微量滴定板法测定蚊虫非特异性酯酶检测抗药性的研究

目的 :探讨简捷灵敏的蚊虫抗药性早期测报技术。方法 :以 β -乙酸萘酯为底物 ,坚固蓝B盐为显色剂 ,用微量滴定板法测定实验室和现场单个淡色库蚊非特异性酯酶活力。结果 :实验室 5个品系淡色库蚊以抗DDVP品系非特异性酯酶活力水平最高 ,其次为抗残杀威品系和抗DDVP降解品系 ,抗氯氰菊酯品系较低 ,与敏感品系相近 ;3个现场淡色库蚊种群对DDVP抗性为 4.15～ 9.3 6倍 ,对残杀威抗性为 1.0 2～ 3 .81倍 ,其非特异性酯酶活力水平均较高。结论 :微量滴定板法测定非特异性酯酶能够检测蚊虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性水平。方法简便快速 ,结果客观准确 ,可重复性强 ;可测出抗性频率 ,早期发现抗性的存在 ;可测知抗性机制 。

微量滴定板法及其在血型工作中的应用

早在60年代,WEGMANN、SMITHIES、和CRANFORD等人就开始了对血型微量化检测的研究。它既可节约大量昂贵的抗血清,又可缩短反应时间,简化操作程序,是一种较为理想的血型血清学方法,笔者通过正交优化设计,改进和完善了微量滴定板技术,并成功地对4000余名献血者进行了血型鉴定。

PKA活性测定——微量滴定板方法的探讨

本文应用微量滴定板方法测定血液制品中残留的PKA活性.结果表明,用0.05M Tris/0.15M NaCl,pH8.0缓冲液,PKA和PK在室温下培育30分钟,然后加入激肽释放酶显色底物,在室温下再继续培育15分钟是适宜的.该方法重复性好,所测得IVIG中PKA的含量与其生产工艺、大白鼠降压实验相符,并与用芬兰红十字血液中心方法测得的结果基本一致.

微量滴定板改良赖氏试管法检测血浆丙氨酸氨基转移酶

目的研究建立简便、快速、适合于大批量检测原料血浆丙氨酸氨基转移酶 (ALT)的测定方法。方法用微量滴定板法代替传统的赖氏试管法 ,用酶标仪代替分光光度计 ,测定原料血浆ALT。结果微量滴定板改良法赖氏试管法相比 ,检测速度提高了 3倍 ,试剂用量仅为赖氏试管法的 1/ 10。经统计学处理 ,两种方法的检测结果无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论对于大批量原料血浆ALT的检测 。

微量滴定板法测定蚊虫抗性

目的探讨蚊虫抗药性敏感测试方法。方法采用微量滴定板法,对室内常规饲养的敏感品系和室内选育的抗DDVP、抗残杀威品系淡色库蚊非特性酯酶的活性进行了测定。结果敏感品系蚊虫OD值≥0.9的占17.16%(35/204条);<0.9的占82.84%(169/204条);抗DDVP品系OD值≥0.9的占83.33%(200/240条);<0.9的占16.67%(40/240条);抗残杀威品系≥0.9的占74.89%(176/235条),<0.9的占25.11%(59/235条)。结论敏感品系与抗性品系淡色库蚊的平均OD值存在较大差异。

TR-FIA微量滴定板再活化利用的实验研究

本文报道了进口微量滴定板再活化处理效果的实验研究结果。ELISA表明,无论是包被McAbA_(11)-C_b还是包被hAFP-R-LCA,OD值均同新板一致。TR-FIA法的本底约为2400CPS,EuCl_3最小可测值达10^(-12)mol/L,夹心法建立的hAFP-R-LCA标准曲线线性关系明显(r=0.99),变异系数在20％以下,也均与新板相一致。结果说明,处理板蛋白消化完全,Eu^(3+)去除彻底,可以再用于免疫分析实验。

精斑的暗视场聚光镜确证与微量吸收法型物质检验联用的研究

本文用暗视场聚光镜作精斑的确证试验,并与微量吸收法作型物质检验联用,对50份精斑进行检验,结果18个月以内的精斑均检出精子,5份24个月的精斑有3份检出精子,总检出率达96%,型物质检出率100%。本法所用检材量少,操作简便,缩短了检验时间,适用于微量精斑的检验。

^(13)C代谢通量分析

代谢通量分析(metabolic flux analysis,MFA)是通过确定代谢网络中代谢流分布来表征细胞代谢状态的强有力的工具。鉴于计量学代谢通量分析在处理复杂代谢网络时表现出的局限性,发展了以13C标记实验为基础的13C MFA。本文介绍了13C MFA的原理与方法,总结和评述了13C MFA在实验与数据分析方面的最新进展以及MFA在功能基因组研究中的重要地位,同时对代谢通量分析的发展前景进行了展望。

PKA国家参考品的制备

本文应用 PKA 微量滴定板方法,用 WHO1984年建立的 PKA 国际标准品进行标定,制备了我国第一批 PKA 国家参考品。

高通量筛选地衣芽孢杆菌DW2高产杆菌肽诱变菌株

杆菌肽是一种广泛使用的广谱多肽抗生素,其作为次级代谢产物具有复杂的生物合成过程。以杆菌肽工业生产菌株地衣芽孢杆菌DW2作为研究对象,采用ARTP诱变和基于流式细胞仪的高通量筛选策略,获取杆菌肽高产菌株。通过筛选确定了8#6D、7#5E、6#7E、5#8D和2#5F 5株高产菌株,相对出发菌株分别提高20.9%、20.9%、20.8%、19.7%和22.2%,杆菌肽的最高效价达到912 U/mL。高通量筛选操作简单、安全,结合流式细胞仪高流速分选,可快速实现杆菌肽产量提高。

海藻糖对干燥抗A和抗B单抗的保护作用

海藻糖对干燥抗Ａ和抗Ｂ单抗的保护作用郝京生，贾东华，董玉环，范浩南（北京军区军事医学研究所，石家庄０５００８１）王润田（河北医学院）目前，临床上测ＡＢＯ血型一般采用抗Ａ和抗Ｂ人标准血清。近年来随着单克隆抗体技术的发展，已制备出抗Ａ和抗Ｂ单克隆抗体，并...

直接PCR法检测口蹄疫病毒

直接ＰＣＲ法检测口蹄疫病毒西班牙建立一改良ＰＣＲ技术用于检测口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ），该法只需将病毒样品吸附到微量滴定板上。就可直接进行反转录ＰＣＲ（ＲＴ一ＰＣＲ），扩增出特异性病毒核酸，省去核酸提取步骤，大大简化了反应过程。该方法是：将病毒样品加到Ｅ...

国外文摘

鳝鱼血清中的血型特异性沉淀素和凝集秦。林田良子,《日本法医学杂志》。1980、34(3)175—189页。作者研究了鳝鱼血清中的血型特异性沉淀素和凝集素,指出在鳝鱼血清中存在着两种抗H沉淀素:沉淀素Ⅰ和沉淀素Ⅱ。沉淀素Ⅰ的分子量大约为150,000。在β球蛋白和γ球蛋白电泳范围内,由于对2—ME具有耐受性。

北京市房山县人群血清轮状病毒抗体阳性率调查

轮状病毒(HRV)是婴幼儿急性胃肠炎的重要病因。人感染 HRV 后,血清中可检测到特异性抗体,并可能持续终生。因此,调查血清 HRV 抗体阳性率,可以了解人群既往感染 HRV 情况。国外 Gust 等和 Jesudoss等曾报导不同人群血清 HRV 抗体阳性率。

用Verotox-F法检测大肠杆菌Vero毒素

加拿大研究人员比较了一种商品微量板胶乳凝集法(Verotox-F)与Veto细胞毒素(VT)。研究了68个VT阳性大肠杆菌株和104个VT阴性株的培养滤液。68个VT阳性分离物毒素表型和基因型为只有VT1(18株)、VT2和1或VT2(33株)和VT1加VT2(17株)。Verotox-F测定包括将连续稀释的培养滤液与等容量用抗VT1抗体或抗VT2抗体致敏的胶乳颗粒在96孔微量滴定板中孵育。

用合成抗原提高ELISA检测效果

德国研究人员制备了合成肽抗原用于ELISA检测家畜抗鹦鹉热衣原体流产株血清抗体。用微量滴定板进行间接ELISA时,合成肽与鹦鹉热衣原体B577抗血清反应,但不与SPF动物的血清反应。从有流产问题的牛(羊)群获得40只羊和40头牛的血清样品,用鹦鹉热衣原体B577肽ELISA和一种使用重组属特异性衣原体脂多糖(LPS)抗原的ELISA筛选抗体。

鹌鹑新域疫抗体消长测定

1984～1985年,我们对云南部分地州鹌鹑新域疫病进行了调查,其感染率为26.67％。一些鹌鹑养殖场,由于对该病防治不当,引起大量死亡。为对该病的有效防预提供科学依据,适时进行免疫,特对昆明地区几个养鹑场鹌鹁的新域疫(ND)抗体消长情况进行了检测,现报告于后: 一、材料和方法 (一)、待检样品 1,经检验确诊为自然发生新城疫病的鹌鹑群,随机取其雏鹑(同群饲养1～15日龄,依次每天宰杀),分离血清待检。

广范围PCR反应可用于快速检测新出现的病原体

美国加利福尼亚Carlsbad Ibis治疗学机构和La Jolla市的Scripps研究院的研究人员发明了一种快速检测新病原体的方法。该法用广范围PCR，结合电喷射电离质谱和碱基组成的特征分析，能在未知微生物序列中快速检测出样品中的微生物，例如SARS-CoV。该方法有很多优点：（1）由于根据原有病毒科保守区域来设计引物，因此可检测出原有病毒科新的成员；（2）广范围PCR能同时扩增一群生物体的基因，而且每一产物的含量都很高，因此效率很高；（3）质谱分析复杂的PCR产物速率高，每个样品只需约1min，而且由于该项操作是在自动的微量滴定板上进行的，每台仪器每天能检测900多个PCR产物，因此该法可用于公共卫生实验室中大范围临床和环境调研样品的分析；（4）敏感性高，甚至可以检测出血清中约1PFU／ml的SARS-CoV。因此，该法能有效并及时地检测出引起人类和动物患病的未知微生物，也可用于监测传染病的流行进程。