基于芍药苷单克隆抗体的ELISA快速检测方法建立

目的:建立芍药苷快速、灵敏的酶联免疫分析(ELISA)检测方法,并使用新方法检测中药材白芍中芍药苷的含量。方法:以制备出的芍药苷特异性单克隆抗体为基础,通过考察线性关系、精密度、回收率等方法学指标,建立芍药苷间接竞争酶联免疫分析(icELISA)方法,并应用此方法检测中药材白芍中的芍药苷含量。结果:该方法线性范围为3.9~250 ng·mL^(-1),板内和板间差异均不超过9.8%,平均回收率<110%,检测工作时间可控制在2 h内。采用该方法检测中药材白芍中芍药苷的含量,所得结果与HPLC一致。结论:建立的芍药苷icELISA方法,可为含芍药苷的微量生物样品检测、中药材及复方的质量控制分析提供更加快速灵敏的检测方法。

蛋白纳米孔单分子电生理检测方法改进及其应用

单通道电生理检测方法是目前研究蛋白纳米孔传输性质的一种有效手段,但该方法需要将待检测的纳米孔分子加入水溶液中,对于一些难以制备的微量样品很难高效快速地获得实验结果。针对上述问题,本研究对现有单通道电生理检测系统与方法进行改进,通过减小实验体系体积来增加纳米孔分子浓度,将蛋白纳米孔α-溶血素(α-hemolysin)进入脂质膜的几率提高了500倍,从而有效增加了纳米孔通道信号被检测到的可能性,提高了单通道电生理检测方法的实验效率与检测灵敏度。并进一步利用纳米孔α-溶血素对微量T7 DNA进行实时监测,证实了改造后的系统在微量DNA分子检测中的可靠性,为使用纳米孔对难以获得的珍稀微量样品的检测提供了技术基础。