肉汤微量稀释法对耐多药结核分枝杆菌敏感性检测的评价

目的评价肉汤微量稀释(BMD)法在耐多药结核分枝杆菌(MDR-MTB)敏感性检测中的应用效果。方法采用罗氏比例法和BMD法对海南省108株MDR-MTB及11株非MDR-MTB菌株进行药敏试验,并对两种药敏方法检测结果不一致菌株进行全基因组测序(WGS)。结果罗氏比例法和BMD法药敏结果平均判读时间分别为28.0、8.5 d。罗氏比例法检测异烟肼、利福平、乙胺丁醇、卡那霉素和卷曲霉素的耐药率高于BMD法(均P<0.001);BMD法检测丙硫异烟胺和对氨基水杨酸的耐药率高于罗氏比例法(均P<0.001)。以罗氏比例法药敏结果为金标准,BMD法检测耐药性的灵敏度和特异度分别为50.00%~100%、95.69%~100%,除EMB(87.39%)、INH(94.96%)外,BMD法检测其他药物的耐药性符合率均≥95%。罗氏比例法药敏结果与WGS总符合率为76.19%(32/42),BMD法药敏结果与WGS总符合率为23.81%(10/42),差异具有统计学意义(χ^(2)=23.048,P<0.001)。两种药敏方法检测结果不一致的MTB共34株,罗氏比例法耐药+BMD法敏感的26株MTB中,22株(84.62%)相关耐药基因发生突变;罗氏比例法敏感+BMD法耐药的11株MTB中,5株(45.45%)相关耐药基因发生突变。结论BMD法是一种准确、快速的MDR-MTB敏感性检测方法,但仍需要进一步改进和优化,耐药性与相关耐药基因的突变密切相关。

微量稀释联合平板计数法评价聚维酮碘抗菌活性及其影响因素

[目的]建立一种评价聚维酮碘抗菌效果的科学方法,并研究影响其抗菌能力的因素,为聚维酮碘防控水产细菌病提供参考。[方法]采用微量稀释联合平板计数法(包括标测法和模测法)测定了不同厂商和批次聚维酮碘的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度,并评估了孵育温度、细菌浓度、培养基浓度、pH、货架期对聚维酮碘最小抑菌浓度的影响。[结果]标测法测得的聚维酮碘对4株渔源多重耐药菌的MIC(213~17g/m^(3))和MBC(216~19g/m^(3))是临床使用浓度的数万倍。模测法测得的聚维酮碘对MH可培养水生菌的MIC(27~11g/m^(3))和MBC(29~12g/m^(3))是临床使用浓度的数百到数千倍。试验体系的温度(5℃到35℃)越高、细菌浓度(103到108cfu/mL)越大、培养基浓度(0.082~21 g/L,MH)越大、pH(5.5到9.5)越高,聚维酮碘对细菌的MIC越大。聚维酮碘固态原粉货架期为18个月,而聚维酮碘溶液货架期约3个月。[结论]聚维酮碘对渔源致病菌和水生MH可培养菌的MIC远远高于临床使用浓度;水温、pH、培养基浓度、细菌浓度都影响抗菌活性;聚维酮碘固体稳定性远高于其水溶液。

微量稀释法测定皮肤癣菌最低抑菌浓度(MIC)的实验研究

目的，建立用微量稀释法测定皮肤癣菌最低抑菌浓度（ＭＩＣ）的方法学，为该类实验的标准化打下基础。方法：用９６孔酶标板做药敏试验载体，１０级倍比稀释药液，测定３０株皮肤癣菌临床分离株对三唑类新药伊曲康唑和氟康唑的敏感性。结果：３０株皮肤癣菌对伊曲康唑和氟康唑的ＭＩＣ范围分别为≤０．０６～４μｇ／ｍｌ和１～３２μｇ／ｍｌ，均值分别为０．３２μｇ／ｍｌ和７．７６μｇ／ｍｌ．结论：用微量稀释法测定皮肤癣菌ＭＩＣ初步显示了用药量少、重复性好、结果较可靠等优点。

微量稀释法检测酵母菌最低抑菌浓度

目的 了解临床常见酵母菌对抗真菌剂的体外药敏试验,以指导临床医生合理使用抗生素。方法 收集2001年2～3月临床分离酵母菌共54株,应用微量稀释法测定54株酵母菌对两性霉素、酮康唑和氟康唑的最低抑菌浓度(MIC)。结果 酵母菌对两性霉素的MIC值在0.25～1.0μg/ml之间,氟康唑的MIC值在2.0～8.0μg/ml之间。酮康唑的MIC值>16μg/ml。结论 酵母菌对两性霉素的耐药率最低(0％),其次为氟康唑(18.5％),酮康唑耐药率最高(79.6％)。微量稀释法方法简便,结果较可靠,可用于常规检测酵母菌的药敏试验。

微量肉汤稀释法测定长裙竹荪多种提取物对食品中常见细菌的抑制效果

选取长裙竹荪为样品,采用索氏抽提后水蒸馏萃取获得挥发油,同时分别以乙醇、正丁醇、石油醚等有机溶剂萃取得到相应提取物。以8种食品中常见细菌为供试对象,由微量肉汤稀释法测得各类提取物对其的MIC值,作为评价其抑菌效果的指标。结果表明:纯培养环境下,挥发油的抑菌效果优于三种有机溶剂提取物。通过与平板涂布计数结果及其它方法比较分析,进一步证明肉汤稀释法作为测定抑菌效果所具有的优越性。

微量法测定妇康乐洗剂对念珠菌的最低抑菌浓度

目的 对妇康乐洗剂进行体外抗色念珠菌试验 ,测定其最低抑菌浓度 (MIC)值和最低杀菌浓度 (MFC)值。方法 采用美国临床试验标准化委员会 (NCCL S)建议的酵母菌的液基稀释法抗真菌药物敏感试验参考方案进行试验。结果 测得妇康乐洗剂 MIC50 为 12 .2～ 39.1mg· m l- 1 和 MFC为 10 5 .6～ 331.7mg· ml- 1 。

微量液体培养基最低抑菌浓度法与罗氏比例法在结核分枝杆菌药敏试验中的价值比较

目的比较微量液体培养基最低抑菌浓度(MIC)法与罗氏比例法在结核分枝杆菌药敏试验中的临床价值。方法以100株结核分枝杆菌菌株(由辽宁省结核实验室提供)为研究样本,分别采用罗氏比例法与微量液体培养基MIC法检测结核分枝杆菌的药物敏感性。结果微量液体培养基MIC法与罗氏比例法检测结核分枝杆菌对乙胺丁醇、二卡那霉素、利福平、异烟肼、氧氟沙星、卷曲霉素药物的敏感性比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论微量液体培养基MIC法应用于结核分枝杆菌药敏试验中与罗氏比例法有着良好的一致性,且检测速度快,经济适用性好,能够为临床指导结核病用药提供帮助。

对改良的三种最小抑菌浓度测试方法的探讨

对传统以肉眼观察浑浊程度判断最小抑菌浓度的测试方法进行了改良,探讨了浊度法、红四唑(TTC)显色法和刃天青显色法3种方法对连翘提取液MIC结果判断的影响。结果表明,刃天青显色法最优。

安妥沙星琼脂稀释法体外抗菌活性测定临界浓度初步研究

目的确定安妥沙星对葡萄球菌属、肠杆菌科、非发酵菌及嗜血菌属的琼脂稀释法体外抗菌活性测定临界浓度。方法采用标准琼脂二倍稀释法测定安妥沙星对临床常见致病菌的最小抑菌浓度值,并与临床常用的氟喹诺酮类药物相比较分析,结合人体药代动力学参数,初步确定安妥沙星对常见细菌的临界浓度。结果对临床分离致病菌的MIC测定值显示,安妥沙星的抗菌作用与左氧氟沙星接近,安妥沙星体外抗菌活性与左氧氟沙星相关性最好,安妥沙星一次口服300mg后药代动力学参数与左氧氟沙星一次口服400mg相似,综合PK/PD理论,初步设定安妥沙星琼脂稀释法体外抗菌活性测定的临界浓度为,嗜血菌敏感临界浓度为≤1,其它细菌敏感、中介与耐药临界浓度分别为≤2、4和≥8mg/L。结论通过体外抗菌活性比较,结合药代动力学/药效学理论,初步确定了安妥沙星琼脂稀释法体外抗菌活性测定对常见细菌的临界浓度,供临床应用参考与验证。

苦杏壳木醋液最小抑菌浓度及其抑菌活性的稳定性

采用金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)作为指示菌,由D值计算法得到了对苦杏壳木醋液在不同浓度时的存活曲线及死亡曲线,从而精确求得最小抑菌浓度(MIC):木醋液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的MIC分别为0.44%和0.46%,可见木醋液对2种代表性细菌有较显著的抑菌效果;采用滤纸片法,对木醋液抑菌稳定性测试结果表明,苦杏壳木醋液在温度、pH值、紫外光、活性碳吸附及微波加热等不同处理下,抑菌效果基本不变,具有良好的抑菌稳定性。

微量量热法研究异喹啉类生物碱的抑菌活性

从中草药荷叶、黄连根、黄藤、十大功劳中分别提取出荷叶碱、黄连素、黄藤素、异汉防己碱,并对其进行了表征。用瑞典产八通道微量量热仪(3114/3236 TAM Air)测定了不同浓度的生物碱在不同温度时对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌代谢作用的热功率-时间曲线,计算出细菌生长的速率常数,建立速率常数与生物碱浓度的方程式、细菌生长速率常数与温度的方程式,进而确定了最佳抑菌浓度和细菌最佳生长温度。

微量热法测定粉防己碱金属配合物的抑菌性

从中药粉防己中提取粉防己碱。在无水乙醇中粉防己碱分别与M(NO3)2.3H2O(M=Cu,Zn,Co,Ni)反应,合成了4种新的金属配合物,其结构分别用FT-IR和UV等测试技术进行了表征。应用微量量热仪分别测定了不同浓度的粉防己碱及4种粉防己碱的金属配合物、M(NO3)2.3H2O(M=Cu,Zn,Co,Ni)对大肠杆菌代谢作用的热功率-时间曲线,运用Logistic方程计算出细菌的生长速率常数,建立了生长速率常数与药物浓度间的关系,进而确定了最佳抑菌浓度。结果表明,4种金属配合物的抑菌作用均比M(NO3)2.3H2O和粉防己碱强。

3种抗真菌药物对口腔白念珠菌最小抑菌浓度的体外对比研究

目的通过测定氟康唑、制霉菌素和洗必泰3种抗真菌药物对口腔白念珠菌临床分离株的最小抑菌浓度(MIC),指导临床合理用药。方法采集疑诊为口腔念珠菌病患者的口腔拭子标本,分离、鉴定获得37株白念珠菌做为受试菌株。应用微量稀释法测定3种药物的MIC。质控菌株为白念珠菌ATCC22019(对氟康唑敏感)。结果 3种抗真菌药物对90%以上的受试菌株的MIC值分别为氟康唑≤2μg/ml,制霉菌素≤2μg/ml、洗必泰≤8μg/ml。经Kruskal-Wallis秩和检验,3种药物的MIC值差异有统计学意义(P<0.01);经Nemenyi法比较,氟康唑组与制霉菌素组差异无统计学意义(P>0.05),2组的MIC值均明显低于洗必泰组(P<0.01)。结论 3种抗真菌药物对口腔白念珠菌在体外均有较强的抑菌能力,氟康唑和制霉菌素较高,洗必泰次之。

北豆根生物碱抑菌作用的微量量热法研究

从中药北豆根中提取北豆根生物碱.应用微量量热仪分别测定了不同浓度的北豆根生物碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌代谢作用的热功率—时间曲线,运用Logistic方程计算出细菌的生长速率常数,建立了生长速率常数与药物浓度间的关系,进而确定了最佳抑菌浓度.北豆根生物碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌的最佳抑菌浓度分别为0.7977mg/mL、0.2089mg/mL、0.1129mg/mL.通过对三个最佳抑菌浓度数据的比较,可知北豆根生物碱对三种细菌抑制效果为:枯草杆菌>金黄色葡萄球菌>大肠杆菌.

浙江金华地区仔猪大肠杆菌最小抑菌浓度检测及分析

采用试管双倍稀释法,检测浙江省金华地区12个猪场大肠杆菌分离菌株对10种常见抗菌药(环丙沙星、庆大霉素、青霉素钠、复方头孢拉定、硫酸链霉素、阿莫西林、磺胺嘧啶钠、泰乐菌素、阿米卡星、氟苯尼考)的最小抑菌浓度(MIC),对临床诊断用药有指导作用。

应用微量MIC法快速评价消毒剂的质量

市场上销售的各类消毒剂产品质量参差不齐,并且大多数养殖场在使用消毒剂时并没有在合理的稀释浓度范围内,导致消毒失败。开展消毒剂的质量评价,可为消毒剂的选择和配比稀释倍数提供依据。本文通过应用微量最小抑菌浓度(MIC)检测法快速对3种过硫酸氢钾、3种次氯酸钠的最小抑菌浓度进行了测评,其方法快速、简单、高效,具有较大的实际应用价值。1 材料与方法1.1 菌液配制取5 μL保存的菌液接种于5 mL新鲜肉汤中,37 ℃培养过夜。

比较Thermo STP6F药敏测定卡与微量肉汤稀释法测定链球菌对抗菌药物的敏感性

目的为临床提供快速、准确、方便的链球菌药敏试验测定方法,比较ThermoSTP6F药敏测定卡与金标准微量肉汤稀释法测定链球菌对抗菌药物的敏感性。方法按CLSI要求,用ThermoSTP6F药敏测定卡检测199株链球菌(肺炎链球菌、化脓链球菌和无乳链球菌),与微量肉汤稀释法结果进行比较。结果两种药敏测试方法涵盖10种抗菌药物对肺炎链球菌的药敏试验结果,分类一致率(CA)为94.6%,基本一致率(EA)为95.5%,重大偏差(VMD)为0.5%,较大偏差(MD)为1.2%,次要偏差(mD)为4.6%;对化脓链球菌两种方法测试结果的CA为99.2%,EA为95.0%,VMD为0.8%,MD为0.8%,mD为0;对无乳链球菌两种方法测试结果的CA为97.8%,EA为93.6%,VMD为1.1%,MD为0.9%,mD为1.2%。ThermoSTP6F药敏测定卡所得数值常比标准方法略高。结论ThermoSTP6F药敏测定卡对链球菌的检测结果与微量肉汤稀释法一致性较好,在用于检测肺炎链球菌对美罗培南敏感性时建议结合E试验法复核确认。

β-内酰胺类抗生素对聚磷菌最小抑菌浓度的影响

为本研究以聚磷菌作为受试生物,大肠埃希菌和铜绿假单胞菌作为质控菌属,采用微量肉汤稀释法,测定β-内酰胺类抗生素中阿莫西林、头孢哌酮、氨曲南对聚磷菌的最小抑菌浓度(MIC).结果显示,阿莫西林、头孢哌酮对大肠埃希菌的最小抑菌浓度分别为"4~8μg/m L、0.25~0.5μg/m L",氨曲南对铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度为"2~4μg/m L",符合CLSI标准;阿莫西林、头孢哌酮、氨曲南对聚磷菌的最小抑菌浓度分别为"8~16μg/m L、0.5~1μg/m L、4~8μg/m L".

酵母菌药敏试验常量与微量液体稀释法的比较

目的 采用常量和微量稀释法检测酵母样菌对四种抗真菌药物的最低抑菌浓度（MIC），并将两种方法的MIC结果进行统计分析。方法 参照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的“酵母菌液体稀法抗真菌药敏试验参考方法”，测定临床分离的20株酵母样菌。结果 两性霉素－B的两种方法对所有菌株的MIC值大多数落在两个稀释度范围内，但两种方法比较，多数MIC值≥两个稀释度。氟胞嘧啶对白色念珠菌、新型隐球菌和光滑球拟酵母菌两种方法中的MIC有90％得到相同的结果。两性霉素－B对所有菌株、酮康唑对新型隐球菌两种方法有显著性差异（P＜0．05）。微量法中新型隐球菌在48h可以判定结果而常量法要72h才能判定结果。结论 通过两种方法的比较及统计分析表明，微量法与常量法有很好的相关性。微量法操作简便，节省试剂和药物，适合临床实验室应用。