微量细胞培养法检测疑似非淋菌性尿道炎患者的沙眼衣原体

采用微量细胞培养法分离１０７例疑似非淋菌性尿道炎或宫颈炎患者泌尿生殖道标本中的沙眼衣原体。总衣原体感染率为２４．３％，男、女衣原体感染率分别为２５．７％和２１．２％。对衣原体培养阳性的患者做了临床分析，并对微量细胞培养与传统的玻璃瓶培养法进行了比较。结果表明：在本组人群中沙眼衣原体感染有较高的流行率。微量细胞培养法与玻璃瓶培养法具有相似的敏感性，且成本低适用于大量标本的筛检。

微量细胞培养法在病毒性脑炎脑膜炎患儿病原学检测的应用价值探讨

目的 探讨微量细胞培养法在病毒性脑炎、脑膜炎病原学检测中的应用价值及北方地区病毒性脑炎、脑膜炎的病原学构成。方法 应用微量细胞培养法对 12 2例临床诊断为病毒性脑炎、脑膜炎患儿的咽分泌物、粪便及脑脊液进行病毒分离。结果 12 2例脑炎、脑膜炎患儿共取鼻咽分泌物、粪便及脑脊液标本 36 6份 ,分离到病毒 6 9株 ,总阳性率为 18 9% (6 9/36 6 ) ;其中脑脊液中分离到 10株病毒 ,阳性率为 8 2 % (10 /12 2 )。 12 2例患儿中 5 1例病毒分离阳性 ,其中肠道病毒 2 5例 ,腺病毒Ⅲ型 11例 ,单纯疱疹病毒Ⅰ型 9例 ,流感病毒 4例及巨细胞病毒 2例。结论 微量细胞培养法病毒分离具有操作简便、准确可靠、省时省物的优点 ,值得推广。

肾综合征出血热病毒微量细胞培养法和空斑法的比较

对肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）病毒的微量细胞培养法和空斑法进行了比较。４株ＨＦＲＳ病毒及３株特异性ＭｃＡｂ的测定结果表明，微量细胞培养法测得的病毒滴度高于空斑法，但后者检测ＭｃＡｂ的中和效价却高于前者。

微量高通量细胞培养法在脑炎病毒分离中的应用

目的建立用微量高通量、多细胞谱培养法分离未明原因脑炎患儿中病毒的方法，探讨脑炎患儿中肠道病毒的感染情况。为大量、及时分离病毒、病毒鉴定和分子流行病学研究奠定基础。方法将8株不同的细胞接种于96孔细胞培养板中，每种细胞接种一行，细胞长成单层后孔内接种脑脊液标本，每孔5～10μl，每份标本纵向接种8孔（8种细胞系），35℃、5％CO2培养。出现细胞病变（cytopathic effect，CPE）者传代培养两次。两次均出现CPE者视为细胞培养阳性，-70℃保存用于病毒鉴定。将培养物首先用肠道病毒通用引物做逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）并测序，进行初步筛查。结果93份标本中有56份出现明显的CPE，病毒分离率为60．22％（56／93），其中在MA104细胞出现病变者40份，阳性率为43．01％。其中6份培养物的RNA用肠道病毒通用引物得到了扩增，序列测定确定为肠道病毒。结论微量多细胞培养法具有简便、快速等特点，适合用于病毒的初步筛查。

微量板细胞培养法检测泌尿生殖道沙眼衣原体

泌尿生殖道沙眼衣原体（Ct）感染，是近年来全世界范围内流行较严重的性病之一，也是被我国2007年列为国家重点监测的5种性病之一。可导致尿道炎、附睾炎、宫颈炎，并可继发盆腔炎性疾病、异位妊娠和不育症，因此，Ct早期诊断和治疗是非常重要的。沙眼衣原体的实验室检测方法包括细胞培养、抗原检测和核酸检测等。在这几种诊断技术中，细胞培养是目前检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染的较为敏感和特异的方法，被视为“金标准”。

多细胞株微量培养法在病毒性脑炎、脑膜炎患儿病原学检测的应用研究

目的探讨多细胞株微量培养法在病毒性脑炎、脑膜炎病原学检测中的应用价值。方法将脑脊液(CSF)标本过滤除菌后分别接种于含有青霉素和链霉素微量细胞培养板单层细胞上,每份标本平行接种8株细胞:MA104、MDCK、HEL、HEK293、Vero、Hep-2、Hela和BHK-21。静置培养,获得稳定的病毒株。以肠道病毒(EV)组合血清鉴定引起病毒性脑炎、脑膜炎的常见病毒类型。结果 126份病毒性脑炎、脑膜炎患儿CSF标本82份分离到病毒,阳性率63.0%,其中MA104阳性率为57.1%,MDCK阳性率为19.8%,HEL阳性率为11.9%,HEK阳性率为7.1%,Vero阳性率为6.3%,Hep-2阳性率为4.8%,Hela阳性率为4.0%,BHK-21阳性率为2.4%。病变细胞经血清学鉴定,78例鉴定出病毒株,鉴定率为92.8%,这些病毒中EV所占比例较高,为69.2%;ADV占11.5%,HSV-Ⅰ占5.1%,HSV-Ⅱ占6.4%;CMV占5.1%,INF占2.6%。结论 MA104细胞是分离CSF中病毒较敏感的细胞,可以作CSF中病原分离的首选细胞;联合多株细胞可提高细胞病变检出率。多株细胞微孔板培养法分离CSF病毒具有推广应用价值。

过氧化氢对血管平滑肌细胞的作用

目的 研究过氧化氢 (H2 O2 )对兔血管平滑肌细胞的作用机制。方法 兔血管平滑肌细胞 (VSMCs)原代培养 ,微量细胞培养四甲基偶氮唑蓝法 (MTT)检测不同浓度H2 O2 在不同时段对其增殖影响 ,确定进一步研究的H2 O2 浓度 ,并应用流式细胞仪检测此浓度H2 O2 对VSMCs细胞周期和细胞凋亡的作用。结果 MTT法检测 ,H2 O2 浓度≥ 10 0 μmol/L(10 0～ 14 0 0 μmol/L)时 ,与VSMCs作用仅 1h ,即出现吸光度值显著降低 (P <0 .0 1) ;流式细胞仪细胞周期检测 ,H2 O2 浓度≥ 10 0 μmol/L时 ,与VSMCs作用 2 4h后 ,其G1期细胞数显著高于对照组 (94.65 %和 79.97% ) (P <0 .0 1) ,以H2 O2浓度在 10 0 μmol/L时尤为明显 ;流式细胞仪AnnexinV PI双标细胞凋亡检测 ,10 0 μmol/LH2 O2 有促进VSMCs凋亡作用 ,并在作用 48h左右达到高峰 ,占 2 6.76% ,与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 H2 O2 浓度≥ 10 0 μmol/L时 ,可显著抑制VSMCs增殖 ;当H2 O2 浓度为 10 0 μmol/L时 ,有促进VSMCs凋亡作用。