沈阳地区肾综合征出血热病人血清分型的微量细胞病变中和试验法

目的 探讨沈阳地区肾综合征出血热(HFRS)的型别。方法 对采自沈阳市传染病院临床确诊及免疫荧光法确认的HFRS患者恢复期血清92份,用MCPENT法进行检测。结果 检出姬鼠型66份,占71.7％;家鼠23份,占25％;未定型3份,占3.3％。结论 证实了沈阳地区是以姬鼠型为主的HFRS混合感染疫区。同时由于MCPENT方法的特异性和稳定性使之成为疫区型别研究的较理想方法之一。

EHFV微量细胞病变中和试验方法的建立及其在中和抗体检测中的应用

本文报道了一种新的流行性出血热病毒中和抗体检测方法即微量细胞病变中和试验。该法利用流行性出血热病毒在Vero细胞上繁殖时可引起细胞病变的特性，将32－100CCID50病毒液与等量待检出血清混合，37℃中和1．5小时后种入微量培养板孔中的细胞悬液中，培养6－8天后即可判定结果，用该法检测流行性出血热病人血清和灭活疫苗免疫机体后和中和抗体，获得了与空斑减少中和试验法基本一致或者更加敏感的结果。该法简单，特异、准确、敏感、快速、它的推广应用对加我国流行必出血热的血清分型和流行病学调查及疫苗制备毒株的筛选等基础研究工作均有较大的意义。

广州地区轮状病毒血清分型的研究 2.应用微量细胞病变定量读数中和试验对急性病毒性胃肠炎患儿HRV各血清型中和抗体的分析

用微量细胞病变定量读数中和试验,以HRV血清1、2、3、4型的四个标准毒株为抗原,分别检测了1987年广州地区51例健康儿童和30例急性病毒性胃肠炎患儿的急性期及恢复期血清中抗HRV各血清型中和抗体的水平。结果表明30例患儿中的23例,其恢复期血清中的中和抗体比急性期有4倍以上的增长,抗HRV血清4型者占39.1％,抗HRV血清3型占30.4％,抗HRV2型者8.7％,抗HRA1型为17.4％。初步认为1987年广州地区流行的HRV型别以血清型4型为主。

赤羽病细胞培养微量中和试验

引言赤羽病又名阿卡斑病(Akabane disease)。本病是由阿卡斑病毒(Akabane virus简称AKV)引起的牛、羊一种传染病。成年牛、羊临床上呈现隐性感染,但感染的敏感动物的后代发生流产、早产、死胎、新生胎儿发生关节弯曲(AG)和积水性无脑症(HE)为特征。

微量细胞病变法检测人巨细胞病毒中和抗体效价方法的建立

目的建立人巨细胞病毒(HCMV)中和抗体效价微量细胞病变检测方法。方法确定检测HCMV中和抗体效价的微量细胞病变法的细胞密度、病毒剂量和培养时间,采用Krber法计算样品中和效价,并对该方法做线性、准确性、精密度和耐用性方法学验证。结果感染HCMV的MRC-5细胞出现典型细胞病变,该方法准确性好,线性回归系数均>0.99;重复性验证:变异系数为18.4%-20.6%;中间精密度验证:变异系数为23.2%-27.0%;不同细胞密度、病毒剂量与中和反应时间范围亦显示该方法耐用性良好。结论所建立的HCMV中和抗体效价微量细胞病变法具有较好的线性、准确性、精密度及耐用性,可用于HCMV人免疫球蛋白中和抗体效价的检测。

3种禽类呼肠孤病毒血清学相关性及致细胞病变差异分析

本研究旨在研究3种不同疾病型禽类呼肠孤病毒间的抗原性关系及病毒的培养特性。作者通过血清中和试验测定了禽呼肠孤病毒(ARV S1133株)、番鸭呼肠孤病毒(MDRV 9710株)、新型鸭呼肠孤病毒(NDRV NP01株)3种禽类呼肠孤病毒的血清学相关性,统计抗原相关性R值;并应用部分禽胚原代细胞及哺乳动物传代细胞对这3种病毒的培养特性进行了初步研究。结果表明,3种病毒株之间的R值很小,抗原相关性较低;三者具有广泛的细胞亲嗜性,能在多种细胞中增殖,并产生细胞病变,但病毒致细胞病变特征有所差异,ARV和NDRV均以巨融合为主,而MDRV则以细胞圆缩坏死为主。上述结果表明导致禽类不同疾病的ARV、MDRV和NDRV三者之间的抗原相关性较低,病毒的细胞培养特性也不同,细胞病变类型的差别提供了一种初步鉴别禽类呼肠孤病毒的方法。

对A_(72)与PK_(15)进行猪传染性胃肠炎血清中和试验的对比观察

〔目的〕建立以狗直肠瘤(A72细胞)进行TGEV血清中和试验的方法。〔方法〕引进A72细胞系,建立成熟培养环境;以库存94份猪血清观察TGEV在A72与PK15中的增殖与病变,并采用ELISA试验进行验证。〔结果〕以A72细胞培养增殖的TGEV毒价高于以PK15细胞培养增殖的TGEV毒价。在血清中和试验中A72病变明显,易于观察,较PK15细胞的人为误差小。〔结论〕A72细胞可以准确清晰地反应TGEV感染,其敏感性和准确性优于PK15细胞。

应用FG细胞检测淋巴囊肿病毒中和抗体方法的建立

将提纯的淋巴囊肿病毒(LCDV)接种于牙鲆鳃细胞系(FG),可以观察到明显的细胞病变,半数细胞培养物感染量(TCID50)为22.88/40μL。微量细胞病变中和实验显示患淋巴囊肿病的牙鲆血清以及通过免疫获得的兔抗LCDV血清对LCDV感染都具有明显的中和作用,具有中和效果的血清最高稀释度分别为1∶64和1∶160。本文建立的FG细胞检测LCDV中和抗体方法可以作为筛选LCDV中和抗体的有效途径,且重复性和稳定性较好。

微量细胞病变法检测原料血浆中肠道病毒71型中和抗体水平

目的应用微量细胞病变法检测原料血浆中肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)中和抗体水平,以确定可供EV71免疫球蛋白生产用的原料血浆筛选标准。方法建立检测EV71中和抗体效价的微量细胞病变法,检测3批质控血浆,验证该方法的重复性;并对1 238份原料血浆进行检测。结果微量细胞病变法检测高(1∶400)、低(1∶50)效价质控血浆EV71中和抗体效价的变异系数分别为22.7%和27.3%;约40%的原料血浆中和抗体效价<1∶8,约60%的中和抗体效价≥1∶8。结论微量细胞病变法可用于原料血浆中EV71中和抗体的检测,约23%的献浆员的EV71中和抗体效价达1∶32以上,可用于EV71免疫球蛋白的生产。

麻疹疫苗预防犬瘟热的试验研究

为调查麻疹疫苗用于预防犬瘟热的可行性,选择同窝8只土种幼犬,按2～2.5人份/犬的剂量对A组幼犬（n=3）进行2次麻疹弱毒疫苗接种,应用微量中和试验测定免疫前及每次免疫后第7 d血清中的犬瘟热病毒（CDV）中和抗体效价,并转移加强免疫犬外周循环全血[（3.2～3.5）mL/犬]给未免疫B组犬（n=3）,3 d后用Vero细胞分离培养的第3代CDV昆明分离株,以2000个TCID50（相当于5600 PFU）/犬的剂量对上述2组犬和对照C组犬（n=2）进行肌肉注射或滴鼻攻毒。结果发现：不论是否接种麻疹弱毒疫苗,所有犬只均未产生可检测到的CDV中和抗体（效价低于1∶4）;攻毒后连续观察14 d,A组与B组均未出现犬瘟热临床症状,C组出现明显的犬瘟热症状但未死亡。以上结果表明：麻疹弱毒疫苗不能诱导犬产生CDV中和抗体,但可诱导产生有效的抗CDV感染的细胞免疫力。

森林脑炎病毒在几种细胞上空斑技术的研究及其应用

本文报道了森林脑炎病毒的空斑形成技术,将来源不同的森林脑炎东北株和云南株接种于BHK21细胞,恒河猴肾细胞（LLC-MK2）以及原代鸡胚纤维细胞（CEC）,用半微量甲基纤维素空斑形成试验,观察两株病毒在三株细胞上的敏感性空斑形成速率以及空斑形态;并将空斑中和实验的结果与小白鼠中和实验进行对比结果发现,在BHK21细胞空斑形成早,进展快,形态大而园,维持时间长,结果重复性好,是用于中和实验理想的细胞。CEC细胞出斑时间晚,维持时间长,不同的毒株在CEC细胞上空斑形态有明显的差异。

酶联免疫吸附试验(ELISA)的扩展

近年来ELISA应用日趋广泛,不少研究者为了增加其敏感性、特异性及实用性,把ELISA与其他病毒诊断方法相结合,创造了一些更好的快速诊断方法,现简介如下: 1 病毒酶联细胞试验(VELCIA)。将病毒接种于微量培养板细胞单层,增殖后感染的细胞固定在板上,再用酶联免疫吸附试验(E LISA)程序检测。该法可以进行病毒感染力及中和抗体滴定,特别适用于无细胞病变或细胞病变很弱的病毒。 2 液相阻断夹心ELISA。该法综合了中和试验和免疫酶技术的优点。被检血清和病毒在液相中发生反应(中和反应),然后用ELISA夹心法程序检测。

埃及研制成功IBDV细胞苗

埃及学者IL-Eblary等将一株致弱的鸡胚适应鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)

鸡成骨髓细胞性白血病的诊断

鸡成骨髓细胞性白血病(ML)的正确诊断应是病毒分离和鉴定。由于很少有人进行转录病毒的研究,故ML的诊断主要是通过组织病变和肉眼病变来鉴别。1.在ML的病例中,诱导肿瘤的靶细胞是骨髓的成髓细胞或骨髓细胞,因而缺乏法氏囊肿瘤。ML的典型肿瘤一般在头骨周围、喉头粘膜、气管、肋骨和龙骨。2.考虑鸡群的病史。如种鸡群及其后代经济性能在正常标准之内,无意义。

中国肾综合征出血热疫源地和疫区分型研究(Ⅰ)高安、广州等地HFRS病人血清分型实验

为了解不同地区肾综合征出血热 (HFRS)疫源地和疫区性质 ,应用微量细胞病变中和试验 (MCPENT)方法对收集自山东、江西、河北、北京昌平等地的 131份临床诊断的HFRS病人血清进行了特异性抗体检测 ,其中对荧光抗体滴度较高的 62例病人血清进行了分型研究。结果表明 ,北京昌平、江西高安等为家鼠型疫区 。

抗病毒蛋白MxA的诱导和检测方法的实验研究

目的 研究抗病毒蛋白ＭｘＡ的表达及其活性。方法用ＩＦＮα２ｂ或３型腺病毒（Ａ＿３）分别对ＷＩ－３８细胞或人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）作用 １２或２４ ｈ，并用Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ法或ＦＡＣＳ法，分别对Ｍ蛋白的表达进行定性和定量检测。采用微量细胞病变抑制法，对重组的ＭｘＡ和ＩＦＮα２ｂ进行抗病毒效应实验。结果 （１）低浓度的 ＩＦＮα２ｂ（＞ １×1０～＃ＩＵ／Ｌ）和Ａｄ＿３（＞２００ ＴＣＩＤ＿５０），均可诱导相应细胞表达 ＭｘＡ；（２）１０μｇ／Ｌ ＭｘＡ可抵抗２０个 ＴＣＩＤ＿（５０）的 ＨＳＶ－Ｉ、Ｐｏｌｉｏ． Ｖ感染 Ｖｅｒｏ细胞、Ａｄ＿３感染ＨｅＬａ细胞，抵抗２００个ＴＣＩＤ＿（５０）的ＶＳＶ感染Ｗｉｓｈ细胞。结论ＭｘＡ只能由干扰素（ＩＮＦα2ｂ）或病毒诱导产生，其具有广谱的抗病毒活性。

流行性出血热各种特异性抗原抗体及其他免疫因子的研究

本研究为1982年～1992年10年间采用免疫荧光法、阻断ELISA法,单克隆抗体ELISA法,双抗体夹心ELISA法,微量细胞病变中和试验和高密度颗粒凝集试验等方法,对流行性出血热(EHF)各种抗原、抗体系统及某些免疫因子的系统研究,其目的是建立特异性早期诊断方法,探讨发病机理。

静注人免疫球蛋白制剂抗巨细胞病毒中和抗体效价的筛查

目的筛查国内、外静注人免疫球蛋白(human intravenous immunoglobulin,IVIG)和静注巨细胞病毒人免疫球蛋白(human intravenous cytomegalovirus immunoglobulin,CMV-IVIG)制品抗CMV中和抗体效价。方法采用微量细胞病变法检测国内、外IVIG制品及CMV-IVIG抗CMV中和抗体效价,并进行比较。结果国外CMV-IVIG制品Cytogam(3 648 U/g IgG)和Cytotect(3 104 U/g IgG)抗CMV中和抗体效价分别是IVIG制品Privigen(1 048 U/g IgG)和Intratect(980 U/g IgG)的3.5和3.2倍;国内CMV-IVIG制品抗CMV中和抗体平均效价(7 195 U/g IgG)是国内13家企业19批IVIG制品(1 836 U/g IgG)的3.9倍;国内IVIG制品抗CMV中和抗体平均效价是国外IVIG制品Privigen和Intratect的1.8和1.9倍,国内CMV-IVIG制品抗CMV中和抗体平均效价是国外CMV-IVIG制品Cytogam和Cytotect的2.0和2.3倍。结论国内、外的CMV-IVIG制品抗CMV中和抗体效价均为相应IVIG制品3倍以上,采用微量细胞病变法筛查血浆用于制备CMV-IVIG具有可行性,为CMV相关疾病的被动免疫制剂的制备提供了实验依据。

甲组虫媒病毒的微量细胞培养

我们建立白纹伊蚊细胞C6/36株微量培养,用作登革病毒分离,不仅操作简便,而且易于获得病原确诊。为扩大应用范围,我们又将这种方法试用于培养甲组虫媒病毒。

内蒙古包头奶牛病毒性腹泻/粘膜病病毒的分离与鉴定

近两年在内蒙包头地区的奶犊牛中流行一种疑似牛病毒性腹泻—粘膜病(BVD—MD)的犊牛病,主要临床特征为体温高,口、鼻粘膜溃烂和血便。病犊胃肠粘膜出血、脱落。包头市西滩奶牛场,1990年11月至1991年4月共产犊牛94头,死亡98头,从患病犊牛分离到一株能使犊牛肾细胞及犊牛鼻甲骨细胞产生明显病变的病毒。该分离物对酸、热和乙醚敏感,对5—碘脱氧脲苷有抵抗力,病变细胞用吖啶橙染色呈现橙红色荧光,经细胞中和试验及免疫荧光试验证明分离毒和 BVD 具有共同的抗原性,从而表明该场奶犊牛死亡是牛病毒性腹泻/粘膜病病毒所致。