应用流式细胞小球微阵列术法检测趋化因子的变化

目的探讨流式细胞小球微阵列术(cytometricBeadArray,CBA)检测类风湿性关节炎患者服用灵芝三妙散胶囊后趋化因子白细胞介素8(IL8),调节活化的正常T细胞表达和分泌的因子(RANTES),γ干扰素诱导的单核因子(MIG),单核细胞趋化蛋白1(MCP1),以及γ干扰素诱导蛋白10(IP10)的变化。方法收集类风湿关节炎患者65例,设立安慰剂组和中药组,采用CBA法检测类风湿性关节炎患者服用灵芝三妙散胶囊后的血浆和全血在体外用脂多糖(LPS)和植物凝血素(PHA)刺激后趋化因子IL8、RANTES、MIG、MCP1、以及IP10的含量,然后比较分析。结果用CBA法检测类风湿性关节炎患者在服用灵芝三妙散胶囊后,体外试验中药组的IP10变化的百分率比安慰剂组明显升高(P<0.05)。结论CBA法检测血浆趋化因子是一种简便、可靠、灵敏度高、精确的新方法。

流式细胞小球微阵列术检测恶性肿瘤患者血清六种细胞因子的临床意义

目的探讨流式细胞小球微阵列术(CytometricBeadArray,CBA)检测恶性肿瘤患者血清干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素(IL-10、IL-5、IL-4、IL-2)含量改变在恶性肿瘤诊断中的意义。方法连续收集各类恶性肿瘤患者共101例,同时设立健康体检组作为对照。采用流式细胞术的微阵列技术代替传统的ELISA方法来检测血清IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-5、IL-4、IL-2的含量,然后分析比较。结果恶性肿瘤组患者血清IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-5、IL-4、IL-2含量分别为(62.05±127.96),(19.53±37.41),(10.68±12.00),(4.43±7.95),(7.32±13.68)和(2.99±9.73)pg/ml;除IL2外,其余5项均明显高于健康体检组,差异有显著性(P<0.05)。IFN-γ、TNF-α、IL0-10、IL-05、IL-04、IL-02测定的敏感度分别为72.3%、17.8%、39.6%、85.2%、80.2%和9.9%。大多数恶性肿瘤患者血清中有多种细胞因子水平同时升高,其中以IL-5、IL-4和IFN-γ三种细胞因子均升高最多见,占60.4%,与对照组相比,差异有高度显著性(P<0.01)。结论通过对比与分析,细胞因子的单项检测在肿瘤诊断中的意义并不大,但联合检测血清IL-5、IL-4、IFN-γ等的含量在肿瘤临床诊断中有较重要的应用价值。

术前消化道恶性肿瘤患者外周血Th1/Th2细胞外因子漂移分析

目的探讨术前消化道肿瘤患者血清中Th1/Th2细胞因子的漂移情况。方法收集食管癌患者163例,胃癌患者24例,肠癌患者80例,另选取70例健康体检者(对照组)进行试验。流式细胞小球微阵列术(CBA)检测两组血清中Th1类细胞因子[干扰素(IFN-)、肿瘤坏死因子-(TNF-)、白介素-2(IL-2)]与Th2类细胞因子[(白介素-10(IL-10)、白介素-5(IL-5)、白介素-4(IL-4)]的水平。结果食管癌组的IL-5水平与对照组差异有统计学意义(<0.05);胃癌组的IFN-水平与对照组差异有统计学意义(<0.05),IL-4水平与对照组差异有统计学意义(<0.05);肠癌组的IL-5水平与对照组差异有统计学意义(<0.05),IL-4水平与对照组差异有统计学意义(<0.05)。食管癌和肠癌患者为Th2上漂,胃癌患者为Th1、Th2双上漂。结论分析细胞因子漂移变化特点,以了解患者Th1/Th2类细胞因子的免疫调节功能状况,能为术前消化道肿瘤患者的免疫治疗提供依据。

阿德福韦酯对慢性乙型肝炎患者Th1/Th2型细胞因子的影响

目的分析细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-6、IL-4、IL-2在慢性乙型肝炎患者治疗后血清中的浓度改变及其临床意义。方法应用微阵列流式细胞术(CBA)体外检测慢性乙型肝炎患者治疗前、治疗12周、24周、48周的血清细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-6、IL-4、IL-2的浓度。结果慢性乙型肝炎患者阿德福韦酯治疗后外周血清的TH1/TH2细胞因子浓度度,比较治疗前,均是显著升高的(P<0.05),除IL-6外,各细胞因子在治疗过程中均未有显著变化(P>0.05);治疗12周时的血清IL-6的浓度与HBVDNA成负相关,治疗24周,IL-6、IL-10、TNF-α与HBVDNA成负相关(P<0.05)。结论阿德福韦酯除直接抑制病毒作用外,还可能通过免疫调节作用抑制病毒复制。

基于分子生物学方法的快速血流感染诊断技术的研究进展

血培养是诊断临床血流感染的金标准,但微生物结果报告的时间过长,远远不能满足临床医师对快速鉴定和药敏实验的需求.随着分子生物学的兴起和发展,以DNA杂交或PCR技术为基础的检测变性梯度凝胶电泳技术（DGGE）、 随机引物扩增多态性技术（RAPD）和基因芯片技术等不仅可以大大减少结果报告时间,而且可以对菌株进行种属水平间差异的检测;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术（MALDI-TOF MS）和流式细胞术的应用更是填补了蛋白组学在微生物领域中应用的空白.本文仅对临床血液培养的微生物分子生物学快速诊断和药敏试验做一简要综述,以期为发展新的微生物快速检测手段提供参考和借鉴.

恶性淋巴瘤患者TH1／TH2细胞因子表达水平的研究

目的探讨恶性淋巴瘤患者血清中TH1／TH2细胞因子变化及其临床意义，为肿瘤的免疫治疗提供实验依据。方法用流式细胞小球微阵列术（cytometric bead array，CBA）检测92例恶性淋巴瘤患者及70例健康人群血清中γ干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL-2、IL-4、IL-5、IL-10）表达水平。结果92例恶性淋巴瘤患者血清中TH1型细胞因子的水平分别为：IFN-γ（34．26±33．48）pg／ml、TNF-α（8．17±10．09）pg／ml、IL-2（3．74±1．72）pg／ml；TH2型细胞因子的水平分别为：IL-10（6．28±8．56）pg／ml、IL-5（3．53±3．20）pg／ml、IL-4（6．22±7．13）pg／ml。除TNF-α表达水平降低外，其余5项均明显高于健康体检组，差异有统计学意义（P〈0．01）。TH1细胞因子IL-2与TH2细胞因子IL-4的比值明显下降（0．78±0．44），与健康体检组（1．09±0．45）比较差异有统计学意义（P〈0．01）。IL-10与疾病的进展相关，Ⅲ／Ⅳ期恶性淋巴瘤患者的表达水平为（9．58±13．96）pg／ml，Ⅰ／Ⅱ期的表达水平为（4．77±3．50）pg／ml，二者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。IFN-γ在大于60岁的恶性淋巴瘤患者中表达水平明显降低，与其他年龄段恶性淋巴瘤患者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论恶性淋巴瘤患者血清中TH1／TH2细胞因子平衡失调，检测TH1／TH2细胞因子可作为评价淋巴瘤临床进展及预后指标。TH1／TH2平衡向TH2方向漂移，这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸，从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一。

左旋精氨酸强化的TPN对重症急性胰腺炎患者细胞因子的影响

目的探讨左旋精氨酸(L-Arg)强化的全肠外营养(TPN)对重症急性胰腺炎(SAP)患者促、抗炎细胞因子的影响。方法将40例SAP患者随机分为2组,每组20例,分别给予L-Arg强化的TPN和常规TPN营养支持,均从中心静脉补充营养液。选取10例健康体检者作为正常对照组。在营养支持的第1、4天用流式细胞小球微阵列术(CBA)检测营养支持组患者的IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-5、IL-4、IL-2水平,并与对照组比较,同时分析强化TPN组及常规TPN组间各细胞因子水平差异。结果营养支持第1天:强化TPN组及常规TPN组IL-2水平均低于正常对照组(P均<0.05),其余5种细胞因子均高于对照组(P均<0.05),但2组之间各细胞因子水平无明显差异(P均>0.05)。营养支持第4天:2组IL-2水平明显高于第1天(P均<0.05);2组IFN-γ、TNF-α、IL-4及IL-10与第1天比较,差异均有统计学意义(P均<0.05);强化TPN组TNF-α、IL-10、IFN-γ、IL-4水平低于常规TPN组(P均<0.05),IL-10/TNF-α、IFN-γ/IL-4比值更接近于正常组水平(P均<0.05)。结论 L-Arg强化的TPN在调节SAP患者促、抗炎平衡方面优于常规TPN,有利于机体免疫平衡的恢复。CBA能够高通量、高灵敏度地检测促、抗炎细胞因子失调状况。

宫颈鳞癌患者Th细胞因子对鳞状细胞癌抗原的作用及其意义

目的通过对比分析宫颈鳞癌患者鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)和辅助性T细胞(Th)细胞因子的同步水平变化,探讨Th细胞因子对SCC-Ag影响,揭示肿瘤相关抗原SCC-Ag和Th细胞在抗肿瘤免疫应答中的作用和机制。方法对52例不同临床分期的宫颈鳞癌患者采用酶联免疫吸附法检测SCC-Ag水平,应用流式细胞小球微阵列术(CBA)同步检测IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-5、IL-4、IL-2水平,采用方差分析、Pearson相关和多元线性回归方法,分析不同临床分期宫颈鳞癌患者SCC-Ag的水平变化,及其每个细胞因子对SCC-Ag的影响。结果 SCC–Ag水平随临床期别升高而增加,SCC–Ag水平低的组别,IL-2、INF-γ对SCC-Ag的影响较大,表现为Thl优势,SCC–Ag水平高的组别,IL-4、IL-10对SCC-Ag的影响较大,表现为Th2优势。结论宫颈鳞癌患者存在随期别不同而变化的SCC-Ag变化和Thl/Th2失衡,因此动态、联合监测和调节SCC-Ag变化及Thl/Th2失衡,在宫颈鳞癌诊断和防治方面提高准确度的同时,更具针对性。