microRNA-135a通过靶向IL-17抑制肝癌细胞增殖的机制

目的探讨microRNA-135a(miR-135a)在肝癌中的表达及其影响细胞增殖的机制。方法收集17肝癌患者和7例正常受试者血液,用ELISA法测定血浆IL-17浓度。将THLE-3人肝永生化细胞分为乱序对照+IL-17 MUT组、乱序对照+IL-17 WT 3'UTR组、miR-135a+IL-17 MUT组和miR-135a+IL-17 WT 3'UTR组,通过荧光素酶报告基因测定实验验证miR-135a可能靶向调控IL-17的表达,进而影响荧光酶的活性。将miR-135a模拟物、空质粒及乱序寡核苷酸转染到原代肝癌细胞中,检测各组IL-17的浓度,并通过MTT测定各组细胞增殖能力。结果肝癌患者血浆IL-17浓度高于正常受试者(P<0.05)。miR-135a靶向IL-173'UTR的序列调控IL-17分泌,miR-135a模拟物和IL-17 WT 3'UTR共转染细胞后荧光素酶的活性减低(P<0.05)。外源miR-135a模拟物转染原代肝癌细胞可抑制肝癌细胞中IL-17分泌(P<0.05)及肝癌细胞增殖(P<0.05)。结论与正常人相比,肝癌患者的血浆IL-17升高。miR-135a调控IL-17的分泌。miR-135a高表达可能通过抑制IL-17表达,从而抑制肝癌的发展。

miR-135b对LZST1表达及肺癌细胞转移行为的影响

目的探讨miR-135b对亮氨酸拉链肿瘤抑制基因1(LZST1)表达及肺癌细胞转移行为的影响及机制。方法 q PCR检测miR-135b和LZST1在肺癌组织和癌旁正常组织中的表达情况。通过转染miR-135b-mimic和miR-135b-inhibitor模拟物上调和下调肺癌A549细胞中miR-135b的表达。Western blotting检测miR-135b对LZST1的调控作用;划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测miR-135b对肺癌细胞的迁移和侵袭能力的影响;免疫组织化学检测肺癌组织和癌旁正常组织中LZTS1蛋白的表达情况。结果肺癌组织中miR-135b和LZST1表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05)。LZST1蛋白在肺癌组织中表达阳性,在癌旁正常组织中表达阴性。与阴性对照组相比,miR-135b-mimic组LZST1蛋白表达上调,miR-135b-inhibitor组LZST1蛋白表达下调(P<0.05)。与阴性对照组相比,miR-135b-mimic组的迁移能力和侵袭能力增强,miR-135b-inhibitor组的迁移能力和侵袭能力减弱(P<0.05)。结论 miR-135b可以通过调控LZST1的表达影响肺癌A549细胞的迁移和侵袭能力。