母体血清微RNA-146a-5p联合三联法检测在孕中期唐氏综合征筛查中的意义

目的 探讨母体血清微RNA-146a-5p(miR-146a-5p)联合三联法检测在孕中期唐氏综合征筛查中的意义。方法 选取2017年1月至2020年8月于黄冈市中心医院孕中期行唐氏综合征筛查结果为阳性的孕妇65例(病例组),同期选择本院健康的妊娠孕妇65例(对照组)。使用化学发光免疫分析仪检测孕妇血清甲胎蛋白(AFP),人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)以及游离雌三醇(uE3)指标。实时荧光定量PCR法检测血清中miR-146a-5p的水平。采用受试者操作特征(ROC)曲线分析母体血清miR-146a-5p联合三联法对孕中期唐氏综合征的预测价值。采用Pearson法分析miR-146a-5p相对表达水平与血清AFP、uE3、β-hCG中位数的倍数(MOM)值的相关性。结果 与对照组(1.89±0.32)U/mL、(1.63±0.36)μg/L、1.03±0.24、(2.41±0.28)μg/L相比,病例组孕妇血清AFP MOM值(2.84±0.27)U/mL、β-hCG MOM值(2.84±0.25)μg/L及血清miR-146a-5p相对表达水平3.07±0.95较高(P<0.05),uE3 MOM值(1.71±0.19)μg/L较低(P<0.05)。Pearson法分析显示,miR-146a-5p与AFP、β-hCG呈正相关(P<0.05),与uE3呈负相关(P<0.05)。ROC曲线结果显示,AFP+uE3+β-hCG预测孕中期唐氏综合征的曲线下面积(AUC)为0.85,灵敏度分别为83.10%,特异度分别为75.40%;miR-146a-5p预测孕中期唐氏综合征的AUC为0.86,灵敏度为81.50%,特异度为87.70%;miR-146a-5p+AFP+uE3+β-hCG预测子孕中期唐氏综合征的AUC为0.91,灵敏度为86.20%,特异度为80.00%,miR-146a-5p联合三联法检测对孕中期唐氏综合征筛查价值高于三联法检测(P<0.05)。结论 母体血清miR-146a-5p联合三联法对孕中期唐氏综合征的预测效能具有较高的临床价值,可为孕中期唐氏综合征筛查提供一种新途径。

脓毒症患者血浆微RNA-146a表达与患病风险、炎性因子水平及预后的相关性分析

目的评估脓毒症患者血浆miRNA-146a表达水平对患病风险及预后的价值。方法连续纳入2015年10月至2017年3月于海军军医大学(第二军医大学)附属公利医院急诊科和ICU就诊的132例脓毒症患者,以及同期在健康体检中心进行健康体检的131名健康对照。采集两组研究对象的血液样本,采用qRT-PCR检测血浆miRNA-146a表达,采用ELISA法测定血清炎性因子(CRP、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10)水平。结果与健康对照相比,脓毒症患者血浆中miRNA-146a表达水平较低(Z=-7.423,P<0.01);ROC曲线显示血浆miRNA-146a对脓毒症有较好的诊断价值,AUC为0.765(95%CI 0.707~0.823),取约登指数最大值处的界值为最佳诊断界值,此时灵敏度和特异度分别为87.9%和61.8%。多元logistic回归模型显示血浆miRNA-146a表达水平低是脓毒症患病风险的独立预测因素(OR=0.312,95%CI 0.225~0.434,P<0.01)。Spearman相关分析显示血浆miRNA-146a表达水平与急性生理功能和慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分呈负相关(r=-0.562,P<0.01),与血清CRP(r=-0.304,P<0.001)、TNF-α(r=-0.287,P=0.001)、IL-1β(r=-0.173,P=0.047)及IL-6(r=-0.213,P=0.014)呈负相关,与血清IL-10(r=0.225,P=0.009)呈正相关。与存活脓毒症患者相比,死亡患者血浆中miRNA-146a的表达水平降低(Z=-2.818,P=0.005)。ROC曲线分析显示血浆miRNA-146a对脓毒症有良好的预后价值,AUC为0.660(95%CI 0.546~0.773),最佳诊断界值的灵敏度和特异度分别为88.5%和47.2%。结论血浆miRNA-146a表达水平低是脓毒症患病的独立预测因素,并与疾病严重程度高、炎性因子水平高及预后不良有关。

微RNA-146a在风湿性疾病中的研究进展

微RNA(miRNA)作为一种高度保守的、内源性非编码小分子RNA,主要在转录后调节细胞增殖、分化、凋亡及免疫应答等重要生命过程。miR-146是第一个被发现的哺乳动物先天免疫及适应性免疫的调制器,miR-146a表达失调与风湿性疾病的发生及免疫调节异常密切相关。miR-146a作为miR-146家族中的一员,在风湿性疾病发病中的作用受到广泛关注,研究miR-146a在风湿性疾病中的作用机制有助于风湿性疾病的诊断与治疗。

微RNA-146a在肿瘤发生发展中的作用研究进展

微RNA(miRNA)是一类普遍存在于多种生物体内长度为18~26个核苷酸的单链非编码小分子RNA。miRNA通过靶向调控mRNA翻译,参与个体发育及细胞增殖、分化和凋亡等一系列重要的生物学过程,与多种疾病的发生、发展密切相关。miRNA可以调控肿瘤细胞的分化、增殖和迁移等多种生物学行为,在肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。miRNA-146a是miRNAs家族中的一员,在神经系统疾病、心血管疾病、自身免疫性疾病以及癌症的发生和发展过程中发挥重要作用。miRNA-146a的异常表达和茎区段碱基错配可增加肿瘤发生的概率,与消化、呼吸和生殖等系统肿瘤的发生发展密切相关。本文就miRNA-146a在肿瘤发生发展中的作用进行综述。

微RNA-146a基因rs2910164多态性与胃癌易感性的Meta分析

目的 ：探讨微RNA-146a（microRNA-146a,miRNA-146a）基因rs2910164位点多态性与胃癌易感性的关系。方法 ：计算机检索PubMed、EMBASE、Cochrane Library、中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、维普数据库和万方数据库,收集关于miRNA-146a rs2910164多态性与胃癌罹患风险关系的病例-对照研究。根据文献纳入及排除标准筛选研究文献,提取数据并进行质量评价。采用STATA 12.1软件进行Meta分析,计算合并比值比（odds ratio,OR）及95%可信区间（coni dence interval,CI）,并进行亚组分析、敏感性分析和发表偏倚检测。结果 ：共纳入8个病例-对照研究,包括胃癌患者4 308例,非肿瘤对照者6 320例。Meta分析结果显示,miRNA-146a rs2910164多态性与胃癌罹患风险无统计学相关性（C vs G：OR=0.95,95%CI：0.84～1.08;GG＋CG vs CC：OR=1.05,95%CI：0.85～1.29;GG vs CC＋CG：OR=1.12,95%CI：0.94～1.34;CC vs GG：OR=0.91,95%CI：0.71～1.16;CG vs GG＋CC：OR=0.95,95%CI：0.88～1.03）。敏感性分析时剔除了异质性较大的一篇研究（Okubo等）后,C vs G及CC vs GG模型基因多态性与胃癌易感性相关,差异有统计学意义（OR=0.87,95%CI：0.84～0.95;OR=0.80,95%CI：0.70～0.91）。根据Lauren’s分型的亚组分析显示,GG vs CC＋CG模型基因多态性与肠型胃癌的罹患风险增高相关（OR=1.24,95%CI：1.04～1.48）。结论 ：miRNA-146a基因rs2910164位点多态性可能与胃癌易感性无相关性。

miR-375、miR-146a在原发性肝癌患者预后评估中的价值

目的研究miR-375、miR-146a在原发性肝癌患者中的表达及其在患者预后评估中的价值。方法选取2015年9月至2017年3月我院收治的65例原发性肝癌患者、49例乙肝肝硬化患者、51例乙型肝炎患者及47例同期健康体检者作为研究对象。检测四组受试者血清miR-375、miR-146a相对表达量。探究原发性肝癌患者治疗前后血清miR-375、miR-146a表达量变化及其在原发性肝癌患者预后诊断中的价值。分析原发性肝癌患者1年生存期的独立影响因素。结果 miR-375在原发性肝癌组、肝硬化组、肝炎组和健康对照组血清中的表达量分别为(0.3±0.1)、(0.6±0.2)、(0.9±0.3)和(0.9±0.2),miR-146a在原发性肝癌组、肝硬化组、肝炎组和健康对照组血清中的表达量分别为(4.2±0.8)、(2.7±0.5)、(1.2±0.4)和(1.0±0.2),均差异有统计学意义(F=111.247、412.194,P<0.001)。原发性肝癌组患者血清miR-375表达量低于肝硬化组、肝炎组和健康对照组,差异有统计学意义(q=10.179、21.136、22.165,P<0.01);原发性肝癌组患者血清miR-146a表达量高于肝硬化组、肝炎组和健康对照组,差异有统计学意义(q=19.945、41.012、42.442,P<0.01)。原发性肝癌组患者经肝动脉栓塞化疗治疗后血清miR-375表达量为(0.5±0.2),较治疗前升高,差异有统计学意义(t=7.658,P<0.001);血清miR-146a表达量为(3.2±0.7),较治疗前降低,差异有统计学意义(t=-6.832,P<0.001)。65例原发性肝癌患者均接受肝动脉栓塞化疗治疗,其1年生存率为81.5%(53/65)。生存组患者血清miR-375、miR-146a表达量分别为(0.3±0.1)和(3.9±0.6),死亡组患者血清miR-375、miR-146a表达量分别为(0.2±0.1)和(5.3±0.6),均差异有统计学意义(t=-4.408、6.456,P<0.001)。miR-375、miR-146a联合检测诊断原发性肝癌患者1年生存期的AUC为0.956(95%CI:0.874～0.991),效能较高。单因素分析显示病灶大小、白蛋白水平、Child-Pugh分级、miR-375和miR-146a表达量与原发性肝癌患者1年生存期有关。Cox多因素回归分析显示病灶大小、miR-375和miR-146a表达量是原发性肝癌患者1年生存期的独立影响因素。结论联合检测原发性肝癌患者血清miR-375、miR-146a表达有助于预后评估。

体内转染微小RNA-146a对脓毒症小鼠肺的保护作用

目的：观察体内转染微小RNA-146a（miR-146a）对脓毒症小鼠肺脏的保护作用。方法选择健康雄性BALB/C小鼠24只，按随机数字表法分为假手术组、脓毒症组、转染组、转染对照组，每组6只。转染组小鼠经气管内预先滴入转染试剂in vivo-jetPEITM处理的miR-146a模拟物（agomir），转染对照组滴入in vivo-jetPEITM处理的阴性对照物。转染12 h后采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症模型；假手术组仅开腹游离盲肠，不进行结扎穿刺。各组于术后24 h处死动物，采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测肺组织 miR-146a表达，用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平，测定肺组织湿/干质量（W/D）比值，光镜下观察肺组织病理学改变并进行肺损伤病理评分。结果脓毒症组、转染组、转染对照组小鼠肺组织miR-146a表达量分别上调至假手术组的（3.56±0.43）、（27.64±3.46）、（3.72±0.54）倍（P＜0.05或P＜0.01），且转染组miR-146a表达上调量明显高于脓毒症组及转染对照组（均P＜0.01）；而脓毒症组与转染对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。与假手术组比较，脓毒症组、转染组、转染对照组BALF中TNF-α水平均明显升高（ng/L：511.65±43.47、305.74±34.76、492.27±42.21比50.72±7.23，均P＜0.01），转染组TNF-α水平明显低于脓毒症组及转染对照组（均P＜0.01）。与假手术组比较，脓毒症组、转染组、转染对照组肺W/D比值明显升高（6.11±0.32、5.02±0.29、6.05±0.43比4.18±0.10，均P＜0.01），转染组明显低于脓毒症组及转染对照组（均P＜0.01），且转染组肺损伤病理评分较脓毒症组及转染对照组明显下降（分：6.12±0.75比10.53±1.52、9.73±1.08，均P＜0.01）。结论通过体内转染in vivo-jetPEI^TM荷载的miR-146a agomir可以上调脓毒症小鼠肺组织miR-146a表达，减少肺部炎性因子TNF-α的产生，抑制肺部炎症反应，减轻肺组织损伤。

艳山姜总黄酮改善无水乙醇致胃黏膜细胞损伤的作用及机制

目的探讨艳山姜总黄酮通过微RNA-146a-5p(miR-146a-5p)对无水乙醇诱导的胃黏膜细胞损伤的改善作用及潜在机制。方法以人胃黏膜细胞GES-1为对象,以无水乙醇诱导建立急性胃溃疡细胞模型,在考察不同质量浓度艳山姜总黄酮对细胞活力影响及筛选作用浓度的基础上,检测细胞中miR-146a-5p的相对表达量,细胞中肿瘤坏死因子受体关联因子6(TRAF6)、核因子κB p65(NF-κB p65)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白的表达水平,以及细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、前列腺素E2(PEG2)水平;验证miR-146a-5p与TRAF6的靶向关系,并观察过表达miR-146a-5p、敲减TRAF6对模型细胞上清液中IL-1β、IL-6、PEG2水平的影响,以及敲减miR-146a-5p对艳山姜总黄酮抗胃溃疡作用的影响。结果与空白组比较,模型组细胞中miR-146a-5p的相对表达量和上清液中PGE2水平均显著降低(P<0.01),细胞中TRAF6、NF-κB p65、TNF-α蛋白的表达水平和上清液中IL-1β、IL-6水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,模型+艳山姜总黄酮(60 mg/L)组细胞中miR-146a-5p的相对表达量和上清液中PGE2水平均显著升高(P<0.01),细胞中TRAF6、NF-κB p65、TNF-α蛋白的表达水平和上清液中IL-1β、IL-6水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。miR-146a-5p与TRAF6存在靶向关系且呈负相关;过表达miR-146a-5p或敲减TRAF6后,细胞上清液中IL-1β、IL-6水平均显著降低,PGE2水平显著升高(P<0.05)。敲减miR-146a-5p后,艳山姜总黄酮作用下的细胞上清液中IL-1β、IL-6水平和细胞中TRAF6蛋白的表达水平均显著升高,PGE2水平显著降低(P<0.05)。结论艳山姜总黄酮对无水乙醇致胃黏膜细胞损伤有一定的改善作用,其机制可能与上调miR-146a-5p的表达、抑制TRAF6的表达,进而抑制相关炎症因子的分泌有关。

类风湿关节炎发病机制的研究进展

类风湿关节炎(RA)是以慢性破坏性关节病变为特征的全身性自身免疫病。关节滑膜的慢性炎症、增生,形成血管翳,侵犯关节软骨、韧带和肌腱等,造成关节软骨、骨和关节囊破坏,最终导致关节畸形和功能丧失。其发病机制比较复杂,目前尚无有效药物根治。在滑膜和骨质破坏过程中细胞因子、细胞内信号转导等多种成分发挥作用。这些成分的研究有助于进一步揭示RA的病理机制,进而寻找适当的的治疗靶点。

miRNA-146a通过JAK/STAT3信号通路对烧冲复合伤大鼠心脏功能的影响

目的探讨miRNA-146a通过Janus激酶/信号转导和转录激活因子3(JAK/STAT3)信号通路对烧冲复合伤大鼠心脏功能的影响。方法将48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、miRNA-146a阴性对照组(阴性对照组,尾静脉注射20μg miRNA-146a模拟物阴性对照)、miRNA-146a过表达组(过表达组,尾静脉注射20μg miRNA-146a模拟物)、JAK/STAT3通路抑制剂AG490组(AG490组,尾静脉注射5 mg/kg AG490)、miRNA-146a过表达+AG490组(联合组,尾静脉注射20μg miRNA-146a模拟物+5 mg/kg AG490),每组8只,除对照组,其余大鼠均通过爆炸联合94℃热水烧伤的方法构建烧冲复合伤大鼠模型。超声心动图检查大鼠心脏功能指标,多道生理仪记录大鼠血流动力学指标,苏木精-伊红(HE)及Masson染色检测大鼠心肌组织损伤情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测大鼠心肌组织炎症因子水平,RT-qPCR测定大鼠心肌组织miRNA-146a表达,Western blot检测大鼠心肌组织JAK/STAT3通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠心脏功能明显下降,心肌组织受到严重损害,心肌组织中炎症因子水平明显升高(P<0.05),miRNA-146a及JAK/STAT3通路相关蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,过表达组大鼠心功能及心肌组织损伤得到改善,心肌组织中炎症因子水平明显降低(P<0.05),miRNA-146a表达水平及JAK/STAT3通路相关蛋白表达明显升高(P<0.05);与过表达组比较,联合组大鼠心功能明显下降,心肌组织损害较重,心肌组织中炎症因子水平明显升高(P<0.05),miRNA-146a表达水平差异无统计学意义(P>0.05),JAK/STAT3通路相关蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论过表达miRNA-146a可明显改善烧冲复合伤大鼠心脏功能,可能是通过激活JAK/STAT3通路而实现。

miR-146a对血小板免疫炎症功能的影响

目的探讨miR-146a对血小板免疫炎症功能的影响。方法体外培养双分化潜能的K562细胞,佛波酯诱导其向巨核细胞系分化,分别导入miR-146a模拟物和阻遏物。ELISA检测白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平;Western blot及RT-PCR检测转染细胞后Toll样受体4(TLR4)、核因子(NF)-κB蛋白和mRNA的表达水平;通过荧光素酶报告基因法验证IL-1受体相关激酶1(IRAK1)是否含有miR-146a的靶位点,观察miR-146a对靶基因IRAK1的影响。结果过表达miR-146a后,细胞上清中IL-6、TNF-α水平降低,TLR4蛋白表达明显升高,NF-κB mRNA和蛋白表达明显降低。抑制miR-146a后,细胞上清中IL-6、TNF-α水平升高,TLR4蛋白表达明显降低,NF-κB mRNA和蛋白表达明显升高。双荧光素酶报告实验证实Pmir-Report-WT-IRAK1和miR-146amimic共转染组的荧光素酶报告基因活性明显受到抑制,miR-146a过表达可抑制IRAK1蛋白表达,而对IRAK1mRNA表达无影响。结论 miR-146a可能通过IRAK1作用于TLR4/NF-κB信号通路,从而调控血小板免疫炎症。