黄芪注射液联合高通量血液透析对尿毒症患者肾功能和血清微RNA-155、白细胞介素-17、超敏C反应蛋白水平的影响

目的探讨黄芪注射液联合高通量血液透析(HFHD)对尿毒症患者肾功能及血清微RNA-155(miR-155)、白细胞介素-17(IL-17)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平的影响。方法选择2016年12月至2019年12月长安医院收治的156例尿毒症患者为研究对象,根据治疗方法将患者分为观察组(n=86)和对照组(n=70)。2组患者均给予积极治疗原发疾病、纠正贫血及进食低盐、富含优质蛋白质类食物等常规治疗措施;在常规治疗基础上,对照组患者给予HFHD治疗,观察组患者给予黄芪注射液和HFHD联合治疗。治疗前及治疗3、6个月,测量患者舒张压(DBP)和收缩压(SBP),检测患者血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、前白蛋白(PA)、白蛋白(Alb)、血红蛋白(Hb)、IL-17和hs-CRP及miR-155水平,并测量患者24 h尿量和24 h尿蛋白。治疗6个月后评估2组患者临床疗效。结果治疗前2组患者DBP、SBP、SCr、BUN水平及24 h尿蛋白、24 h尿量比较差异无统计学意义(P>0.05),2组患者治疗3、6个月后DBP、SBP、SCr、BUN水平及24 h尿蛋白、24 h尿量显著低于治疗前(P<0.05),2组患者治疗6个月后DBP、SBP、SCr、BUN水平及24 h尿蛋白、24 h尿量显著低于治疗3个月(P<0.05);治疗3、6个月后,观察组患者DBP、SBP、SCr、BUN水平及24 h尿蛋白显著低于对照组,24 h尿量显著高于对照组(P<0.05)。治疗前2组患者PA、Alb、Hb水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者治疗3、6个月后PA、Alb、Hb水平显著高于治疗前(P<0.05);对照组患者治疗3、6个月后Hb水平显著高于治疗前(P<0.05);对照组患者治疗3、6个月后PA、Alb水平与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者治疗6个月后Hb水平显著高于治疗3个月(P<0.05);2组患者治疗6个月后PA、Alb水平与治疗3个月比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗3、6个月后,观察组患者PA、Alb、Hb水平显著高于对照组(P<0.05)。治疗前2组患者血清IL-17、hs-CRP水平及miR-155相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组患者治疗3、6个月后血清IL-17、hs-CRP水平及miR-155相对表达量显著低于治疗前(P<0.05);2组患者治疗6个月后血清IL-17、hs-CRP水平及miR-155相对表达量显著低于治疗3个月(P<0.05)。治疗3、6个月后,观察组患者IL-17、hs-CRP水平及miR-155相对表达量显著低于对照组(P<0.05)。观察组和对照组患者治疗总有效率分别为93.02%(80/86)、74.29%(52/70),观察组患者治疗总有效率显著高于对照组(χ^(2)=10.408,P<0.05)。结论黄芪注射液和HFHD联合治疗可有效控制尿毒症患者的血压,抑制炎症反应,延缓肾功能损伤,改善营养状况。

微RNA-155与Th1/Th17异常相关性疾病关系的研究进展

微RNA(miRNA/miR)-155为一种多功能miRNA,参与到感染、免疫、炎症、肿瘤等多种病理生理过程中。miR-155可通过作用于靶基因对免疫细胞产生强大的调控作用,参与到多种免疫相关性疾病的发生、发展中。在银屑病、特应性皮炎、扁平苔藓、硬化性苔藓等多种免疫相关性疾病中均存在miR-155表达异常,并且伴随着辅助性T细胞(Th)1/Th17细胞的分化异常,提示miR-155表达异常与Th1/Th17细胞分化相关,因此miR-155表达异常的研究,对于揭示Th1/Th17细胞分化异常的机制,Th1/Th17异常相关性疾病的发生机制及治疗具有重要意义。

微RNA-155与肾脏疾病的研究进展

微RNA(miRNA)是一类内源性基因表达调节因子,在免疫相关性疾病的体液和细胞免疫调控中发挥重要作用,免疫细胞中miRNA的异常分布、表达可导致疾病的发生。其中,miR-155作为免疫系统最主要的多功能miRNA之一受到广泛关注,是目前研究的热点。成熟的miR-155可通过调控特定的靶基因在免疫系统中发挥生物学作用,而免疫系统异常是肾脏疾病发生的主要原因之一,影响其发生、发展及预后。因此,miR-155有望成为肾脏疾病治疗的新靶点,从而为揭示肾脏疾病的作用机制、临床诊断和治疗提供新思路。

微RNA-155-5p、微RNA-16、微RNA-129-5p对脓毒性休克患儿连续肾脏替代疗法疗效的预测价值分析

目的分析微RNA(miR)-155-5p、miR-16、miR-129-5p对脓毒性休克患儿连续肾脏替代疗法(CRRT)疗效的预测价值。方法回顾性选取2021年1月至2022年1月山西省儿童医院收治的179例重症脓毒症患儿,其中89例脓毒性休克患儿为A组,90例脓毒症非休克患儿为B组,另选择同期参加体检的健康儿童80例为C组。比较各组miR-155-5p、miR-16、miR-129-5p表达水平;A组患儿根据CRRT疗效分为有效组、无效组,比较两组miR-155-5p、miR-16、miR-129-5p表达的差异及对CRRT疗效的预测价值。结果A组miR-155-5p表达量高于B、C组(2.56±0.98比1.41±0.35、0.53±0.11),miR-16、miR-129-5p表达量低于B、C组(1.00±0.27比2.23±0.98和3.38±1.01、0.65±0.17比1.39±0.22和2.25±0.76),差异有统计学意义(P<0.05);B组miR-155-5p表达量高于C组,miR-16、miR-129-5p表达量低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析发现,序贯器官衰竭量表评分、白细胞计数、C反应蛋白、降钙素原、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α、N末端B型利钠肽前体水平和miR-155-5p、miR-16、miR-129-5p表达水平为影响脓毒性休克患儿CRRT疗效的独立危险因素(P<0.05)。Pearson相关分析结果表明,miR-155-5p与miR-16、miR-129-5p呈负相关(r=-0.411、-0.369,P<0.05);miR-16与miR-129-5p呈正相关(r=0.444,P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果表明,miR-155-5p、miR-16、miR-129-5p联合检测对脓毒性休克患儿CRRT治疗疗效的预测价值高于单项指标(P<0.05)。miR-155-5p高表达、miR-16及miR-129-5p低表达的脓毒性休克患儿病死率较高(P<0.05)。结论miR-155-5p、miR-16、miR-129-5p在脓毒性休克患儿中表达异常,且与CRRT疗效有关,可用于CRRT疗效的早期预测。

微RNA-155激动剂对脓毒症小鼠肝损伤时炎症应答的影响

目的探讨微RNA-155(miR-155)激动剂对脓毒症小鼠肝损伤时炎症应答的影响。方法将80只雄性小鼠分成假手术组、脓毒症组、微RNA(miRNA)组及miR-155组,每组各20只。以盲肠结扎穿孔(CLP)术制备脓毒症小鼠模型,假手术组除不结扎和穿刺盲肠外,其余手术步骤相同。建模成功后48 h,miRNA组、miR-155组小鼠分别经尾静脉注射miRNA、miR-155激动剂,假手术组和脓毒症组注射等量等渗NaCl溶液。每组取10只用于观察小鼠活动状态及术后7 d存活情况;每组另取10只于术后5 d采集外周血,检测并比较miR-155及丙氨酸转氨酶(ALT)水平;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白细胞介素10(IL-10)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果CLP术后7 d,miR-155组小鼠均死亡,脓毒症组和miRNA组仍有2只存活;而假手术组小鼠10只均存活。CLP术后5 d,4组小鼠间miR-155、ALT、IL-10及TNF-α水平比较,差异均有统计学意义(F=46.536,P<0.001;F=39.194,P=0.002;F=39.228,P=0.002;F=83.400,P<0.001)。进一步两两比较发现,脓毒症组、miRNA组及miR-155组小鼠的miR-155、ALT、IL-10及TNF-α水平均显著高于假手术组(P均<0.05),且与脓毒症组和miRNA组比较,miR-155组小鼠的miR-155、ALT及IL-10水平均较高,而TNF-α水平均较低(P均<0.05)。结论miR-155激动剂可提高IL-10水平,降低TNF-α水平,从而加重脓毒症小鼠的肝损伤。

利用CRISPR/Cas9技术构建微RNA-155基因敲除小鼠模型孙瑞成

目的 探讨利用CRISPR/Cas9技术构建微RNA-155（miR-155）基因敲除小鼠模型.方法 选择健康C57BL/6J小鼠,首先进行小鼠基因组靶序列的扩增和测序,明确miR-155序列及位点,然后设计并构建Cas9载体质粒（Cas9 RNA）及打靶载体单导向RNA（sgRNA）,随后将体外转录的Cas9 RNA及sgRNA显微注射入小鼠的受精卵,并将受精卵体外培养.将培养合格的胚胎移植到代孕小鼠的输卵管中,待小鼠生育后得到F0代小鼠.通过对F0代小鼠基因型检测确定基因敲除情况,进而繁育并建立基因敲除小鼠模型.结果 利用CRISPR/Cas9技术构建模型小鼠得到F0代小鼠18只,其中4号小鼠出现DNA单链碱基片段缺失,且基因型可以稳定传代.对其进行繁育后,得到F1代杂合子小鼠3只.杂合子小鼠交配繁育,得到F2代纯合子基因敲除小鼠,电泳及测序结果证实其缺失114 bp碱基序列,成功敲除miR-155基因.miR-155基因敲除小鼠在清洁级动物饲养环境中可以正常繁育.结论 CRISPR/Cas9技术能够快速、有效地构建miR-155基因敲除小鼠模型.

miRNA-155与TP53INP1 mRNA在非小细胞肺癌患者胸水脱落细胞中的表达及其临床意义

目的探讨miRNA-155与TP53INP1 mRNA在非小细胞肺癌患者胸水脱落细胞中表达的临床意义,以及两者相关性。方法分别从42例恶性胸水患者和21例良性胸水患者胸水脱落细胞中,提取RNA,采用实时定量PCR技术检测miRNA-155与TP53INP1 mRNA表达量,分析其与恶性胸腔积液患者临床病理特征、生存时间的相关性。结果恶良性胸水组中miRNA-155相对表达水平分别为(22.74±1.33,21.53±1.89),恶性组显著高于良性组(t=2.95 P<0.05);恶良性胸水组中TP53INP1 mRNA相对表达水平(5.92±1.43,6.95±1.93),恶性组显著低于良性组(t=2.39 P<0.05)。恶性胸水组miRNA-155高、低表达水平组患者的中位生存时间,分别为253d、383d,两者差异有统计学意义(P<0.05);恶性胸水组患者miRNA-155表达量与胸水细胞TP53INP1 mRNA呈负相关。结论miRNA-155的高表达对诊断肺癌合并恶性胸腔积液具有一定的价值,恶性胸腔积液中miRNA-155表达增加,预示患者生存率下降,TP53INP1可能是miRNA-155在非小细胞肺癌中发挥作用的靶标。

MicroRNA-155调控Th17/Treg平衡的研究进展

微RNA(miRNA)是真核生物中的一种小的内源性非编码蛋白质小分子RNA,它在细胞的分化中起着重要作用。在众多的miRNAs中,miR-155与免疫调控的关系最为密切。辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)是介导适应性免疫应答的两个T细胞亚群,两者之间相互调节共同发挥免疫效能。miR-155可通过调节Th17、Treg等炎性T细胞的增殖、分化与发育而介导自身免疫炎症反应,并可调节机体的细胞因子的分泌来调控Th17/Treg的平衡。

基于氧化/抗氧化平衡及miR-221、miR-155水平变化探讨前列地尔联合德谷胰岛素治疗2型糖尿病下肢血管病变的效果

目的:基于氧化/抗氧化平衡及微RNA(miR)-221、miR-155水平变化,探讨前列地尔联合德谷胰岛素治疗2型糖尿病下肢血管病变的效果。方法:选取2018年12月至2020年12月该院住院部2型糖尿病下肢血管病变患者94例进行前瞻性研究,以简单随机化法分为观察组(n=47)、对照组(n=47)。两组患者均采用基础治疗,对照组患者采用德谷胰岛素治疗,观察组患者采用前列地尔联合德谷胰岛素治疗。比较两组患者的疗效、不良反应发生情况,治疗前后临床症状评分、踝肱指数(ABI)、下肢动脉情况(胫后动脉、足背动脉、腘动脉及股动脉的血流量和内径)、血清氧化应激指标[8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)、超氧化物歧化酶(SOD)和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)]水平、miR-221和miR-155水平。结果:观察组患者的总有效率为95.74%(45/47),明显高于对照组(80.85%,38/47),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组患者的临床症状评分低于对照组,ABI高于对照组,胫后动脉、足背动脉、腘动脉及股动脉的血流量高于对照组,内径长于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组患者血清8-iso-PGF2α、ox-LDL、miR-221和miR-155水平低于对照组,血清SOD水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组、对照组患者的不良反应发生率分别为8.51%(4/47)、6.38%(3/47),两组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:前列地尔联合德谷胰岛素治疗2型糖尿病下肢血管病变患者,可调节氧化/抗氧化平衡,降低血清miR-221、miR-155水平,增加下肢动脉内径及血流量,改善临床症状,效果显著。

胸腔积液中miRNA-21和miRNA-155表达的诊断价值

目的探讨胸水miRNA-21和miRNA-155含量检测的临床意义。方法分别从43例恶性胸水患者和27例良性胸水患者胸水中提取miRNA,采用荧光定量PCR技术检测miRNA-21和miRNA-155在良性和恶性胸水中表达量,常规细胞学方法检测胸水脱落细胞。应用受试者工作特征曲线(ROC)分析方法评价其诊断价值。结果恶性胸水组miRNA-21和miRNA-155的表达量明显高于良性胸水组(P<0.05),胸水脱落细胞学检查肿瘤细胞阳性组miRNA-21和miRNA-155的表达量明显高于阴性组。胸水中miRNA-21表达量对肺癌的诊断价值:当特异性为100%时,诊断的敏感性为67.4%,ROC曲线下面积0.891。胸水中miRNA-155表达量对肺癌的诊断价值:当特异性为100%时,诊断的敏感性为65.1%,ROC曲线下面积0.848。结论检测胸水miRNA-21和miRNA-155的表达对诊断恶性胸水具有较高的特异性和敏感性。

纳米壳聚糖递送分子信标成像肺癌细胞的研究

目的采用纳米技术和分子信标(MB)技术,研究纳米壳聚糖(CS)作为miR-155 MB载体用于肺癌细胞成像的效果。方法设计并合成锁核酸修饰的miR-155 MB,采用自组装方法合成纳米壳聚糖分子信标复合物(CS-MB)并对其抗DNaseⅠ特性、粒径大小、zeta电位等理化性质进行检测。以CS作为载体转染miR-155 MB,激光共聚焦检测miR-155 MB对肺癌细胞中的miR-155的识别能力并进行成像,采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)进行进一步验证,以随机序列分子信标(RS MB)作为阴性对照。结果按照7:1的质量比合成的CS-MB,其包封率高,能抵抗DNaseⅠ的降解,粒径小,带正电荷,适合基因转染。CS转染miR-155 MB后可在肺癌细胞中看到较强的红色荧光,RS MB组未检测到荧光信号(P<0.05),且荧光信号强弱趋势与实时荧光定量PCR检测的miR-155表达趋势较一致。结论 CS可作为miR-155 MB载体检测肺癌细胞中miR-155的表达并进行肺癌细胞成像,为肺癌的诊断提供了新思路和新技术。

MiRNA-155在反复喘息儿童中的表达及与Th1/Th2细胞平衡的关系研究

目的分析反复喘息儿童miRNA-155的表达量,探讨miRNA-155与喘息及Th1/Th2细胞平衡的可能关系。方法选取2019年1月—2020年10月在玉环市人民医院住院的反复喘息40例儿童为观察组,同期在该院健康体检儿童40例为对照组。检测2组儿童外周血miRNA-155、IFN-γ及IL-4水平。结果观察组miRNA-155表达量为5.24(3.42,7.45),对照组miRNA-155表达量为6.52(4.51,12.88),观察组miRNA-155表达量显著低于对照组,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组IFN-γ/IL-4值为0.73±0.09,对照组IFN-γ/IL-4值为0.82±0.10,观察组IFN-γ/IL-4值显著低于对照组,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组miRNA-155表达量与喘息次数呈负相关关系(r=-0.557,P<0.05)。观察组miRNA-155表达量与IFN-γ/IL-4值无相关关系(r=0.223,P>0.05)。结论miRNA-155表达量可能与儿童喘息发生呈负相关关系,miRNA-155表达量下降可能会增加儿童喘息发生的风险;IFN-γ与IL-4比值下降可能会增加儿童喘息发生的风险,但未发现miRNA-155表达量与Th1/Th2细胞平衡存在明显相关性。