血管性认知功能障碍病人血清微RNA-335-5p、血清应答因子水平及其临床意义

目的 探究血管性认知功能障碍(VCI)病人血清微RNA(miR)-335-5p、血清应答因子(SRF)水平及临床意义。方法以石家庄市人民医院2019年1月至2020年12月因脑卒中治疗后6个月出现VCI的110例病人为研究对象(VCI组),其中非痴呆型血管性认知功能障碍(VCIND)者48例(VCIND组)、血管性痴呆(VD)者62例(VD组)。同时间段该院脑卒中未合并认知障碍者110例为对照组。分析各组病人发病时(入院次日)、发病后6个月、发病后1年血清miR-335-5p、SRF水平。logistic回归模型分析脑卒中病人发生VCI的影响因素。Pearson法分析血清miR-335-5p与SRF水平的相关性。受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-335-5p、SRF水平对VCI的预测价值。结果 VCI组发病时miR-335-5p水平0.76±0.15低于对照组1.06±0.07,而SRF水平1.52±0.24高于对照组1.01±0.09,差异有统计学意义(P<0.05)。发病时,对照组、VCIND组、VD组的miR-335-5p水平逐次降低(1.06±0.07比0.86±0.17比0.68±0.14),SRF水平依次增加(1.01±0.09比1.32±0.25比1.67±0.24),差异有统计学意义(P<0.05)。VD组、VCIND组受试者在发病后6个月及1年时SRF水平低于发病时,而miR-335-5p水平高于发病时(P<0.05)。三组蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分、miR-335-5p、SRF组间、时间、交互作用差异有统计学意义(P<0.05)。发病时,VCI组血清miR-335-5p与SRF水平存在负相关性(r=-0.64,P<0.001)。年龄、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、miR-335-5p、SRF是影响脑卒中病人VCI的危险因素(P<0.05)。ROC分析显示,血清miR-335-5p、SRF、miR-335-5p联合SRF预测脑卒中后VCI的曲线下面积为0.88[95%CI:(0.84,0.93)]、0.90[95%CI:(0.86,0.95)]、0.93[95%CI:(0.89,0.97)]。结论VCI病人血清miR-335-5p水平明显降低,而SRF水平升高,二者水平变化与VCI严重程度有关,是导致脑卒中后VCI的影响因素,且二者联合对脑卒中后VCI有较高预测效能。

微RNA-335对胃癌细胞系SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制

目的探讨微RNA(miR)-335对胃癌细胞系SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制。方法选择2020年1月至2021年7月新乡医学院第三附属医院收治的61例胃癌患者为研究对象,收集患者手术切除的胃癌组织、癌旁组织(距癌灶1~2 cm)及切缘正常组织,采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测人胃癌组织、癌旁组织和正常组织中miR-335的表达。另外,将对数生长期的胃癌细胞系SGC-7901细胞分为miR-335转染组、空白载体组和对照组,miR-335转染组SGC-7901细胞转染miR-335 precursor,空白载体组SGC-7901细胞转染miR-335-NC,对照组细胞不做任何传染。采用四甲基偶氮唑盐法检测3组SGC-7901细胞增殖能力,划痕实验检测3组SGC-7901细胞迁移能力,Transwell小室法检测3组SGC-7901细胞侵袭能力。采用荧光素酶报告基因技术检测miR-335的作用靶点,Western blot法检测3组SCG-7901细胞中p53蛋白的表达。结果miR-335转染组、空白载体组和对照组胃癌组织中miR-335相对表达量显著低于正常组织和胃癌癌旁组织(t=15.238、8.796,P<0.05),癌旁组织与正常组织中miR-335相对表达量比较差异无统计学意义(t=0.293,P>0.05)。miR-335转染组SGC-7901细胞的增殖能力显著低于空白载体组和对照组(t=8.192、9.209,P<0.05),空白载体组与对照组SGC-7901细胞的增殖能力比较差异无统计学意义(t=0.910,P>0.05)。miR-335转染组SGC-7901细胞迁移距离显著短于空白载体组和对照组(t=12.833、12.987,P<0.05),空白载体组与对照组SGC-7901细胞迁移距离比较差异无统计学意义(t=0.623,P>0.05)。miR-335转染组SGC-7901细胞侵袭数目显著少于空白载体组和对照组(t=12.750、14.553,P<0.05),空白载体组与对照组SGC-7901细胞侵袭数目比较差异无统计学意义(t=0.556,P>0.05)。含有p53-3′非翻译区预测基因质粒的miR-335转染组细胞的荧光素酶活性显著低于空白载体组和对照组(t=6.609、7.671,P<0.05),空白载体组与对照组细胞的荧光素酶活性比较差异无统计学意义(t=0.432,P>0.05)。miR-335转染组SGC-7901细胞中p53蛋白相对表达量显著低于空白载体组和对照组(t=7.652、9.227,P<0.05),空白载体组与对照组SGC-7901细胞中p53蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(t=1.004,P>0.05)。结论胃癌组织中miR-335呈低表达,miR-335可通过靶向p53抑制胃癌细胞的增殖和侵袭。

miR-335及ROCK1在骨肉瘤中表达及相互关系研究

目的探讨miR-335及rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(ROCK1)在骨肉瘤组织及细胞系中表达的情况及两者的相关性。方法临床选取18例骨肉瘤组织标本及配对正常骨骼肌组织标本;设定人正常成骨细胞为对照组,骨肉瘤细胞系MG-63和U2-OS为实验组,RT-PCR检测骨肉瘤组织与各组细胞中miR-335与ROCK1 mRNA的表达差异;miR-335 mimic转染MG-63和U2-OS两细胞系,检测miR-335过表达对ROCK1mRNA和蛋白表达的影响。结果 miR-335在骨肉瘤组织及细胞系中特异性低表达,而ROCK1则呈高表达,两者呈负相关;转染miR-335mimic后,miR-335mRNA过表达,ROCK1mRNA和蛋白表达在MG-63和U2-OS两细胞系中受到显著抑制。结论 miR-335与ROCK1表达在骨肉瘤组织学水平和细胞学水平均成负相关;过表达miR-335可降低ROCK1的表达。