高血压合并焦虑病人血清微RNA-451a、胰岛素样生长因子-1受体表达水平与焦虑程度的关系

目的探讨高血压合并焦虑病人血清微RNA-451a(miR-451a)、胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)表达水平与焦虑程度的关系。方法选取2020年2月至2022年1月在汉中市中心医院进行治疗的高血压病人160例,根据临床诊断和汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评估将病人分为高血压组60例、高血压合并轻度焦虑情绪组48例、高血压合并中度焦虑情绪组32例和高血压合并重度焦虑情绪组20例,收集整理所有病例的临床基础资料。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-451a表达水平、ELISA法检测血清IGF1R表达水平;比较分析高血压病人和高血压合并焦虑情绪病人的临床病理特征;采用Pearson法分析HAMA评分与血清miR-451a、IGF1R表达水平的相关性;采用logistic回归分析高血压合并焦虑的影响因素。结果高血压组、轻度焦虑、中度焦虑和重度焦虑组病人血清miR-451a水平依次降低(0.88±0.30,0.59±0.14,0.48±0.11,0.38±0.09),IGF1R水平依次升高[(2.14±0.60)μg/L,(2.66±0.62)μg/L,(3.08±0.66)μg/L,(3.51±0.74)μg/L];血清miR-451a水平与HAMA评分呈负相关(r=−0.50,P<0.05),血清IGF1R水平与HAMA评分呈正相关(r=0.43,P<0.05);高血压合并焦虑组收缩压[(142.26±18.51)mmHg,(135.29±17.84)mmHg]、舒张压[(84.25±11.30)mmHg,(78.23±10.25)mmHg]、C-反应蛋白[(4.47±0.96)mg/L,(4.16±0.91)mg/L]、IL-6水平[(36.95±6.31)μg/L,(27.48±5.49)μg/L]显著高于高血压组,IL-10水平[(12.34±3.26)ng/L,(16.24±3.91)ng/L]显著低于高血压组(P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,收缩压[OR 95%CI=1.33(1.06,1.67)]、舒张压[OR 95%CI=1.20(1.00,1.45)]、IL-6[OR 95%CI=1.89(1.22,2.93)]、IL-10[OR 95%CI=0.38(0.17,2.93)]、miR-451a[OR 95%CI=0.01(0.00,0.47)]、IGF1R[OR 95%CI=7.62(1.21,48.03)]水平为高血压合并焦虑的影响因素(P<0.05)。结论高血压合并焦虑病人血清中miR-451a低表达,IGF1R高表达,且与病人焦虑程度密切相关。

微小RNA-451抑制胶质瘤细胞侵袭能力的实验研究

目的研究微小RNA-451（miR-451）通过调控基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9的表达对LN229胶质瘤细胞株侵袭能力的影响。方法体内、外实验均设立3组，分别为空白对照组、无义序列组和miR451 mimics组。合成寡核苷酸miR451 mimics转染LN229胶质瘤细胞以上调miR451的表达，采用实时定量PCR检测转染后miR-451的表达，以Western blot方法检测各组MMP-2和MMP-9蛋白的表达，通过Transwell实验评估各组LN229胶质瘤细胞的侵袭能力。同时建立LN229细胞荷瘤裸鼠模型，绘制肿瘤生长曲线，并采用免疫组化方法检测各组肿瘤内MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果PCR检测结果提示，与空白对照组、无义序列组相比，miR451 mimics组miR451的表达明显升高（均P〈0．05）。Western blot结果显示，miR451 mimics组MMP-2的相对表达量（0．26±0．03）均低于空白对照组（0．67±0．07）和无义序列组（0．65±0．04）（均P〈0．05）；miR-451 mimics组MMP-9的相对表达量（0．25±0．02）亦低于空白对照组（0．71±0．04）和无义序列组（0．73±0．01）（均P〈0．05）。Transwell实验结果显示，miR-451 mimics组穿过Transwell小室的细胞数为（41．0±2．9）个，低于空白对照组[（79．0±2．7）个]和无义序列组[（73．0±3．4）个]（均P〈0．05）。体内实验结果表明，miR-451mimics组的肿瘤体积[（697．31±65．25）mm^3]明显小于空白对照组[（1753．69±76．52）mm^3]和无义序列组[（1532．64±65．31）mm^3]（均P〈0．05）；免疫组化结果表明，与空白对照组和无义序列组相比，miR451 mimics组肿瘤组织MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低（均P〈0．05）。结论miR-451通过调控MMP-2和MMP-9的表达抑制LN229胶质瘤细胞的侵袭性生长能力，可能为潜在的人脑胶质瘤基因治疗的候选靶点。

miRNA-451调控人脑胶质瘤细胞上皮-间质转化发生的机制研究

目的研究miRNA-451过表达后通过靶标钙结合蛋白39（CAB39）调控人脑胶质瘤细胞上皮-间质转化发生的机制，以及miRNA-451过表达对胶质瘤细胞侵袭和迁移能力的影响。方法培养U251胶质瘤细胞，将其分为空白对照组、无义序列组以及miRNA-451 mimics处理组（简称miRNA-451组）。采用实时定量PCR检测转染后U251细胞miRNA-451的表达；以Western blot法检测CAB39、E-钙黏素、N-钙黏素、波形蛋白、TWIST、人基质金属蛋白酶2（MMP-2）、人基质金属蛋白酶9（MMP-9）、Snail、蛋白激酶B（AKT）、磷酸化蛋白激酶B（P—AKT）的表达水平；通过细胞免疫荧光实验进一步验证N-钙黏素、波形蛋白的表达水平；采用划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化。结果与空白对照组及无义序列组相比，miRNA-451组的miRNA-451相对表达水平明显升高（均P〈0．05）。Western blot结果显示，与空白对照组及无义序列组相比，miRNA-451组CAB39、N-钙黏素、波形蛋白、TWIST、MMP-2、MMP-9、Snail、P-AKT的表达水平降低（均P〈0．05），而E-钙黏素的表达水平升高（均P〈0．05）。细胞免疫荧光实验结果显示，miRNA-451组的N-钙黏素、波形蛋白的表达水平相对于空白对照组明显降低（均P〈0．05）。划痕操作后24h、48h miRNA-451组的划痕修复率与空白对照组及无义序列组相比均明显降低（均P〈0．05）。转染48h后miRNA-451组穿过滤膜的细胞数目与空白对照组及无义序列组相比显著减少（均P〈0．05）。结论miRNA-451可能通过降低靶标CAB39的表达调控P13K／AKT通路，抑制人脑胶质瘤细胞中上皮-间质转化现象的发生，从而抑制人脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力。

胸腺肽α1联合顺铂和氟尿嘧啶新辅助化疗治疗食管癌疗效观察

目的探讨胸腺肽α1联合顺铂和氟尿嘧啶新辅助化疗对食管癌患者的临床效果。方法选择2017年9月至2019年12月新乡医学院第一附属医院收治的124例食管癌患者为研究对象,根据治疗方案将患者分为对照组和观察组,每组62例。所有患者术前给予顺铂和氟尿嘧啶进行新辅助化疗2个周期。观察组患者于新辅助化疗开始前3 d至新辅助化疗结束皮下注射胸腺肽α1。比较2组患者治疗前后细胞免疫功能、血清炎症因子水平、微RNA(miR)-451和miR-21相对表达量及外科手术治疗效果、3级和4级不良反应发生率。结果治疗前2组患者外周血中CD3+、CD4+、CD8+水平及CD4+/CD8+、CD16+/CD56+比值比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗24、45 d及术后7 d,2组患者外周血中CD3+、CD4+、CD8+水平及CD16+/CD56+比值显著低于治疗前(P<0.05),CD4+/CD8+比值显著高于治疗前(P<0.05)。治疗24、45 d及术后7 d,观察组患者外周血中CD3+、CD4+、CD8+水平及CD4+/CD8+、CD16+/CD56+比值显著高于对照组(P<0.05)。治疗前2组患者血清中白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、miR-451和miR-21水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组患者治疗后血清中IL-6、IL-8、TNF-α、miR-451和miR-21水平均显著低于治疗前(P<0.05)。治疗后观察组患者血清中IL-6、IL-8、TNF-α、miR-451和miR-21水平均显著低于对照组(P<0.05)。观察组患者手术切除率和完全性切除率均显著高于对照组(P<0.05)。2组患者均未发生3、4级肺炎、周围神经损害、肝功能损害及肾功能损害。观察组患者3、4级呕吐、粒细胞减少、血红蛋白减少、血小板减少、食管炎不良反应发生率均显著低于对照组(P<0.05)。结论胸腺肽α1联合顺铂和氟尿嘧啶新辅助化疗对食管癌患者的临床疗效较好。