微RNA-7在肿瘤中的生物学作用及其临床应用前景

微RNA-7(miR-7)是23个核苷酸长的非编码小分子RNA,其在多种肿瘤组织中的表达降低,与肿瘤生长、转移等密切相关。miR-7作为一个肿瘤抑制因子,可抑制表皮生长因子受体、胰岛素样生长因子1受体等基因的表达,从而抑制肿瘤的发生、发展。此外,miR-7还能提高肿瘤对化疗的敏感性,并抑制肿瘤血管生成。miR-7本身也受细胞内复杂机制的调控,其表达量变化及其对肿瘤的调控可为肿瘤的诊治提供新思路,具有良好的潜在临床应用前景。

微RNA-7在人结直肠癌组织中表达的临床意义及其与黏着斑激酶的相关性

目的探讨miRNA-7及黏着斑激酶（FAK）在结直肠癌中的表达及其临床意义。方法收集结直肠癌及其癌旁结直肠组织各60份，采用免疫组织化学法检测FAK表达，实时荧光定量PCR检测miRNA-7表达。统计学处理采用卡方检验，相关性采用Spearman相关性分析。结果FAK蛋白在结直肠癌中的表达阳性率为75．0％（45／60），在癌旁组织中的表达阳性率为26．7％（16／60），差异有统计学意义（χ^2=28．04，P〈0．01）。磷酸化FAK（p-FAK）蛋白在结直肠癌中的表达阳性率为65．0％（39／60），在癌旁组织中的表达阳性率为21．7％（13／60），差异有统计学意义（χ^2=22．94，P〈0．01）。miRNA-7在结直肠癌组织的表达较癌旁组织下调（P=0．044）。miRNA-7的表达与结直肠癌患者的淋巴结转移呈负相关（r=-2．290，P=一0．022），与结直肠癌患者的TNM分期呈显著负相关（r=-2．698，P=0．007）；但与患者的年龄、性别、肿瘤位置和肿瘤分化程度均无关；miRNA-7表达与FAK、p-FAK表达呈负相关（r=-0．303，P=0．019；r=-0．267，P=0．038）。结论miRNA-7可能通过调控FAK的表达参与结直肠癌的发生与发展，为结直肠癌的诊疗提供新的靶点。

微RNA-7和磷酸酶与张力蛋白同源物在干燥综合征中的关系

目的研究微RNA(miRNA-7)在pSS B细胞中的表达,分析其和磷酸酶与张力蛋白同源物(PETN)、疾病活动度的关系。方法收集2017—2019年青海省人民医院门诊及住院部收集到的20例初发pSS患者为病例组,20名体检健康志愿者作为对照组,收集病例组疾病活动相关实验室检查。运用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测2组B细胞中miRNA-7和PETN mRNA的表达量,分析病例组血浆及B细胞中miRNA-7表达量的一致性。蛋白质印迹法检测2组B细胞中PETN蛋白的表达,分析病例组B细胞中miRNA-7的表达与疾病活动度的相关性,线性回归分析miRNA-7和PETN mRNA之间的关系。结果和对照组miRNA-7(0.39±0.11)、PTEN mRNA(2.32±0.30)和蛋白(1.03±0.21)比较,病例组B细胞中的miRNA-7(0.53±0.17)表达增高,PTEN mRNA(0.88±0.24)和蛋白(0.51±0.12)表达均降低,差异均有统计学意义(t=2.990,P<0.05;t=16.98,P<0.05;t=8.41,P<0.05)。线性回归分析显示PTEN mRNA与miRNA-7呈负相关(b=-0.78,P<0.01),病例组miRNA-7的表达与ESSDAI、IgG、IgA和抗SSB抗体呈正相关,与C4和白细胞呈负相关。结论miRNA-7和疾病活动之间有一定的关系,在B细胞中miRNA-7可能通过PETN的调控参与pSS的发病机制,对疾病活动度评估具有一定价值。

CDR1as在喉鳞状细胞癌中的作用机制研究

目的:探讨小脑变性相关蛋白1反义转录物(CDR1as)在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的作用及其可能机制。方法:将Hep-2和AMC-HN-8细胞系按不同处理方法分组,CCK-8法检测各组细胞的增殖,Transwell实验观察细胞迁徙和侵袭能力,实时定量PCR法检测CDR1as、微RNA-7(miR-7)和细胞周期蛋白E1(CCNE1)、磷脂酰肌醇-3激酶催化亚基δ(PIK3CD)的表达。结果:PCR检测显示Hep-2和AMCHN-8细胞过表达和敲除CDR1as基因模型构建成功。过表达CDR1as的两种细胞系细胞增殖明显,迁徙和侵袭能力增强;敲除CDR1as的两种细胞系细胞凋亡增加,迁徙和侵袭能力下降。两种细胞系过表达CDR1as后miR-7表达下调、CCNE1和PIK3CD表达上调,而过表达miR-7可抵消上述作用。结论:CDR1as通过上调靶基因miR-7表达而促进LSCC的发生、发展和转移。

小胶质细胞在帕金森病伴抑郁模型中的研究进展

随着人口老龄化及环境因素的影响,帕金森病发病率呈逐渐上升趋势,已成为继阿尔茨海默病后的第二大神经系统退行性疾病,而与之伴随的非运动症状严重影响患者生活质量。本文综合分析了帕金森病伴抑郁的发病机制及最新研究进展,浅析小胶质细胞及炎症小体NLRP3介导的炎症反应在帕金森病抑郁模型中的重要作用,并关注到micRNA-7在帕金森病伴抑郁的炎症机制中的调控作用。希望可以更深入了解炎症机制在帕金森病中的作用,为解决帕金森病及伴随症状等难题提供帮助。

人类mir-7-3基因慢病毒表达载体的构建及其在胶质瘤中的表达

目的构建人类mir-7-3基因慢病毒表达载体，为进一步研究mir-7-3基因的功能及其在肿瘤治疗中的应用奠定基础。方法采用反转录-聚合酶链（RT—PCR）技术从含有mir-7-3基因的质粒pENTR-MIRNAVECTOR扩增目的基因mir-7-3，并将基因克隆到慢病毒载体表达质粒Lenti-GFP-RNAiVECTOR[含增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因]中，构建慢病毒载体表达质粒Lenti-GFP-mir-7—3，酶切、测序验证mir-7-3基因后，将Lenti-GFP-mir-7-3质粒和包装质粒pRsv—REV、pMDlg-pRRE、pMD2G共同转染人类胚胎肾上皮细胞系293T细胞，获得携带mir-7-3基因和EGFP基因的重组慢病毒FIV-CMV．EGFP-mir-7-3，取浓缩纯化后的病毒上清感染293T细胞和人类胶质瘤细胞U251，荧光显微镜观察293T细胞的荧光表达，RT—PCR鉴定U251细胞中mir-7-3基因的表达水平。结果Lenti-GFP-mir-7-3共转染包装细胞293T能产生高浓度的重组慢病毒FIV—CMV-EGFP-mir-7-3，荧光显微镜下能直接观察到EGFP，FIV—CMV-EGFP-mir-7-3中携有正确的mir-7-3基因，目的基因mir-7．3能被重组慢病毒高效地转导入U251。结论成功构建了携带mir-7-3基因的重组慢病毒载体；为进一步从分子水平探讨mir-7-3基因治疗胶质瘤奠定了基础。