ST段抬高型心肌梗死患者循环微RNA-92a表达的研究

目的了解微RNA-92a（miR-92a）在ST段抬高型心肌梗死（STEMI）发生发展中的表达，以及经皮冠状动脉介入治疗（PCI）对循环miR-92a表达的影响，探讨miR-92a在冠心病I临床应用中的可能性。方法82例STEMI患者及116例慢性稳定型心绞痛（SAP）患者按照是否接受PCI治疗分为STEMI行PCI治疗组（58例）、STEMI未行PCI治疗组（24例）及SAP未行PCI治疗组（116例）3组，分析比较其循环miR-92a表达的差异。结果STEMI未行PCI患者入院次日循环miR-92a表达水平高于SAP未行PCI者（0．2869±0．8167比-0．0555±0．9855，P-0．121）。PCI治疗24h后STEMI行PCI患者循环miR-92a表达水平低于STEMI未行PCI者（-0．0324±0．9563比0．2869±0．8167，P-0．156）。SAP未行PCI患者出院存活率显著高于STEMI未行PCI者（100．0％比75．0％，P-0．001），STEMI行PCI患者出院存活率高于STEMI未行PCI者（89．7％比75．0%P-0．088）。结论STEMI患者循环miR-92a表达增高；PCI治疗能降低STEMI患者循环miR-92a表达；miR-92a表达下调的STEMI患者出院时存活率高于表达上调的STEMI患者。miR-92a很可能具有用于诊断或评估STEMI危险度、提高急性心肌梗死高危患者筛选的敏感性与准确性以及进行干预治疗的临床实际应用价值。

微RNA-92a对高糖诱导的足细胞损伤的影响及其机制

目的探讨微RNA(miR)-92a对高糖诱导的足细胞损伤的影响及其机制。方法将体外培养的足细胞分为对照组(未处理)、高糖组(高糖处理)、高糖+miR-NC组(高糖环境下转染miR-92a阴性对照)和高糖+miR-92a组(高糖环境下转染miR-92a模拟物),采用RT-PCR检测各组细胞中miR-92a的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡,Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3活性,免疫印迹检测足细胞损伤标志蛋白Podocin、Nephrin、Desmin和上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、α-SMA、Smad7的表达情况。双荧光素酶报告基因实验检测miR-92a与Smad7的靶向关系。结果与对照组相比,高糖组、高糖+miR-NC组和高糖+miR-92a组细胞中miR-92a和Desmin、α-SMA蛋白的表达水平以及细胞凋亡率、Caspase-3活性均明显升高,而Podocin、Nephrin、E-cadherin和Smad7蛋白的的表达水平明显降低(P<0.05),且高糖+miR-92a组变化幅度明显大于高糖组(P<0.05),而高糖+miR-NC组和高糖组之间差异无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实Smad7是miR-92a的靶基因。结论miR-92a可通过促进足细胞凋亡和上皮间质转化加重高糖诱导的足细胞损伤,其作用机制可能与靶向调控Smad7表达有关。

加权基因共表达网络分析微RNA-92b-3p在食管鳞状细胞癌中的作用及机制

目的通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)对食管鳞状细胞癌(ESCC)发展相关基因进行筛选,并通过实验验证。方法以基因芯片平台(GPL)570、GPL571、GPL96/97或GPL14613为基础,从基因表达数据库(GEO)中下载ESCC基因表达谱数据集;将所得差异基因结合癌症基因组图谱(TCGA)的81例ESCC患者的基因表达谱数据和临床信息,通过WGCNA方法构建由mRNA和miRNA组成的共表达模块。实时荧光定量PCR检测ESCC癌组织和癌旁组织中miRNA表达,免疫组织化学法检测Kruppel样因子4(KLF4)和细胞桥粒胶蛋白2(DSC2)的表达;转染ESCC细胞系ECA-109 miRNA模拟物后,流式细胞术检测细胞周期,Transwell小室和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力,激光共聚焦显微镜和蛋白质印迹法检测KLF4和DSC2的表达,双荧光素酶报告基因系统验证靶基因。统计学分析采用t检验、秩和检验、卡方检验和Pearson相关分析。结果共筛选出4 023个差异蛋白编码基因(DEG)和328个差异表达微RNA(DEM);通过WGCNA共构建出11个基因模块。其中brown模块与肿瘤分级和T分期均呈负相关(r=-0.340、-0.268,P=0.002、0.016),has-mir-92b及其潜在靶基因KLF4和DSC2同时包含于brown模块。实时荧光定量PCR显示,ESCC组织中miRNA-92b-3p(has-miR-92b成熟体)表达水平高于癌旁组织[3.052(1.652, 5.371)比0.985(0.558, 2.032)],差异有统计学意义(Z=-4.021,P<0.01)。免疫组织化学显示KLF4和DSC2在ESCC组织中的阳性率分别为43.3%(13/30)和20.0%(6/30),分别低于对应癌旁组织的70.0%(21/30)和63.3%(19/30),差异均有统计学意义(χ^2=4.344、11.589,P均<0.05)。转染miRNA-92b-3p模拟物后,ECA-109细胞G0/G1期缩短[(63.71±2.83)%比(54.62±4.00)%],S期和G2/M期均延长[分别为(31.81±2.88)%比(41.20±2.87)%,(3.87±1.75)%比(8.10±1.71)%],差异均有统计学意义(t=3.215、4.000、2.998,P=0.032、0.016、0.040)。细胞侵袭和迁移能力显著增强[分别为79.67±27.54比280.33±46.18,(69.72±3.91)%比(84.90±5.25)%],差异均有统计学意义(t=6.465、4.019,P=0.003、0.016)。蛋白质印迹法检测结果显示,与转染对照模拟物组比较,转染miRNA-92b-3p模拟物组DSC2和KLF4表达水平均下降(分别为1.00±0.23比0.42±0.03,1.00±0.20比0.55±0.21),差异均有统计学意义(t=4.470、5.493,P=0.042、0.032)。双荧光素报告酶系统证实miRNA-92b-3p可以直接结合DSC2和KLF4。结论WGCNA是一种有效的系统生物学方法,通过此方法可识别出新的促癌基因miRNA-92b-3p。

miR-92a与其靶基因的研究进展

微RNA-92a(microRNA-92a, miR-92a)是在进化中高度保守的致病微RNA,属于微RNA-17-92基因簇成员,参与调控细胞增殖、凋亡及分化等生物学活动。最近研究发现,miR-92a表达紊乱与疾病发生相关,主要通过调控靶基因或靶蛋白发挥致病作用。目前与miR-92a相关的研究主要集中在恶性肿瘤领域,且已发现其高表达与癌细胞恶性及肿瘤对放化疗敏感性降低相关。miR-92a靶向靶基因或靶蛋白致病及其与放化疗的关系,是近年来的研究热点。基于此,该文将miR-92a靶向靶基因或靶蛋白致病及其对化学治疗影响的最新研究进行了综述,以期对临床疾病诊疗提供靶标。