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德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8脱硫基因启动子的克隆与鉴定 被引量:2
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作者 余志坚 李焕杰 +1 位作者 王海胜 李信 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期529-533,共5页
利用PCR方法,从专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8中克隆了脱硫基因启动子系列缩短的片段,连接至启动子探测型表达载体pPR9TT,电转原始菌R-8,并测定重组菌R-8-P中的报告基因LacZ表达量。结果表明脱硫基因核心启动... 利用PCR方法,从专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8中克隆了脱硫基因启动子系列缩短的片段,连接至启动子探测型表达载体pPR9TT,电转原始菌R-8,并测定重组菌R-8-P中的报告基因LacZ表达量。结果表明脱硫基因核心启动子区缩短至300 bp,并对启动子序列进行了预测。 展开更多
关键词 德氏假单胞菌 脱硫基因 启动子
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德氏假单胞R-8菌脱硫的“硫饥饿”诱导机理 被引量:3
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作者 余志坚 李焕杰 +3 位作者 王海胜 李玉光 闫艳春 李信 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期235-239,共5页
以专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8为出发菌株,构建了含有重组质粒pRT-D的重组菌株R-8-D.在不同硫酸盐浓度条件下,研究了R-8和R-8-D脱硫的"硫饥饿"诱导机理,结果表明,在充足的Na2SO4(>0.023mmolL-1... 以专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8为出发菌株,构建了含有重组质粒pRT-D的重组菌株R-8-D.在不同硫酸盐浓度条件下,研究了R-8和R-8-D脱硫的"硫饥饿"诱导机理,结果表明,在充足的Na2SO4(>0.023mmolL-1)条件下,R-8菌首先利用硫酸盐生长,脱硫酶的合成受阻遏,DBT不被利用,而R-8菌处于"硫饥饿"状态(Na2SO4浓度≤0.023mmolL-1)时,诱导了脱硫酶的合成,能利用DBT生长;Na2SO4在临界浓度以上时,R-8-D菌阻遏了脱硫基因的报告基因lacZ的表达,低于临界浓度时不抑制lacZ表达.本实验结果从细胞和分子水平上证实了R-8菌脱硫属"硫饥饿"诱导类型,并首次确定了脱硫微生物"硫饥饿"诱导的硫酸盐临界浓度为0.023mmolL-1,为构建高活性的、不受硫酸盐抑制的脱硫工程菌提供了理论依据和技术支持. 展开更多
关键词 德氏假单胞菌 硫酸盐 DBT “硫饥饿”诱导 pPR9TT 脱硫基因
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脱硫菌R-8的生长及其生物降解水中二苯并噻酚 被引量:10
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作者 罗明芳 姜成英 +4 位作者 邢建民 缑仲轩 李珊 刘会洲 陈家镛 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期278-282,共5页
以二苯并噻酚(DBT)为唯一硫源考察了pH、温度、碳源、氮源等对德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R(8生长的影响. 结果表明,该菌的最适生长pH范围为6-9,最适生长温度为30oC,甘油是细胞生长的最好碳源,最佳浓度范围为10-15 g/L,最佳... 以二苯并噻酚(DBT)为唯一硫源考察了pH、温度、碳源、氮源等对德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R(8生长的影响. 结果表明,该菌的最适生长pH范围为6-9,最适生长温度为30oC,甘油是细胞生长的最好碳源,最佳浓度范围为10-15 g/L,最佳无机氮源乙酸铵的浓度为 1.6 g/L. 有机氮源能促进细胞的生长,但对从DBT脱硫却产生抑制作用. 硫酸钠、二甲基亚砜、胱氨酸和蛋氨酸等硫化物都可以作为R-8生长的硫源,但对R-8脱硫活性的表达没有诱导作用. 展开更多
关键词 二苯并噻酚 生长 生物脱硫 德氏假单胞菌 石油
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脱硫工程菌的构建及其脱硫性能分析 被引量:3
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作者 李焕杰 余志坚 +2 位作者 熊小超 李玉光 李信 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2034-2040,共7页
以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,利用pPR9TT穿梭质粒构建脱硫操纵子表达载体,转化原始菌培养得到1株多拷贝脱硫基因的脱硫工程菌R-8-1,并对其脱硫性能进行了研究。结果表明,在同样的生物催化脱硫反... 以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,利用pPR9TT穿梭质粒构建脱硫操纵子表达载体,转化原始菌培养得到1株多拷贝脱硫基因的脱硫工程菌R-8-1,并对其脱硫性能进行了研究。结果表明,在同样的生物催化脱硫反应条件下,工程菌的脱硫活性达到6.25μmol DBT/g dry cell/h,是原始菌的2倍;柴油的脱硫试验表明,在12h内工程菌静息细胞能将柴油硫含量从310.8mg/L降至100.1mg/L,脱硫率达到68%,而原始菌为53%。进一步比较了重组质粒pPR-dsz在工程菌株中传代的稳定性,试验表明pPR-dsz在工程菌株R-8-1中具有良好的遗传稳定性。此研究为生物脱硫提供了1株优良的工程菌株,并为该技术的应用提供了参考。 展开更多
关键词 生物脱硫 德氏假单胞菌 工程 脱硫操纵子 二苯并噻吩
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组成型脱硫工程菌的构建及其脱硫性能分析
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作者 余志坚 陈传红 +1 位作者 李江 黄德娟 《安徽农业科学》 CAS 2012年第18期9862-9865,共4页
[目的]研究组成型脱硫工程菌的构建及其脱硫性能。[方法]以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,将该菌的脱硫质粒中的脱硫基因dszABC和组成型gap基因启动子克隆到表达载体pPR9TT中,获得的组成型重组质粒pR... [目的]研究组成型脱硫工程菌的构建及其脱硫性能。[方法]以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,将该菌的脱硫质粒中的脱硫基因dszABC和组成型gap基因启动子克隆到表达载体pPR9TT中,获得的组成型重组质粒pRT-C后电转化R-8-0菌,得到了组成型工程菌R-8-C,并对其脱硫性能进行了比较研究。[结果]R-8-C菌在含0.10 mmol/L Na2SO4的BSM培养基中仍然具有较高脱硫活性,在72 h内,是以二苯并噻吩(DBT)为唯一硫源时R-8脱硫活性的93%;而对照组(即原始菌R-8)几乎不能脱硫。以DBT为唯一硫源时,在不同生长时期内,R-8-C菌生长细胞的脱硫活性均高于R-8菌,且在24 h内,R-8-C菌的脱硫活性约为R-8菌的1.3倍。[结论]该研究为进一步了解脱硫基因调控机制及构建高活性脱硫工程菌奠定了基础。 展开更多
关键词 生物脱硫 德氏假单胞菌 组成型工程 二苯并噻吩
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π络合吸附剂吸附脱硫及其生物再生 被引量:1
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作者 李望良 邢建民 +2 位作者 熊小超 单国彬 刘会洲 《石油化工》 CAS CSCD 北大核心 2005年第z1期696-698,共3页
提出了一种吸附剂生物再生循环使用的新耦合方法.通过离子交换再用He保护自动还原的方法制备了π络合吸附剂Cu(Ⅰ)/Y,Cu(Ⅰ)/MCM-41,Cu(Ⅰ)/ZSM-5,以萘和二苯并噻吩(DBT)为模型化合物考察了吸附剂的吸附性能.
关键词 吸附脱硫 π络合吸附剂 生物再生 德氏假单胞菌R-8 脱附剂
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血红蛋白基因在脱硫菌R-8中的表达及其在柴油脱硫中的应用 被引量:4
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作者 李焕杰 余志坚 +3 位作者 熊小超 李玉光 王海胜 李信 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1026-1032,共7页
【目的】旨在构建一株优良的工程菌株,对血红蛋白基因在柴油的生物脱硫领域的应用做初步的探索。【方法】以德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8为出发菌株,通过基因工程的手段,构建透明颤菌(Vitreoscilla)血红蛋白基因表达质粒... 【目的】旨在构建一株优良的工程菌株,对血红蛋白基因在柴油的生物脱硫领域的应用做初步的探索。【方法】以德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8为出发菌株,通过基因工程的手段,构建透明颤菌(Vitreoscilla)血红蛋白基因表达质粒并电击导入原始菌株,得到重组菌P.delafieldiiR-8-2。【结果】R-8-2菌株的CO差光谱在419nm处有特征峰出现,表明血红蛋白在脱硫菌中得到了有效表达。R-8-2菌株和R-8菌株相比,生长得到改善,相同培养条件下菌体密度比R-8提高了20%,最大脱硫活性能够达到R-8的2.4倍。在实际柴油脱硫实验中,R-8-2菌株能将柴油的硫含量降至96.6mg/L,脱硫率达到69.9%,而R-8仅为57.2%。【结论】R-8-2是在较低溶氧条件下仍能保持较高的菌体密度和脱硫活性的基因工程菌株,具有良好的应用前景,该研究为血红蛋白基因在生物脱硫工业的应用提供参考。 展开更多
关键词 生物脱硫 透明颤血红蛋白基因 德氏假单胞菌R-8 工程
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硅藻土固定细胞-陶瓷膜微泡曝气-搅拌釜式反应器生物脱硫的研究
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作者 朱飞燕 魏雪团 +2 位作者 胡中波 罗明芳 刘会洲 《计算机与应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期483-486,共4页
Pseudomonas delafieldii R-8是一株高效的脱硫菌,是好氧菌。陶瓷膜微泡曝气能产生100μm左右的气泡,理论的利用率能达到100%,并且膜管在曝气的过程中有滤菌作用,可以节约能耗。搅拌釜式反应器在气液之间的混合效果好、相接触面积大以... Pseudomonas delafieldii R-8是一株高效的脱硫菌,是好氧菌。陶瓷膜微泡曝气能产生100μm左右的气泡,理论的利用率能达到100%,并且膜管在曝气的过程中有滤菌作用,可以节约能耗。搅拌釜式反应器在气液之间的混合效果好、相接触面积大以及传质效果好。本文首次使用陶瓷膜微泡曝气技术,研究了硅藻土固定化的R-8细胞在搅拌釜式反应器中的脱硫反应,得到最优的脱硫条件为:温度为30℃,搅拌转速为400 rpm以及通气量为0.04 MPa。等量的细菌量进行生物脱硫,陶瓷膜微泡曝气的初始脱硫速率以及24 h的总脱硫率分别为0.12 mmol/h和91%,而传统的鼓泡曝气的的初始脱硫速率以及24 h的总脱硫率分别为0.07 mmol/h和23%,使用陶瓷膜微泡曝气的初始比脱硫率以及24 h的总脱硫率要远远大于传统鼓泡曝气,因此,陶瓷膜微泡曝气具有明显的优越性。 展开更多
关键词 硅藻土 陶瓷膜曝气 搅拌釜式反应器 德氏假单胞菌R-8
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Cell-free supernatants of Bacillus inhibit the biofilms of Pseudomonas lundensis cultured with and without Acinetobacter johnsonii
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作者 WU Shiyuan LU Zhong +3 位作者 SHI Honghui ZHANG Jun LU Haixia ZHU Junli 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期3886-3900,共15页
[Objective] Pseudomonas as one of the dominant spoilage bacteria highly form biofilms in chilled meat products and processing environment when contaminating single or mixed with other species.This study aims to invest... [Objective] Pseudomonas as one of the dominant spoilage bacteria highly form biofilms in chilled meat products and processing environment when contaminating single or mixed with other species.This study aims to investigate the antibiofilm properties of the cell-free supernatants(CFSs) of three Bacillus species isolated from fermented food and rice seeds on Pseudomonas lundensis(PL) or and Acinetobacter johnsonii(AJ) as mono-or dual-species.[Methods] Biofilm biomass,extracellular polymeric substances(EPSs),and biofilm structure were measured by crystal violet staining,spectrophotometry,confocal laser scanning microscopy(CLSM),respectively,as well as transcription of biofilm-related genes determined by qPCR.[Results] The CFSs of Bacillus amyloliquefaciens ZG08,B.velezensis B5,and B.subtilis YB11 inhibited the biofilm formation of PL and AJ without affecting their growth.The treatment with 50% CFSs of ZG08 and B5 decreased the cell viability of two biofilms by 12.73%–21.04%,which was higher than that of YB11(0.15%–4.38%).The inhibition rates of 50% CFSs of the three strains were 59.75%–79.59% against the PL biofilm and 63.62%–78.57% against the biofilm of PL+AJ,in which the CFS of YB11 had weaker activity.The content of exopolysaccharides and exoprotein in the two biofilms treated with these CFSs were reduced by 53.77%–73.30% and 54.84%–62.38%,respectively.The treatment with the three CFSs also reduced the adhesive cells,loosened biofilm structures,and thinned their thickness by 57.63%–74.49% and 60.43%–64.64%,respectively.Moreover,the CFSs of ZG08 and B5 effectively eradicated by 41.77%–69.79% against the mature biofilms of PL and PL+AJ,compared to weak activity of YB11.In addition,the antibiofilm activities of the three CFSs were stable under four enzyme digestion and heating conditions.Compared with the control,the CFSs of ZG08 and B5 significantly down-regulated the expression of six biofilm-related genes,lapA,alg44,pelG,luxR,wspR,and rpoS.[Conclusion] The CFSs of ZG08 and B5 have strong antibiofilm activities against PL and AJ as mono-or dual-species. 展开更多
关键词 Bacillus spp. cell-free supernatant ANTIBIOFILM Pseudomonas lundensis Acinetobacter johnsonii biofilm of mixed species
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