栉孔扇贝神经节一氧化氮合酶的组织化学和免疫组化定位

采用组织化学和免疫组化技术对栉孔扇贝(Chlamysfarreri)神经节内的一氧化氮合酶(NOS)进行定位研究。组织化学显示,存在NOS的部位如下:脑神经节内纵行的神经纤维和表层的少量小细胞;足神经节表层的大量小细胞,中央大量水平分布的神经纤维;脏神经节中部大量水平分布的神经纤维,前叶内大量小细胞和神经纤维,后叶内少量小细胞和许多环行神经纤维,侧叶内大量似放射状分布的神经纤维;脑足和脑脏神经索内的神经纤维。免疫组化定位表明,神经型一氧化氮合酶(nNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在整个神经系统内均呈阴性;足神经节和脏神经节内有少量神经细胞呈内皮型一氧化氮合酶(eNOS)强阳性;各神经节和神经索内的部分小细胞和神经纤维呈eNOS弱阳性。栉孔扇贝进化上为较低等的贝类,NOS阳性神经细胞应主要分布于外周器官组织内,神经系统内大量的NOS可在其神经传导和免疫调节等方面发挥重要的作用。

豚鼠心脏表面神经节丛SP、CGRP及VIP的免疫组织化学研究

目的 研究SP、CGRP及VIP在心脏表面 3个主要神经节丛 ,右心房神经节丛 (RAGP)、心房背侧神经节丛 (DAGP)及主动脉与肺动脉间神经节丛 (A PGP)的化学性质和定位分布。方法 应用免疫组织化学ABC法 ,对豚鼠心脏表面 3个主要神经节丛的神经元及神经纤维进行了SP、CGRP及VIP免疫组织化学染色及光镜观察。结果 在上述三个神经节丛内 ,未发现SP及CGRP免疫反应阳性神经元 ,但可见少量SP免疫反应阳性神经纤维分布 ,CGRP免疫反应阳性神经纤维数量较SP阳性纤维密集 ,尤其在A PGP更为明显 ;VIP免疫反应阳性神经元和神经纤维分布最为密集 ,交织成神经节丛。结论 豚鼠心脏表面主要神经节丛内确实存在SP、CGRP及VIP ,并且这 3种神经肽可能直接参与心肌细胞和心脏血管活动的调控。

NGF,BDNF,NT-3和GDNF在背根节不同神经元的配布的免疫组织化学证据

为了探讨神经生长因子、脑源性神经生长因子 ,神经营养素 -3,胶原细胞源性神经生长因子在成年猫背根节神经元不同大小细胞的分布。取 L6背根节制成 2 0μm厚冰冻切片 ,用上述四种因子抗血清进行免疫组化反应。计数每一种因子阳性大、中、小型 (小于 42μm者为小型神经元 ;42～ 5 7μm者为中型神经元 ;大于 5 7μm者为大型神经元 )神经元的百分数。结果证明 ,此四种因子在背根节大、中、小神经元的阳性百分数分别为 :1.2± 0 .7,2 .1± 0 .9,3.3± 1.1;1.7± 0 .4,11.2± 1.2 ,30 .0± 1.5 ;2 6 .7± 2 .2 ,6 .2± 1.2 ,13.2± 2 .9;2 7.4± 3.3,8.1± 1.7,2 0 .1± 2 .4。表明 :在成年猫 L6背根节仅存在少数神经生长因子阳性细胞 ,而脑源性神经生长因子则主要配布于中、小神经元 ,神经营养素 -3和胶质细胞源性生长因子的免疫阳性细胞主要是大神经元 ,但也包括一些中小神经元。提示此四种因子在成年猫背根节的生理功能可能与神经元的不同大小有关。

大鼠、小鼠颌下腺副交感神经节神经肽的免疫组织化学观察

本实验采用免疫组织化学 ABC法对大鼠、小鼠颌下腺副交感神经节细胞的神经肽进行了定性观察。结果证明 :在颌下腺小叶间结缔组织中存在着副交感神经节 ,神经节内神经元胞体呈圆形、椭圆形或不规则形 ;还可看到有发自神经元胞体的细长或短的突起 ,与邻近神经元似有联系。神经元胞体呈 SP、VIP、NPY、SOM和 CGRP免疫反应阳性 ,细胞核为阴性反应。本实验结果提示 :大鼠、小鼠颌下腺副交感神经节细胞内的神经肽可能以神经递质或神经调质的方式 。

偏侧帕金森病大鼠基底神经节亚区GABA能神经元的免疫组织化学研究

为探讨基底神经节各亚区γ-氨基丁酸能神经元在帕金森病时的变化。本研究应用免疫组织化学和图象分析技术对 6-羟基多巴胺脑内注射制备的偏侧帕金森病大鼠模型基底神经节亚区 γ-氨基丁酸能神经元的变化进行了观察和计数。结果发现 ,与假手术对照组比较 ,6-羟基多巴胺损毁侧基底神经节亚区γ-氨基丁酸免疫反应阳性神经元的数量均明显减少 (P<0 .0 5 )。本研究结果提示 ,帕金森病时基底神经节直接回路和间接回路兴奋—抑制失衡 ,可能与 γ-氨基丁酸表达减少有关。

甘丙肽和经典神经递质在大鼠和家兔背根神经节细胞内共存的免疫组织化学研究

为研究背根神经节细胞内生物活性物质间的关系，用免疫组织化学ＡＢＣ法，证实大鼠和家兔背根神经节存在甘丙肽免疫阳性反应细胞。用相邻镜像邻片免疫双标记技术，观察到甘丙肽分别与５－ＨＴ和ＤＡ在家兔和大鼠背根神经节细胞内共存。此结果为进一步研究背根神经节细胞内生物活性物质间的关系提供了形态学资料。

支配肺的心内神经节一氧化氮能阳性神经元的研究—神经追踪与组织化学结合法

目的 :探索大鼠支配肺的心内神经节细胞是否含有递质一氧化氮。方法 :以荧光追踪剂 /一氧化氮合酶组织化学结合技术将快兰 (fastblue ,FB)注入大鼠肺内 ,在心内神经节区切片进行一氧化氮合酶组织化学染色反应。结果 :发现部分FB标记的心内神经节细胞含递质一氧化氮 (nitrogenmonoxide,NO)。 6只动物发现FB/NO双阳性神经细胞 1 2 8个 ,占NO阳性神经细胞的 3 5± 1 8% ,散在分布于心内神经节。细胞多为卵圆及梭形。以中、小型为主。讨论 :本实验证实支配肺的部分心内神经节细胞以NO为递质 ,实现对肺的调节。

心内神经元血管加压素的基因表达—原位杂交与免疫组织化学结合法研究

取中华蟾蜍心房后壁腔静脉窦部位组织作冰冻切片 (30 μm) ,以原位杂交和免疫组织化学双标法进行心内神经节细胞的血管加压素 m RNA (VP m RNA)及血管加压素免疫反应 (VP- IR)染色观察。结果在心内神经节发现了 3种标记细胞 :1VP- IR阳性神经元 ;2 VP m RNA阳性神经元 ;2 VP m RNA和 VP- IR双阳性神经元。VP m RNA和 VP- IR双标记神经元证明部分心内神经节的细胞元内既有血管加压素 (VP)的基因表达 ,又储存 VP。从而说明 VP系心内神经节的一种内源性神经递质。为心内神经节以

IAPP与SS在大鼠和家兔背根神经节细胞内分布与共存的免疫组织化学研究

应用免疫组织化学ABC法,观察到在大鼠和家兔背根神经节内存在胰岛淀粉样多肽免疫阳性反应细胞.用相邻镜像邻片免疫双标记技术,证实胰岛淀粉样多肽存在于背根神经节内那些生长抑素免疫反应阳性的细胞中,说明胰岛淀粉样多肽在大鼠和家兔背根神经节内与生长抑素共存.实验结果为胰岛淀粉样多肽的胰腺外研究提供了新的资料,为进一步研究背根神经节内生物活性物质间的关系及生理作用提供了形态学证据.

Nogo(N-18)在成年大鼠三叉神经节、背根节及腰段脊髓中分布的免疫组织化学研究

目的 观察Nogo在成年大鼠三叉神经节、背根节及腰段脊髓中的分布 ,探讨其存在的意义。 方法 采用抗Nogo(N 18)多克隆抗体免疫组织化学SP法。 结果 成年大鼠三叉神经节、背根节感觉神经元胞浆和胞核以及腰段脊髓灰质神经元胞核内出现Nogo免疫反应。 结论 Nogo免疫反应存在于大鼠三叉神经节、背根节感觉神经元胞浆和胞核以及腰段脊髓灰质神经元胞核内 ,应重新认识Nogo的功能。

大鼠Scarpa神经节中Trk受体的免疫组织化学研究(英文)

采用免疫组织化学的卵白素-生物素-HRP复合物(ABC)法,以二氨基联苯胺(DAB)为呈色剂,观察高亲和性的神经营养物质受体(酪氨酸激酶受体),即TrkA, TrkB和TrkC在大鼠Scapa神经节(前庭神经节,VG)中的分布。结果显示,许多VG神经元分别对3种Trk受体呈阳性反应,受体位于神经元胞体。每一种Trk受体的反应强度在不同神经元间有区别,有弱、中等和强反应之分。对同一种Trk受体而言,阳性神经元的大小不等;统计结果显示:TrkA, TrkB和TrkC阳性神经元平均面积分别为330.8±7.6, 303.89±10.6和355.05±8.3μm2。该研究结果为Trk受体在VG内发挥维持神经元存活、保持其形态特征等的作用提供了形态学支持。

BDNF和IL-1α免疫组织化学阳性细胞在商城肥鲵脊神经节中的表达(英文)

采用了组织学和免疫组织化学的方法对商城肥鲵的脊髓和脊神经节的石蜡切片进行了研究。结果显示,商城肥鲵的脊髓可分为灰质和白质;白质外有3层膜包围,由外向内依次是硬脊膜、蛛网膜和软脊膜。常规染色显示脊神经节位于脊神经后根,外包被膜,呈不规则的卵圆形,神经节内的细胞有两种,一种为节细胞,胞体圆形或者卵圆形,大小不等,根据胞体的大小又可分为大脊神经节细胞和小脊神经节细胞;另一种细胞叫做卫星细胞,包裹在脊神经节细胞的周围。BDNF和IL-1α一抗均显示脊神经节细胞呈阳性,卫星细胞呈阴性,前者大神经节细胞阳性明显强于小神经节细胞,后者两种神经节细胞的阳性强度无显著差异。

大鼠松果体的神经支配——免疫组织化学及光镜体视学研究

目的探讨大鼠松果体的神经支配及双侧颈上交感神经节摘除后对松果体细胞分泌活动的影响。方法免疫组织化学、光学体视框及图像分析方法。结果松果体内神经末梢、松果体细胞及其突起终末呈突触体素(P38)免疫组织化学阳性反应。摘除了双侧颈上交感神经节后,大鼠松果体所含神经末梢的平均数密度减少了43%(P<0.01),平均每个大鼠松果体内所含神经末梢总数减少了37%(P<0.05),松果体细胞及其突起终末内突触体素免疫阳性产物的平均A值明显降低(P<0.01)。结论支配松果体的神经纤维有很大部分来自双侧颈上交感神经节,这些神经纤维对松果体细胞的分泌功能产生明显影响。

BDNF,NT-3在猫背根神经元的自分泌和旁分泌作用初探——原位杂交和免疫组织化学研究

探讨脑源性神经营养因子 (BDNF)、神经营养因子 3 (NT- 3)在成年猫背根节 (DRG)神经元是否存在自分泌或旁分泌作用方式。用特异的 trk B、 trk C抗体及 BDNF、 NT- 3的 c RNA探针 ,以免疫组化及原位杂交双标法观察了成年猫 L6DRG神经元 BDNF m RNA与 trk B、 NT- 3 m RNA与 trk C的关系 ,以了解 BDNF、 NT- 3在成年猫 L6 DRG神经元有无自分泌或旁分泌作用。结果表明 ,在成年猫 L6 DRG BDNFm RNA阳性细胞主要是部分中、小神经元 (4 2～ 5 7μm,<42μm) ,而 trk B阳性细胞则主要是部分大神经元 (>5 7μm)。未见双标的 BDNF m RNA和 trk B阳性神经元 ,但见一些双标的卫星细胞。与BDNF者比较 ,大多数大神经元既表达 NT- 3 m RNA,又表达 trk C。这表明在成年猫 L6 DRG神经元 ,NT- 3可能存在自分泌方式。但本文的结果未证明 BDNF在成年猫 L6 DRG神经元存在自分泌。

先天性巨结肠病结肠内肽能神经支配紊乱:免疫组织化学观察

本实验应用免疫组织化学,对15例小儿先天性巨结肠病和4例其它肛肠病,观察结肠内血管活性肠肽(VIP)、P物质(SP)和亮氨酸脑啡肽(ENK)能神经的支配,及其在本病中的改变。发现:(1)正常对照结肠(NCS)、VIP和SP能神经的支配模式是相似的,本病正常有神经节细胞肠段(NGS)内者与之相似。VIP和SF免疫反应(IP)纤维遍布于肠壁内各层.固有膜内两种纤维有的围绕着肠腺,形成细网状结构。粘膜下层VIP-和SP-IR纤维存在于麦氏粘膜下丛(MSP),丛内有数个VIP-或SP-IR神经节细胞(GC).肌层富含两种纤维,环肌比纵肌层内者较为丰富.欧氏肠肌丛(AMP)内存在有VIP-或SP-IR-GC。

μ阿片受体在大鼠痛一级传入神经元中的免疫组织化学定位——荧光双标与电镜双标研究

μ阿片受体在大鼠痛一级传入神经元中的免疫组织化学定位——荧光双标与电镜双标研究李和李肇春王小丽张亦农杨世明（同济医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室，武汉４３００３０）以前的研究表明，阿片受体可存在于一级传入神经元中，在脊髓后角胶状质或三叉神经脊束...

μ阿片受体在大鼠痛一级传入神经元中的免疫组织化学定位

μ阿片受体在大鼠痛一级传入神经元中的免疫组织化学定位李和李肇春王小丽张亦农杨世明（同济医科大学组织学与胚胎学教研室）以前的研究表明，阿片受体可存在于一级传入神经元中，在脊髓后角胶状质或三叉神经脊束核尾侧亚核胶状质内有高密度表达，但其是否定位于传递痛信...

不同年龄大鼠心肌中CNTF表达的免疫组织化学研究

目的 :为了解睫状神经营养因子 ( CNTF)在大鼠生后心肌中的表达变化。方法 :用免疫组织化学法和计算机图像处理系统 ,研究 1天龄、1月龄、2月龄、3月龄、2年龄大鼠心肌中 CNTF免疫反应的变化。结果 :在各年龄组中均存在阳性免疫反应 ,阳性免疫反应见于心肌细胞膜上 ,各年龄组的平均灰度值分别为 2 5 .12± 0 .5 4、5 0 .12± 0 .6 7、5 7.2 5± 0 .6 2、43 .81± 0 .83、3 2 .14± 0 .73。结论 :睫状神经节因子在出生后的心肌细胞内即存在 。

螺旋神经节神经元原代培养及其免疫细胞化学鉴定

目的建立成体哺乳动物耳蜗螺旋神经节神经元（ｓｐｉｒａｌｇａｎｇｌｉｏｎｎｅｕｒｏｎ，ＳＧＮ）体外培养的细胞模型。方法对出生后７ｄ的Ｗｉｓｔａｒ大鼠的螺旋神经节细胞进行解离与分散培养。用荧光显微镜与倒置相差显微镜观察原代培养ＳＧＮ细胞的活力以及生长与分化过程。应用链霉卵白素过氧化物酶（ＳＰ）方法和抗神经丝蛋白单克隆抗体（ＮＦＰＭｃＡｂ）对ＳＧＮ进行免疫细胞化学染色鉴定。结果幼龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠的ＳＧＮ在体外条件下，可良好存活并有正常的表型分化，表现出稳定的神经元可塑性。其细胞数量与形态以及存活周期可满足体外实验的基本要求。结论此方法扩大了内耳组织培养的材料来源，有助于外周听觉系统离体研究的开展。

大鼠心内神经节雄激素受体和免疫因子白介素-6的共存

目的 研究雄激素受体 (AR)和免疫因子白介素 6 (IL 6 )的表达 ,证实它们在心内神经节共存的可能性。方法 采用免疫细胞化学双重标记技术。结果 切片上观察到 3种细胞 :①AR单标细胞 ,胞核呈棕褐色 ;②IL 6单标细胞 ,胞浆呈红色 ;③AR IL 6双标细胞 ,胞核棕褐色 ,胞浆为红色。双标细胞占全部阳性标记细胞的 5 0～ 6 0 %。结论 AR和IL 6可共存于同一大鼠心内神经节细胞 ,从而首次于细胞水平为神经免疫内分泌网络在心脏的存在提供了直接的形态学证据。