溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1在肿瘤中作用的研究进展

溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1作为磷脂胆碱代谢途径中的关键代谢酶,可通过脱酰基-再酰化来介导磷脂酰胆碱的合成,使细胞膜磷脂组成成分发生改变,导致细胞膜骨架发生重塑。溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1可通过加速肿瘤细胞膜磷脂成分的改变、或与表皮生长因子受体、细胞周期相关等肿瘤驱动基因相互作用影响肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,以及肿瘤细胞的耐药性,促进肿瘤的发展。

溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1在恶性肿瘤中的机制研究进展

溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1(lysophosphatidylcholine acyltransferase 1,LPCAT1)是LPCAT家族成员之一,作为磷脂代谢途径中的关键酶,其在乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌、肝癌、胃癌和食管癌等多种恶性肿瘤中呈异常表达,并与肿瘤恶性增殖、迁移和侵袭密切相关。LPCAT1已被多项研究证实其可以作为一种具有泛癌特性的恶性肿瘤潜在的早期诊断生物学标志物以及治疗靶点。该文就LPCAT1在恶性肿瘤中的作用机制相关研究进展作一综述。

骨骼肌心磷脂酰基转移酶1的运动强度变化特征及其对氧化应激和线粒体自噬的影响

目的:探讨骨骼肌心磷脂酰基转移酶1(acyl-CoA:lysocardiolipin acyltransferase-1,ALCAT1)表达变化的运动强度特征及不同强度运动对骨骼肌氧化应激和PINK1/Parkin介导的线粒体自噬的影响,为运动抑制ALCAT1重塑的强度筛选和耐力训练诱导线粒体自噬的发生机制提供实验依据。方法:雄性C57BL/6J野生型小鼠,随机分为安静对照组(C组)、60% VO2max运动强度组(SE组)、76% VO2max运动强度组(ME组)和85% VO2max运动强度组(HE组),每组8只。SE组以8 m/min、ME组以12 m/min、HE组以18 m/min进行跑台运动,坡度为0°,60 min/天,5天/周×4周。4周运动结束24 h后取材,分离腓肠肌,RT-qPCR检测骨骼肌ALCAT1 mRNA表达,Western blotting检测骨骼肌ALCAT1、MFN2、PINK1、Parkin、LC3、P62、SOD1和SOD2蛋白表达,酶活性试剂盒检测骨骼肌氧化应激指标,线粒体呼吸仪测定骨骼肌线粒体呼吸功能。结果:1)与C组比较,SE、ME和HE组小鼠骨骼肌ALCAT1 mRNA与蛋白表达和P62蛋白表达均显著降低,MDA含量、MFN2蛋白表达、LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、ST3和RCR值均显著升高;2)与C组比较,SE和ME组小鼠骨骼肌PINK1、Parkin、SOD1、SOD2的蛋白表达以及T-AOC含量、T-SOD活性均显著增加,HE组不具有显著性;3)与ME组比较,HE组小鼠骨骼肌ALCAT1 mRNA与蛋白表达和MDA含量均显著升高,PINK1、Parkin、SOD1、SOD2蛋白表达和T-AOC含量、T-SOD活性以及ST3、RCR值均显著降低。结论:1)骨骼肌ALCAT1表达变化呈现明显的运动强度特征,4周不同强度运动均可抑制骨骼肌ALCAT1表达,提高线粒体呼吸功能,其中76% VO2max运动强度效果更显著;2)60% VO2max和76% VO2max运动强度可以激活骨骼肌氧化-抗氧化系统,提高PINK1/Parkin介导的线粒体自噬,85% VO2max运动强度可显著增加骨骼肌氧化应激水平,但对骨骼肌抗氧化能力和PINK1/Parkin介导的线粒体自噬无显著影响。

甘蓝型油菜磷脂二酰甘油酰基转移酶(BnPDAT1)表达特性研究

为探究甘蓝型油菜中BnaPDAT1基因表达特性与油脂合成之间的关系。选用2个含油量具有显著差异的甘蓝型油菜双低品系855(49. 72%)和868(35. 06%),以qRT-PCR方法检测BnaPDAT1各拷贝在两品系油菜中的表达规律,同时以薄层层析(TLC)和气相色谱(GC)检测两品系油菜中TAG的积累规律。结果表明:授粉后种子中BnaPDAT1基因及其3个拷贝表达量均呈先升高后降低的趋势,花、叶片中均有BnaPDAT1表达,三拷贝表达存在差异,但表现整体调控的特点。两品系油菜叶(Bna A10. PDAT1除外)和授粉后20 d的种子中BnaPDAT1及其3个拷贝表达量具有极显著差异,其余各时期两品系间表达差异规律不明显,BnaPDAT1在高含油量品系855中授粉后20 d表达量为全生育期最高值(11. 100 9),是868的5. 07倍;叶中表达量8. 858 6,为868的7. 34倍,表达特性与Bna C09. PDAT1相似。两品系油菜种子TAG含量变化均呈S型,授粉20 d后油脂合成进入快速增长阶段,授粉后35 d进入缓慢增长期;授粉后30 d以前TAG含量品系间差异不大,授粉后35 d开始出现差异,授粉后40 d差异进一步扩大并趋于稳定。BnaPDAT1基因表达和种子TAG含量变化没有明显的直接关系,但高含油品系中BnaPDAT1基因表达值明显高于低含油品系。

急性髓系白血病患者骨髓溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1的表达分析

目的:探讨急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者骨髓中溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1(lysophosphatidylcholine acyltransferase 1,LPCAT1)的表达和临床意义。方法:应用实时定量PCR技术检测60例不同临床分型的AML患者和27例健康对照骨髓标本LPCAT1 mRNA的表达。结果:与对照组相比,AML患者LPCAT1 mRNA的表达水平显著降低(P<0.001)。60例AML患者中27例(45%)存在LPCAT1 mRNA低表达,而27例对照均未见LPCAT1 mRNA低表达改变,差异有统计学意义(χ^(2)=17.618,P<0.001)。LPCAT1 mRNA低表达与年龄、性别、白细胞计数、血小板计数、血红蛋白、FAB分型及核型危险分级等均无临床相关性(P>0.05)。LPCAT1 mRNA区分AML患者的受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.896(95%CI:0.825~0.967,P<0.001),LPCAT1 mRNA表达的截断值为0.173时,敏感性和特异性分别为88.3%和81.5%。结论:LPCAT1低表达是AML中的常见分子事件,或可用于AML辅助诊断。

溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1在宫颈癌中的表达及临床意义

目的探讨溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1(LPCAT1)在宫颈癌中的表达及其临床意义。方法选取2012年1月1日—2022年12月31日海南医学院第一附属医院妇科手术治疗宫颈癌患者163例作为观察组,另选取同期因患子宫平滑肌瘤施行全子宫切除术患者77例作为对照组。采用免疫组织化学法检测LPCAT1蛋白在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的表达水平,比较LPCAT1蛋白水平在不同宫颈癌患者临床病理特征中的差异,运用Kaplan-Meier法分析LPCAT1蛋白表达与宫颈癌患者术后预后的关系,Cox回归模型分析宫颈癌术后预后的影响因素。结果宫颈癌组织中LPCAT1蛋白高表达率显著高于正常宫颈组织(χ^(2)=18.509,P<0.001);FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、浸润深度>1/2肌层、淋巴结转移、中高分化宫颈癌患者LPCAT1蛋白高表达率高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、浸润深度≤1/2肌层、无淋巴结转移、低分化者(χ^(2)/P=5.501/0.019,20.463/<0.001,5.979/0.014,21.675/<0.001);LPCAT1蛋白高表达者总生存率显著低于低表达者(χ^(2)=4.791,P=0.029);FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤浸润深度>1/2肌层、淋巴结转移、中高分化和LPCAT1蛋白高表达均为宫颈癌患者术后预后的独立危险因素[HR(95%CI)=1.564(1.284~2.122),1.376(1.069~1.972),2.439(1.300~3.950),2.690(2.049~3.699),1.302(1.068~1.590)]。结论LPCAT1蛋白在宫颈癌组织中呈现高表达,且其高表达可提示宫颈癌患者术后预后不良。LPCAT1蛋白可能具有作为宫颈癌早期诊断和预后预测生物标志物的潜能。

溶血卵磷脂胆碱酰基转移酶1与肿瘤关系的研究进展

溶血卵磷脂胆碱酰基转移酶1(lysophosphatidylcholine acyltransferase 1,LPCAT1)是一种磷脂酰基代谢酶,可促进磷脂的合成及重构。近年来研究发现LPCAT1在多种肿瘤组织中表达升高,并与肿瘤的恶性程度、分期、分级呈正相关。LPCAT1在肿瘤组织中过表达与前列腺癌、乳腺癌的早期复发呈正相关,在结直肠癌细胞、肝癌细胞中过表达可促进细胞的增殖、迁移、侵袭,是恶性肿瘤早期诊断潜在的生物学标志物和肿瘤治疗的靶点。现对LPCAT1与肿瘤关系的研究进展进行综述。

心肺复苏后大鼠脑组织精脒/精胺-N1-乙酰基转移酶2与HIF-1α表达的动态变化规律

目的研究心肺复苏后大鼠脑组织中精脒/精胺-N1-乙酰基转移酶2(spermidine/spermine-N1-acetyltrans-ferase2,SSAT2)与缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α)表达的动态变化规律,分析二者相关性。方法 88只成年SD大鼠随机数字表法分为正常对照组(n=8)、假手术组(n=40)和心肺复苏组(n=40)。其中假手术组和心肺复苏组再分为1、8、24、48、72 h 5个亚组,每亚组8只。采用RT-PCR、Western blot法分别检测脑组织中HIF-1αmRNA和HIF-1α、SSAT2蛋白的表达。结果 SSAT2的表达在复苏后明显降低,1 h[(0.314±0.027),P<0.01]表达最低,随后逐渐升高(P<0.01),至72 h[(0.731±0.024),P>0.05]时回升到正常对照组水平(0.736±0.02),而假手术组SSAT2的表达与正常对照组相比无显著变化(P>0.05)。HIF-1αmRNA的表达在复苏后1 h[(0.245±0.021),P<0.05]时降低,但8 h[(0.430±0.019),P<0.05]时明显增强,后24 h[(0.387±0.018),P<0.05]、48 h[(0.385±0.019),P<0.05]下降,至72 h时回落到正常对照组水平(0.343±0.022);但HIF-1α蛋白在复苏后1 h[(0.755±0.012),P<0.01]显著增高,随后逐渐下降(P<0.01),至72 h[(0.033±0.002),P<0.01]时仅轻度增高,而在正常对照组和假手术组未能检测出HIF-1α表达。SSAT2表达与HIF-1α表达在复苏后72 h内呈负性相关(r=-0.945,P<0.01),SSAT2表达与HIF-1αmRNA表达在复苏后8～48 h呈负相关(r=-0.614,P=0.01)。结论在心肺复苏后一定时间内,大鼠脑组织SSAT2表达减弱,HIF-1αmRNA及蛋白表达增加,两者呈负相关表达,提示SSAT2对HIF-1α蛋白、HIF-1αmRNA可能起负性调节作用。

渥曼青霉素阻断罗格列酮对人巨噬细胞酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶-1表达的影响

目的:研究过氧化体增殖物激活型受体-γ(peroxisome proliferator activated receptors-γ,PPAR-γ)配体罗格列酮对巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(Acyl-CoA:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)表达的影响及可能机制。方法:在RPMI 1640培养基中培养人单核细胞株(THP-1),加入佛波酯培养48h,细胞贴壁呈巨噬细胞样分化。将细胞分为空白对照组、不同浓度罗格列酮组和罗格列酮+渥曼青霉素(wortmannin)组,运用实时定量PCR和Western blot,观察巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:罗格列酮可明显抑制ACAT-1 mRNA和蛋白的表达,且呈浓度依赖性;加入磷酯酰肌醇三磷酸激酶(phosphate dylinositol 3-kinase,PI3K)信号途径抑制剂渥曼青霉素后ACAT-1表达较罗格列酮组高,较空白对照组低。结论:PPAR-γ配体罗格列酮通过PI3K途径抑制ACAT-1表达发挥其抗动脉粥样硬化的作用。

溶血卵磷脂胆碱酰基转移酶1与非小细胞肺癌患者临床特征及预后的关系

目的分析溶血卵磷脂胆碱酰基转移酶1(LPCAT1)与非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床特征及预后的关系。方法收集95例NSCLC患者癌旁组织及肿瘤组织,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法对其癌旁组织及肿瘤组织中的LPCAT1 mRNA相对表达量进行比较,分析LPCAT1 mRNA相对表达量与NSCLC患者临床特征及预后的关系。结果NSCLC患者癌旁组织LPCAT1 mRNA相对表达量为(0.069±0.017),明显低于肿瘤组织的(0.621±0.124),差异有统计学意义(P﹤0.01)。TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移的NSCLC患者肿瘤组织中LPCAT1 mRNA相对表达量均明显高于TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移者(P﹤0.01);不同年龄、性别、病理类型、肿瘤直径、分化程度及是否吸烟NSCLC患者的肿瘤组织中LPCAT1 mRNA相对表达量比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。LPCAT1 mRNA相对表达量高水平组患者总生存率为37.50%,低于低水平组的68.09%,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论NSCLC患者肿瘤组织中LPCAT1 mRNA相对表达量高于癌旁组织,且NSCLC患者临床特征及预后与LPCAT1 mRNA相对表达量有关。

THR mRNA、ALCAT1在甲亢性心脏病中的协同诊断作用

目的探讨甲状腺激素受体(THR)mRNA、心磷脂酰基转移酶1(ALCAT1)在甲亢性心脏病中的临床意义。方法选取2020年2月—2022年3月张家口市妇幼保健院甲亢性心脏病患者69例(甲亢性心脏病组)、单纯甲状腺功能亢进患者69例(单纯甲亢组)、非甲亢性心脏病患者69例(非甲亢性心脏病组)和健康体检者69名(正常对照组)。收集所有研究对象的一般资料和实验室检测结果,并检测THRα1 mRNA、THRβ1 mRNA和ALCAT1。采用Logistic回归分析评估甲亢性心脏病发生的危险因素。采用相对超危险度比(RERI)、归因比(AP)和交互作用指数(SI)分析THR mRNA、ALCAT1在甲亢性心脏病发生中的交互作用。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价THR mRNA、ALCAT1诊断甲亢性心脏病的效能。结果甲亢性心脏病组THRβ1 mRNA相对表达量和ALCAT1水平高于单纯甲亢组(P<0.001),THRα1 mRNA、THRβ1 mRNA相对表达量和ALCAT1水平高于非甲亢性心脏病组、正常对照组(P<0.001)。单纯甲亢组THRα1 mRNA、THRβ1 mRNA相对表达量和ALCAT1水平高于非甲亢性心脏病组、正常对照组(P<0.05),非甲亢性心脏病组THRα1 mRNA、THRβ1 mRNA相对表达量和ALCAT1水平高于正常对照组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,校正甲状腺功能亢进病程、游离三碘甲状腺原氨酸(FT_(3))、游离甲状腺素(FT_(4))、促甲状腺激素(TSH)、总三碘甲状腺原氨酸(TT_(3))、总甲状腺素(TT_(4))后,THRβ1 mRNA相对表达量和ALCAT1水平升高是甲亢性心脏病发生的危险因素[比值比(OR)值分别为3.185、3.712,95%可信区间(CI)分别为1.524~6.658、1.967~7.006,P<0.001]。THRβ1 mRNA与ALCAT1对甲亢性心脏病的发生存在正向交互作用,二者均高表达时甲亢性心脏病风险是二者均低表达时的9.000倍;二者同时高表达时甲亢性心脏病风险是其他未知因子(其OR=1)的3.148倍(RERI=3.148);协同效应是二者单独存在产生效应之和的1.855倍(SI=1.855);在二者共存的甲亢性心脏病风险中,有34.98%(AP=34.98%)由二者交互作用引起。ROC曲线分析结果显示,THRβ1 mRNA、ALCAT1单项检测和联合检测诊断甲亢性心脏病的曲线下面积(AUC)分别为0.798、0.726、0.872。结论THRβ1 mRNA、ALCAT1是甲亢性心脏病的独立危险因素,且对甲亢性心脏病的发生具有协同促进作用,二者联合检测可提升对甲亢性心脏病的诊断效能。

血清NT-proBNP、ALCAT1与25(OH)D联合检测在老年甲亢性心脏病患者诊断中的应用价值

目的探究血清N端脑钠肽前体(NT-proBNP)、心磷脂酰基转移酶1(ALCAT1)、25羟基维生素D[25(OH)D]联合检测在老年甲亢性心脏病患者诊断中的应用价值。方法选择2017年12月-2020年12月三亚中心医院收治的79例甲亢性心脏病患者为观察组,同期收治的60例甲亢患者为对照B组,同期在该院体检健康者50例为对照A组,比较3组血清NT-proBNP、ALCAT1和25(OH)D水平及心功能指标[左心室舒张末期内径(LVDd)、左心室射血分数(LUEF)与二尖瓣舒张早期/晚期最大血流速度(E/A)],分析血清NT-proBNP、ALCAT1、25(OH)D水平与心功能指标及甲亢性心脏病的相关性,绘制ROC曲线,分析血清NT-proBNP、ALCAT1和25(OH)D水平对甲亢性心脏病的预测价值。结果对照A组、对照B组、观察组的NT-proBNP、ALCAT1与LVDd值依次显著升高(P<0.05),25(OH)D、LVEF值与E/A值依次显著下降(P<0.05)。相关性分析显示,血清NT-proBNP、ALCATI水平与甲亢性心脏病及LUDd值呈正相关(P<0.05),与LVEF值和E/A值呈负相关(P<0.05);血清25(OH)D水平与甲亢性心脏病及LVDd值呈负相关(P<0.05),与LVEF值和E/A值呈正相关(P<0.05)。绘制ROC曲线发现,血清ALCAT1、25(OH)D和NT-proBNP联合预测甲亢性心脏病的效能(AUC为0.926)明显优于各单独指标(AUC分别为0.786、0.804与0.826)(P<0.05)。结论血清NT-proBNP、ALCATI与25(OH)D联合检测对于老年患者甲亢性心脏病的诊断有较高的应用价值,有助于临床制定针对性措施进行防治,从而有助于控制患者病情。

心磷脂酰基转移酶1与糖尿病周围神经病变的相关性研究

目的探讨心磷脂酰基转移酶1(ALCAT1)与糖尿病周围神经病变(DPN)的关系。方法雄性大鼠60只,随机分为正常对照(NC)组,糖尿病4周(DW 4)组,糖尿病8周(DW 8)组,抗氧化(AO)组。测各组坐骨神经传导速度(sNCV),坐骨神经ALCAT1 mRNA和蛋白表达量,SOD、MDA、谷胱甘肽(GSH)水平,以及坐骨神经电镜图。结果 NC、DW 4、DW 8、AO组sNCV依次为(56.56±4.40)vs(53.43±4.25)vs(41.90±3.79)vs(53.38±3.26)m/s。DW 4、DW 8、AO组ALCAT1 mRNA表达量与NC组比较依次为(1.52±0.12)vs(2.86±0.30)vs(1.48±0.11)倍。NC、DW4、DW8、AO组ALCAT1蛋白相对表达量为(0.56±0.04)、(1.10±0.09)、(1.56±0.13)、(1.02±0.08)。NC、DW 4、DW 8、AO组SOD水平依次为(56.72±3.75)vs(33.93±3.87)vs(25.50±2.33)vs(35.89±4.25)U/ml;MDA水平依次为(1.58±0.23)vs(3.84±0.41)vs(4.94±0.78)vs(3.48±0.374)nmol/ml;GSH水平依次为(17.63±1.42)vs(9.69±1.52)vs(5.80±1.69)vs(11.19±1.34)mg/L。NC组神经元胞体、线粒体、髓鞘结构完整;DW 4组神经元肿胀、线粒体水肿、髓鞘板层开始散乱;DW 8组神经元肿胀明显、线粒体嵴断裂、髓鞘板层有囊性间隙出现;AO组神经元胞体胞体规则、线粒体肿胀、嵴较清晰、髓鞘与轴索间有轻微间隙出现。结论 T1DM大鼠8周即进展为DPN。ALCAT1可能与DPN的发生发展机制相关。OS水平可能影响ALCAT1的表达。

基于单细胞组学分析LCLAT1在喉鳞癌中的表达及其与预后的关系

目的 探讨心磷脂酰基转移酶1(LCLAT1)在喉鳞癌中的表达及其与预后的关系。方法 对3例喉鳞癌患者的肿瘤、癌旁及淋巴转移组织进行单细胞RNA测序。使用R软件对上述样本进行数据分析,观察LCLAT1在上皮细胞亚群中的表达情况。然后使用癌症基因组图谱(TCGA)中喉鳞癌的数据,分析了包含LCLAT1在内128个甘油磷脂合成途径相关基因的表达情况及对预后的影响,并使用Cytoscape软件评估了LCLAT1在喉鳞癌甘油磷脂合成途径中的重要作用。最后使用免疫组化实验检测LCLAT1在20例喉鳞癌标本中的表达情况。结果 识别出10个主要的细胞簇,其中上皮细胞包含11个亚群,标记为c0~c10。簇c1是处在高增殖状态的恶性细胞,并且高表达LCLAT1。LCLAT1作为甘油磷脂合成途径中的关键基因之一在肿瘤组织中高表达,并且是喉鳞癌的危险因素和独立预后指标。免疫组化验证LCLAT1在喉鳞癌肿瘤组织中表达量高于癌旁组织。结论 LCLAT1在喉鳞癌高增殖状态的恶性上皮细胞中高表达,可能作为甘油磷脂合成途径中的关键基因促进喉癌发展,影响喉癌预后。

糖尿病冠心病患者心肌细胞中磷脂酰基转移酶1水平的变化及影响因素分析

目的检测磷脂酰基转移酶1(ALCAT1)的mRNA及蛋白质水平在冠心病(CHD)合并T2DM患者心肌细胞中的变化,并探讨其影响因素。方法选取河南省人民医院行心脏手术的风湿性心脏病(RHD)、RHD合并T2DM(RHD+T2DM)、单纯CHD及CHD合并T2DM(CHD+T2DM)患者共131例。手术中取右心耳米粒大小组织,PCR检测ALCAT1的mRNA表达水平;Western blot检测AL—CAT1的蛋白表达水平。结果 (1)4组SBP、DBP、TC、LDL-C、HDL-C、TG、FPG、HbA在c、血肌酐(Scr)及心脏射血分数(EF)等指标比较,差异有统计学意义(P<0.05);(2)ALCAT1的mRNA水平在4组间比较,差异有统计学意义[(0.029±0.005)vs(0.041±0.004)vs(0.036±0.006)vs(0.053±0.004),P<0.05]。ALCAT1的蛋白表达呈相似趋势(P<0.05);(3)ALCAT1的mRNA水平与年龄、SBP、DBP、TC、LDL-C、TG、FPG、HbA在c、Scr水平呈正相关,与HDL—C及EF呈负相关(P<0.05)。结论 CHD患者心肌细胞中ALCAT1的mRNA及蛋白水平较RHD患者高,并发糖尿病的患者比不伴发糖尿病者高,间接提示了CHD及糖尿病会加重心肌细胞中心磷脂的病理重构,并引起线粒体的功能障碍。

敲减心磷脂酰基转移酶1对肝细胞脂肪变和氧化应激的影响及其机制

目的探讨心磷脂酰基转移酶1(ALCAT1)对脂肪肝细胞模型中肝细胞脂肪变和氧化应激的影响及其作用机制。方法以游离脂肪酸(FFA;亚油酸和棕榈酸混合物)诱导建立脂肪肝细胞模型,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测ALCAT1在脂肪肝细胞模型中的表达情况。构建空载小干扰RNA(siRNA)质粒和ALCAT1 siRNA质粒。以空载siRNA质粒转染人正常肝细胞(L-02细胞)24 h,然后与FFA共培养24 h,设立脂肪肝细胞模型组;以ALCAT1 siRNA质粒转染L-02细胞24 h,然后与FFA共培养24 h,设立ALCAT1干预组;以常规培养基培养的L-02细胞作为空白对照组。在透射电子显微镜下观察各组的脂滴沉积、线粒体形态,采用蛋白质印迹法测定自噬体标志物微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、酵母ATG6同源物(Beclin1)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路关键蛋白mTOR和磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)的表达水平,采用ELISA法测定氧化应激产物丙二醛、4-羟基壬烯醛(4-HNE)、活性氧和炎症因子IL-6、TNF-α的表达。采用独立样本t检验进行统计学分析。结果脂肪肝细胞模型中ALCAT1的mRNA和蛋白质的表达水平均高于阴性对照组(9.26±0.83比1.02±0.12、0.35±0.02比0.17±0.01),差异均有统计学意义(t=9.82、6.83,P均<0.05)。透射电子显微镜结果显示,脂肪肝细胞模型组和ALCAT1干预组的脂滴沉积量均高于空白对照组(17.67±3.52和7.67±0.33比4.33±0.33),ALCAT1干预组脂滴沉积量低于脂肪肝细胞模型组(7.67±0.33比17.67±3.52),差异均有统计学意义(t=3.76、7.07、2.82,P均<0.05);脂肪肝细胞模型组线粒体肿胀程度高于空白对照组,而ALCAT1干预组线粒体肿胀程度低于脂肪肝细胞模型组。蛋白质印迹法结果显示,脂肪肝细胞模型组的LC3-Ⅱ表达水平高于空白对照组(0.43±0.01比0.28±0.02),差异有统计学意义(t=7.32,P<0.05);脂肪肝细胞模型组的Beclin1表达水平与空白对照组比较(0.93±0.05比0.98±0.05),差异无统计学意义(P>0.05);ALCAT1组的LC3-Ⅱ、Beclin1表达水平均高于脂肪肝细胞模型组和空白对照组(0.95±0.04比0.42±0.01和0.28±0.02、2.07±0.06比0.93±0.05和0.98±0.05),差异均有统计学意义(t=13.30、15.63、14.05、13.02,P均<0.05)。脂肪肝细胞模型组和ALCAT1干预组的mTOR表达水平均低于空白对照组(1.44±0.02和0.74±0.01比1.93±0.10),ALCAT1干预组mTOR的表达水平低于脂肪肝细胞模型组(0.74±0.01比1.44±0.02),差异均有统计学意义(t=4.83、12.04、32.14,P均<0.05);脂肪肝细胞模型组和ALCAT1干预组的磷酸化AKT的表达水平均低于空白对照组(0.14±0.01和0.07±0.01比0.28±0.01),ALCAT1干预组磷酸化AKT的表达水平低于脂肪肝细胞模型组(0.07±0.01比0.14±0.01),差异均有统计学意义(t=8.59、14.10、5.96,P均<0.05)。ELISA检测结果显示,脂肪肝细胞模型组和ALCAT1干预组的活性氧、丙二醛、4-HNE、IL-6和TNF-α的表达水平均高于空白对照组[(11.44±0.30)和(5.84±0.36)g/L比(1.72±0.38)g/L、(19.94±2.47)和(11.95±1.55)μmol/L比(1.47±0.18)μmol/L、(5.00±0.43)和(2.99±0.37)ng/L比(1.46±0.23)ng/L、(203.40±5.16)和(92.07±11.98)ng/L比(23.32±3.33)ng/L、(123.70±8.38)和(67.42±4.88)ng/L比(47.18±4.57)ng/L],差异均有统计学意义(t=19.86、7.86、7.45、6.74、7.22、3.49、29.34、5.53、8.02、3.03,P均<0.05)。ALCAT1干预组的活性氧、4-HNE、IL-6和TNF-α的表达水均低于脂肪肝细胞模型组[(5.84±0.36)g/L比(11.44±0.30)g/L、(2.99±0.37)ng/L比(5.00±0.43)ng/L、(92.07±11.98)ng/L比(203.40±5.16)ng/L、(67.42±4.88)ng/L比(123.70±8.38)ng/L],差异均有统计学意义(t=11.99、3.51、8.54、5.81,P均<0.05);ALCAT1干预组丙二醛的表达水平与脂肪肝细胞模型组比较[(11.95±1.55)μmol/L比(19.94±2.47)μmol/L],差异无统计学意义(P>0.05)。结论ALCAT1在脂肪肝细胞模型肝细胞中表达上调,敲减ALCAT1可抑制mTOR通路相关蛋白的表达,激活自噬,减轻肝细胞脂肪变、氧化应激和炎症反应。

银杏叶提取物EGB761对阿尔茨海默病家兔模型ACAT1和LCAT mRNA表达的影响

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对阿尔茨海默(AD)病家兔模型胆固醇酰基转移酶(ACAT1)和卵磷脂-胆固醇酰基转移酶(LCAT)mRNA表达的影响。[方法]以2%高胆固醇饲料喂养雄性新西兰大白兔,建立AD家兔模型。模型建立后,用50 mg/(kg.d)EGB761灌胃3周作为EGB761组,以5 mg/(kg.d)辛伐他汀作为阳性药对照组。干预结束后,通过实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测海马卵磷脂-胆固醇酰基转移酶mRNA和胆固醇酰基转移酶1 mRNA的表达。[结果]银杏叶提取物EGB761可以下调ACAT1 mRNA的表达,不影响LCAT mRNA的表达。[结论]银杏叶提取物EGB761可下调AD家兔模型ACAT1 mRNA表达,对LCAT mRNA表达无调节作用。

LPCAT1在FAB-M2亚型成人急性髓系白血病患者中的预后意义

目的:研究溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1(LPCAT1)在急性髓系白血病(AML)中的预后价值。方法:使用基于Taq Man的逆转录-实时荧光定量聚合酶链反应检测214例初治成人AML患者和24例健康对照者LPCAT1的相对表达量。使用Kaplan-Meier方法进行生存分析,Cox比例风险回归模型用于确定预后因素。结果:LPCAT1在成人AML中的表达水平为34.37%(1.83%-392.63%),显著低于健康对照者的92.81%(2.60%-325.84%)(P<0.001)。本研究在具有完整临床信息和预后数据的171例非急性早幼粒细胞白血病患者中评估了LPCAT1的预后意义。生存分析结果表明,LPCAT1的表达水平对整个队列的预后没有显著影响。然而,在FAB-M2亚型(M2-AML)的AML患者中,低表达LPCAT1患者的2年无复发生存率为35.4%(95%CI:0.107-0.601),显著低于高表达LPCAT1患者的79.2%(95%CI:0.627-0.957)(P=0.012)。多因素分析结果表明,低表达LPCAT1是M2-AML患者无复发生存率的独立危险因素(HR=0.355,95%CI:0.126-0.966,P=0.049)。结论:LPCAT1在成人AML患者中低表达,LPCAT1低表达是M2-AML患者无复发生存率的独立危险因素。

紫苏PfPDAT1基因序列及表达特性分析

[目的]发掘脂肪酸代谢关键酶基因,了解其编码蛋白的理化性质,探究该基因在紫苏不同组织中及不同逆境胁迫下的表达特性,为紫苏分子育种提供基因元件。[方法]利用生物信息学技术对转录组测序数据库中获得的紫苏PfPDAT1基因序列进行了分析,并采用qRT-PCR技术研究了不同逆境胁迫下该基因的表达特性。[结果]PfPDAT1基因cDNA全长序列为2 097 bp,包含1 554 bp的开放阅读框,编码517个氨基酸残基,通过预测将PfPDAT1基因编码蛋白定位于细胞质;多序列比对分析显示,PfPDAT1基因编码蛋白与芝麻和油橄榄具有较高的同源性,序列相似性分别为89%和83%;实时荧光定量PCR分析结果表明,PfPDAT1基因在‘晋苏1号’不同组织中均有表达,且在种子中表达量最高;PfPDAT1基因在NaCl、PEG6000和低温胁迫诱导时,其相对表达量有显著差异,且均在胁迫6 h时表达量达到最高。[结论]PfPDAT1基因在紫苏生长发育及抵御逆境胁迫过程中起重要作用。

叶绿体G 3 PAT酶酰基选择性与植物低温敏感性关系的研究进展

叶绿体甘油-3-磷酸酰基转移酶(G 3 PAT)的酰基选择性与植物低温敏感性密切相关。一般来讲,冷敏感植物叶片中PG分子饱和度比抗冷植物中的高。叶绿体G3 PAT酶是决定PG分子种类并影响其分子中脂肪酸饱和度的关键酶,而G 3 PAT酶分子中的关键氨基酸影响了G 3 PAT酶的酰基选择性。