针刺治疗心肌缺血再灌注损伤介入时机的研究探析

当前对于心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的研究主要集中在电针预处理可以减轻再灌注损伤,但是急性心肌梗死往往发病急骤,不具备临床可预见性,除了重视预处理外,在发病中和发病后进行干预同样具备临床适用性。通过查阅针刺治疗心肌缺血再灌注损伤的文献,对不同的针刺介入时机进行探讨,将介入时机分为预处理和后处理,预处理对应前驱期即缺血前,后处理对应缺血后,分为再灌注前及再灌注后。旨在明确不同介入时机治疗心肌缺血再灌注损伤的有效性,为针刺治疗方案的选择提供依据。

铁死亡在心肌缺血-再灌注损伤中的作用及针刺干预研究进展

缺血性心脏病(ischemic heart disease,IHD)是以冠状动脉狭窄、心肌缺血缺氧为主要特征的慢性疾病。数据显示,2017年全球共有1.26亿人罹患IHD,有900万人死于IHD[1]。经皮冠状动脉介入等再灌注治疗是挽救缺血心肌、改善心脏功能的重要手段。但缺血一段时间再恢复血液灌注,会引起额外的心肌损伤,使得心脏功能障碍和结构损伤加重[2],即心肌缺血-再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)。MIRI可扩大心肌梗死范围,诱发心室重构,极大增加严重心律失常、猝死等不良事件发生风险。研究表明,铁死亡参与MIRI发生发展,抑制铁死亡可能是抗MIRI的有效策略[3]。而针刺具有保护心肌、改善MIRI效应,其机制与铁死亡相关[4]。因此,本文就铁死亡在MIRI中的作用及针刺干预相关研究进行综述,以期为深入研究针刺抗MIRI的机制研究提供新的思路。

醒神通督针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬的作用研究

目的从自噬探讨醒神通督针刺抗脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组(简称模型组)和脑缺血再灌注+醒神通督针刺组(简称针刺组)。采用大脑中动脉线栓法构建脑缺血再灌注损伤模型,针刺组大鼠造模前5 d开始干预,取穴“百会”“四神聪”“足三里”,每日针刺1次,直至再灌注24 h。另外2组大鼠只抓取不针刺。再灌注24 h后采用氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色观察脑梗死面积,透射电镜观察神经元及自噬的亚显微结构,Western blot、免疫荧光检测缺血皮层微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein light chain 3B,LC3)、肌球蛋白样BCL2结合蛋白(coiled coil moesin like BCL2 interacting protein,Beclin-1)、自噬相关蛋白(autophagy related protein,Atg)12、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)与磷酸化Akt(phosphorylated Akt,p-Akt)的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠大脑中动脉供血区梗死面积明显增加(P<0.05),且缺血皮层神经元结构严重破坏,自噬明显激活,自噬蛋白Beclin-1、Atg12表达及LC3Ⅱ/I比值显著升高(P<0.05),p-Akt表达下降(P<0.05)。与模型组比较,针刺组大鼠脑梗死面积减少(P<0.05),透射电镜显示神经元结构较为正常,自噬体较少。此外,针刺组自噬蛋白Beclin-1、Atg12表达及LC3Ⅱ/I比值明显降低(P<0.05),p-Akt表达显著上调(P<0.05)。结论针刺具有抗脑缺血再灌注损伤作用,可能通过抑制自噬的活化实现。

基于PI3K/AKT信号通路探讨针刺对脑缺血再灌注损伤模型大鼠线粒体自噬的机制研究

目的 观察针刺疗法对脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型大鼠脑组织线粒体自噬的影响,并探究其对脑组织保护作用的机制。方法 40只SD大鼠根据随机数字表法分为假手术组、CIRI组、非穴位针刺组、针刺穴位组,每组6只。通过改良线栓法建立CIRI模型大鼠,针刺穴位组针刺“大椎”“人中”“百会”三穴,非穴位针刺组针刺穴位左侧旁开0.3 cm处,假手术组和CIRI组不行针刺。针刺疗法72 h后,通过Zea Longa法评价大鼠神经功能,分离大鼠脑组织,通过TTC法检测脑组织梗死体积,JC-1法检测脑组织线粒体膜电位。通过Western blot检测自噬相关蛋白及PI3K-AKT信号通路相关蛋白表达。结果 与假手术组比较,CIRI组大鼠神经功能损伤评分明显升高[(3.50±0.96)分比(0.00±0.00)分,P<0.05],CIRI组大鼠脑组织线粒体自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、Bcl2腺病素EIB19KD相互作用蛋白(BNIP3)水平[(4.48±0.75)比(1.00±0.14),(4.77±0.44)比(1.00±0.09),P<0.05]显著升高,p62水平[(0.98±0.14)比(5.01±0.17),P<0.05]降低,自噬增强,线粒体膜电位降低[红/绿荧光比(1.08±0.10)比(4.99±0.13),P<0.05],同时PI3K-AKT信号通路相关蛋白磷酸化水平显著降低[p-PI3K:(1.04±0.08)比(5.09±0.07),p-AKT:(0.99±0.15)比(4.43±0.14),p-mTOR:(0.84±0.08)比(5.00±0.16),P<0.05];与非穴位针刺组比较,针刺穴位组CIRI模型大鼠脑组织损伤减轻,表现为大鼠神经功能损伤评分[(2.17±0.90)分比(3.17±0.69)分,P<0.05]、脑梗死体积百分比[(31.25±1.97)%比(39.23±1.89)%,P<0.05]以及脑半球肿胀百分比[(3.42±0.32)%比(4.98±0.37)%,P<0.05]显著降低(P<0.05),线粒体膜电位升高[红/绿荧光比(3.24±0.13)比(1.25±0.06),P<0.05],自噬水平降低,同时PI3K-AKT信号通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT和p-mTOR水平显著升高[p-PI3K:(3.07±0.14)比(1.18±0.12),p-AKT:(3.50±0.15)比(1.42±0.13),p-mTOR(2.65±0.16)比(1.01±0.11),P<0.05]。结论 针刺疗法可能通过激活PI3K/AKT信号通路抑制线粒体自噬,从而实现对CIRI模型大鼠的脑保护作用。

基于PI3K/Akt信号通路探讨针刺在心肌缺血/再灌注中的研究进展

近年来针灸治疗心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)的疗效得到广泛肯定。磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路参与细胞生长、代谢、增殖与分化等过程,与MIRI的发生发展密切相关。大量研究表明,针刺通过调控PI3K/Akt通路,从减轻炎症反应、抑制细胞凋亡等多方面保护受损心肌组织。本研究深入探讨PI3K/Akt信号通路对MIRI的保护机制及针刺的调控作用,为临床治疗心血管疾病提供实验依据。

针刺调控自噬蛋白Beclin-1对脑缺血再灌注损伤大鼠海马区Caspase-9的影响

目的 探讨针刺调控细胞自噬对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠海马区细胞凋亡的影响及机制。方法 110只SD大鼠随机分为正常组22只、假手术组22只和造模组66只,造模组使用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型,成功后随机均分为模型组、针刺组、药物组,每组各22只。针刺组捆绑并针刺“大椎”“百会”“人中”,药物组注射依达拉奉。Garcia神经功能评分评定大鼠神经功能,TTC染色观察脑梗死情况,透射电镜观察海马区自噬小体,TUNEL检测患侧脑组织细胞凋亡率,免疫组化检测海马区半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3蛋白表达,Western blot检测海马区苄氯素-1 (Beclin-1)、Caspase-9表达。结果 干预前后与正常组比较,假手术组各项指标差异均无统计学意义(P>0.05)。干预前,与假手术组比较,造模组神经功能评分下降(P<0.01)。针刺72 h后,与假手术组比较,模型组神经功能评分下降(P<0.01)、脑梗死面积比上升(P<0.01)、缺血侧脑组织细胞凋亡率、海马区Caspase-9、Caspase-3表达量增加(P<0.01)、Beclin-1表达量下降(P<0.05);与模型组比较,药物组、针刺组神经功能评分显著上升(P<0.01)、梗死面积比缩小(P<0.01)、患侧脑组织细胞凋亡率及海马区Caspase-9、Caspase-3下降(P<0.01)、Beclin-1表达量上升(P<0.05)。透射电镜下模型组细胞器肿胀,大多数线粒体变大,见少量溶酶体;针刺组、药物组神经细胞轻度水肿,线粒体轻度肿胀,可见初级溶酶体、自噬小体、自噬溶酶体存在。结论 针刺可调控大鼠自噬关键蛋白抑制CIRI后细胞凋亡,其机制可能与调整自噬影响Caspase-9表达相关。

针刺内关和足三里双穴位对大鼠心肌缺血再灌注损伤后的血管重塑作用

目的研究针刺内关和足三里对心肌缺血再灌注损伤后的血管重塑作用。方法将SPF级雄性SD大鼠分为空白组(10只)、MIRI组(10只)、内关组(10只)、足三里组(10只)以及内关+足三里组(10只)。对大鼠进行心肌缺血再灌注(MIRI)处理从而构建MIRI动物模型。穴取双侧内关、足三里以及内关+足三里,疏密波,频率2 Hz。关胸后第2天进行电针治疗,每日1次,共14 d。超声心动图(ECG)检查各组大鼠左心室射血分数(LVEF)及左心室内径缩短率(LVFS)。TTC染色检测各组大鼠心肌梗死面积。免疫荧光法(IF)检测各组大鼠心肌组织中α-SMA和CD31蛋白共表达情况。蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测各组大鼠心肌组织中VEGFA、α-SMA,CD31和p-eNOS蛋白表达水平变化。结果与空白组比较,MIRI模型组大鼠LVEF和LVFS参数显著降低(P<0.0001)。针刺内关或足三里穴位的大鼠LVEF和LVFS参数较未进行针刺的MIRI大鼠显著升高(P<0.0001)。针刺内关和足三里双穴位的大鼠LVEF和LVFS参数相比MIRI模型组(P<0.0001)以及针刺单穴位组(P<0.01)均有显著升高。MIRI组的梗死面积显著高于空白组(P<0.0001)。单独针刺内关穴(P<0.001)和足三里穴(P<0.01)能显著缩小梗死面积,而针刺内关穴和足三里双穴位相比针刺单个穴位能更有效缩小梗死面积(P<0.05,P<0.001)。与空白组比较,MIRI组大鼠心肌组织中α-SMA和CD31表达阳性显著减弱。相较MIRI组,单独针刺内关或足三里穴位组的大鼠心肌组织中α-SMA和CD31表达阳性增强,而针刺内关和足三里双穴位组的表达阳性强于MIRI对照组以及针刺单穴位组。MIRI组的α-SMA、CD31、VEGFA和p-eNOS蛋白表达水平相对空白组显著降低(P<0.0001)。单独针刺内关或足三里穴位组的大鼠心肌组织中VEGFA(P<0.001,P<0.0001)、α-SMA(P<0.0001)、CD31(P<0.0001)和p-eNOS(P<0.0001)表达增强,而针刺内关和足三里双穴位组表达升高更为显著(P<0.0001)。结论针刺内关和足三里双穴位对心肌缺血再灌注损伤后心血管重塑效果更佳。

针刺干预脑缺血再灌注损伤的氧化应激机制

缺血性脑卒中是一种发病率、致残率及复发率很高的神经系统疾病,是患者、家属和临床工作者面临的共同难题。脑卒中发生后病理进程复杂,其中氧化应激在脑卒中后关键病理环节脑缺血再灌注损伤中通过对大脑中蛋白质、DNA和RNA等造成氧化损伤,对疾病预后极其不利。近期研究证明针刺可以显著抑制脑卒中后缺血级联反应中的氧化应激,本研究深入探讨了针刺干预脑缺血再灌注后氧化应激的机制,为针刺作为一种多通路抑制氧化应激而改善脑卒中患者预后提供理论依据,推进针刺在临床中的合理应用。

针刺治疗脑缺血再灌注损伤机制的研究进展

脑缺血再灌注损伤(CIRI)是急性期脑梗死患者恢复血液灌注后的重要病理环节,涉及多种病理过程,如内质网应激、细胞凋亡、炎症反应、细胞焦亡及铁死亡等。针刺治疗CIRI疗效较好,可通过多种途径发挥脑保护作用。本文综述了针刺发挥脑保护作用在分子及基因层面的相关研究文献,发现针刺发挥脑保护作用具有多水平、多通路、多靶点的特点,可通过干预内质网应激、抑制细胞凋亡、减少细胞炎性反应、调控细胞焦亡、抑制铁死亡、适度激活细胞自噬、促进血管新生、改善学习记忆等方面发挥治疗作用。

血府逐瘀汤联合穴位针刺治疗对急性心肌梗死患者缺血再灌注损伤及血清炎症因子水平的影响

目的 探讨血府逐瘀汤联合穴位针刺治疗对急性心肌梗死(AMI)患者缺血再灌注损伤、血清炎症因子水平的影响。方法 将90例AMI患者随机分为联合组与对照组,各45例。在常规对症治疗的基础上,给予对照组穴位针刺治疗,给予联合组血府逐瘀汤联合穴位针刺治疗。比较两组患者的临床总有效率,以及治疗前后中医证候评分、心肌损伤指标水平、血清炎症因子水平及24 h动态心电图相关指标的变化情况,并统计两组患者治疗期间不良反应的发生情况。结果 联合组临床总有效率为91.11%,高于对照组的73.33%(P<0.05)。治疗后,两组患者的胸痛、胸闷、气短、心悸、疲倦乏力评分及中医证候总评分,血清心肌肌钙蛋白Ⅰ、肌酸激酶同工酶、氨基末端B型利钠肽原、白细胞介素6、高敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子α水平,以及24 h内缺血发作次数、ST段下降幅度、ST段下降时间较治疗前降低或减少,且联合组上述指标低于或少于对照组(P<0.05)。治疗期间,两组患者不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 在常规对症治疗的基础上,采用血府逐瘀汤联合穴位针刺治疗可以提高AMI患者的临床疗效,改善胸痛、胸闷、气短、心悸、疲倦乏力等临床症状,降低患者心肌损伤指标水平及血清炎症因子水平,改善24 h动态心电图相关指标,对缺血再灌注损伤具有保护作用,安全性较高,值得临床应用推广。

基于NLRP3介导细胞焦亡探讨针刺治疗心肌缺血再灌注损伤作用

近年来发现,NLRP3炎症小体引发的焦亡与心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)的发生发展密切相关。MIRI多为本虚标实之证。气阴两虚和阳虚是致病之本,瘀血、痰饮、热毒是致病之标。针刺内关可治疗心系疾病,NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)在细胞焦亡过程中发挥重要作用,特别是对于心肌缺血再灌注损伤疾病的治疗,得到了越来越多的关注。本研究旨在研究NLRP3介导细胞焦亡的机制对对心肌缺血再灌注作用,并探索针灸对NLRP3介导的细胞焦亡中的影响。本研究将为深入认识肌缺血再灌注损伤的病理生理过程。对NLRP3介导细胞焦亡探讨针刺治疗心肌缺血再灌注损伤作用及现状进行归纳,以期为临床针刺治疗心肌缺血提供科学依据。

针刺调控脑缺血再灌注损伤大鼠海马区环状RNA_009775表达的研究

目的研究针刺对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠海马区环状RNA_009775表达的影响,探索针刺对CIRI可能的作用机制。方法将39只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组,每组13只。除假手术组外,其余两组均采用线栓法制备CIRI模型。造模后,针刺组大鼠捆绑固定行针刺干预,间隔12 h进行1次,共7次;假手术组与模型组大鼠仅捆绑不针刺。Garcia评分法、TTC染色法评估针刺疗效;基因芯片技术筛选针刺组/模型组、模型组/假手术组核心共同差异表达circRNA;qRT-PCR法对芯片筛选结果进行验证;TargetScan软件预测核心circRNA的下游mi RNA及mRNA,构建核心circRNA的调控网络,并对m RNA进行基因本体功能富集分析;Western blot法验证神经元核抗原抗体(neuron specific nuclear protein,NEUN)表达量。结果干预后,与假手术组相比,模型组大鼠Garcia评分、NEUN和circRNA_009775表达量显著降低(P<0.01),脑梗死面积比显著升高(P<0.01);与模型组相比,针刺组脑梗死面积比显著降低(P<0.01),Garcia评分、NEUN和circRNA_009775表达量显著升高(P<0.05或P<0.01)。芯片筛选核心共同差异表达circRNA,经qRT-PCR验证circRNA_009775表达趋势与芯片结果一致,结合靶关系预测,构建了含有1个circRNA、12个miRNA、31个mRNA的调控网络。基因本体功能富集分析显示mRNA主要涉及神经系统发育、神经元生成等生物过程。结论针刺具有改善CIRI大鼠神经功能缺损、降低脑梗死面积、部分减轻海马区神经元损伤的作用,其机制可能与调控circRNA_009775介导的潜在调控网络、促进神经系统发育、神经元生成等生物过程有关。

针灸防治心肌缺血-再灌注损伤的研究进展

心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)是指缺血的心肌恢复血流供应后造成组织损伤加重的现象,是心脏疾病临床干预后常见的并发症。在应用现代医学进行治疗的同时,传统医学在治疗MIRI中发挥的作用也日益得到关注。其中,针灸疗法作为中国传统医学的重要组成部分,结合合适的针灸方式和穴位配伍,可有效防治MIRI。本文就针灸防治MIRI的研究进展作一综述,以期为相关研究提供参考。

针刺对脑缺血再灌注损伤模型大鼠海马细胞凋亡的影响

目的:探讨针刺对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠海马区细胞凋亡的影响及机制。方法:SD大鼠共75只,随机分为假手术组(sham)、脑缺血再灌注损伤模型组(CIRI)和针刺治疗组(CIRI+AC),利用大脑中动脉栓塞法制备CIRI大鼠模型,CIRI+AC组大鼠接受针刺“大椎”、“水沟”、“百会”穴治疗。Garcia评分法检测大鼠神经功能,TTC染色法检测大鼠脑梗死面积,免疫组织化学染色检测海马区caspase-3阳性细胞数量,Western Blot检测海马区caspase-9表达,TUNEL检测细胞凋亡。结果:针刺前,CIRI组和CIRI+AC组神经功能评分较sham组显著降低(P<0.01);针刺24、72 h后,CIRI+AC组神经功能评分较CIRI组显著升高(P<0.01),脑梗死面积比缩小(P<0.05),患侧脑组织细胞凋亡率降低(P<0.01);与针刺24 h后比较,72 h后CIRI组患侧脑组织细胞凋亡率及海马区caspase-3阳性细胞数量增加(P<0.05),CIRI+AC组患侧脑组织细胞凋亡率及海马区caspase-3阳性细胞数量明显降低(P<0.05)。与CIRI组比较,针刺24 h后CIRI+AC组患侧海马区caspase-9表达显著升高(P<0.01),针刺72 h后caspase-9表达显著降低(P<0.01)。结论:持续针刺可改善大鼠神经功能和细胞凋亡情况,且针刺对CIRI大鼠海马区细胞凋亡的抑制具有时效性。

中西医结合治疗心肌梗死后缺血再灌注损伤的研究进展

心肌缺血是冠心病的重要病理改变,血流灌注量减少使心肌处于缺血、缺氧状态,导致能量代谢异常,心功能不同程度的降低等,严重者可诱发心肌梗死、猝死等不良事件。而急性心肌梗死(AMI)后冠心病最为严重的心肌缺血类型,以胸口疼痛、呼吸困难、胸闷、呕吐为主要临床症状,若不积极治疗,可引发心律失常,增加猝死风险。临床上再灌注治疗是AMI治疗的主要手段,再灌注治疗通过溶栓药物、介入治疗或手术治疗,将完全闭塞的血管重新开通,使缺血组织获得再灌注。及时的血运重建治疗能够在短时间内恢复血液供应,但同时亦会导致不同程度的缺血再灌注损伤(IRI),损害心肌的结构和功能,被认为是影响冠心病患者再灌注治疗效果的主要事件。目前研究发现心肌缺血再灌注损伤(MIRI)与氧化应激、Ca^(2+)超载、能量代谢障碍、炎症反应等机制相关。药物治疗着眼于相关机制从而保护心肌缺血再灌注损伤,如抗氧自由基、抑制钙超载、改善炎症浸润及细胞凋亡、减轻线粒体损伤。目前西医治疗再灌注损伤已处于瓶颈,笔者尝试引入中医药理论。根据中医观点,AMI可归于“心痛”“胸痹”范畴,病位在心,牵连肝、脾、肾等诸多脏器,病机见于气虚血瘀,宜采用养气除痹、活血化瘀之法。因而从中西医结合理论深入探索再灌注损伤的发病机制,系统总结再灌注损伤的中西医可能的主要机制,对于防治缺血再灌注损伤具有重要价值。

针刺通过PI3K-Ⅲ/Beclin-1通路抑制脑缺血-再灌注损伤大鼠的细胞凋亡

目的:利用大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)法制备大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型,研究针刺对CIRI模型大鼠脑组织中Ⅲ型磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K-Ⅲ)/Beclin-1通路的影响。方法:利用MCAO/R方法制备SD大鼠CIRI模型,分别给予针刺和(或)自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)进行治疗。利用采用Garcia评分法检测大鼠神经功能,TTC染色法检测大鼠脑梗死面积,Western Blot法检测海马组织PI3K-Ⅲ、Beclin-1和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白的表达水平,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:MCAO/R手术后大鼠神经功能评分降低(P<0.01),TTC染色观察到脑梗死,同时海马区PI3K-Ⅲ、Beclin-1和Bcl-2表达显著下调(P<0.01),脑皮质细胞凋亡增多(P<0.01)。针刺治疗不但提高了大鼠神经功能评分(P<0.01),并且减少了脑梗死面积(P<0.01);同时显著上调了海马组织中PI3K-Ⅲ、Beclin-1和Bcl-2表达(P<0.01),并减少了脑细胞凋亡(P<0.01)。3-MA阻断了针刺的治疗作用,而且使脑损伤更加严重。结论:针刺可改善CIRI大鼠神经功能并减轻神经损伤,其机制可能与激活PI3K-Ⅲ/Beclin-1通路增加细胞自噬并减少细胞凋亡有关。

针刺调控脑缺血再灌注损伤大鼠海马circRNA_011989和circRNA_009775表达

目的:观察针刺对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠缺血侧海马组织circRNA_011989和circRNA_009775表达的影响。方法:以SD大鼠为受试对象,通过线栓法制备CIRI模型,通过针刺(AC)手段进行治疗。采用Garcia评分法对大鼠神经功能进行评定,TTC染色法检测脑梗死体积比,运用靶点预测网站预测circRNA_011989、circRNA_009775结合的miRNAs及对应mRNAs,并采用Cytoscape构建circRNA-miRNA-mRNA共表达网络,通过qRT-PCR法检测缺血侧海马区circRNA_011989、circRNA_009775、miR-466b-5p、miR-3065-3p、Rims1、Slc30a3的表达。结果:与CIRI组相比,CIRI+AC处理组大鼠Garcia评分明显增加(P<0.01),梗死区体积缩小,患侧海马区circRNA_011989、circRNA_009775、Rims1、Slc30a3表达上调(P<0.05,P<0.01),miR-466b-5p、miR-3065-3p表达下降(P<0.05)。结论:针刺可能通过上调circRNA_011989和circRNA_009775的表达明显改善CIRI大鼠神经功能缺损症状,其具体机制可能与激活circRNA_011989/miR-466b-5p/Rims1和circRNA_009775/miR-3065-3p/Slc30a3轴有关。

针刺调控脑缺血再灌注损伤神经细胞凋亡信号中NF-κB与miRNA作用研究进展

核因子-κB(NF-κB)信号通路作为脑缺血再灌注损伤(CIRI)的中心环节,调控着CIRI过程中神经细胞的炎性反应并作为凋亡信号影响着CIRI的预后,而miRNA也是CIRI神经细胞凋亡信号中的重要调控因子。该文通过汇总NF-κB信号通路及microRNA(miRNA)介导的细胞凋亡机制发现两者有着相交、相似的调控模式,一些独特的NF-κB依赖性miRNA、miRNA激活性的NF-κB可能组成CIRI中独特的抗凋亡网络,发挥着巨大的抗神经细胞凋亡作用。针刺作为治疗CIRI的优选方法,不仅能够调控miRNA的合成转录,也能诱导调控NF-κB信号通路。我们猜测,针刺参与调控CIRI中神经细胞凋亡信号可能与miRNA、NF-κB的交互作用有关。遂该文以NF-κB、miRNA的抗凋亡机制为出发点,汇总了针刺调控相关信号的机制以及NF-κB、miRNA形成抗凋亡交互网络的研究进展,为研究针刺降低脑缺血再灌注损伤提供理论依据和新的研究方向。

针刺调控脑缺血再灌注损伤大鼠海马区核心基因circHDAC2表达抗神经损伤的研究

目的探讨针刺对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑保护作用与海马组织差异表达核心基因、转录网中信使RNAs(mRNAs)功能之间的联系,为针刺调控环状RNAs(circRNAs)抗CIRI后神经损伤研究提供参考。方法将54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和针刺组,每组18只,后两组采用改良Longa线栓法制备大脑中动脉阻塞再灌注模型,假手术组仅剥离血管,不插线栓。干预期内针刺组捆绑于鼠板并针刺“大椎”“水沟”“百会”穴,均匀捻转刺激1 min,频率为90次/min,15 min后行针1次,共留针30 min,每12 h干预1次,共7次。假手术组、模型组捆绑于鼠板不针刺。改良加西亚(Garcia)评分法检测大鼠神经功能状况,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法观察脑梗死面积;通过基因芯片技术筛选缺血侧海马组织差异表达基因,整理出模型组/假手术组、针刺组/模型组共同差异表达的环状RNAs(co-DE circRNAs),根据P值、差异倍数(FC)、基因本体(GO)数据库条目富集数量筛选出高表达的核心co-DE circRNAs,分析核心co-DE circRNAs来源基因的GO功能;统计缺血侧海马CA1区尼氏染色阳性细胞数;通过实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法验证核心co-DE circRNAs表达量,选取表达趋势与芯片结果一致的circRNAs进行竞争性内源RNA(ceRNA)网络预测,对预测网络中的mRNAs进行GO功能富集分析。结果干预前,与假手术组比较,各造模组改良Garcia神经功能评分显著降低(P<0.05);干预后,与假手术组比较,模型组脑梗死面积比显著升高,改良Garcia神经功能评分和CA1区尼氏染色阳性细胞数显著降低(P<0.05);与模型组比较,针刺组脑梗死面积比显著降低,改良Garcia神经功能评分和CA1区尼氏染色阳性细胞数显著升高(P<0.05);组内干预前后比较,针刺组改良Garcia神经功能评分显著升高(P<0.05)。芯片结果显示,模型组下调/针刺组上调、模型组上调/针刺组下调的co-DE circRNAs为23个,根据FC>1.25和GO数据库条目富集数量筛选出核心基因为环状RNA组蛋白去乙酰化酶2基因(circHDAC2)、环状RNA神经营养受体酪氨酸激酶2基因(circNTRK2);GO数据库分析显示,二者富集于神经元的产生、神经系统发育、神经元分化等条目。验证其表达量发现,与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧海马组织circHDAC2、circNTRK2表达量均显著下调(P<0.05);与模型组比较,针刺组大鼠缺血侧海马组织circHDAC2、circNTRK2表达量均显著上调(P<0.05)。circHDAC2表达趋势与芯片结果一致,由此对circHDAC2构建相关ceRNA调控网络,调控网络中mRNAs的GO分析主要富集在神经元的产生、神经元分化的调控、轴突引导、神经系统发育、神经元死亡的调节等条目。结论针刺可改善CIRI大鼠改良Garcia神经功能评分与脑梗死面积比,降低缺血侧海马组织的神经元损伤,其作用可能与调控缺血侧海马组织circHDAC2表达以及激发调控网络中mRNA的神经元产生、神经元分化、神经元细胞体功能等有关。

针刺手厥阴心包经穴对心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的 :探讨针刺手厥阴经穴治疗心血管疾病的机理。方法 :电针大鼠心包经穴位 2 0min后 ,结扎左冠状动脉前降支 40min ,心电图 (ECG)监测 ,再电针穴位 2 0min ,松扎 ,恢复灌流 60min,摘取心脏 ,制成细胞悬液 ,流式细胞仪检测。结果 :模型组出现典型的细胞凋亡峰 ,凋亡率明显升高 ,针刺心包经穴组的凋亡率有明显降低 ,与模型组比较差异均有非常显著性意义 (P <0 0 1 )。结论 :针刺手厥阴经穴能有效地抑制心肌细胞的凋亡 。