缺血预适应对心肌缺血再灌注损伤的延迟保护作用

延迟预适应指多次短暂缺血对随后24h甚至更长时间心肌缺血再灌注损伤产生保护作用的适应机制,是迄今为止对心肌缺血再灌注损伤最强大的内源性保护措施。其本质为细胞内信号转导途径,主要涉及触发物质、中介物质和效应物质。

运动预处理后内源性阿片肽对大鼠心肌缺血再灌注损伤的延迟性保护作用

目的:探讨运动预处理后内源性阿片肽(EOP)对大鼠心肌缺血再灌注损伤延迟性保护作用及机制。方法:健康雄性SD大鼠75只,随机分成假手术组(sham组)、缺血再灌注模型组(I/R组)、运动预处理组(EP组)、运动预处理+纳洛酮(naloxine)组(EPN组)、运动预处理+白屈菜赤碱(chelerythrine)组(EPC)。在运动预适应模型基础上,结扎左冠状动脉前降支复制大鼠心肌缺血再灌注模型,采用多道生理记录仪描记血流动力学参数,用酶联免疫法(ELASA)检测血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)和心肌环氧化酶-2(COX-2),用化学比色法检测心肌诱导型一氧化氮合酶(i NOS)活性,用黄嘌呤氧化法检测心肌锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性,用原子分光光度法检测心肌中钙离子(Ca2+)浓度。结果:1与I/R组相比,EP组在再灌注期左室收缩压(LVSP)、左室内压最大上升速率(+dp/dt max)降低幅度明显减小(P<0.05);与EP组相比,EPC组在再灌注60min后+dp/dt max值下降幅度明显,且差异具有显著性(P<0.05)。2与I/R组相比,EP组血清cTnⅠ明显减少,具有显著性差异(P<0.05);与EP组相比,EPN组和EPC组中血清cTnⅠ值明显升高,有显著性意义(P<0.05)。3与I/R组相比,EP组、EPN组和EPC组心肌中Mn-SOD、i NOS和COX-2活性明显升高,差异有显著性(P<0.05);与EP组相比,EPC组心肌COX-2和i NOS显著降低(P<0.05),EPN组心肌COX-2显著降低(P<0.05)。4与I/R组相比,EP组心肌细胞胞浆中Ca2+浓度明显降低,具有显著性差异(P<0.05),EPN组和EPC组心肌细胞胞浆中Ca2+浓度有降低趋势,但差异不显著;与EP组相比,EPN组和EPC组中心肌细胞胞浆中Ca2+浓度明显升高,有显著性意义(P<0.05)。结论:运动预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,内源性阿片肽可能通过蛋白激酶C(PKC)及下游信号途径减轻心肌细胞钙超载和改善微循环,发挥延迟性保护效应。

洛伐他汀预处理的延迟性心肌保护作用及其机制

目的探究洛伐他汀在大鼠心脏急性缺血/再灌注中的延迟性心肌保护作用及其机制。方法SD大鼠24只随机分为3组(每组8只):模型对照组(C);Lovastatin组(L),洛伐他汀直接灌胃两周15mg/(kg·d);Lovastatin复合LNAME组(N),洛伐他汀15mg/(kg·d)直接灌胃2周同时腹腔注射LNAME30mg/(kg·d);2周后建立在体急性缺血/再灌注心脏模型,监测缺血/再灌注前后血流动力学各项指标,同时观察各组血脂水平及其血浆中MDA、SOD、LDH以及CK的变化情况。结果L组和N组较C组心率显著减慢(P<0.01),缺血/再灌注心律失常消失和再灌注时-dp/dtmax下降显著改善(P<0.05);各项血脂指标不变的情况下,洛伐他汀显著减少再灌注时血浆中MDA生成和LDH及CK的释放(P<0.01),并且提高心肌组织SOD活性(P<0.05)。结论Lovastatin对在体大鼠心脏急性缺血/再灌注时具有非降脂外的延迟性心肌保护作用。NO合酶途径是其心脏保护作用的诸多途径之一。

阿片样物质参与延迟相心肌保护的分子机制

阿片样物质是参与延迟相心肌保护的重要触发物质之一,本文将就多年来有关阿片样物质参与延迟相心肌保护的分子机制的研究进展作一综述,并结合我们近年的工作对心脏主要阿片受体亚型即κ-阿片受体介导的心脏保护作用作一简要介绍。

洛伐他汀在大鼠心脏急性缺血再灌注中的延迟性心肌保护作用及其机制的研究

目的:探究洛伐他汀在大鼠心脏急性缺血再灌注中的延迟性心肌保护作用及其机制。方法:将24只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组(n均=8):模型对照组(C);洛伐他汀(Lovastatin)组(L),胃管直接灌注洛伐他汀15mg·kg-1·d-12周;洛伐他汀复合L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)组(N),洛伐他汀15mg·kg-1·d-1直接灌胃2周同时腹腔注射L-NAME30mg·kg-1·d-1;2周后建立在体急性缺血再灌注心脏模型,监测缺血再灌注前后血流动力学各项指标,同时观察各组血脂水平及其血浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)以及肌酸激酶(CK)的变化情况。结果:L组和N组较C组心率明显减慢(P<0·01),缺血再灌注心律失常消失和再灌注时左心室内压下降最大速率(-dp/dtmax)下降程度减轻(P<0·05);洛伐他汀明显减少再灌注时血浆中MDA生成和LDH及CK的释放(P<0·01),并且提高心肌组织SOD活性(P<0·05),各项血脂指标不变。结论:洛伐他汀对大鼠心脏急性缺血再灌注时具有延迟性心肌保护作用。这种保护作用除与其增加一氧化氮(NO)合成相关外,还可能通过直接或间接方式稳定心肌细胞膜表面的离子通道,减少再灌注心律失常的发生,具体机制需待进一步实验证明。

诱导型一氧化氮合酶与环氧化酶-2在未成熟心肌缺血预处理延迟性保护机制中的关系

目的 探讨诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)与环氧化酶 - 2 (COX - 2 )在未成熟兔心肌缺血预处理延迟性保护机制中的关系。方法 健康 2～ 3周中国大白兔 36只 ,随机分为 6组 :假手术组 (Ⅰ组 ) ,缺血再灌注组 (Ⅱ组 ) ,缺血预处理组 (Ⅲ组 ) ,缺血预处理 +二甲亚砜组 (Ⅳ组 ) ,缺血预处理 +NS - 398组 (Ⅴ组 )和缺血预处理 +14 0 0W组 (Ⅵ组 ) ,每组 6只。分别于预处理 2 4h后行心肌缺血 30min ,再灌注 6 0min ,观察左室发展压 (LVDP)、左室压上升及下降最大速率 (+dp dtmax,-dp dtmax)变化。采用Westernblot及比色法分别测定COX - 2蛋白活性及iNOS活性。结果 缺血再灌注 1h后Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ组LVDP、+dp dtmax、-dp dtmax恢复率均显著低于Ⅲ组 (P <0 .0 1) ,Ⅲ、Ⅳ组LVDP、±dp dtmax恢复率较其他组升高明显 (P <0 .0 1) ;Ⅲ组心肌iNOS活性较Ⅰ及Ⅱ组活性显著升高 (P<0 .0 5 ) ,Ⅴ和Ⅵ组心肌COX - 2蛋白活性较Ⅲ组显著降低 (P <0 .0 5 )。结论 iNOS和COX - 2共同参与了未成熟兔缺血预处理延迟性心肌保护作用 ,COX - 2处于iNOS下游 ,iNOS对COX - 2活性具有调控作用。

氧自由基在缺血预处理对未成熟心肌延迟性保护机制中的作用

目的 探讨氧自由基 (OFRs)在缺血预处理 (IP)对未成熟心肌延迟性保护 (第二窗 )机制中的作用。方法 3～ 4周龄的幼兔 30只 ,随机分为 5组 (n =6 ) :Ⅰ组 ,正常对照组 ;Ⅱ组 ,缺血 再灌注损伤组 ;Ⅲ组 ,单纯IP组 ;Ⅳ组 ,IP +L -精氨酸 (L -arginine ,30 0mg kg)组 ;Ⅴ组 ,IP +L -硝基精氨酸甲酯 (L -NAME ,10mg kg)组。建立幼兔活体心脏缺血预处理及缺血 再灌注损伤模型 ,监测左心室血流动力学变化 ,化学比色法检测心肌一氧化氮合酶 (NOS) (iNOS eNOS)活性 ,同时测定SOD活性及MDA含量。结果 缺血预处理 2 4h后 ,各组间的LVDP、±dp dtmax无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;缺血 再灌注 6 0min ,Ⅱ组和Ⅳ组的LVDP、+dp dtmax、-dp dtmax恢复率低于Ⅲ组和Ⅴ组 (P <0 .0 1)。缺血前 ,Ⅲ组和Ⅴ组的iNOS活性高于Ⅱ组和Ⅳ组 (P <0 .0 5 ) ;再灌注 6 0min ,Ⅲ组和Ⅴ组的eNOS活性高于Ⅱ组和Ⅳ组 (P <0 .0 5 )。缺血前和再灌注末 ,Ⅲ组和Ⅴ组的SOD活性高于Ⅱ组和Ⅳ组 (P <0 .0 5 )。结论 OFRs对IP延迟性心肌保护起到了“触发物”的作用 ,而iNOS的升高可能仅是炎性反应标记物 ,eNOS活性的升高可能是形成第二保护窗 (SWOP)的原因之一 ,外源性NO取消了SWOP的形成 ,可能与其清除了OFRs有关。

p38参与单磷酰脂A预处理的延迟保护作用

目的探讨丝裂素活化蛋白激酶p38MAPK是否参与单磷酰脂A(MLA)预处理的延迟保护作用。方法建立大鼠心肌缺血/再灌注损伤(I/R)模型。分别应用MLA、p38的特异性抑制剂SB203580预处理心脏,24h后对心脏进行缺血再灌注,观察各组心功能、心肌梗死范围、血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性,同时用Western印迹法检测MLA预处理后即刻、10、15、30min、SB203580加单磷酰脂A预处理15min时p38磷酸化水平。结果MLA预处理组较I/R组心功能明显改善,心梗范围明显缩小,血浆LDH活性升高程度减轻(P<0.01)。p38磷酸化在MLA预处理后即刻稍微增高,10min轻度升高、15min达到高峰、30min开始下降,而用SB203580可明显抑制p38活性,且预处理延迟保护作用被消除,分别与单纯缺血再灌注组相似(P>0.05)。结论MLA预处理对24h后缺血/再灌注心肌有保护作用。p38参与心肌预处理后的延迟保护作用,MLA预处理后p38适度激活可能是药物延迟保护作用的重要机制之一。

促红细胞生成素心肌保护作用的实验研究

目的研究促红细胞生成素(EPO)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(I／R)的延迟保护作用。方法将60只SD大鼠随机分成空白对照组(A组)、1 000 U／kg EPO预处理组(B组)和3 000 U／kg EPO预处理组(C组),B、C组均提前24 h腹腔注射EPO。建立Langendorff大鼠离体心脏灌注模型,各组分别平衡灌注20 min后,缺血30 min,再复灌45 min。复灌20 min后测定并比较冠状动脉流液中磷酸肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量;实验结束后,电子显微镜下观察各组心肌细胞超微结构的变化,并通过免疫组织化学法检测凋亡相关基因bax、bcl-2的蛋白表达。结果复灌20 min后,B、C组CK和LDH漏出量分别为(11．58±2．05)U／L、(16．24±2．02)U／L和(10．34±1．56)U／L、(15．16±2．67)U／L,均显著低于A组的(27．22±2．14)U／L和(29．12±1．45)U／L(P值均<0．05)。实验结束后,B、C组心肌细胞超微结构损伤显著减轻。B、C组Bax阳性片数率分别为50％和30％,均显著低于A组的95％(P值均<0．05),C组亦显著低于B组(P<0．05)。B、C组Bcl-2阳性片数率分别为35％和70％,均显著高于A组的20％(P值均<0．05),C组亦显著高于B组(P< 0．05)。结论EPO对大鼠心肌I／R具延迟保护作用,其作用机制与抑制心肌细胞的凋亡有关。

吗啡对大鼠离体工作心脏延迟性保护作用的实验研究

目的研究吗啡预处理对大鼠离体工作心脏缺血再灌注的延迟性保护作用,并探讨其机制。方法48只Wistar大鼠随机分为6组,每组8只,即对照组、吗啡组、纳络酮组、格列本脲组、吗啡+纳络酮组和吗啡+格列本脲组。腹腔注射给药24h后,建立离体工作心脏模型,4℃St.Thom asⅡ停搏液诱导心脏停搏30min,复灌45min。观察心脏缺血再灌注前后血流动力学恢复率、心肌酶及心肌超微结构的变化。结果吗啡组的心排出量(CO)恢复率、左室发展压(LVDP)恢复率、左室压力微分(±dp/dtmax)恢复率及乳酸脱氢酶(LDH)漏出量均优于对照组(P<0.05);30min缺血再灌注后心肌超微结构损伤明显减轻;纳络酮和格列本脲可以完全阻断吗啡的作用,而单独使用纳络酮或格列本脲对大鼠心脏不产生影响。结论吗啡预处理对缺血心肌可以产生延迟性保护作用,其作用与阿片受体和心肌细胞ATP敏感性钾通道(KATP通道)介导有关。

诱导型一氧化氮合成酶参与大鼠心脏缺血后处理延迟相的保护作用

目的探讨心肌缺血后处理的延迟相保护作用,以及诱导型一氧化氮合成酶(i NOS)在延迟相保护作用中的意义。方法 160只大鼠随机分为5组:缺血再灌注组(I/R组)、缺血后处理组(IPO组)、缺血后处理+1400W(iNOS阻断剂)组(IPO+1400W组)、缺血再灌注+1400W组(I/R+1400W组)和假手术组,每组32只,分别接受3、24、48、72 h再灌注(每时间点8只)。测定各组心肌梗死面积与肌酸激酶(CK)活性,检测磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-e NOS)与i NOS的表达。结果再灌注3 h,IPO组与I/R组相比,左室梗死面积明显减少[(18.0±2.3)%vs(30.7±3.1)%,P<0.05];再灌注72 h,IPO组与I/R组相比梗死面积差异有统计学意义[(25.7±1.1)%vs(34.9±0.8)%,P<0.05];各组CK活性的差异与梗死面积的差异一致。再灌注3、24 h,IPO组与I/R组相比,p-e NOS表达增多;再灌注48、72 h,IPO组i NOS表达增多。结论缺血后处理具有延迟相心肌保护作用,i NOS在后处理延迟相心肌保护中必不可少。