心肌素在平滑肌细胞分化及表型调节中的作用

平滑肌细胞在动脉粥样硬化的发生和进展过程中起了重要作用。粥样斑块中的平滑肌细胞不仅来源于中膜平滑肌,还可以从骨髓干细胞分化而来。平滑肌细胞的分化是高度可逆的,并在多种局部环境因素的参与作用下发育。平滑肌细胞表达多种标志表明它们在分化成熟中的相对状态。但是没有单个细胞分化特异性标志能将平滑肌细胞与其它完全区别开。心肌素及与其相关的血浆反应因子共刺激因子、ETS家族三元复合物(EIK-1)和心肌素相关转录因子对平滑肌细胞分化起到一定作用。因此平滑肌祖细胞概念的提出,为动脉粥样硬化防治提供了一种新的治疗策略。

狼疮性肾炎患儿血管损伤中心肌素与miR-145的表达情况及其临床意义研究

目的观察狼疮性肾炎(LN)患儿血管损伤中心肌素与miR-145的表达情况,并探讨二者在LN患儿血管损伤发生中的作用。方法选取2008年1月—2015年9月在湘雅二医院儿科住院的系统性红斑狼疮(SLE)患儿中确诊为LN的患儿49例,均行肾活检,活检组织常规进行免疫荧光、光镜及电镜检查。依据国际肾脏病协会(ISN)和肾脏病理学会(RPS)2002—2003年联合修订的ISN/RPS 2003 LN分型标准进行病理分型,共分为Ⅱ型5例、Ⅲ型7例、Ⅲ+Ⅴ型9例、Ⅳ型17例、Ⅳ+Ⅴ型11例。以中膜比例评价血管损害程度,并分为轻度14例、中度19例、重度16例。依据KATAFUCHI等的评价方法对肾小球、肾间质损害进行半定量积分;采用双抗体夹心法测定血清心肌素水平;采用原位杂交法检测miR-145表达。结果不同病理分型患儿肾小球、肾间质损害积分间差异均有统计学意义(P<0.05)。肾小球损害积分与肾间质损害积分呈直线正相关(r=0.961,P<0.01)。不同血管损害程度、病理分型患儿血清心肌素水平间差异均有统计学意义(P<0.05)。不同血管损害程度、病理分型患儿肾内血管miR-145表达间差异均有统计学意义(P<0.05)。血清心肌素水平与肾内血管miR-145表达呈直线正相关(r=0.782,P<0.01);血清心肌素水平、肾内血管miR-145表达与血管损害程度呈直线负相关(r值分别为-0.728、-0.790,P<0.01)。结论随着血管损害程度的增加血清心肌素水平和肾内血管miR-145表达均降低,二者不仅可用于评估LN患儿肾内血管损害(RVLs)程度,也可能是LN肾血管损伤治疗的新靶点。

2型糖尿病合并冠心病患者的促心肌素-1水平

2型糖尿病组血浆促心肌素-1(CT-1)升高,心肌梗死患者高于心绞痛患者,与心肌酶呈正相关。糖尿病合并冠心病组升高更明显,糖尿病早期已有心血管病变,CT-1反映糖尿病心血管病变的严重程度,可作为糖尿病心血管病变的标识物。

急性心肌梗死患者Killip心功能分级与血浆促心肌素-1浓度变化的关系

目的探讨急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者Killip功能分级与血浆促心肌素-1(cardiotrophin-1,CT-1)浓度变化的关系。方法选择2008年4月～2008年10月于海南医学院附属医院心血管内科住院的29例AMI患者为研究对象,根据入院时Killip分级分组,其中KillipⅠ组11例,年龄(64±11)岁;KillipⅡ组10例,年龄(67±15)岁;KillipⅢ组8例,年龄(68±15)岁。另外,选择20例排除CT-1增高疾病的患者为正常对照组,年龄(63±8)岁。收集入选者血清肌酸激酶同工酶、血清肌钙蛋白浓度,并用酶联免疫吸附测定方法测定血浆CT-1浓度,所得数据用SPSS软件包进行统计学分析。结果方差分析显示4组心肌肌钙蛋白I浓度、血清肌酸激酶同工酶浓度、血浆CT-1浓度比较,差异有统计学意义(F=3.709,P<0.05;F=3.617,P<0.05;F=18.343,P<0.05)。KillipⅢ组血浆CT-1浓度高于KillipⅠ组及KillipⅡ(613.25±84.85)pg/mLvs.(299.36±139.56)pg/mL,P<0.05];[(613.25±84.85)pg/mLvs.(394.11±67.89)pg/mL,P<0.05]。Pearson相关分析显示,AMI患者Killip分级与血浆CT-1浓度呈正相关(r2=0.77,P<0.01),与肌酸激酶同工酶峰值呈正相关(r2=0.44,P<0.05),与心肌肌钙蛋白峰值呈正相关(r2=0.39,P<0.05)。AMI患者血浆CT-1浓度与心肌肌钙蛋白峰值呈正相关(r2=0.555,P<0.01),与肌酸激酶同工酶峰值呈正相关(r2=0.614,P<0.01)。结论血浆CT-1浓度在AMI患者中明显升高,其浓度与Killip心功能分级相关。

益气化瘀中药对子宫肌瘤患者血清NF-κB p65及心肌素的影响

目的：探讨益气化瘀中药对子宫肌瘤患者血清中NF-κB p65与心肌素表达的影响及其意义。方法选取2013年8月～2014年10月于南阳市中心医院妇科已确诊为子宫肌瘤的患者56例，根据随机数字表法随机分为2组：对照组28例，予米非司酮治疗；实验组28例，予益气化瘀中药治疗，比较患者的临床疗效、子宫体积、肌瘤体积、NF-κB p65与心肌素水平。结果治疗后实验组有效率为89.29％，高于对照组的67.86％（χ2＝3.82，P＜0.05）。与对照组比较，实验组患者血清中NF-κB p65表达量低于对照组（P＜0.05），心肌素的表达量高于对照组（P＜0.05），子宫体积和子宫肌瘤体积均小于对照组（P＜0.05）。结论益气化瘀中药对子宫肌瘤患者具有较好的临床疗效，有效降低血清中NF-κB p65表达量，提高心肌素的表达量，缩小子宫及子宫肌瘤体积，对临床治疗子宫肌瘤具有重要意义。

降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞的心肌素表达及细胞炎症激活的作用

目的探讨降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对体外培养的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)心肌素表达及细胞炎症激活的影响。方法取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMCs,根据不同的处理方案,分为对照组、IL-1β组、CGRP组、心肌素高表达组、心肌素干扰组和CGRP8-37组(CGRP受体拮抗剂组)。Western blot检测不同组VSMCs中心肌素和IL-6蛋白表达水平。结果以IL-1β处理VSMCs后,细胞培养24、48、72 h时IL-6表达水平均高于基线水平(P<0.05),而心肌素水平无显著变化;以高表达心肌素的腺病毒载体转染VSMCs并给予IL-1β处理后,与单纯IL-1β处理比较,各时间点IL-6水平显著下降(P<0.05)。CGRP组中各个时间点VSMCs内心肌素水平较同时间点IL-1β组心肌素水平显著增加[24 h:(1.17±0.03)vs(0.25±0.03);48 h:(2.04±0.05)vs(0.19±0.01);72 h:(0.96±0.02)vs(0.28±0.02);P<0.05],而细胞内IL-6表达水平较同时间点IL-1β组水平显著降低[24 h:(0.23±0.01)vs(0.77±0.03);48 h:(0.28±0.02)vs(1.35±0.04);72 h:(0.20±0.02)vs(1.04±0.04);P<0.05]。心肌素干扰组VSMCs中CGRP处理后各个时间点细胞内IL-6水平较CGRP组显著升高[24 h:(1.74±0.04)vs(0.51±0.01);48 h:(1.68±0.03)vs(0.29±0.01);72 h:(0.98±0.02)vs(0.31±0.01);P<0.05],且CGRP8-37组与CGRP组比较也获得类似结果,而心肌素干扰组和CGRP8-37组中同时间点的细胞内IL-6水平无明显差异。结论 CGRP通过促进VSMCs心肌素的表达而抑制IL-1β诱导的细胞炎症激活蛋白IL-6表达,且这一作用是CGRP通过与其受体结合后实现的。

降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞心肌素表达及细胞表型改变的作用

目的:研究降钙素基因相关肽(CGRP)对血管平滑肌细胞(VSMCs)心肌素表达的影响及对细胞表型改变的调节作用。方法:取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMCs,分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组(加入AngⅡ处理)、CGRP组(加入AngⅡ和CGRP处理)和CGRP8-37组(在AngⅡ和CGRP基础上加入CGRP8-37)。Western blot法检测VSMCs中心肌素及细胞表型标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和骨桥蛋白(OPN)表达情况。结果:在VSMCs培养中,细胞心肌素表达水平随着培养时间延长逐渐降低,细胞培养48 h和72h时心肌素表达水平较基线水平显著降低(P<0.05);而加入CGRP处理后,心肌素表达水平逐渐增加,与基线水平比较,加入CGRP培养后48 h和72 h时细胞心肌素水平显著增加(P<0.05)。同时,在VSMCs培养48 h时,AngⅡ组细胞心肌素水平较对照组下降(P<0.05),且α-SMA表达亦相应下降(P<0.05),而OPN表达水平显著增加(P<0.05);CGRP组VSMCs心肌素水平较AngⅡ组增加,伴随着α-SMA表达水平增加(P<0.05),相反地OPN表达水平下降(P<0.05);CGRP8-37组心肌素和α-SMA表达水平较CGRP+AngⅡ组降低(P<0.05),而OPN表达较CGRP组增加(P<0.05)。结论:CGRP通过促进VSMCs心肌素的表达而抑制细胞表型转换,使细胞维持收缩表型,且这一作用是CGRP通过与其受体结合后实现的。

稳定型心绞痛病人血清心肌素、和肽素水平与急性心肌梗死发生的相关性

目的检测稳定型心绞痛(SAP)病人血清心肌素、和肽素水平,并探讨其与急性心肌梗死(AMI)发生的相关性。方法选取2017年11月—2019年11月于邯郸市第一医院住院治疗的183例SAP病人为研究对象,根据有无发生AMI将病人分为两组,其中未发生AMI病人(单纯SAP组)112例,发生AMI病人(发生AMI组)71例。比较两组一般资料、糖脂代谢指标,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测SAP病人血清心肌素、和肽素水平,分析发生AMI病人血清心肌素、和肽素水平与糖脂代谢指标的相关性,并分析SAP病人发生AMI的影响因素。结果两组性别、年龄、血肌酐、高血压、高血脂比较,差异均无统计学意义(P>0.05);发生AMI组心肌素、和肽素、体质指数(BMI)、空腹血糖(FPG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)明显高于单纯SAP组(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显低于单纯SAP组(P<0.05);发生AMI病人血清心肌素、和肽素水平与FPG、LDL-C、TG、TC均呈正相关(P<0.05),与HDL-C呈负相关(P<0.05);心肌素、和肽素是SAP病人发生AMI的危险因素,HDL-C是SAP病人发生AMI的保护因素。结论SAP发生AMI病人血清心肌素、和肽素水平高于单纯SAP病人,心肌素、和肽素水平的变化对AMI的发生有重要意义,SAP病人血清心肌素、和肽素水平升高会增加AMI发生的风险。

核因子-κB p65与心肌素在子宫肌瘤中的表达及作用机制

目的探讨核因子(NF)-κB p65亚型和心肌素在子宫肌瘤发生中的作用机制。方法蛋白印迹法检测29例子宫肌瘤和相应肌层组织以及15例原代子宫肌瘤细胞和相应肌层细胞中NF-κB p65、心肌素的表达;RNA干扰技术抑制子宫肌瘤细胞中NF-κB p65基因表达,光镜观察细胞生长状况,蛋白印迹法检测干扰后子宫肌瘤细胞中NF-κB p65和心肌素的表达。结果与正常肌层相比,子宫肌瘤组织和细胞中的NF-κB p65相对表达量增高(P<0.05),而心肌素的相对表达量降低(P<0.05)。RNA干扰后,与未转染的子宫肌瘤细胞相比,NF-κB p65的相对表达量降低(P<0.05),而心肌素的表达量相对增高(P<0.05)。结论 NF-κB p65与心肌素可能相互作用共同参与了子宫肌瘤的形成。

儿童单纯性肥胖干预前后脑钠肽、心肌素、内脂素及脂糖代谢变化与关系研究

目的 探讨儿童单纯性肥胖干预前后脑钠肽、心肌素、内脂素及脂糖代谢的变化与关系。方法 采用回顾性研究方法,选取2018年1月至2021年12月在江南大学附属医院治疗的单纯性肥胖儿童80例作为观察组,其中轻度、中度和重度肥胖患儿分别为23、40和17例,同时选取正常儿童80名作为对照组。检查各受试者血液脑钠肽、心肌素、内脂素及脂糖代谢指标,同时比较观察组患儿干预前后上述指标的变化情况。结果 观察组和对照组患儿N末端B型利钠肽原(NT-pro BNP)、心肌素比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患儿内脂素、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均明显高于对照组,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组不同肥胖程度患儿内脂素、总胆固醇、甘油三酯、LDL-C、空腹血糖、HOMA-IR、HDL-C比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。内脂素与总胆固醇、空腹血糖及HOMA-IR呈正相关(P<0.05),其余未见明显相关性。观察组患儿干预前后血液NT-pro BNP、心肌素无明显变化(P>0.05);观察组患儿干预后内脂素、总胆固醇、甘油三酯、LDL-C、空腹血糖和HOMA-IR明显低于干预前,而HDL-C明显高于干预前,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 儿童单纯性肥胖干预前后脑钠肽、心肌素无明显变化,内脂素及脂糖代谢指标改善,其中内脂素及脂糖代谢指标与肥胖程度有关,同时内脂素与脂糖代谢密切相关。

促心肌素1-C端肽干预大鼠心肌缺血再灌注损伤的效果

目的观察不同的促心肌素1-C端肽(cardiotrophin-1 C-terminal peptides,CT1C)对大鼠心肌缺血再灌注损伤后组织损伤程度的影响。方法用结扎-松解大鼠冠状动脉左后降支制作模型。正常组5鼠;缺血与再灌注组6鼠,缺血30 min后开始再灌注;缺血与再灌注后干预组8鼠,缺血30 min后开始再灌注,并腹腔注射CT1C-100μg/kg;缺血与再灌注前干预组8鼠,腹腔注射CT1C 100μg/kg,7 d后进行缺血与再灌注。实验结束前取血检测血浆一氧化氮、血清肌酸激酶和丙二醛。结果缺血与再灌注后,大鼠血一氧化氮降低(q=8.758,P<0.01),血肌酸激酶(q=14.391,P<0.01)和丙二醛浓度升高(q=11.015,P<0.01);缺血与再灌注后干预,大鼠血浆一氧化氮升高(q=14.197,P<0.01),清肌酸激酶(q=10.649,P<0.01)和丙二醛降低(q=6.167,P<0.01),但仍高于正常组(P<0.01);缺血与再灌注前干预,大鼠血浆一氧化氮浓度高于正常组(q=9.595,P<0.01),但低于后干预组(q=6.147,P<0.01),血清肌酸激酶(q=6.147,P<0.01)和丙二醛(q=10.551,P<0.01)则高于缺血与再灌注组。结论CT1C再灌注早期短期作用能减轻心肌组织损伤及氧化损伤的程度;但使用较长时间后,大鼠对缺血与再灌注的耐受力降低,组织损伤及氧化损伤的程度明显加重。

狼疮性肾炎患儿肾血管损害与心肌素浓度变化

目的研究狼疮性肾炎(LN)患儿不同血管损害程度时心肌素浓度的变化。方法选取经皮穿刺活检组织常规免疫荧光、光镜及电镜检查确诊的LN患儿49例,30名健康体检儿童为正常对照组。依据ISN/RPS 2003 LN病理分型标准进行病理分型;依据Katafuchi评价方法对肾小球与肾小管间质损害进行半定量积分,同时对血管损害进行评价;采用双抗体夹心法检测血清心肌素含量。结果 LN患儿的肾小球损害积分、肾间质损害积分均随病理分型的加重而增高,差异有统计学意义(P<0.05);肾小球损害与肾间质损害呈正相关(r=0.96,P<0.01);血管损害程度与肾小球损害程度、肾间质损害程度有关,与临床检验指标无关。按肾血管损害程度分组,血管损害轻度组、中度组、重度组及正常对照儿童之间外周血心肌素浓度差异有统计学意义(F=378.61,P<0.001),中度组、重度组明显低于正常对照与轻度损害组,差异均有显著统计学意义(P<0.01);正常对照与轻度损害组之间差异无统计学意义(P>0.05)。按病理类型分组,正常对照与各病理类型分组间外周血心肌素浓度差异有统计学意义(F=626.793,P<0.01),Ⅱ、Ⅲ、Ⅲ+Ⅴ、Ⅳ、Ⅳ+Ⅴ型患儿外周血心肌素依次降低,组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 LN患儿血清中心肌素的浓度可在一定程度上反映其肾脏血管损害情况,提高心肌素的浓度可能有助于血管损害的修复。

一种新发现的肌特异基因表达调节因子:心肌素

心肌素是一种新发现的特异性调节心肌和平滑肌基因表达的蛋白因子 ,与血清效应因子(SRF)一起构成肌细胞分化分子开关的组成成分。心肌素在胚胎及成年心肌和平滑肌细胞中均进行表达 ,是这两类细胞基因特异性表达及分化所必需的转录激活因子。

心肌素与心血管疾病的研究进展

心肌素(myocardin)是2001年发现的在心血管组织特异表达的转录辅助因子,心肌素与血清效应因子(SRF)共同控制着心肌和平滑肌细胞特异基因的表达,其活性的改变与人类主要心血管疾病如动脉粥样硬化、心肌肥大、高血压的发生发展关系非常密切。本文就心肌素分子结构、表达调控以及与心血管疾病关系的研究进展作一综述。

大鼠心肌素慢病毒RNA干扰载体的构建及其对血管平滑肌细胞分化的影响

目的:构建大鼠心肌素(myocardin)慢病毒RNA干扰(RNAi)重组质粒,分析该RNAi质粒的干扰效果及其对血管平滑肌细胞(VSMCs)分化的影响。方法:设计并合成3对针对大鼠myocardin的shRNA片段,退火后将双链oligo-DNA克隆入慢病毒质粒载体pGCSIL-GFP获得重组干扰质粒pGCSIL-GFP-shMyocd。以pEGFP-N1/X124G表达载体构建含Flag标签的myocardin表达质粒pEGFP-N1-Myocd。将重组干扰质粒和过表达质粒共转染293T细胞,Western blotting分析Flag标签蛋白的表达,筛选出干扰效率最好的干扰质粒并大量扩增。干扰质粒转染大鼠主动脉VSMCs,RT-PCR和Western blotting检测myocardin及分化标志物SM22α的表达。结果:成功构建大鼠myocardin的慢病毒干扰质粒pGCSIL-GFP-shMyocd和过表达质粒pEGFP-N1-Myocd。上述2种质粒共转染293T细胞后,1号干扰质粒转染组Flag标签蛋白表达下降最显著。将1号质粒进行大包装,获得滴度为1×10^(12)TU/L的慢病毒颗粒,该病毒转染VSMCs后,myocardin表达明显下调并伴随分化标志物SM22α表达的显著下降。结论:成功构建大鼠myocardin慢病毒重组干扰质粒pGCSIL-GFP-shMyocd;抑制基因myocardin表达后伴随VSMCs分化的表达下降,提示myocardin在VSMCs分化过程中的重要性。pGCSIL-GFP-shMyocd重组质粒的成功构建为后续研究特定病理条件下(如动脉粥样硬化)VSMCs表型转变的分子机制奠定了基础。

急性冠脉综合征患者血浆促心肌素-1水平的变化及意义

目的:探讨临床急性冠脉综合征(ACS)患者血浆促心肌素-1(CT-1)的浓度变化及意义。方法:ACS患者56例,其中不稳定型心绞痛(UA)患者27例,急性心肌梗死(AMI)患者29例,并纳入同期正常人20例作为对照组。用ELISA方法测定CT-1浓度;同期检测血肌酸磷酸激酶同功酶(CK-MB)与血清肌钙蛋白(cTnI)水平。用SPSS软件包进行统计学分析。结果:(1)血浆CT-1浓度UA组,AMI组与正常对常组对比均有显著差异。AMI组的CT-1浓度[(419.50±166.32)ng/L]明显高于UA组[(180.06±125.05)ng/L]及正常对照组[(19.05±18.65)ng/L(均P<0.01),而UA组也高于正常对照组(P<0.01)。(2)AMI患者CT-1浓度与CK-MB峰值(r=0.614,P<0.01)与cTnI峰值(r=0.555,P<0.01)存在良好的相关性。结论:血浆CT-1在ACS各组患者中都有升高,其浓度与疾病的严重程度有一定相关性。血浆CT-1在心肌损伤的修复中发挥作用。CT-1可做为ACS严重程度的预测指标。

心肌素抑制血管平滑肌细胞表型转换改善动脉粥样硬化

动脉粥样硬化(As)是一种涉及多种细胞并由多种因素诱导的慢性疾病,血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖、迁移对As的发生和发展有着不可忽视的影响,包括促进斑块的生成及诱发斑块的不稳定等。VSMC由收缩表型向合成表型转换是其增殖和迁移的基础,维持VSMC的收缩表型,抑制其合成表型的形成有助于抑制其异常增殖和As斑块的形成。心肌素作为VSMC收缩标志基因的关键转录因子,能与血清反应因子结合来激活VSMC收缩标志基因的表达。多种功能因子,如雌激素受体α、组蛋白修饰、DNA甲基化和microRNA等,都可以与心肌素联合作用调节血管的功能并抑制VSMC的表型转换;多种作用途径,例如转化生长因子β1、血小板衍生生长因子BB等信号通路,可增加心肌素表达,抑制VSMC的增殖和迁移。因此,心肌素在As发展过程中有着至关重要的保护作用。调控心肌素影响VSMC的表型转换可能成为未来治疗As乃至心血管疾病的新策略。

抑制磷脂酰肌醇3激酶/心肌素信号通路对血管平滑肌瘤细胞增殖和侵袭能力的影响

目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶/心肌素(PI3K/MYOCD)信号通路在调控血管平滑肌瘤(AM)细胞中的作用。方法:AM细胞分为PI3K/MYOCD siRNA组(转染PI3K/MYOCD siRNA)和对照组(未行转染)。qRT-PCR检测PI3K和MYOCD mRNA的表达,CCK8试剂盒检测细胞的增殖能力,Transwell小室检测细胞的侵袭能力,Western blot检测PI3K、MYOCD、AKT、Bcl-2蛋白的表达。结果:PI3K/MYOCD siRNA组细胞的增殖和侵袭能力低于对照组(P<0.05);与对照组相比,PI3K/MYOCD siRNA组细胞的PI3K、MYOCD表达水平降低,AKT蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05);PI3K/MYOCD siRNA组细胞的PI3K蛋白与MYOCD、AKT蛋白呈正相关,与Bcl-2蛋白呈负相关;MYOCD蛋白与AKT蛋白呈正相关,与Bcl-2蛋白呈负相关(P<0.001)。结论:抑制PI3K/MYOCD信号通路可能通过调控AKT、Bcl-2蛋白降低AM细胞的增殖和侵袭能力。

川崎病患儿外周血miR-145和心肌素的表达及其与冠状动脉损害的关系

目的研究微小核糖核酸-145(miR-145)和心肌素在川崎病患儿血清中的表达水平,分析二者与合并冠状动脉损害的关系。方法选取眉山市妇幼保健院和西南医科大学附属医院2015年5月—2018年10月收治的川崎病患儿72例为研究对象,按照是否出现冠状动脉损害分为无损害组(40例)和损害组(32例),另选取同期在眉山市妇幼保健院体检的健康志愿者40名为对照组。收集3组研究对象临床生化数据及血清炎症相关因子水平,采用酶联免疫吸附法检测血清miR-145和心肌素水平。结果冠状动脉损害组患儿血清C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)、红细胞沉降率(ESR)、血小板计数(PLT)及白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平高于冠状动脉无损害组和对照组(P<0.05),且冠状动脉无损害组高于对照组(P<0.05)。冠状动脉损害组患儿血清miR-145及心肌素水平低于冠状动脉无损害组和对照组(P<0.05),且冠状动脉无损害组低于对照组(P<0.05)。miR-145在川崎病患儿血清中表达水平与心肌素水平呈正相关(P<0.01)。Logistic回归分析显示,低水平的血清miR-145、心肌素是川崎病患儿并发冠状动脉损害的危险因素(P<0.05)。结论miR-145、心肌素在川崎病合并冠状动脉损害患儿血清中低表达,低水平的血清miR-145、心肌素是川崎病患儿并发冠状动脉损害的危险因素。

心肌素在周期性张应变调控血管平滑肌细胞表型转化中的作用

目的探讨周期性张应变条件下诱导血管平滑肌细胞(VSMC)表型转换时,心肌素在其中可能的作用。方法应用FX-5000T体外周期性张应变加载系统,分别对体外培养的VSMC施加频率为1.25 Hz、加载幅度为5%(正常张应变状态)、15%(高张应变状态)的周期性张应变力学刺激,加载时间为24 h。采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR技术检测心肌素、肌肉萎缩相关基因1(atrogin-1)及相关收缩蛋白SMA、SM22的蛋白表达水平和mRNA水平;敲除atrogin-1后测心肌素及相关收缩蛋白SMA、SM22的变化;用蛋白酶体抑制剂MG132处理后测心肌素和atrogin-1的表达水平。结果与5%正常张应变组比较,15%高张应变促进平滑肌细胞的去分化。15%高张应变下调心肌素和SMA、SM22蛋白水平;上调atrogin-1蛋白表达水平;下调心肌素和SMA、SM22的mRNA水平,上调atrogin-1 mRNA水平。应用siRNA特异性下调atrogin-1后,心肌素、SMA、SM22蛋白水平均上升。用1μmol/L MG132处理细胞后,心肌素、SMA、SM22的蛋白水平上升,atrogin-1蛋白水平下降。结论周期性高张应变可以通过调节血管平滑肌细胞中atrogin-1/心肌素轴来调控血管平滑肌表型转换,进而影响VSMC的分化增殖。