大鼠心肌缺血预适应相关基因5的克隆与特性分析

目的采用生物信息学分析表达序列标签AW918640以获得其所代表基因的全长序列,并对该基因进行初步的特性分析。方法利用基因银行(GeneBank)数据库,通过BLAST比对等生物信息学方法进行电子克隆,采用逆转录聚合酶链反应和基因测序等技术进行鉴定,采用mapviewer软件进行染色体定位,ExPASy和SMART软件对获得的全长基因进行翻译和蛋白质功能结构分析。结果AW918640(基因银行登录号)为一个在大鼠心肌缺血预适应后3h表达升高的表达序列标签序列,通过电子克隆得到其所代表基因的全长,且为一新基因,经逆转录取合酶链反应和基因测序证实后,将其命名为心肌缺血预适应相关基因5(MIP5),并在基因银行数据库上登录,登录号为AY553870。心肌缺血预适应相关基因5最大开放读码框为909bp,编码302个氨基酸,含有6个kelch重复基序。结论心肌缺血预适应相关基因5为一与大鼠心肌缺血预适应相关的新基因。

TRPM7-P13K在治疗性浅低温（34℃）处理的大鼠离体心肌缺血-再灌注模型中的作用

目的在离体大鼠心肌缺血一再灌注模型中，检测常温下心肌缺血-再灌注损伤后TRPM7的表达水平变化以及治疗性浅低温（34qc）在心肌缺血-再灌注中对TRPM7的影响及其与P13K通路的关系。方法SPF清洁级健康成年雄性SD大鼠108只，随机分为六组，每组18只，SHAM组：正常大鼠组；UR组：37℃灌流液灌流大鼠心脏30min，缺血30min，37℃灌注液再灌注120min；VR＋2-APB组：37℃灌流液灌流30rain，缺血30min，灌注液中加2-APB后行37℃灌注液再灌注120min；34H＋I／R组：37℃灌流液灌流30min，缺血30min，34℃灌注液再灌注120min；34H＋L／R＋WORT组：37℃灌流液灌流30rain，缺血30min，在灌注液加womannin后行34℃灌注液再灌注120min；34H＋L／R＋2-APB组：37℃灌流液灌流30min，缺血30min，在灌注液中加2-APB后行34℃灌注液再灌注120min。以压力换能器连接Medlab生物信号采集系统记录平衡灌流30rain末（哟，基础值），再灌注30min（T1），60min（T2），90min（T3），120min（T4）各时间点的心率（HR）、左心室收缩压（LVSP）、左心室舒张末压（LVEDP）、左心室内压上升／下降最大速率（±do／dtmax）。在再灌注120min末，取心脏进行HE染色观察心肌损伤，WesternMot测定TRPM7蛋白含量，并测定TTC染色后的心肌梗死面积。结果UR组TRPM7的表达量升高（P〈0．05），心肌梗死面积明显增多（P〈0．05）；L／R＋2-APB组与SHAM组和I／R组比较，TRPM7表达量明显减少（P〈0．05），心肌梗死面积与I／R组比较明显减少（P〈0．05）；34H＋VR组TRPM7的表达量与SHAM组和UR组相比明显减少（P〈0．05），心肌梗死面积与L／R组相比明显减少（P〈0．05）；34H＋I／R＋WORT组TRPM7表达量与34H＋L／R组相比增多（P〈0．05），心肌梗死面积与34H＋L／R组相比有所增加（P〈0．05）；34H＋L／R＋2-APB组TRPM7表达量与34H＋∥R组相比差异无统计学意义（P〉0．05），与34H＋L／R＋WORT组相比其TRPM7表达量减少（P〈0．05）；34H＋VR＋2-APB组心肌梗死面积与34H＋L／R组相比差异无统计学意义（P〈0．05），与34＋I／R＋WORT组相比，其心肌梗死面积减小（P〈0．05）。各组之间血流动力学变化差异无统计学意义（P〈0．05）。结论在离体心肌缺血-再灌注模型中，心肌缺血-再灌注损伤时TRPM7蛋白呈现高表达；治疗性浅低温（34℃）可以抑制心肌缺血一再灌注中TRPM7的高表达，并且这种保护作用是通过P13K通路介导产生的。

电针对心肌缺血细胞G蛋白信号通路的影响

目的:分析电针对缺血心肌细胞G蛋白信号通路的影响,揭示电针抗心肌缺血的分子作用途径。方法:健康SD雄性大鼠20只,随机分为正常组、模型组、电针正常“神门”组、电针模型“神门”组,每组5只。采用冠状动脉结扎法复制心肌缺血模型,然后电针“神门”穴,予以1.3 mA、2 Hz方波刺激,每日1次,3 d后动物麻醉状态下活体取材,用基因芯片技术筛选各组G蛋白及其相关基因。结果:筛选到表达G蛋白15个,通过cAMP或Ca2+途径影响下游基因表达,调节细胞转录和应答。电针“神门”特异性G蛋白2个,主要是G蛋白γ亚型通过cAMP影响下游蛋白激酶Aβ2调节细胞转录。结论:电针抗心肌缺血可以通过调节多种G蛋白影响缺血心肌细胞内的基因表达,从而发挥保护心肌的作用,以Gi和Gq最为重要;心经与心脏间具有相对特异的分子联系途径,可能主要是Gγ和PKAβ2途径。

大鼠心肌缺血再灌注时能量代谢及脂质过氧化变化及复方丹参滴丸的保护作用(英文)

目的 探讨大鼠心肌缺血 再灌注时能量代谢及脂质过氧化变化及复方丹参滴丸的保护作用。方法 采用Langendorff离体心脏灌流技术 ,制备心肌缺血再灌注损伤模型 ,分别在缺血前预灌时及缺血后再灌注时用复方丹参滴丸对心肌给予保护 ,观察心肌能量代谢及脂质过氧化 (LPO)变化。本实验共分 4组 ,正常对照组 ,单纯缺血再灌注组 ,复方丹参滴丸前保护组 ,复方丹参滴丸后保护组。结果 ①心肌缺血 4 0min再灌注 2 0min ,心肌组织内高能磷酸化合物明显减少 ,脂质过氧化物含量明显增多 ,与正常对照组比P <0 .0 1。②在缺血前预灌注时及缺血后再灌注时加入复方丹参滴丸 ,心肌组织中的高能磷酸化合物均高于单纯缺血再灌注组 (P <0 .0 1) ,两组ATP、TAN均接近正常水平 (P >0 .0 5 )。两组的LPO低于单纯缺血再灌注组 ,复方丹参滴丸前保护组的LPO与对照组比无明显差别 (P >0 .0 5 )。结论 心肌缺血 4 0min再灌注 2 0min ,心肌能量代谢障碍 ,脂质过氧化反应增强 ,大鼠心肌发生缺血再灌注损伤。复方丹参滴丸在缺血前预灌注时与缺血后再灌注时给予均可通过增加心肌能量储备 ,抑制脂质过氧化物的生成而保护心肌。

冠状动脉造影正常而心电图有心肌缺血改变者的相关冠状动脉血流储备功能减低

目的 :观察临床上心电图长期有心肌缺血改变但冠状动脉 (冠脉 )造影完全正常者的冠脉血流储备情况。方法 :临床上冠脉造影完全正常者 33例 ,以心电图有无缺血性ST T改变 (ST水平型或下斜型压低≥ 0 0 5mV或成组导联T波深倒置 )分为两组。甲组 17例 ,心电图有ST T改变 ,乙组 16例 ,无ST T改变。采用冠脉内多普勒导丝血流速度测定的方法计算冠脉血流储备 ,并对两组受试者的冠脉微血管病危险因素做比较分析。结果 :甲组心电图示前壁心肌缺血者的前降支血流储备以及下壁心肌缺血者的右冠脉血流储备值显著低于乙组( 2 16± 0 48vs .2 92± 0 5 2 ,P =0 0 0 2及 2 2 7± 0 5 1vs .3 40± 0 6 3,P <0 0 0 1) ,有显著性差异 ;甲组中有 14例( 82 35 % )存在冠脉血流储备的异常 ,乙组中仅有 2例 ( 12 5 0 % )存在异常 ;甲组 17例中有 13例 ( 76 47% )有冠脉微血管病基础 ,而乙组 16例中仅有 5例 ( 31 2 5 % )有冠脉微血管病危险因素 ,两组差别有统计学意义 (P =0 0 35 )。结论 :冠脉造影正常而心电图有心肌缺血改变者中 82 35 %的患者存在相关冠脉血流储备异常 。

老年2型糖尿病无症状心肌缺血患者心电学分析

目的:探讨老年2型糖尿病无症状心肌缺血(SMI)患者的心电学特点。方法:随机选择24 h动态心电图检测的老年单纯2型糖尿病患者70例(Ⅰ组)、2型糖尿病合并SMI患者55例(Ⅱ组)及健康老年对照者50例(Ⅲ组),对比Ⅰ组和Ⅱ组心律失常情况,并对其室性早搏发生部位进行分析,对比3组心率变异性(HRV)时域指标[24 h窦性R-R间期均值标准差(SDNN)、5 min窦性R-R间期均值标准差(SDANN Index)、5 min窦性R-R间期标准差的均值(SDNN Index)、24 h R-R连续差异均方的平方根(rMSSD)和相邻窦性R-R间期差值>50 ms的百分比(PNN50)]。结果:Ⅰ组和Ⅱ组房性早搏(χ2=0.509,P=0.475)、房性心动过速(χ2=0.086,P=0.769)发生率比较,差异无统计学意义;但室性早搏(χ2=9.478,P=0.002)、室性心动过速(χ2=2.458,P=0.117)发生率比较,差异有统计学意义。Ⅱ组左心室前壁及心尖部室性早搏发生率高于Ⅰ组(χ2=9.943,P=0.002)。3组HRV时域指标SDNN、SDANN Index、SDNN In-dex、rMSSD和PNN50比较,差异均有统计学意义(F为20.126、23.151、14.356、17.407和8.181,P均<0.05);且Ⅱ组rMSSD、PNN50与Ⅲ组比较,差异亦有统计学意义(P均<0.05)。结论:老年2型糖尿病SMI患者室性心律失常发生率增高,HRV降低,左心室前壁及心尖部室性早搏发生率高于单纯老年2型糖尿病患者。

抗TNF-α中和抗体通过升高脂联素水平减轻小鼠心肌缺血/再灌注损伤的作用

目的:阐明心肌缺血/再灌注(MI/R)时,脂联素(APN)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的关系,以及使用中和抗体阻断TNF-α可否提高血浆APN,进而发挥心肌保护作用。方法:96只成年雄性C57小鼠和36只ob/ob小鼠均采用30 min缺血/再灌注(I/R)建立MI/R模型。96只C57小鼠分为假手术组、手术+盐水对照组及手术+抗TNF-α中和抗体治疗组(n=32);36只ob/ob小鼠分为ob/ob假手术组、ob/ob手术+盐水对照组及ob/ob手术+抗TNF-α中和抗体治疗组(n=12)。假手术或缺血20 min后,腹腔注射给予单次抗TNF-α中和抗体或盐水干预。分别采用ELISA检测TNF-α与APN血浆水平;小鼠心脏超声评估心脏LVEF;伊文氏蓝/TTC染色检测心脏梗死面积;以及TUNEL/Caspase-3活性检测观察心肌细胞凋亡。结果:血浆ELISA测定发现,MI/R后,小鼠血浆TNF-α水平在再灌后1 h即显著升高,后缓慢下降。注射抗TNF-α中和抗体可在再灌后1 h即中和TNF-α(P<0.01),同时在再灌注3 h、8 h、1 d及3 d后4个时间点,较给予盐水对照显著升高血浆APN(P<0.01)。通过小鼠心脏超声、伊文氏蓝/TTC染色和TUNEL/Caspase-3活性检测发现,与给予盐水的对照相比,腹腔注射抗TNF-α中和抗体可提高小鼠的心肌功能(P<0.05)、减少梗死面积(P<0.01)及心肌细胞的凋亡(P<0.01)。而在ob/ob小鼠中,通过以同样的实验方法证实,单次注射抗TNF-α中和抗体已不能提高血浆APN的含量,其减轻心肌损伤的作用同样被显著削弱,但给予APN球状片段仍可发挥心肌保护作用。结论:以抗TNF-α的中和抗体阻断TNF-α可逆转MI/R后血浆APN的降低并发挥心肌保护作用,提示抗TNF-α中和抗体发挥的心肌保护作用可能部分通过提高APN实现。

参芪提取物对大鼠急性心肌缺血保护作用的实验研究

目的:观察参芪提取物对注射垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血的保护作用。方法:选取健康Wistar大鼠50只,随机分为模型组,硝酸甘油组,参芪提取物高、中、低剂量组。给药3天后1小时,记录正常Ⅱ导联心电图,然后尾静脉注射垂体后叶素复制急性心肌缺血模型,描记注射后即刻、30秒、1分钟、4分钟、8分钟的心电图,比较注射垂体后叶素前后各组大鼠的T波、J点及心率等指标的变化。结果:参芪提取物能明显降低急性心肌缺血大鼠心电图J点和T波的抬高,对抗垂体后叶素引起的心率减慢。结论:参芪提取物对大鼠急性心肌缺血具有一定的保护作用。

伟哥对长期服用硝酸盐类药物对冠心病患者性行为中的心肌缺血症状的控制效力

勃起功能障碍患者中有很多同时合并冠心病。由于一直以来硝酸盐药物治疗对西地那非的使用是一种禁忌症，Rosano等进行了一项评估代谢性抗缺血药物——1，3甲氧苄嗪对长期接受硝酸盐治疗的冠心病患者性活动中的心肌缺血发生的影响。研究人选38例冠心病男性患者（年龄：57±6岁）。

急性心肌缺血对心脏神经节、心房、心室肌表达乙酰胆碱和孤啡肽的影响

目的：观察心脏神经节分布特征以及心脏神经节细胞，心房和心室肌表达乙酰胆碱（ACh）和孤啡肽（0FQ）的特性及结扎冠状动脉左前降支对其影响。方法：将大鼠随机分为对照组（sham组）和结扎冠状动脉组（CAO组）。于扎闭冠脉或者冠脉下穿线30min取心脏标本。采用HE．尼氏（Nissl）染色法、免疫荧光标记技术和酶联免疫吸附法（ELISA）检测分析神经节分布和ACh和OFQ的变化。结果：心脏神经节多见于心房脂肪垫内，大血管周围脂肪组织内、心房肌间．偶见于心室肌闻。神经节细胞呈强嗜碱性．被卫星细胞包绕，分别表达．共表达ACh和OFQ。CAO组ACh和OFQ共表达细胞数量增加13．5％．表达OFQ细胞增加4．3％．表达ACh细胞减少19．2％；神经节细胞．心房肌和心室肌OFQ荧光光密度分别增加22％、59％和27％（P〈0．01）；ACh荧光光密度分别降低28％、44％和36％（P〈0．01）。ELISA结果显示．结扎冠脉后30min，心房和左心室OFQ含量增加而ACh含量降低（P〈0．05）。结论：乙酰胆碱和孤啡肽表达于心脏神经节细胞和心房、心室肌．可能共同参与了急性心肌缺血早期病理过程。

冠状动脉起源异常与心肌缺血的关系

目的应用64排128层螺旋CT进行冠状动脉成像检查,检出冠状动脉起源异常的病例,分析其与心肌缺血的关系。方法收集整理我院2010年1月-2014年5月在我院行64排128层CT冠状动脉成像检查的病例,共3231例,其中冠状动脉起源异常的病例27例,男17例,女10例,其发生率占0.83%。结果有27例冠状动脉起源异常,右冠状动脉起源异常20例,占异常比例为74.07%,以起源在左冠状窦为主,有17例,左冠状动脉起源异常6例,占22.22%,起源左右冠状窦5例,起源于肺动脉1例,多发异常1例。结论单纯性冠状动脉起源于主动脉,在不合并冠状动脉狭窄及斑块等病变的,通常不引起心肌缺血改变,起源于肺动脉,有心肌缺血改变。

心肌缺血再灌注对心脏合成一氧化氮影响的临床研究

从临床角度出发，观察体外循环心内直视手术中心肌缺再灌注对心脏合成一氧化氮水平的影响。选用的病例为单纯室缺患者（ｎ＝１４）。在体外循环心内手术中，分别于阻断主动脉前，开放主动脉后１ｍｉｎ，５ｍｉｎ，２０ｍｉｎ，采取主动脉根部血液，冠状静脉窦血液。镀铜镉法测定血样中的ＮＯ２－／ＮＯ３－浓度。用同一采血时点的冠状静脉窦～主动脉根部血液中ＮＯ２－／ＮＯ３－浓度差代表该时点心脏合成一氧化氮水平。实验结果表明，与阻断主动脉前相比，开放主动脉后１ｍｉｎ心脏合成一氧化氮水平即显著降低（０．０１＜Ｐ＜０．０５）。与开放主动脉后１ｍｉｎ相比，开放主动脉后５ｍｉｎ进一步显著降低（０．０１＜Ｐ＜０．０５），并持续发展至开放主动脉后２０ｍｉｎ。说明病人心脏在心肌缺血再灌注后心脏合成一氧化氮水平是明显下降的。提示心肌缺血现灌注严重损伤冠状动脉内皮细胞功能。

二肽基肽酶4及其生理底物在心肌缺血再灌注损伤中的作用

心肌缺血再灌注损伤(MIRI)发生在体外循环心内直视手术、心血管介入和溶栓等治疗后,是导致治疗后患者心功能不全、心力衰竭甚至死亡的最主要原因。近年来研究发现,内源性活性肽的释放可以缓解MIRI的产生,通过调节内源性肽的功能和作用可能是治疗MIRI最有效的途径之一。二肽基肽酶4(DPP4)是哺乳动物体内重要的丝氨酸蛋白酶,具有水解内源性肽的酶活性,其在体内的功能作用主要是代谢体内的短肽,包括生长因子、激素等。该综述通过阐述DPP4对内源性肽的水解作用在MIRI中的影响,旨在更好地认识并寻找有效的治疗靶点,最终为MIRI的治疗作用提供新的思路。

JNK抑制剂对缺血/再灌注大鼠心肌梗死面积及心功能的影响

目的观察JNK丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)特异性阻断剂SP600125对大鼠心脏缺血/再灌注(I/R)损伤后心肌梗死面积和收缩功能的影响,探讨阻断该信号转导通路减轻梗死面积及心功能I/R损伤的作用及机制。方法30只健康成年SD大鼠被随机分成5组,每组6只。用穿线结扎冠状动脉前降支(LAD)30min、复灌180min造成心肌I/R损伤动物模型。SP6001253个剂量组在松开结扎前5min和再灌注过程中分次静脉给予SP600125总剂量分别为4.7,14.4,47.9mg/kg;假手术组、模型组相同时间给予等量生理盐水。观察左心室收缩压(LVSP)、左心室等容期压力最大变化速率(±dp/dtmax)和左心室发展压(LVDP′)等血流动力学指标,并计算心肌梗死及缺血危险区面积。结果SP600125使I/R心肌损伤减轻,缩小梗死面积,在整个I/R期,SP600125组LVSP、±dp/dtmax和LVDP′的变化值均明显小于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论SP6001253个剂量组均能改善大鼠心肌梗死面积及心脏I/R引起的心脏收缩功能。

HQS对大鼠实验性缺血损伤心肌的保护作用

目的:观察黄芩素(HQS)对冠脉结扎所致的大鼠缺血心肌的保护作用。方法:将60只大鼠随机分为假手术组10只及造模组50只,造模组大鼠麻醉开胸后结扎冠状动脉左前降支复制急性心肌梗死模型。手术后将造模成功的大鼠随机分为5组,假手术组和模型组静脉注射氯化钠注射液5 mL/kg,阳性对照组静脉注射硝酸甘油(nitroglyccrin,NG)0.3 mg/kg,受试药高、中、低剂量组分别给HQS 160 mg/kg、80 mg/kg、40 mg/kg。于冠脉结扎前、结扎后及给药后不同时间点监测心电图,标测ST段和T波(ST—T);于冠脉结扎6 h后行心肌氯化硝基四氮唑蓝(NBT)染色,测定心肌梗死重量。结果:不同剂量HQS可不同程度地降低S点位移、减轻心肌梗死重量。结论:黄芩素对冠脉结扎致大鼠急性心肌缺血损伤具有良好的保护作用,为中药抗心肌缺血损伤提供思路。

缺血预适应影响缺血心肌钙稳态的分子学机制

目的:从调控钙稳态,了解α1受体在大鼠缺血心肌中发挥效应的机制。方法:Langendorff灌流模拟心肌缺血。实验组分为缺血前用苯肾上腺素(phehylephine)亚组(称为A组)和缺血前用哌唑嗪(prazosin)亚组(称B组),使用免疫组化与生化技术观察Bcl-2、胞浆钙、线粒体钙的变化。结果:A组[Ca2+]c(胞浆钙浓度)为(5.7±1.5)nmol/mg pro.(毫克蛋白)、[Ca2+]m(线粒体钙浓度)为(8.2±2.2)nmol/mg pro.,B组的[Ca2+]c为(9.2±1.4)nmol/mg pro.、[Ca2+]m为(22±2.6)nmol/mg pro.,A组的[Ca2+]c和[Ca2+]m均较B组明显降低(P<0.01)。缺血前激活α1受体,缺血时Bcl-2表达(50.9±9)‰。结论:α1受体通过影响Bcl-2表达,改变胞膜、内质网线粒体Ca2+活性,参与调控心肌细胞的钙稳态。

黄芩苷对缺氧缺糖性心肌细胞的保护作用

目的 :探讨黄芩苷对缺氧缺糖性心肌细胞的影响。方法 :取SD乳鼠的心脏 ,经消化 ,分离及纯化制成心肌细胞悬液并接种至 2 4孔培养板中 ,通过缺氧缺糖 ,建立心肌细胞“缺血性”损伤的实验病理模型 ,在此基础上观察黄芩苷对缺氧缺糖心肌细胞形态及细胞内SOD、MDA水平及NO分泌的影响。结果 :0 1～ 10 μg/ml的黄芩苷可显著提高缺氧性心肌细胞中SOD活性 ,10 μg/ml的黄芩苷显著抑制MDA的生成 ,1μg/ml黄芩苷显著增加NO分泌 ,10 μg/ml黄芩苷又抑制NO分泌。 结论 :黄芩苷对缺氧缺糖性心肌细胞损伤具有一定的保护作用。