仓鼠心肌肥厚模型的建立及左心室Chymase、ACE基因表达的检测

目的观察仓鼠心肌肥厚模型的心肌Ｃｈｙｍａｓｅ及ＡＣＥ基因表达的变化。方法：取８周龄仓鼠，行腹主动脉部分结扎术，分别于术后４周、８周处死仓鼠，取心称重并测量心肌壁厚度。采用以β－ａｃｔｉｎ作参照的ＲＴ－ＰＣＲ法对Ｃｈｙｍａｓｅ及ＡＣＥ基因表达进行检测。结果：显示手术组心重／体重比值及心肌壁厚度明显大于假手术组（Ｐ＜０．０１），表明模型构建成功。手术组动物Ｃｈｙｍａｓｅ基因表达水平随手术后时间的延长有明显增加趋势，手术４周及８周后其表达水平分别增加了２．６倍及１２．６倍；而ＡＣＥ基因表达水平手术后无明显变化。上述结果显示：本文所建心肌肥厚模型中其心肌肥厚的变化可能主要与Ｃｈｙｍａｓｅ基因表达增加有关。提示：Ｃｈｙｍａｓｅ与ＡＣＥ基因相比前者表达在心肌肥厚中起着更重要的作用。

经胸骨上窝小鼠心肌肥厚模型建立

心肌肥厚模型目前有药物诱导、转基因及主动脉缩窄等，主动脉缩窄为最常用。我们通过胸骨上窝利用钽夹部分夹闭主动脉弓的方法使其模型形成时间相对固定，成功率得到提高，肥厚程度可控，模型制备相对简单，现报道如下。

高血压大鼠心肌肥厚模型及心衰模型的建立

目的探索高血压心肌肥厚模型建立及高血压大鼠心衰模型的建立的方法。方法将30只SD大鼠随机分为三组:假手术组(n=10)、高血压心肌肥厚组(n=10)、高血压心衰组(n=10)。假手术组:腹腔麻醉,沿中线切开腹腔后,于右肾上方分离长约3mm腹主动脉,不结扎腹主动脉。高血压心肌肥厚组:腹腔麻醉,沿中线切开腹腔,于右肾上方分离长约3mm腹主动脉,穿线结扎,拔出针管,制备腹主动脉缩窄模型。高血压心衰组:腹主动脉缩窄术后四周大鼠进行左冠状动脉结扎术。结果高血压心衰组大鼠出现心腔扩大、心功能减退,LVEDD、LVESD均较高血压心肌肥厚组和假手术组明显增大(P<0.05);LVEF均降低(P<0.05)。高血压心肌肥厚组较假手术组无明显心腔扩大,LVEDD、LVESD、LVEF均无显著变化,但存在舒张功能的下降。病理切片显示:假手术组心肌纤维排列整齐,横纹清晰,细胞间质丰富,间隙正常。高血压心肌肥厚组:心室无明显扩大,心肌细胞增粗肥大,排列紊乱,间质水肿。高血压心衰组:心室明显扩大,心肌细胞增粗肥大,排列紊乱,间质水肿。结论腹主动脉缩窄术建立高血压大鼠肥厚模型及腹主动脉缩窄术联合左冠状动脉结扎术建立高血压心衰模型成功率高,但创伤大。

Peroxiredoxin Ⅲ在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化

目的：探讨Peroxiredoxin Ⅲ（PrxⅢ）在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化。方法：雄性SD大鼠随机分为假手术对照组和模型组，模型组大鼠实施腹主动脉缩窄术，制备压力超负荷心肌肥厚模型。分别于术后24h，2、4、6周，测定血液动力学变化；称量心体质量；光镜和电子显微镜观察左心室的组织变化；提取左心室RNA，RT-PCR分析PrxⅢ的表达变化。结果：术后24h两组大鼠的血液动力学和心肌形态无明显变化。术后2、4、6周时，模型组大鼠的SBP、DBP、LVSP、LVED及左心室体质量指数逐渐增加，心肌纤维逐渐增粗，线粒体逐渐增多，肌节增长。术后24h PrxⅢ的表达稍有降低，但无统计学意义，2周时则明显降低，4周有所上升但仍低于对照，6周时明显上升且高于对照组。结论：PrxⅢ mRNA表达呈现先降低后增高的趋势，即在心肌肥厚中早期表达降低，而在心肌肥厚形成后表达明显升高，表明PrxⅢ参与了超负荷心肌肥厚的发生。

伊贝沙坦联合培哚普利治疗对压力负荷性心肌肥厚大鼠心肌钙调神经磷酸酶及钙泵的影响

目的初步探讨钙调神经磷酸酶、钙泵和血管紧张Ⅱ素在大鼠压力负荷性心肌肥厚中的变化及伊贝沙坦和培哚普利联合应用对它们的影响。方法40只雄性SD大鼠随机分为5组,每组8只。除假手术组外,其余4组大鼠采用腹主动脉部分结扎法造成压力负荷性心肌肥厚模型,术后1周分别用下列药物开始灌胃:假手术组生理盐水2mL/kg.d,对照组生理盐水2mL/kg.d,伊贝沙坦组(20mg/kg.d)、培哚普利组(2mg/kg.d)及联合用药组(培哚普利2mg/kg.d,伊贝沙坦20mg/kg.d)。用药6周后测量左室质量指数(LVMI)、血浆和心肌AngⅡ、心肌钙调神经磷酸酶及钙泵活性的变化。结果联合用药组LVMI((2.14±0.12)显著低于对照组(2.99±0.16)及单用伊贝沙坦(2.36±0.13)或培哚普利组(2.39±0.16)(P<0.05),伊贝沙坦组血浆AngⅡ(伊贝沙坦:630±50.7比假手术:309±29.9,对照:310±36.8,培哚普利:288±36.9,联合用药:327±46.1,P<0.05)及心肌AngⅡ(伊贝沙坦:7.15±0.50比假手术:3.11±0.93,对照:5.04±0.35,培哚普利:3.21±0.34,联合用药:3.31±0.36,P<0.05)显著高于其他组,各用药组钙调神经磷酸酶活性显著低于对照组(假手术:0.44±0.04,培哚普利:0.51±0.05,伊贝沙坦:0.51±0.03,联合用药:0.49±0.04比对照:0.61±0.03,P<0.05),对照组心肌肌浆网钙泵活性显著降低(对照:3.6±0.69比假手术:6.85±0.88,培哚普利:4.51±0.58,伊贝沙坦:4.45±0.55,联合用药:5.63±0.61,P<0.05),联合用药组可明显增加钙泵活性至正常。相关分析显示LVMI与CaN呈显著正相关(r=0.80,P<0.01),与钙泵活性呈负相关(r=-0.726,P<0.01)。结论伊贝沙坦升高心肌AngⅡ而培哚普利对其无影响,两者均能降低心肌钙调神经磷酸酶活性,升高心肌钙泵活性,联合应用更有利于改善心肌肥厚。

三七总皂苷对异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚的保护作用

目的研究三七总皂苷(PNS)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)所致大鼠心肌肥厚的保护作用。方法5mg/kg.d连续7d建立大鼠心肌肥厚模型。造模第二天开始ipPNS25和50mg/kg.d连续14d,测定全心重量指数(HW/BW)、左心室重量指数(LVW/BW即LVI);采用试剂盒用分光光度法检测左心室心肌组织中羟脯氨酸(Hyp)和一氧化氮(NO)含量,及Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性;用放免分析法检测左心室心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量。结果ISO模型组大鼠的HW/BW、LVI明显升高;左心室Hyp、AngⅡ含量增高,NO水平下降,Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性降低。PNS能明显提高心肌组织NO水平及Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性,降低胶原的含量,抑制AngⅡ产生,使HW/BW及LVI下降,抑制心肌肥厚。结论PNS对ISO所致大鼠心肌肥厚具有保护作用。

压力超负荷性心肌肥厚发病机制的研究

目的:探讨α1、β受体阻断剂派唑嗪(Prazosin,Pra)、心得安(Propra-nolol,Pro)及钙离子拮抗剂尼群地平(Nitrendipine,Nit)在压力超负荷性心肌肥厚发病学中的意义。方法:采用Pra、Pro和Nit治疗大鼠腹主动脉缩窄所致左室肥厚(LVH)。结果:Pra和Nit能抑制早期肥厚心肌c-fosmRNA表达,6周后Pra组和Nit组较LVH组之BP,LVW/BW均显著下降,同时心脏舒张功能改善,Na+-K+ATPase活性增强;而Pro不能有效改善LVH。结论:Pra和Nit治疗成功预防了心肌肥厚的发生,而Pro不能。提示儿茶酚胺参与压力超负荷性心肌肥厚的形成,其效应不仅涉及后负荷的高低,也可通过α1肾上腺素能受体而不是β肾上腺素能受体对心肌产生直接性致肥大作用,同时钙离子可作为第二信使参与引起心肌细胞肥大的信息传递。

整合素β1在异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚组织中的表达

目的观察心肌肥厚大鼠心肌组织中整合素β1的表达变化。方法在大鼠背部皮下分别注射7 d、28 d和56 d异丙肾上腺素(ISO),判定心肌肥厚指标,利用免疫组织化学和免疫印迹技术,观察整合素β1在肥厚左心室肌中的表达。结果免疫组化和Western blot结果显示,整合素β1主要表达于心肌细胞膜。与对照组相比,实验各组大鼠的心肌组织的整合素β1表达明显(P<0.05)。7 d、28 d和56 d各组间相比其表达含量逐渐增强。结论在心肌肥厚状态下,心肌细胞中的整合素β1表达增高,随着心肌肥大的进展其表达逐渐增加,提示整合素β1在心肌肥厚发生发展起重要作用。

心肌肥厚的PTEN负性调控与卡托普利干预对其影响的实验研究

目的检测异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心肌肥厚大鼠PTEN mRNA、蛋白水平表达及卡托普利(captopril,Cap)对其表达的影响,从而探讨PTEN的负性调控在心肌肥厚中的作用。方法24只大鼠随机分为对照组、ISO组、Cap+ISO组。利用小剂量ISO持续背部皮下注射大鼠,建立心肌肥厚模型。在观察期末,分别测定各组大鼠体重、心脏湿重、左室湿重,计算出心脏重量/体重及左室重量/体重;电镜观察超微结构的变化,并测定左室收缩末压、左室舒张末压、左心室压力上升及下降最大速率等指标。RT-PCR测定心肌组织PTEN mRNA,Western blot测定其蛋白表达。结果(1)与对照组比较,ISO组、Cap+ISO组的左室重量/体重、心脏重量/体重、左室收缩末压、左室舒张末压均升高(P≤0.05),左室压力上升及下降最大速率(±dp/dtmax)均下降(P≤0.05)。(2)与ISO组相比,Cap+ISO组的左室重量/体重、心脏重量/体重、左室收缩末压、左室舒张末压均下降(P≤0.05,P≤0.01),左室压力上升及下降最大速率(±dp/dtmax)均升高(P≤0.05,P≤0.01)。(3)与对照组比较,ISO组、Cap+ISO组的PTEN mRNA、蛋白表达均增加。(4)与ISO组比较,Cap+ISO组的PTEN mRNA、蛋白表达增加。结论ISO诱导心肌肥厚PTENmRNA、蛋白表达升高,心肌肥厚过程中存在负性调控,PTEN是一种内源性抑制心肌肥厚的重要因子。卡托普利不仅能明显抑制心肌肥厚,改善血液动力学参数,而且还能上调心肌PTEN水平,这是其抑制心肌肥厚的又一机制。

技术

哈医大发现病理性心肌肥厚治疗潜在靶点 日前，哈尔滨医科大学药理学教授董德利在国际上首次发现一种参与骨和软骨生长发育的蛋白——骨成型蛋白-4与病理性心肌肥厚的形成关系密切。此蛋白不但在病理性心肌肥厚模型腿表达增高，而且可诱导心肌肥厚和心肌纤维化。