心肌肽通过HIF-1a/NLRP3信号通路减轻脂多糖诱导的心肌细胞损伤实验研究

目的探究心肌肽(cardiomyopeptide,Car)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及可能的机制。方法CCK-8法测定不同浓度(0、20、40、60、80 mg/L)和处理时间(0、1、3、6、12 h)下,心肌肽对H9c2心肌细胞存活率的影响,以确定心肌肽处理细胞的最适浓度和最佳时间。将心肌细胞分为4组:对照组、Car组、LPS组和Car+LPS组。CCK-8法测定H9c2心肌细胞存活率,实时聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、NLRP3、GSDMD、半胱氨酸蛋白酶1(caspase1)、白细胞介素(interleukins,IL)-1β和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis fac⁃tor-α,TNF-α)的表达量。结果20、40、60 mg/L Car浓度对正常心肌细胞活性无明显影响。与对照组相比,LPS组H9c2心肌细胞HIF-1α、NLRP3、GSDMD、caspase-1、IL-1β和TNF-α的表达量均显著增加;与LPS组相比,Car+LPS组心肌细胞HIF-1α、NLRP3、GSDMD、IL-1β和TNF-α的表达量均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);caspase-1表达量下降,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Car能够保护LPS损伤的心肌细胞,其机制可能与抑制HIF-1α/NLRP3信号通路、降低炎症反应、改善心肌缺氧状态有关。

心肌肽素对大鼠心脏缺血-再灌注损伤的预防作用

目的 :研究小分子多肽类物质心肌肽素对大鼠心脏缺血 再灌注损伤的预防作用。方法 :在大鼠冠脉结扎致心肌缺血 再灌注损伤模型上 ,观察心肌肽素预防性给药对缺血大鼠血浆中肌酸磷酸激酶 (CPK)、乳酸脱氢酶 (LDH)活性及脂质过氧化物终产物 (MDA)含量的影响。结果 :心肌肽素预防性给药能明显降低血浆CPK ,LDH的活性与MDA含量 ,其作用具有明显的量效关系。结论 :心肌肽素对心脏缺血 再灌注损伤有预防作用 ,这可能与其减少心肌酶的释放及抗心肌脂质过氧化有关。

心肌肽素抗心律失常作用及对钙和钾离子通道的影响

目的 :观察心肌肽素对室速、室颤发生率及心室肌细胞钙、钾电流的影响。方法 :建立整体动物心肌缺血 -再灌流损伤模型。以膜片钳技术记录单个心室肌细胞内向钙电流及电流 -电压曲线、内向整流钾电流及延迟整流钾电流。结果 :心肌肽素可降低室速、室颤发生率 ,在一定浓度下对心肌细胞内向钙电流有明显的抑制作用 ,且该作用具有一定的电压依赖性 ,而对内向整流钾电流及延迟整流钾电流均无作用。结论 :心肌肽素能降低缺血 -再灌流损伤大鼠严重室性心律失常的发生率 。

心肌肽素对缺血-再灌流损伤大鼠离体心脏的影响

为研究小分子多肽类物质心肌肽素抗心肌缺血 -再灌流损伤作用 ,在大鼠离体 L angendoff's心脏缺血 -再灌流损伤模型上 ,观察心肌肽素对室颤 (VF)发生率及心肌生化指标的影响。结果发现 :心肌肽素能明显降低离体缺血 -再灌流损伤心脏 VF的发生率 ;剂量依赖性地降低心肌乳酸脱氢酶 (L DH)活性和丙二醛(MDA)含量 ;提高心肌肌酸磷酸激酶 (CPK)活性。提示心肌肽素对缺血 -再灌流损伤心肌有保护作用 。

心肌肽素对大鼠心脏缺血-再灌注损伤的治疗作用

目的 :研究多肽类物质心肌肽素对大鼠心脏缺血 -再灌注损伤的治疗作用。方法 :在大鼠冠脉结扎致心肌缺血 -再灌注损伤模型上 ,观察心肌肽素治疗性给药对缺血大鼠血浆中肌酸磷酸激酶 (CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性及脂质过氧化终产物 (MDA)含量的影响。结果 :心肌肽素治疗性给药能明显降低血浆CPK、LDH的活性与MDA含量 ,其作用具有明显的量效关系。结论 :心肌肽素对心脏缺血 -再灌注损伤有治疗作用 ,提示可能与其抗脂质过氧化和影响心肌酶的活性有关。

心肌肽素在心脏手术中对心肌的保护作用的临床研究

目的:考察心脏瓣膜替换术和冠状动脉旁路移植术(CABG)患者在体外循环停跳液中使用心肌肽素的安全性及对心肌的保护作用。方法:选择心脏瓣膜替换术患者44例(瓣膜替换组,又随机分为对照患者、用药患者各22例),CABG患者65例(CABG组,又随机分为对照患者33例、用药患者32例)。2组用药患者在麻醉后,静脉滴注心肌肽素1 mg/kg,30分钟给药完毕;第1次灌注时在停跳液中一次性加入心肌肽素2 mg/kg。2组对照患者给予相应的甘露醇。观察围术期血流动力学,心肌组织形态学,心肌酶学及肌钙蛋白含量的变化。结果:所有受试患者均顺利完成试验,未见明显不良反应,均康复出院。CABG组心肌组织形态学:用药患者在用药前心肌组织病变分值较对照患者显著升高(P<0.01),而用药后较对照患者显著降低(P<0.01);用药患者体外循环后心肌组织病变分值较体外循环前显著降低(P<0.01);而对照患者体外循环后心肌组织病变分值较体外循环前显著升高(P<0.01)。瓣膜替换组心肌组织形态学:体外循环前心肌组织病变分值用药患者虽高于对照患者,但无统计学意义;体外循环后用药患者显著低于对照患者(P<0.01);体外循环后对照患者心肌组织病变分值较体外循环前显著升高(P<0.01),用药患者虽有降低,但无统计学差异(P>0.05)。结论:心肌肽素在心脏瓣膜替换术和CABG患者体外循环停跳液中使用是安全的,而且对心肌有一定保护作用。

注射用心肌肽对幼鼠离体心脏缺血再灌注能量代谢的影响

目的:探讨注射用心肌肽对幼鼠离体心脏缺血再灌注能量代谢的影响及机制。方法:50只SD幼鼠,随机分为5组(n=10),正常对照组:心脏灌流20min稳定后,再持续灌注150min;正常+注射用心肌肽组:同正常对照组,但在灌流液中加入注射用心肌肽50mg/L;模型对照组:心脏灌流20min稳定后,停搏液停搏(缺血)90min,再恢复正常灌流(再灌注)60min,建立心肌缺血再灌注损伤模型,灌流用K-H缓冲液,停搏用ST.Thomas’II停搏液;注射用心肌肽1组(CMP1组):停搏液加入注射用心肌肽100mg/L;CMP2组:灌流液加入注射用心肌肽50mg/L及停搏液加入注射用心肌肽100mg/L)。监测不同组离体灌流心脏心率(HR)、收缩力(△T)及最大收缩速度(+dT/dtmax)和最大舒张速度(-dT/dtmax)、冠状动脉流量(CF)、复搏时间,透射电镜观察缺血再灌注损伤模型组中幼鼠心肌组织超微结构改变。进一步检测3个缺血再灌注损伤组冠状动脉流出液中肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量的变化,心肌组织能量及氧化抗氧化代谢指标、丙二醛、NO的含量,检测心肌组织NOS、醛糖还原酶的活性,实时荧光定量PCR相对定量检测心肌组织iNOS,eNOS和Akr1b4mRNA表达。结果:正常对照组离体心脏长时间灌流后心功能无明显变化,注射用心肌肽对正常心脏心功能无明显影响。与模型对照组比较,两个用药组心搏功能下降轻微,冠状动脉流量较好。电镜观察可见模型对照组心肌肌原纤维断裂,线粒体肿胀,而用药组心肌组织结构较完整,线粒体未见明显肿胀变性。再灌注后,模型对照组CK-MB增加。与模型对照组比较,两个用药组的CK-MB含量低,Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶、心肌总ATP酶活性相对较高,超氧化物歧化酶活性也增高,丙二醛、NO含量低,心肌组织NOS、醛糖还原酶的活性下降,iNOS,Akr1b4mRNA表达下调,其中CMP2组改变更为明显(P<0.01或P<0.05)。此外eNOSmRNA表达在CMP2组升高(P<0.05),而在CMP1组中变化无统计学意义(P>0.05)。结论:注射用心肌肽可改善缺血心脏再灌注后的能量代谢,增加冠状动脉流量,提高心功能,对幼鼠未成熟心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,灌流液及停搏液均加入注射用心肌肽对未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用效果更佳。其作用机制可能与抑制心肌细胞iNOS,Akr1b4mRNA表达,减少NO生成,抑制醛糖还原酶的活性有关。

心肌肽素对异丙肾上腺素致损伤大鼠心肌的保护作用

目的：观察心肌肽素对异丙肾上腺素致损伤大鼠心肌的保护作用。方法：在大剂量异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤模型上，观察心肌肽素对心肌形态及脂质过氧化的影响。结果：心肌肽素可明显减轻受损心肌的变性坏死反应和减少炎性细胞浸润，非常显著地降低心肌丙二醛含量、提高心肌超氧化物歧化酶活性。结论：心肌肽素对异丙肾上腺素损伤大鼠心肌有保护作用，这可能与其抗脂质过氧化作用有关。

注射用心肌肽预处理对大鼠未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的:探讨注射用心肌肽预处理对幼鼠未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用,阐明其相应的作用机制。方法:通过结扎SD幼鼠冠状动脉左前降支建立缺血再灌注损伤模型。SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组及注射用心肌肽预处理组(CMP组)。检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白T(Tn-T)和心肌组织匀浆丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(SOD)、总一氧化氮合酶(TNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量,免疫组织化学法检测NOS2(iNOS)、NOS3(eNOS)含量及Caspase-3蛋白表达水平;光学显微镜观察心肌梗死范围,透射电镜检测心肌组织结构改变;TUNEL法观察心肌凋亡细胞。应用实时荧光定量PCR分析心肌组织iNOS、eNOS、Caspase-3mRNA表达。结果:CMP组大鼠LDH、CK-MB、Tn-T含量低于模型对照组(P<0.05或P<0.01),MDA、SOD、TNOS、iNOS含量以及Caspase-3、iNOS表达水平较假手术组增高,但低于模型对照组(P<0.05或P<0.01)。CMP组与模型对照组大鼠比较,坏死(AN)/缺血危险面积(AAR)下降52%(P<0.01),心肌梗死范围缩小。模型对照组大鼠心肌片状出血,炎性细胞浸润,心肌细胞严重变性坏死,心肌细胞凋亡显著;而CMP组心肌细胞变性坏死程度较轻,血管结构正常,心肌凋亡细胞水平介于假手术组和模型对照组之间。结论:注射用心肌肽预处理对大鼠未成熟心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与减少NO生成,抑制心肌细胞Caspase-3mRNA和蛋白表达,从而减少细胞凋亡有关。

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响

目的研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响,探讨心肌肽素在离子通道水平的药理作用机制。方法用急性酶解分离法获得豚鼠心室肌细胞,标准的全细胞膜片钳技术记录L型钙电流(ICa-L)。结果心肌肽素1、5、10、50、100、500 mg.L-1使豚鼠心室肌细胞ICa-L分别增加(5±4)%、(21±5)%、(30±5)%、(55±8)%、(76±11)%、(80±9)%,半最大效应浓度(EC50)为(18±6)mg.L-1。心肌肽素50 mg.L-1使ICa-L激活时间(TTP)从(6.7±0.9)m s缩短为(5.9±0.7)m s(P<0.01);使ICa-L电流密度-电压曲线下移,但激活电压、峰电压和I-V曲线的形状不变;激活曲线向负电压方向变化,半数激活电压从(-4.3±0.4)mV减少至(-8.6±0.4)mV(P<0.05);不影响稳态失活曲线和稳态失活后恢复曲线。结论心肌肽素浓度依赖性增强豚鼠心室肌细胞ICa-L。

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞钠通道的影响

目的:研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞钠通道的影响,探讨心肌肽素在离子通道水平的作用机制。方法:用急性酶解分离法获得豚鼠心室肌细胞,标准全细胞膜片钳技术记录钠电流(INa)。结果:心肌肽素1、5、10、50、100、500 mg/L使豚鼠心室肌细胞INa分别减少(0±1)%、(6±2)%、(10±2)%、(15±1)%、(22±9)%、(30±6)%,呈浓度依赖性抑制INa。心肌肽素50 mg/L使INa激活时间(TTP)从(2.8±0.7)m s延长至(3.0±0.8)m s(P<0.05);使INa电流密度-电压曲线上移,但不改变激活电位、峰电位、反转电位和I-V曲线的形状;不影响稳态激活曲线、稳态失活曲线和稳态失活后恢复曲线。结论:心肌肽素浓度依赖性抑制豚鼠心室肌细胞INa,可能是其抗心律失常作用的机制之一。

心肌肽素的分离组分及组分相加对阿霉素中毒大鼠心肌细胞的修复作用

目的 :研究心肌肽素的分离组分及组分相加对阿霉素中毒大鼠心肌细胞的修复作用。方法 :采用MTT比色法 ,观察阿霉素中毒心肌细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶的活力。结果 :心肌肽素及 5个分离组分均显示了促进琥珀酸脱氢酶活力的作用 ,其中P1组分活力较强 ;各组分相加亦显示促进酶活力的作用 ,但未见显示相加效应。结论 :心肌肽素对阿霉素所致心肌细胞损伤的促进修复作用 ,系各组分所含物共同作用的结果。

注射用心肌肽在体外循环心内直视手术期间对患者心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:通过观察注射用心肌肽在体外循环(CPB)心内直视手术期间的应用,阐明其对患者心肌再灌注损伤的防护作用。方法:30例二尖瓣机械瓣置换患者,采用随机数字表方法分为实验组和对照组。实验组在术中及术后,给予注射用心肌肽。两组患者分别在体外转流前(T0)、主动脉开放即刻(T1)、主动脉开放后30 min(T2)、停止CPB 12 h(T3)、24 h(T4)抽取桡动脉血,检测肌酸激酶同功酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度。术后第7天测心脏射血分数(EF)。结果:两组患者体外转流前血浆CK-MB、cTnI及TNF-α浓度比较差异无显著性(P>0.05);开放30 min后两组患者血清CK-MB、TNF-α明显高于T1(P<0.05),且实验组在T2、T3、T4各相同时间点血清CK-MB、TNF-α浓度均明显低于对照组(P<0.05);主动脉开放即刻两组患者血清cTnI明显升高,且实验组在T1、T2、T3、T4各相同时间点血清cTnI明显低于对照组(P<0.05)。术后7 d,实验组EF值明显高于对照组(P<0.05)。结论:在CPB心内直视手术术中及术后给予注射用心肌肽可明显减轻炎症反应、抑制心肌损伤,改善心功能。

心肌肽素抗培养心肌细胞阿霉素损伤作用

目的 :观察小分子多肽类物质心肌肽素抗培养心肌细胞阿霉素损伤作用。方法 :建立培养心肌细胞阿霉素 (ADM)损伤模型 ,观察心肌肽素对心肌细胞肌酸磷酸激酶 (CPK)、乳酸脱氢酶 (LDH)及线粒体脱氢酶活性的影响 ,以荧光染料Fura- 2 -AM定量测定细胞内游离Ca2 + 浓度。结果 :心肌肽素可剂量依赖性降低细胞培养液中CPK和LDH活性及对抗细胞内线粒体脱氢酶活性下降 ,可剂量依赖性地降低培养心肌细胞 [Ca2 + ]i。结论 :心肌肽素对阿霉素损伤培养心肌细胞具有保护作用。

心肌肽素抗培养心肌细胞缺氧再给氧损伤作用

目的 观察小分子多肽类物质心肌肽素对缺氧 再给氧损伤培养心肌细胞的保护作用。方法 建立培养心肌细胞缺氧 再给氧损伤模型 ,分别以荧光微量法和光化学扩增法检测心肌细胞内脂质过氧化反应终产物MDA的含量及细胞内SOD活性 ,线粒体脱氢酶活性用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定。结果 心肌肽素可剂量依赖性地降低MDA的含量 ,提高SOD活性及增强受损细胞内线粒体脱氢酶活性。结论 心肌肽素对缺氧

心肌肽素抗大鼠离体心脏缺血-再灌流损伤作用

自Ｊｅｎｎｉｎｇｓ等1960年发现再灌流损伤(ＲＩ)以来,抗ＲＩ的研究就成为医学基础与临床的重点课题之一。有关多肽类物质抗ＲＩ的研究也日益受到人们的重视,但尚未见从乳猪心脏提取的活性多肽抗心肌缺血再灌流损伤的报道。我们对该活性物质的药理作用进行了较系统的研究...

心肌肽素在小型猪急性心肌缺血再灌注中的作用

目的利用小型猪急性心肌缺血再灌注的模型模拟临床急性心肌梗死患者内科再灌注治疗过程,探讨心肌肽素在小型猪急性心肌缺血再灌注中的保护作用及可能的作用机制。方法 12只小型猪分成单纯损伤组和治疗组,每组6只。X线下用球囊阻断冠状动脉左前降支血流造成心肌缺血;90 min后退出球囊,血流再通造成再灌注损伤。在心肌缺血60 min后,经静脉给予治疗组动物心肌肽素、单纯损伤组动物0.9%NaCl水溶液干预。分别在术前、用药结束和用药后24 h进行血清酶学及超声心动检查。用药24 h后,取出心脏进行TTC染色并测量梗死面积,切片行病理学检查、评分和原位凋亡检测。结果两组各有5只动物存活至实验终点,治疗组乳酸脱氢酶、肌酸激酶和肌酸激酶MB同工酶水平与单纯损伤组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组用药后24 h左心室舒张末容积较单纯损伤组增高,差异有统计学意义(P<0.05);两组的心肌梗死面积和损伤评分差异无统计学意义(P>0.05),治疗组的梗死区细胞凋亡较单纯损伤组明显减少(P<0.05)。结论用小型猪急性心肌缺血再灌注模型模拟急性心梗患者内科再灌注治疗,静脉输注心肌肽素可通过减少梗死区细胞凋亡保护心肌,但对于大面积、严重心梗患者,短时间、单独使用心肌肽素不能明显减小梗死面积和改善心功能。

心肌肽素在复杂先心病根治术中对心肌保护作用的临床研究

目的:观察心肌肽素(cardiomyopeptide)在复杂先心病根治术中对心肌的保护作用。方法:63例复杂先天性心脏病患者,其中,法乐氏四联症(TOF)43例,右室双出口(DORV)11例,完全性心内膜垫缺损(C-ECD)9例,同期行根治术。患者随机分为两组,心肌肽素治疗组术中给予3mg/kg、术后以3mg/kg连用3d,对照组给予GIK液(10%葡萄糖200ml+50%葡萄糖100ml+普通胰岛素10U),给予时间与治疗组相同。两组分别于主动脉阻断前,复灌后6,12,24,48,72h采集患者中心静脉血,测心肌酶学:磷酸肌酸激酶(CK)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌钙蛋白I(cTn-I)含量。统计数据分析用SPSS11.5,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,组间、组内手术前后比较用配对t检验,计数资料以百分率表示,采用行χ2检验。结果:心肌肽素治疗组心脏自动复搏率较对照组高,术后多巴胺用量较对照组少,两组术后心肌酶谱、cTn-I均较术前高,两组间术前和术后心肌酶谱无显著性差异,但cTn-I治疗组较与对照组有显著性差异。结论:心肌肽素在阻断时间较长的复杂先心病根治术中可能对心肌起到更明显的保护作用。

含血停搏液中添加注射用心肌肽在重症瓣膜外科术中的应用研究

目的探讨重症心脏瓣膜外科手术中含血停搏液内添加注射用心肌肽的心肌保护作用。方法对2016年1月至12月93例术前左心室射血分数(LVEF)小于50%的瓣膜外科手术进行回顾性分析,根据是否使用心肌肽分为心肌肽组(47例)和对照组(46例)。主要瓣膜外科手术有主动脉瓣置换37例、主动脉瓣置换+二尖瓣置换/成形12例、主动脉瓣置换+二尖瓣置换/成形+三尖瓣成形44例。心肌肽组仅在第一次含血停搏液中一次性添加心肌肽3 mg/kg,对照组在含血停搏液中不添加心肌肽。从围术期LVEF变化、心肌酶谱[肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CKMB)、乳酸脱氢酶(LDH)]变化、肝肾功能、ICU时间、血管活性药物使用等方面评价心肌肽的心肌保护作用。结果心肌肽组与对照组在患者年龄、体重、体外循环时间和主动脉阻断时间、ICU时间等均无显著性差异(P>0.05);心肌肽组患者术后24 h、48 h超声评价显示LVEF恢复程度均显著优于对照组(P<0.05),心功酶谱结果示术后48 h心肌肽组的CK和LDH恢复程度显著优于对照组(P<0.05),术后24 h CKMB恢复程度心肌肽组显著优于对照组(P<0.05)。两组患者肝肾功能指标无显著性差异(P>0.05)。入ICU时血管活性药物指数比较,心肌肽组显著低于对照组(P<0.05)。两组患者均无死亡。结论含血停搏液中添加心肌肽在重症瓣膜外科手术中具有一定的心肌保护作用。

注射用心肌肽对体外循环心脏手术患者的心肌保护作用

目的观察注射用心肌肽在体外循环心脏手术围手术中对心肌的保护作用。方法心脏瓣膜替换术患者48例,随机分为试验组与对照组,试验组患者在围术期麻醉后,静滴心肌肽麻醉后静滴1mg·kg-1;对照组在麻醉、手术全程中给予极化液,观察肌钙蛋白(TnI)含量以及心肌组织形态学的变化。结果术后2组cTnI明显升高;术后第5天,试验组cTnI明显低于对照组。体外循环后心肌标本透射电镜检查,对照组心肌病变重于试验组。结论在体外循环心脏手术围手术期中,注射用心肌肽对心肌有较好的保护作用。