ERK1/2信号通路介导心肌营养素1对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的探讨心肌营养素1对心肌缺氧复氧损伤的保护作用及其信号通路。方法用改良的方法培养出生1～3天的乳鼠心肌细胞,分为五组:对照组、缺氧复氧组、缺氧复氧+心肌营养素1组、缺氧复氧+心肌营养素1+PD98059(ERK阻断剂)组及缺氧复氧+心肌营养素1+DMSO组。缺氧3 h,复氧3 h。MTS法测定心肌细胞存活率,四氯四乙基苯丙咪唑基羰化青碘化物(JC1)检测心肌细胞线粒体膜电位,二氯荧光磺双乙酸盐(DCFH-CA)检测细胞活性氧水平,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,RT-PCR检测心肌细胞促凋亡基因Bad mRNA表达,Western blot检测ERK1/2蛋白水平。结果缺氧复氧后心肌细胞凋亡率及细胞内活性氧水平较对照组明显增加,分别是19.4%±2.3%比2.2%±0.2%及14.28±1.42比3.54±0.46(P<0.05),而心肌细胞存活率显著降低,心肌细胞线粒体膜电位下降。而心肌营养素1处理后,心肌细胞存活率明显高于缺氧复氧组,心肌细胞凋亡率及细胞内活性氧水平显著减少,心肌细胞线粒体膜电位更高,ERK1/2磷酸化蛋白水平增加,Bad mRNA表达明显下调。心肌营养素1的这种作用能被ERK阻断剂PD98059抑制。结论心肌营养素1能减轻缺氧复氧引起的心肌细胞损伤,其作用依赖ERK1/2信号通路的激活。

心肌营养素1诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞

目的:探索心肌营养素1(CT-1)对小型猪骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化的影响。方法:获取、扩增稳定的成体西藏小型猪MSCs,鉴定成脂、成骨潜能。分4组诱导向心肌样细胞分化,包括空白对照组、5-氮杂胞苷(5-Aza)组、CT-1组、5-Aza和CT-1合用组。取诱导后4周的细胞加肌动蛋白(α-actin)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)抗体,进行免疫荧光染色,最后计数红色荧光阳性染色率。结果:分组诱导分化结果,合用组的诱导分化心肌样细胞α-actin阳性率为29.90%±4.76%,明显大于5-Aza组(17.73%±2.35%,P<0.01)、CT-1组(6.63%±0.55%,P<0.01)和空白对照组(1.62%±0.09%,P<0.01);5-Aza组明显大于CT-1组(P<0.01)和空白对照组(P<0.01);CT-1组明显大于空白对照组(P<0.05)。cTnT红色荧光染色结果显示:合用组的诱导分化心肌样细胞cTnT阳性率为36.50%±4.09%,明显大于5-Aza组(14.37%±1.65%,P<0.01)、CT-1组(7.50%±0.61%,P<0.01)和空白对照组(1.12%±0.23%,P<0.01);5-Aza组明显大于CT-1组(P<0.01)和空白对照组(P<0.01);CT-1组明显大于空白对照组(P<0.01)。结论:适宜浓度的5-Aza(10μmol/L)和CT-1(0.1μg/L)能够在体外诱导小型藏猪骨髓MSCs转化为心肌样细胞,诱导后的细胞获得部分心肌细胞特异性蛋白的表达。CT-1与5-Aza联合可明显提高诱导率。

心肌营养素1对心肌成纤维细胞增殖的作用机制

目的探讨在高静水压条件下心肌营养素1(CT-1)对成纤维细胞增殖作用机制。方法3～4代心肌成纤维细胞用于实验,分为对照组、助溶剂(二甲亚砜,DMSO)组、CT-1反义寡核苷酸组(ASODN)、正义寡核苷酸组(SODN)、MEK-EPK阻断剂PD98059组、JAK-STAT3阻断剂AG490组、PI3K阻断剂LY294002。利用自制压力培养装置,将各组细胞置于160mmHg压力下培养8h。STAT3、ERK1/2和PI3-K的活性通过Westernblot分析测定;MTT测定心肌成纤维细胞增殖。结果高静水压明显促进心肌成纤维细胞增殖,CT-1表达上调,CT-1ASODN干预后,CT-1ASODN能抑制高静水压所致的细胞增殖,吸光度值(A值)为(0.132±0.013vs0.154±0.011,P<0.05),STAT3(2.09±0.25vs2.47±0.28,P<0.05)、ERK1/2(1.13±0.19vs1.61±0.22,P<0.05)和PI3-K(1.25±0.23vs1.71±0.25,P<0.05),蛋白表达水平明显低于对照组。AG490组明显减弱高静水压的促增殖作用(0.118±0.018vs0.155±0.010,P<0.05);PD98059增强高静水压的促增殖(0.185±0.011vs0.155±0.010,P<0.05),PI3-K阻断剂LY294002干预后对高静水压的促增殖作用无影响(0.157±0.015vs0.155±0.010,P>0.05);SODN与对照组相比对心肌成纤维细胞增殖无明显影响。结论高静水压下,可以激活STAT3、ERK1/2、PI3-K信号通路,心肌成纤维细胞增殖主要通过STAT3通路;ERK1/2通路起负向调节作用;PI3-K与细胞增殖关系不是很密切。

两种剂量瑞舒伐他汀对急性心肌梗死患者血清心肌营养素1水平及心功能的影响

目的 探讨不同剂量瑞舒伐他汀对急性心肌梗死（AMI）患者血清心肌营养素1（CT-1）水平及心功能的影响.方法 将112例AMI患者按照用药剂量分为2组,瑞舒伐他汀常规剂量治疗组（常规剂量组,60例）患者在常规应用阿司匹林、氯吡格雷、硝酸盐类、β受体阻滞剂等药物治疗基础上加服瑞舒伐他汀10 mg/d;瑞舒伐他汀强化剂量治疗组（强化剂量组,52例）患者在常规药物治疗基础上加服瑞舒伐他汀20 mg/d.另完全随机选取40例体检正常者作为对照组.对照组于AMI患者用药前,常规剂量组、强化剂量组分别于用药前及用药后4周空腹静脉采血检测CT-1水平并检查超声心动图指标,包括左心室舒张末期内径（LVEDD）、左心室收缩末期内径（LVESD）和左心室射血分数（LVEF）.结果 用药前常规剂量组、强化剂量组CT-1水平、LVEDD及LVESD[（333 ±53） ng/L、（339 ±51）ng/L,（59.5±6.4）mm、（58.2±7.6） mm,（40.7 ±7.4） mm、（40.4 ±6.2） mm]明显高于对照组[（42.6±11.2） ng/L,（38.2±1.8）mm,（30.2±1.2）mm],LVEF[（41.1±6.8）％、（41.4±7.2）％]明显低于对照组[（58.2±0.9）％],用药后4周,CT-1水平、LVEDD及LVESD[（152 ±28） ng/L、（108± 19）ng/L,（52.1 ±6.1）mm、（46.4±4.9）mm,（34.5 ±4.6）mm、（30.9±4.2）mm]明显降低,LVEF明显升高[（47.5±6.1）％、（52.8±6.2）％],差异均有统计学意义（P＜0.05）.与常规剂量组比较,强化剂量组上述指标改善更为明显（P＜0.05）.结论 瑞舒伐他汀可有效降低患者CT-1水平,抑制心室重塑,改善患者心功能.

Id3基因在心肌营养素1促心肌成纤维细胞增殖中的作用

目的探讨在高静水压条件下分化抑制因子3(inhibitory of differentiation3,Id3)基因在心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)促心肌成纤维细胞增殖中的作用。方法 3～4代心肌成纤维细胞用于实验,分为对照组(C组)、CT-1反义寡核苷酸组(ASODN组)、正义寡核苷酸组(SODN组)、高静水压组(P组)。利用自制压力培养装置,将各组细胞置于160mmHg压力下培养8h。CT-1活性通过Western印迹法分析测定,Id3基因表达通过RT-PCR方法测定,MTT测定心肌成纤维细胞增殖。结果高静水压明显促进心肌成纤维细胞增殖,CT-1表达上调,Id3mRNA表达增加;CT-1ASODN干预后能抑制高静水压所致的细胞增殖,CT-1表达下调,Id3mRNA表达减少。结论 Id3mRNA在心肌成纤维细胞中有明显表达,且与CT-1促心肌成纤维细胞增殖密切相关。

心肌营养素1血浆水平对慢性心力衰竭诊断的临床价值研究

目的探讨检测心肌营养素1(CT-1)血浆水平对慢性心力衰竭(CHF)诊断的临床价值。方法选择74例CHF患者作为病例组,按NYHA心功能分级分组:心功能Ⅱ级24例,心功能Ⅲ28例,心功能Ⅳ22例。25例健康体检者作为对照组。对所有的研究对象用酶标免疫分析方法测定血浆CT-1浓度,酶联免疫吸附法测定脑钠肽(BNP)血浆浓度,分析CT-1和BNP血浆浓度与CHF心功能的关系。结果病例组血浆CT-1和BNP浓度明显高于对照组,病例组血浆CT-1和BNP浓度随着NYHA分级增高而逐级升高,差异有统计学意义(P<0.01)。CT-1和BNP血浆浓度与左心室射血分数呈负相关性(CT-1:r=-0.755;BNP:r=-0.684,均P<0.01)。结论血浆CT-1浓度可能是反映CHF严重程度的指标。联合测定CT-1和BNP血浆浓度对CHF的早期筛查诊断具有重要的临床价值。

心肌营养素1与慢性心力衰竭的研究新进展

心肌营养素1是近年来新发现的生物标志物,心肌营养素1对慢性心力衰竭的病理生理学机制起着重要的调节作用。慢性心力衰竭患者心肌营养素1血浆水平随着心力衰竭严重程度加重而升高。心肌营养素1参与交感神经元的胆碱能转化,参与诱导炎性细胞因子的产生,参与诱导心肌肥大和心室重构,加剧了慢性心力衰竭病程进展。心肌营养素1与慢性心力衰竭的诊断、治疗及预后价值评价相关联,是一个重要的生物学标志物。这些研究为今后慢性心力衰竭的临床预防、诊断、治疗及预后价值评价提供全新的信息。

心肌营养素1在压力超负荷致心肌肥大中的作用

目的研究心肌营养素1在腹主动脉缩窄所致大鼠压力负荷性心肌肥大模型中的作用,观察AG490对心肌肥大及心肌营养素1表达的影响。方法用腹主动脉缩窄的方法建立心肌肥大大鼠模型,检测左心室重量指数,应用逆转录聚合酶链反应检测心肌营养素1、β-肌球蛋白重链mRNA表达,放射免疫分析法测定血浆和心肌血管中血管紧张素Ⅱ水平。结果腹主动脉缩窄术后14天心肌肥大组左心室重量指数明显高于假手术组(P<0.01);AG490干预组左心室重量指数明显低于心肌肥大组(P<0.01),但仍高于假手术组(P<0.01)。心肌肥大组血浆和心肌血管紧张素Ⅱ增高,与假手术组比差异有统计学意义(P<0.01);AG490干预组血管紧张素Ⅱ水平低于心肌肥大组(P<0.05),但仍高于假手术组(P<0.01)。心肌肥大组心肌营养素1mRNA表达较假手术组增加(P<0.01);AG490干预组心肌营养素1表达较心肌肥大组无明显变化(P>0.05),但与假手术组相比表达明显增加(P<0.01)。心肌肥大组心肌β-肌球蛋白重链mRNA表达明显高于假手术组(P<0.01);AG490干预组β-肌球蛋白重链mRNA表达较心肌肥大组明显降低(P<0.01),与假手术组相比表达仍增加(P<0.01)。结论心肌营养素1参与腹主动脉缩窄所致大鼠压力负荷性心肌肥大的发病过程,AG490可抑制心肌营养素1的表达及心肌肥大。

心肌营养素1与原发性高血压病的研究新进展

心肌营养素1(CT-1)是近年来新发现的生物标志物,CT-1对原发性高血压病的病理生理变化起着重要的调节作用。高血压患者CT-1血浆水平升高。CT-1参与了血管炎症、血管重构和心室重构的病理过程。血浆CT-1水平与高血压性心力衰竭相关,可辅助诊断高血压C期心力衰竭。基础性研究发现CT-1通过一氧化氮调节途径发挥降低血压的作用。CT-1基因1742(C/G)基因多态性GG基因型具有抑制心肌肥厚的作用。这些研究将为临床预防和治疗高血压病提供全新的思路。

心肌营养素1对谷氨酸诱导神经干细胞凋亡的作用

背景:心肌营养素1属于白细胞介素6细胞因子家族,近年发现其可能对中枢神经系统有重要保护作用。目的:探索重组腺病毒心肌营养素1对谷氨酸诱导神经干细胞凋亡的保护作用,为脑损伤提供新的治疗措施。方法:取新生Wistar大鼠海马神经干细胞,第2代培养第5天用于实验,神经干细胞分为3组:谷氨酸组、重组腺病毒心肌营养素1组及对照组,利用四唑蓝比色了解细胞存活情况及原位缺口末端标记技术检测细胞凋亡。结果与结论:谷氨酸组神经干细胞呈现明显形态改变,重组腺病毒心肌营养素1组未见类似改变,在谷氨酸暴露后12,24,48及72hMTT吸光度值均低于心肌营养素1组,而细胞凋亡率均高于心肌营养素1组。与其他两组比较,对照组相同时间点A值增高,细胞凋亡率降低。提示,心肌营养素1对谷氨酸损伤的神经干细胞具有保护作用,可以抑制神经干细胞凋亡,促进其存活和增殖。

卡托普利预处理对急性心肌损伤大鼠心肌营养素1和肿瘤坏死因子α表达的影响

心肌营养素1（CT-1）可促进未成熟心肌细胞的存活和增殖，具有心肌保护作用。卡托普利（Cap）则可通过缺血预适应减轻心肌损伤。本实验通过给大鼠腹腔注射异丙基肾上腺素（Iso），建立急性心肌损伤的动物模型，探讨血管紧张素转换酶抑制剂的心肌保护作用是否与CT-1和TNF-α的表达有关，从而为临床上如何干预CT-1的表达提供理论依据，并为某些心血管疾病的治疗开辟新的途径。

Rad对心肌营养素1诱导心肌细胞肥大作用的实验研究

目的探讨小G蛋白Rad对心肌营养素1(CT-1)诱导心肌细胞肥大作用的影响。方法 2011年6月—2013年3月,选取新生健康雄性SD乳鼠60只。构建载有Rad基因的腺病毒载体(Ad-Rad)、含有编码绿色荧光蛋白基因的空白腺病毒载体(Ad-GFP)。取乳鼠心脏并剪碎,进行心肌细胞原代培养。采用随机数字表法将提取的原代心肌细胞平均分为6组,即空白对照组〔转染磷酸盐缓冲液(PBS),刺激物为PBS〕、Ad-GFP组(转染Ad-GFP,刺激物为PBS)、Ad-Rad组(转染Ad-Rad,刺激物为PBS)、CT-1对照组(转染PBS,刺激物为CT-1)、Ad-GFP+CT-1组(转染Ad-GFP,刺激物为CT-1)、Ad-Rad+CT-1组(转染Ad-Rad,刺激物为CT-1)。转染腺病毒载体48 h后,采用流式细胞仪检测腺病毒载体转染率,并采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测Rad、心房钠因子(ANF)、β肌球蛋白重链(β-MHC)mRNA表达水平,Western blotting法检测Rad表达水平。结果腺病毒载体转染率为95.51%。Ad-Rad组Rad mRNA表达水平高于空白对照组、Ad-GFP组、CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组(P<0.05);Ad-Rad+CT-1组Rad mRNA表达水平高于空白对照组、Ad-GFP组、CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组(P<0.05)。CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组ANF mRNA表达水平高于空白对照组、Ad-GFP组、Ad-Rad组(P<0.05);Ad-Rad+CT-1组ANF mRNA表达水平低于空白对照组、Ad-GFP组、Ad-Rad组、CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组(P<0.05)。CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组β-MHC mRNA表达水平高于空白对照组、Ad-GFP组、Ad-Rad组(P<0.05);Ad-Rad+CT-1组β-MHC mRNA表达水平低于CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组(P<0.05)。Ad-Rad组Rad表达水平高于空白对照组、Ad-GFP组、CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组(P<0.05);Ad-Rad+CT-1组Rad表达水平高于空白对照组、Ad-GFP组、CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组(P<0.05)。结论 Rad具有负性调节CT-1诱导心肌细胞肥大的作用。

心肌营养素1与心肌梗死

心肌营养素1(CT-1)是白介素6(IL-6)家族细胞因子,它与糖蛋白130/白血病抑制因子受体异二聚体相结合,诱导心肌细胞肥大,促进心脏成纤维细胞增生,抑制心肌细胞凋亡,与许多心脏疾病密切相关。本文就CT-1与心肌梗死之间的关系作一综述。

心肌营养素1对异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤的保护作用

目的观察重组人心肌营养素1对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌损伤的保护作用。方法利用异丙肾上腺素建立大鼠急性心肌缺血模型,各实验组分别给予不同剂量的心肌营养素1或溶媒,末次给药24h后取血处死大鼠,测定血清中谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、磷酸肌酸激酶(creatine kinase-MB,CK-MB)、乳酸脱氢酶1(lactate dehydrogenase-1,LDH-1)活性;取心肌组织测定心肌匀浆中丙二醛(malondiadehyde,MDA)、一氧化氮(nitricoxide,NO)的含量和超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)的活性,比较各组大鼠心肌组织学变化。结果重组人心肌营养素1显著减轻异丙肾上腺素所致大鼠心肌组织损伤,抑制损伤大鼠血清AST、CK-MB、LDH-1活性,逆转心肌组织中MDA和NO含量的升高,提高大鼠心肌组织中SOD活性。结论重组人心肌营养素-1对大鼠心肌缺血有保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化反应和抗炎症反应有关。

舍曲林对原发性高血压合并焦虑抑郁病人血清S100B蛋白、心肌营养素1及血压的影响

目的观察原发性高血压合并焦虑、抑郁病人应用舍曲林治疗对情绪、血清S100B蛋白(神经组织蛋白质S100)与心肌营养素1(CT-1)及血压的影响。方法选取新乡医学院第二附属医院2015年12月至2017年6月收治的106例原发性高血压合并焦虑、抑郁的病人为研究对象,退出6例,将剩余100例按随机数字表法分为对照组和观察组,所有病人均应用替米沙坦口服,观察组加用舍曲林口服,对照组加用相同剂型的安慰剂口服,持续治疗1月。于治疗前后应用焦虑自评量表(SAS)及抑郁自评量表(SDS)对两组病人焦虑及抑郁症状进行评分,用动态血压仪测定两组病人治疗前后24 h平均收缩压(24 h SBP)、24 h平均舒张压(24 h DBP)、白昼平均收缩压(d SBP)、夜间平均收缩压(nSBP)、白昼平均舒张压(dDBP)及夜间平均舒张压(n DBP),并用酶联免疫吸附法检测血清S100B、CT-1水平。结果观察组治疗后SAS、SDS评分分别为(39.7±6.7)分、(38.4±5.3)分,对照组分别为(64.7±5.8)分、(58.1±4.9)分,观察组治疗后SAS、SDS评分低于对照组(t=19.965,19.369,均P<0.001);观察组治疗后24 h SBP、24hDBP、dSBP、nSBP、dDBP、nDBP分别为(118.2±6.7)、(78.3±6.6)、(124.1±7.3)、(112.3±6.1)、(82.5±6.8)、(74.1±6.4)mmHg,对照组分别为(121.7±7.1)、(82.3±7.2)、(127.2±8.1)、(116.2±5.7)、(85.2±6.6)、(79.4±7.8)mmHg,观察组治疗后24 h SBP、24 h DBP、dSBP、nSBP、d DBP、nDBP水平低于对照组(t=2.535,P<0.05;t=2.896,P<0.05;t=2.010,P<0.05;t=3.303,P<0.01;t=2.012,P<0.05;t=3.714,P<0.001);观察组治疗后血清S100B、CT-1分别为(60.6±13.4)pg/mL、(47.8±12.5)ng/L,对照组分别为(88.4±15.7)pg/mL、(56.7±11.2)ng/L,观察组治疗后血清S100B、CT-1水平低于对照组(t=7.468,3.751,均P<0.001)。结论舍曲林能有效改善原发性高血压合并焦虑、抑郁病人的焦虑、抑郁情绪,并辅助降低血压,从而血清S100B、CT-1水平下降。

心肌营养素1分子的克隆及其反转录病毒载体的构建

实验于2005-10/2006-06在江苏省干细胞重点实验室进行。体外分离培养新生SD大鼠心室肌细胞2周后,Trizol法抽提细胞总RNA,RT-PCR获得心肌营养素1基因,与克隆载体PMD18-T-Vector连接,转化TOP10感受态细菌,阳性克隆经鉴定正确后,PCR扩增心肌营养素1基因,EcoRI和BamHI双酶切,T4DNA连接酶连接,构建pEGZ-CT-1的反转录病毒载体。经PCR及酶切鉴定,测序表明心肌营养素1基因成功插入pEGZ-Term载体。pEGZ-CT-1载体的构建,为转基因细胞的制备和移植治疗心肌梗死奠定了基础。

冠心病患者血清心肌营养素1和心型脂肪酸结合蛋白表达与血小板活化状态及预后的相关性研究

目的探讨冠心病(冠状动脉粥样硬化性心脏病)患者血清心肌营养素1(CT-1)、心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)表达与血小板活化状态及预后的相关性。方法选取2017年1月至2019年4月青海省心脑血管病专科医院收治的150例冠心病患者作为观察组,另外选取同期在本院体检者150例作为对照组。比较2组血小板表面α-颗粒膜糖蛋白(CD62p)、溶酶体膜糖蛋白(CD63)、血清CT-1、H-FABP表达水平。分析观察组血清CT-1、H-FABP表达水平与CD62p、CD63水平相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清CT-1、H-FABP对冠心病患者发生主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。采用Logistic回归模型分析冠心病患者发生MACE的影响因素。结果观察组高血压史、糖尿病史、高血脂史比例及CD62p、CD63、CT-1、H-FABP水平均高于对照组(均P<0.05)。观察组血清CT-1、H-FABP表达水平与CD62p、CD63水平均呈正相关(均P<0.001)。血清CT-1、H-FABP联合预测冠心病患者发生MACE的曲线下面积为0.913,敏感度为78.60%,特异度为91.70%。高血压史、糖尿病史、CD62p>7.2%、CD63>7.5%、CT-1>139.8 ng/L、H-FABP>9.6μg/L均为冠心病患者发生MACE的独立危险因素(均P<0.05)。结论冠心病患者血清CT-1、H-FABP高表达,其水平与CD62p、CD63水平呈正相关,且对冠心病患者发生MACE有一定预测价值,可用于评估冠心病患者病情进展及预后。

充血性心力衰竭患者血清心肌营养素1、细胞间黏附分子1、N-末端脑钠肽原水平变化及与心功能关系

目的观察充血性心力衰竭(CHF)患者血清心肌营养素1(CT-1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)及N-末端脑钠肽原(NT-proBNP)水平变化,并分析其与心功能关系。方法选取山东省立第三医院2018年4月至2019年8月112例CHF患者为观察组,按照美国纽约心脏病学会(NYHA)心功能分级分为三个亚组(Ⅱ级组、Ⅲ级组、Ⅳ组),并取同期50例体检健康者作为对照组,检测各组血清CT-1、ICAM-1、NT-proBNP水平,并利用超声仪测定心功能指标[左心室射血分数(LVEF)、左心室收缩末内径(LVESD)与左心室舒张末内径(LVEDD)],进行相关性分析。结果观察组血清CT-1、ICAM-1、NT-proBNP水平显著高于对照组(t=18.919、14.795、127.439,P<0.05);CHF患者不同心功能分级亚组血清CT-1、ICAM-1、NT-proBNP水平比较差异均有统计学意义(F=102.424、11.194、127.439,P<0.05),Ⅳ级组血清CT-1、ICAM-1、NT-proBNP水平明显高于Ⅱ级组与Ⅲ级组(P<0.05),Ⅲ级组明显高于Ⅱ级组(P<0.05)。CHF患者不同心功能分级亚组心功能指标比较差异均有统计学意义(F=84.148、30.930、21.158,P<0.05),Ⅳ级组患者LVEF明显低于Ⅱ级组与Ⅲ级组(P<0.05),LVESD、LVEDD明显大于Ⅱ级组与Ⅲ级组(P<0.05),Ⅲ级组LVEF明显低于Ⅱ级组(P<0.05),LVESD、LVEDD明显大于Ⅱ级组(P<0.05)。Pearson分析显示血清CT-1、ICAM-1、NT-proBNP与LVEF呈负相关(r=-0.978、-0.989、-0.991,P<0.05)。结论CHF患者血清CT-1、ICAM-1、NT-proBNP水平有异常升高改变,且心功能损伤越严重,升高程度越大,与LVEF呈显著负相关。

超声介导心肌营养素1基因转移骨髓间充质干细胞及表达测定

目的探讨超声介导白蛋白微泡破裂促进心肌营养素1(CT-1)基因转移骨髓间充质干细胞(MSC)表达的测定。方法从分离培养的新生大鼠心肌细胞中克隆CT-1基因,构建其表达载体,与白蛋白微泡混合后,在超声作用下介导CT-1基因转染大鼠MSC,荧光显微镜及流式细胞术检测报告基因EGFP的表达,Western blot检测MSC中CT-1表达。结果可获大鼠CT-1编码基因,并成功构建表达载体pIRES2-CT-1。体外实验结果示,以脉冲0.75 W/cm2作用30 s转染2次,可以有效地将CT-1基因转染MSC,经转染的MSC可以表达分泌CT-1及报告基因EGFP。结论超声介导白蛋白微泡破裂可以有效促进CT-1基因转染MSC,该技术可能为临床应用基因联合干细胞移植治疗急性心肌梗死提供新的方法。

缺血后适应中心肌营养素1对心肌细胞的保护作用研究

目的探讨心肌营养素1(CT-1)在缺血后适应中对心肌细胞的保护作用机制及参与的信号通路。方法选择H9C2乳鼠心肌细胞株,实验分为对照组、缺氧复氧组、缺氧后适应组、缺氧后适应+CT-1组、缺氧后适应+CT-1+Akt阻断剂组、缺氧后适应+CT-1+二甲基亚砜组,MTS法检测细胞的存活率,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,Western-blot检测Akt蛋白表达,Q-PCR检测BadmRNA的表达。结果缺氧复氧组较对照组细胞凋亡率明显增加,存活率降低,缺氧后适应组细胞比缺氧复氧组凋亡率低,存活率增加,缺氧后适应+CT-1组细胞比缺氧后适应组凋亡率进一步降低,存活率进一步增加,Akt磷酸化蛋白水平明显升高,BadmRNA表达下调,加入Akt阻滞剂(A6730)后,这种保护作用被抑制。结论心肌营养素1参与激活Akt信号通路协同缺氧后适应减轻缺氧复氧对心肌细胞的损伤,对心肌细胞起保护作用。