正常儿童左室心肌重量测定及其临床应用价值的探讨

左室肥大是许多心血管疾病的重要诊断依据和了解病情、判断预后的指标,理论上左室心肌重量(LVM)最能确切地反映左室肥大的存在与程度。目前国内外尚无不同年龄小儿LVM正常值测定及其在儿科临床应用的报道。

中药干预心肌能量代谢重编程防治心衰的研究进展

本文通过对近年国内外文献研究,发现以线粒体氧化代谢和能量消耗相关的代谢重编程为药理学靶点的治疗方法,已成为临床提高心脏效率、减少能量缺乏和改善衰竭心脏功能的一种非常有潜力的新型治疗方法。且多种中药通过干预心肌能量代谢重编程发挥治疗心力衰竭作用。因此,对心肌细胞能量代谢重编程的主要靶点以及中药干预心肌能量代谢重编程的研究进行综述,以期为中药防治心力衰竭研究提供新的思路。

急性心肌梗死患者抗心肌肌球蛋白重链抗体诱导心肌细胞凋亡

目的:探讨抗心肌肌球蛋白重链抗体(AMHCA)诱导心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法:从急性心肌梗死患者血清中提取AMHCA,研究其对成年大鼠心肌细胞凋亡的影响。DNA末端标记膜联蛋白-V/PI复染色法观察和测量心肌细胞凋亡。分别用免疫印迹、膜片钳和激光共聚焦法检测凋亡相关蛋白P53和Bcl-2以及第二信使钙离子的表达和浓度。结果:AMHCA诱导的心肌细胞凋亡具有剂量依赖性。在此过程中,促凋亡的核蛋白P53促进心肌细胞凋亡,而抑凋亡的胞质蛋白Bcl-2抑制心肌细胞凋亡。同时,胞内钙离子浓度升高,而L型钙通道则没有影响。结论:急性心肌梗死患者体内的AMHCA可能是一种新的起动因子,可诱导心肌细胞凋亡。

阿霉素致大鼠心衰心肌肌球蛋白重链变化

为观察阿霉素所致大鼠心衰时心肌肌球蛋白重链的变化及心肌结构的改变 ,采用雄性 SD大鼠 2 2只 ,随机分为 2组 :1正常对照组 :ip等体积生理盐水 ;2阿霉素组 (ADR) :于实验开始后第 2、4天 ip ADR1mg/ kg;第 6、8天 ip ADR2 mg/ kg;第 10、12天 ip ADR3mg/ kg;第 14、16天 ip ADR4 mg/ kg,16 d累计用药剂量达 2 0 mg/ kg。停药 2 4 h后 ,称体重、心肌重量、左心室重量及心肌蛋白的提取、肌球蛋白重链 (MHC)分析 ,电镜观察心肌细胞超微结构的变化。结果表明 ADR组大鼠的体重、心体比及左室心体比 (LVM/ BW)均较正常对照组有显著改变 (P<0 .0 1)。电镜下可见心肌纤维溶解 ,肌质网扩张空泡化 ,线粒体水肿 ,嵴断裂。心肌α- MHC向β- MHC转化 ,即α- MHC含量下降 ,β- MHC含量上升。结果提示阿霉素导致的心肌损害伴有心肌细胞结构和功能蛋白质合成的改变。

心肌肌球蛋白及其重链的研制、特性鉴定和应用

目的分离、提纯人心肌肌球蛋白(HCM)及其重链(HCMHC),为心肌显像及其显像剂抗HCMHC抗体的研究打基础。方法参考猪心肌肌球蛋白制备方法,做了较大改进后,提取了HCM,用盐酸胍裂解HCM制备了HCMHC。用SDS-PAGE(梯度)电泳测定分子质量,用检测无机磷的方法测定HCM的ATP酶活力,用Ellman氏试剂测定游离巯基。将HCMHC免疫动物,用ELISA法测定了血清抗体效价。结果HCMHC的相对分子量为200×103,纯度大于80%;被免疫的BALB/C小鼠血清的抗体滴度最高达107,细胞融合率达80%。结论研制的HCMHC具有良好的免疫学活性,为下一步抗HCMHC单链可变区抗体(ScFv)及其放射性核素受体显像的研究打下了基础。

人参总皂苷合黄连小檗碱对慢性心衰大鼠心肌肌球蛋白重链的影响

目的:探讨人参总皂苷(GS)合黄连小檗碱(Ber)对慢性心衰大鼠心肌肌球蛋白重链(α-MHC,β-MHC)表达的影响.方法:连续12 d皮下注射较大量异丙肾上腺素(ISO)建立慢性心衰大鼠模型,ISO总量80 mg/kg,随机分为模型组、GS+Ber组、卡托普利组、参麦注射液组,另设对照组.GS+Ber组各以20 mg/(kg.d)灌胃,卡托普利组以45 mg/(kg.d)灌胃,参麦注射液组以5 mL/(kg.d)腹腔注射,模型组和对照组以蒸馏水灌胃.4 wk后检测各组血流动力学指标、心脏质量指数,实时荧光定量PCR检测α-MHC,β-MHC mRNA表达.结果:对照组与各组相比,左室内压峰值(LVSP)、左室等容收缩期压力上升最大速率(+dp/dtmax)、左室舒张期压力下降最大速率(-dp/dtmax)以及α-MHC mRNA表达明显下降,左室舒张末压(LVEDP)、心脏质量指数以及β-MHC mRNA表达显著升高(均P<0.01);GS+Ber组、卡托普利组与模型组相比,LVSP,±dp/dtmax,α-MHC mRNA表达明显升高,LVEDP、心脏质量指数以及β-MHC mRNA表达显著降低(P<0.01或P<0.05).结论:GS+Ber能增加慢性心衰大鼠心肌细胞内α-MHC mRNA表达,降低β-MHC mRNA表达,为GS+Ber改善心功能和心室重构的主要机制之一.

心肌肌凝蛋白重链启动子的心血管组织特异性基因表达及其活性

目的 探讨心肌肌凝蛋白重链 (cMHC)基因启动子的心血管组织特异性及其表达活性 ,构建心血管组织靶向性表达的基因载体。方法 分别采用PCR法合成大鼠cMHC基因启动子片段 (- 16 0 0～ +32 )和酶切法获得CMV启动子片段 ,以取代 pAdSV4nlacZ载体中的LTR启动子 ,获得pAdSV4nlacZ、pAdMHCnlacZ和 pAdCMVnlacZ。上述载体分别转染培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)、心肌细胞 (CM )、心肌成纤维细胞 (CF)和人胚肾细胞 (2 93细胞 ) ,观察lacZ基因在上述细胞中的表达活性。结果 β-半乳糖苷酶活性在 pAdSV4nlacZ和 pAdCMVnlacZ转染的各组细胞间无显著差异 ;pAdMHCnlacZ在转染的CM中lacZ基因的表达明显高于其他各组细胞 ,β -半乳糖苷酶活性在VSMC组低于CM组 ,高于CF和 2 93细胞 (P <0 0 1) ,在CF和 2 93细胞间无差异 (P >0 0 5 )。结论 cMHC启动子的转录活性相对低于CMV启动子和LTR启动子 ,而在CM和VSMC中的表达活性高于CF和 2 93细胞 ,具有良好的心血管组织定向表达能力 ,适合用于心血管疾病的基因治疗。

MYH7基因c.1574A>G突变致扩张型心肌病1S型家系分析

目的 采用全外显子组测序分析1例左心系统扩张患儿的基因变异情况,并进行家系分析,确认扩张型心肌病1S型(DCMIS)的病因。方法 收集1例左心系统扩张患儿的临床资料。采用染色体拷贝数变异测序(CNV-seq)检测患儿染色体结构缺失和重复情况。采用全外显子组测序分析患儿基因变异情况,采用Sanger测序对患儿及其父母、异卵双生姐姐变异位点进行验证。通过生物信息学分析评估变异位点的危害性。结果 患儿心脏彩色多普勒超声示左心功能降低,左心系统明显扩张增大,肺动脉高压,二尖瓣和三尖瓣反流。CNV-seq结果为seq[hg19]46,XN,未发现染色体异常。全外显子组测序分析结果显示,患儿β-心肌肌肉球蛋白重链7(MYH7)基因发生杂合变异[c.1574A>G(p.Glu525Gly)]。检索OMIM、ClinVar数据库,未见相关报道;检索ESP数据库、千人基因组数据库、ExAC数据库和gnomAD数据库,该变异位点未被收录,属于新发变异。Sanger测序证实变异存在,患儿父母、姐姐MYH7基因均正常。MYH7基因c.1574A>G(p.Glu525Gly)变异导致蛋白侧链O端与第484位赖氨酸侧链N端之间形成的氢键侧链相互作用消失。结论 c.1574A>G(p.Glu525Gly)为新发现的MYH7基因变异,是造成患儿左心系统明显扩张的原因。新发变异的检出丰富了DCMIS致病机制研究数据。

不同模式低氧及递增负荷训练对心肌肌球蛋白重链表达的影响

目的:主要通过间歇低氧训练和高住低练两种低氧训练模式观察运动即刻状态下大鼠心肌肌球蛋白重链比例表达。方法:48只大鼠分为6组,四周递增负荷跑台实验后,测得心肌肌球蛋白重链及相关指标。结果:①高住低练组较间歇低氧运动组,左心室心肌运动性肥大较为明显(P<0.05);②运动组心肌肌球蛋白β-MHC向α-MHC转化率高于常氧对照组,高住低练组高于间歇低氧运动组,且存在显著性差异(P<0.05);结论:本次实验中就心肌肌球蛋白重链等相关指标而言,高住低练组是本实验设计六组中最为理想的训练模式。

心肌肌球蛋白重链与心室重构

心室重构是心力衰竭发生、发展过程中的重要环节,胚胎基因再表达是衰竭心脏心室重构的重要分子标志之一。哺乳动物的心肌中含有两种肌球蛋白重链(MHC)基因,即α、β亚型。MHC的V1(由αMHC构成)比MHC的V3(由βMHC构成)有较大的ATP酶活性和收缩速率。心力衰竭时,αMHC向βMHC转换。

温肾方对亚临床甲状腺功能减退模型大鼠心肌肌球蛋白重链基因表达的影响

目的:观察温肾方对亚临床甲状腺功能减退模型大鼠心肌肌球蛋白重链基因表达的影响。方法:采用"甲状腺全切术+术后皮下注射L-T4"法制备亚临床甲减大鼠模型,设定空白对照组、模型组、西药组、中药低剂量组及高剂量组、中+西药组,RT-PCR法按照试剂盒说明测定心肌肌球蛋白重链基因表达,同时观察温肾方对其指标的干预情况。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠心肌肌球蛋白重链α-MHCmRNA表达降低(P<0.05),β-MHCmRNA表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,中+西药组和中药高剂量组在上调大鼠心肌α-MHCmRNA表达,下调大鼠心肌β-MHCmRNA表达方面效果显著(P<0.05);中+西药组及中药高剂量组心肌α-MHCmRNA、β-MHCmRNA表达水平接近于空白对照组(P>0.05)。结论:亚临床甲状腺功能减退可引起心肌肌球蛋白重链基因表达的改变,温肾方能逆转心肌肌球蛋白基因的异常表达,从而具有防治亚临床甲减心脏并发症的作用。

心脏发育关键转录因子与心肌细胞直接重编程的研究进展

由于心肌细胞几乎没有再生能力,所以在心肌细胞受损后,只能通过活化的成纤维细胞形成瘢痕组织去修补心脏。但这种修复无法恢复心脏功能。目前在心肌细胞再生研究方面有了长足的进步,从一种体细胞类型(如成纤维细胞)直接转换为心肌细胞的方法即心肌细胞直接重编程,就是一种新的可以治疗及再生受损心肌细胞的方案。在心肌细胞直接重编程中,许多心脏发育关键转录因子是各种编程方案的基石。现主要介绍心脏发育关键转录因子与心肌细胞直接重编程。

心肌细胞直接重编程的研究进展

心肌细胞直接重编程是一种新兴的心脏再生技术,它使用表观遗传修饰技术将心脏成纤维细胞转化为终末分化的心肌细胞。该文介绍了心肌细胞直接重编程的研究进展、所面临的问题以及未来的发展方向。

心肌缺血再灌注损伤的微循环改变

近年来,随着溶栓疗法、冠状动脉旁路移植术、经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention,PCI）等的建立和推广,使急性阻塞的冠状动脉多能及时再通,缺血的心肌重新获得血液供应.

miRNA208a对扩张型心肌病模型大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨miRNA208a对扩张型心肌病模型大鼠心肌纤维化的影响。方法取30只成年Wistar大鼠,采用连续腹腔注射阿霉素法制备扩张型心肌病模型,按照随机数字表法将其随机分为mut-miRNA208a组、an⁃tagomiRNA208a组、pre-miRNA208a组,每组10只。分别转染含突变miRNA208a、抑制miRNA208a表达、过表达miR⁃NA208a的腺相关病毒质粒。转染成功72 h后,应用动物心脏彩超检测各组大鼠心功能相关指标:心室舒张末期内径(LVEDD)、心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)。计算心脏指数(HWI);检测各组大鼠心肌组织中内皮素(ET)、β心肌肌球蛋白重链(MHC-β)、胶原蛋白Ⅰ(COL-Ⅰ)的表达水平。结果三组大鼠HWI、LVEDD、LVESD、LVEF,ET、MHC-β、COL-ⅠRNA及蛋白表达比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与mut-miRNA208a组、pre-miRNA208a组相比,antagomiRNA208a组大鼠心功能好转,心肌组织中ET、βMHC、COL-Ⅰ表达下调,心肌间质纤维化程度明显减轻。结论miRNA208a可通过作用于其靶标ET、MHC-β促进COL-Ⅰ高表达在扩张型心肌病心肌纤维化的发生发展过程中起到重要作用。

缺血后处理抑制再灌注心律失常及其机制研究进展

再灌注心律失常（reperfusion arrhythmia，RA）是指冠状动脉（冠脉）突然解除梗阻，缺血心肌重新获得血液灌注后的一定时间内发生的心律失常，临床上可作为判断冠脉再通的一项指标，然而再灌注室颤又被认为是缺血再灌注期患者猝死的重要原因。

心肌球蛋白重链基因Arg719Gln突变与家族性肥厚型心肌病

目的 调查中国人家族性肥厚型心肌病 β 肌球蛋白重链 (β MHC)基因突变情况 ,评估中国人肥厚型心肌病临床特点与基因突变的关系。方法 对 5个独立的肥厚型心肌病家系进行 β MHC基因突变扫描 ,通过聚合酶链反应扩增 β MHC基因 3～ 2 7及 40号外显子 ,通过单链构像多态性及测序检测突变 ,采用限制性片断长度多态性分析检测其他家系成员。结果 发现一家系先证者第19号外显子聚合酶链反应产物单链构象多态性异常 ,测序分析表明该患者 β MHC基因第 719密码子位置发生G→A转换 ,使精氨酸 (Arg)变为谷氨酰胺 (Gln)。该患者临床表现胸痛、心悸及反复发作晕厥 ,超声示室间隔轻度不对称肥厚和左房扩大 ,母亲及姐姐皆有相似临床症状且都已于 38岁猝死。此外 ,在其他 4个家系中还发现了位于 β MHC基因上的ACT6 3ACC、TTT2 44TTC多态位点 ,但与疾病无明显相关。结论 β MHC基因Arg719Gln错义突变位于肌球蛋白重链的头杆结合部 ,该部位系肌球蛋白的重要功能区。该突变表型症状重 ,发病早 ,预后差 ,并与心房扩大和心房纤颤相关 ,提示该突变是致肥厚型心肌病的恶性突变。另一方面 ,研究表明同一突变可有不同的临床表现和预后 ,结合其他 4个家系均未发现错义突变的结果 。

机械牵张对缺血缺氧心肌细胞肌球蛋白重链mRNA表达的影响

目的 探讨机械牵张对缺血缺氧心肌细胞肌球蛋白重链 (MHC)mRNA表达的影响。方法 建立离体培养的SD乳鼠心肌细胞机械牵张模型 ,并施加无糖缺氧刺激因素 ,模拟烧伤后缺血缺氧损害。实验分 10 %牵张组、缺血缺氧培养组、10 %牵张 +缺血缺氧培养组 ,每组每时相点 3皿细胞。各组分别在刺激前和刺激后 1、3、6、12h时相点进行观察。采用二步法逆转录聚合酶链反应检测心肌细胞MHCmRNA表达的变化 ,并用凝胶软件进行分析。 结果 与刺激前比较 ,10 %牵张组α、β型MHCmRNA表达均增加 ,但以 β型增加为主 (P <0.0 1)。缺血缺氧培养组α MHCmRNA向 β MHCmRNA转化加速 ,且缺氧 12h后心肌细胞α MHCmRNA下调明显 (P <0.0 5);β MHCmRNA表达先升后降 ,6h表达最强 (P <0.0 5 )。10 %牵张 +缺血缺氧培养组α MHCmRNA向 β MHC mRNA转化明显 ,随机械刺激时间的延长转化加剧 ;12h后α、β型MHCmRNA表达均下调 (P <0.0 5)。 结论 机械牵张进一步加剧缺血缺氧对MHCmRNA表达的下调 ,可能是严重烧伤后早期心肌功能降低的原因之一。