基于单细胞测序发现心脏再灌注损伤中存在一群Fabp5+巨噬细胞新亚群

目的:应用单细胞测序技术,揭示小鼠心脏在缺血再灌注后浸润的巨噬细胞中存在新亚群。方法:选取C57小鼠10只以及绿色荧光蛋白(GFP)基因小鼠,通过伽马射线对C57小鼠进行照射后构建移植有GFP阳性骨髓的小鼠;选用骨髓移植成功的小鼠通过冠脉前降支结扎30 min后再恢复灌注构建心脏缺血再灌注(I/R)模型;于术后3 d处死小鼠并收集新鲜心脏组织,采用美天旎心脏组织消化试剂盒获得细胞悬液,实验分为对照组:单纯利用经典流式细胞分选技术分析I/R 3 d时心脏中的骨髓源性巨噬细胞;实验组:在流式分选的基础上通过新方法C1微流控技术进行单细胞捕获以及转录组学测序。结果:首先通过流式分选技术我们发现心脏中存在两群巨噬细胞:大量骨髓源性的巨噬细胞(CCR2+GFP+,约占80%),以及CCR2-的原位巨噬细胞(约占20%);进一步捕获单个的CCR2+GFP+细胞并构建单细胞的cDNA文库;结合测序数据饱和度以及内部对照spike-in RNA对数据进行筛选得到47个细胞的数据;经过分析发现存在两个细胞亚群,其中一群巨噬细胞高表达Fabp5。结论:通过单细胞测序发现心脏缺血再灌注过程中存在一群新的Fabp5阳性的骨髓来源的巨噬细胞亚群。

右美托咪定对心脏缺血再灌注损伤的保护作用研究进展

右美托咪定(Dexmedetomidine, DEX)是一种高选择性的α2肾上腺素受体激动剂,该药物具有镇静镇痛、减轻应激及炎症反应及抗焦虑等多种作用,因此常用于手术围术期或重症监护病房机械通气时的辅助治疗。然而,动物实验研究和临床试验都已充分证实,右美托咪定也是一种抗缺血再灌注损伤(Ischemia-Reperfusion Injury, IRI)的心脏保护药物。本文深入总结了右美托咪定在抗心脏缺血再灌注损伤中的作用机制和信号通路;此外,本文综述了目前在心脏手术围术期中应用右美托咪定保护缺血心脏的临床研究,以期为未来的研究方向提供启示。我们希望这些研究成果不仅能够为心脏手术患者带来益处,还能拓展至更广泛的临床领域,如急性冠脉综合征患者,从而使更多患者受益。

异丙酚对离体大鼠心脏再灌注损伤后冠脉儿茶酚胺浓度的影响

目的 通过建立离体大鼠工作心脏灌注模型,测定冠脉流出液儿茶酚胺浓度,研究异丙酚对离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤后左室功能及心肌代谢的保护机制。方法 雄性SD大鼠40只,随机分为4组(每组10只),对照组、异丙酚10μmol/L组、50μmol/L组、100μmol/L组。建立工作心脏模型后,所有心脏全心缺血25 min,再灌注30 min。在缺血前5 min、0 min,再灌注后5、10、15、20、25和30 min分别观察心率(HR)、左室发展压与心率乘积(LVDP×HR)、冠脉流量(CF)、心排出量(CO)等心功能指标,并留取冠脉流出液测量肌酸激酶(CK)、儿茶酚胺含量。结果 缺血前,异丙酚组CO、HR、LVPSP及LVDP×HR均显著低于对照组(P<0.05);4组CK值无显著变化(P>0.05),儿茶酚胺测不出。再灌注时,异丙酚组CF、CO、HR、LVEDP、LVPSP及LVDP×HR在相应时点均比对照组恢复明显(P<0.05);异丙酚组CK值显著低于对照组(P<0.05);再灌注后,异丙酚组肾上腺素和去甲肾上腺素显著低于对照组(P<0.05);各组多巴胺含量差别不显著(P>0.05)。结论 异丙酚对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用,其机制之一可能是由于异丙酚抑制心肌缺血再灌注损伤后儿茶酚胺的释放。

尾加压素预处理对大鼠心脏缺血再灌注损伤的影响

目的 :探讨尾加压素 (UII)预处理对于离体灌流大鼠心脏缺血再灌注 (I/R)损伤的影响。方法 :在离体灌流的SD大鼠心脏I/R模型上 ,以UII预灌注心脏 ,采用MFLLab2 0 0心功能软件监测心功能 ,以试剂盒测定心肌细胞ATP、总钙、丙二醛含量和乳酸脱氢酶 (LDH)漏出 ,并观察其对于冠脉流出量 (CPF)的影响。结果 :UII预处理组与单纯I/R组比较 ,冠脉流出液中LDH低 2 8% [(78 3± 18 1)U/Lvs (10 9 3± 2 3 9)U/L ,P <0 0 5 ],心肌组织MDA和钙含量分别低 2 4 %和 2 7% (P <0 0 5 ) ;ATP含量高 73% (P <0 0 5 )。与I/R组比较 ,UII预处理组CPF高 4 2 % [(5 4± 0 7)mL/minvs (3 8± 0 8)mL/min ,P <0 0 5 ],LVEDP低 2 0 % (P <0 0 5 ) ,±dp/dtmax分别高 2 5 %和 4 5 % (P <0 0 5 ) ;冠脉流出液中NO-2 /NO-3 含量高 6 3% (P <0 0 5 )。结论 :UII预处理可以减轻离体灌注大鼠心脏I/R所造成的损伤 ,其机制与NO介导的冠脉扩张效应有关。

熊果酸减轻糖尿病大鼠心脏缺血再灌注损伤

探讨熊果酸(ursolic acid,UA)对糖尿病大鼠心脏缺血再灌注损伤的作用及潜在机制。通过腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型。2周后糖尿病大鼠随机均分为假手术组(Sham)、心脏缺血/再灌注损伤组(MI/R)和熊果酸低、中、高剂量组(UA)。通过结扎冠状动脉左前降支构建心脏缺血再灌注损伤模型。测定各组大鼠乳酸脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST),心肌梗死面积、心脏收缩和舒张功能、磷脂酰肌醇(-3)激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)和B细胞淋巴因子2(BCL-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和TUNEL的表达。与Sham组相比,MI/R组心肌梗死面积明显增加,CK、AST、LDH、p-AKT、PI3K、IL-6、IL-1β、TNF-α、Bax和TUNEL的表达明显上调,而心脏收缩和舒张功能明显降低,BCL-2表达明显减少。与MI/R组相比,心肌梗死面积明减少,CK、AST、LDH、p-AKT、PI3K、IL-6、IL-1β、TNF-α、Bax和TUNEL的表达明显下调,而心脏收缩和舒张功能明显增强,BCL-2表达明显增加。三组之间AKT表达无差异。实验结果显示熊果酸预处理可通过减轻炎症和下调凋亡减轻糖尿病大鼠心脏缺血再灌注损伤,其作用机制与抑制AKT/PI3K信号通路激活相关。

乌司他丁对心脏直视术中缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 研究乌司他丁对心肺转流 (CPB)心脏直视手术中缺血 再灌注损伤的保护作用。方法 2 0例择期CPB心脏瓣膜手术患者随机均分为对照组 (C组 )和乌司他丁组 (U组 )。C组不给药 ,U组给予乌司他丁 10 0万U(其中 30万U为麻醉诱导前给予 ,40万U预充体外循环机内 ,30万U为开放升主动脉后给予 )。分别于麻醉诱导后 (T1)、阻断升主动脉 30分钟 (T2 )、再灌注 1小时(T3 )、再灌注 2小时 (T4 )及再灌注 3小时 (T5)各时间点取静脉血用ELISA法测定样本中下列各指标的水平 :肿瘤坏死因子 α(TNF α)、白细胞介素 6 (IL 6 )、白细胞介素 8(IL 8)。结果 两组血清中TNF α、IL 6、IL 8的浓度 ,都是在再灌注后与手术前值及阻断主动脉 30分钟的值相比有明显的增加(P <0 0 5 ) ;在T3 、T4 、T5三个时点U组的TNF α、IL 6、IL 8的释放明显低于对照组 (P <0 0 5 )。结论 在CPB过程中乌司他丁可以通过抑制炎性介质TNF α、IL 6和IL 8的释放而减轻缺血

脂肪乳后处理对心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究脂肪乳预处理和后处理是否具有心脏保护作用,并初步探讨其机理。方法雄性SD大鼠20只。采用Langendorff灌流模型,随机分为4组:持续灌注组(CTL组,持续灌注3h50min),缺血再灌注组(ISCH组,心脏平衡50min,37℃缺血45min,复灌3h),脂肪乳预处理(I-preC组,脏平衡30min,给予含30%脂肪乳的灌注液预处理15min,洗脱15min,37℃缺血45min,复灌3h),和脂肪乳后处理组(I-postC组,心脏平衡50min,37℃缺血45min,复灌3h,复灌开始给予含30%脂肪乳的灌注液15min)。基础和复灌期间连续监测心率(HR)和机械功能(LVDP)。平衡20min和复灌60min时测定流出液中LDH的含量。复灌结束,剪下心脏左室前壁,做病理切片。余下的心肌组织液氮速冻后-70℃冰箱保存,做Western Blotting。结果与ISCH组相比,I-postC组心脏做功增强,而I-preC并不增加左室做功。与ISCH组相比,I-preC组和I-postC组复灌60min时LDH的释放均降低,I-postC组心肌凋亡细胞指数降低(P<0.05);I-preC组和ISCH组心肌凋亡细胞指数之间差异无统计学意义。与ISCH组相比,I-postC组的Bax表达量较低;I-postC组的Bcl-2的表达量较高。与ISCH组相比,I-preC组Bax的表达量比较高,I-postC组Bcl-2的表达量较低。结论脂肪乳后处理通过抑制心肌细胞凋亡而增强心脏机械做功,并减少LDH的释放而减轻心肌缺血再灌注损伤。

心肌Cx43在心脏缺血再灌注损伤及其保护作用的研究进展

缝隙连接蛋白43（Cx43）是哺乳动物心脏最主要的连接蛋白，它在心脏发育及心脏疾病中具有重要意义。缺血预处理（ischemic preconditioning．IPC）和缺血后处理（ischemic postconditioning．IPOC）是最强的两种缺血心肌内源性保护方法。研究表明．Cx43对IPC及IPOC心脏保护具有重要调控作用。本文就Cx43在心脏缺血／再灌注（I／R）损伤及其保护作用的研究进展予以综述。

番茄红素对SD大鼠在体心脏缺血再灌注损伤的影响及其作用机制

目的探讨番茄红素对SD大鼠在体心脏缺血再灌注(IR)损伤的影响及其作用机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、番茄红素组、IR损伤组、番茄红素+IR损伤组各15只,番茄红素组与番茄红素+IR损伤组术前15 d给予番茄红素,其他组给予生理盐水,1次/d。再灌注24 h后检测各组心肌梗死面积;再灌注3 h后检测炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-6,血清心肌酶谱指标乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK),血清氧化应激损伤指标超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)变化水平,比较线粒体相关蛋白在mRNA与蛋白水平的表达。结果与IR损伤组比较,番茄红素+IR损伤组心肌梗死面积显著减少,CK、LDH、TNF-α、CRP、IL-6、MDA水平显著降低,SOD水平显著升高;线粒体动力相关蛋白(Drp)1、线粒体融合蛋白(Mfn)及视神经萎缩症蛋白(Opa)1 mRNA与蛋白水平显著增高(均P<0.05)。结论番茄红素对SD大鼠在体心脏IR损伤有较好的保护作用,其保护机制与抑制炎症反应、减少氧化应激、改善线粒体形态、提高线粒体代谢密切相关。

妊娠期糖尿病SD大鼠对子代心脏缺血再灌注损伤的影响

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM) SD大鼠对子代大鼠心脏缺血再灌注(I/R)损伤的影响及作用机制。方法选择妊娠中期SD雌性大鼠25只,按照随机数字表法分为研究组(13只,腹腔注射35 mg/kg链脲佐菌素建立GDM模型)和对照组(12只,腹腔注射等量柠檬酸盐缓冲液)。对比两组子代大鼠刚出生时的体重,饲喂24周后的体重、全心质量和体重与全心质量比值;对两组子代大鼠构建心脏离体I/R模型,生理计录仪测定I/R前和I/R后大鼠心脏功能指标;western blot检测两组子代大鼠I/R前和I/R后心肌相关蛋白激酶B(PKB)、腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的相对表达量。结果 (1)两组子代大鼠刚出生时的体重比较,差异无统计学意义(P>0.05);生长至24周时,子代研究组体重(286.91±18.17 vs.257.91±19.02) g、全心质量(850.12±130.41 vs.718.94±124.57) mg、全心质量/体重(2.95±0.12 vs.2.78±0.10) mg/g,明显高于子代对照组(P<0.05)。(2)I/R后,子代研究组心率与收缩压的乘积(RPP)水平(3 350.84±319.26 vs.6 710.12±424.91)次/min×mm Hg,明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);(3)I/R后,两组ACC蛋白(研究组:1.32±0.24 vs.0.68±0.09;对照组:1.87±0.41 vs.0.69±0.12)和AMPK蛋白(研究组:2.28±0.51 vs.1.13±0.33;对照组:3.39±0.58 vs.1.12±0.22)相对表达量均较I/R前明显升高,且子代研究组明显低于子代对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 GDM大鼠对子代的生长发育过程会产生影响,导致体重增加和心脏功能异常及对子代大鼠心脏I/R损伤产生不耐受,从而引起心脏功能异常。

维生素C对抗外源性溶血磷脂酰胆碱所致的离体大鼠工作心脏类缺血再灌注损伤作用

目的 :观察维生素C的对抗外源性溶血磷脂酰胆碱(LPC)所致的离体大鼠工作心脏类缺血再灌注损伤作用。方法 :利用麻醉SD大鼠 ,制备离体大鼠工作心脏模型。C组 :用正常K H液连续灌注 35min ;L组 :用含 5 μmolLPC的K H液灌注 5min ,正常K H液再灌注 30min ;V组 :先用含 10 0 μmol维生素C的K H液灌注 5min ,再用含 5μmolLPC的K H液灌注 5min ,用含 15 0 μmol维生素C的K H液再灌注 30min。结果 :与C组相比 ,再灌后L组心功能指标均明显下降 ,室颤发生率提高 ,灌注液中乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛 (MDA)含量明显升高 ,心肌组织中超氧化物歧化酶 (SOD)活力明显降低。L组相比 ,V组心功能指标均明显升高 ,无室颤发生 ,灌注液中LDH和MDA含量明显降低 ,心肌组织中SOD活力变化不明显。结论 :维生素C对LPC所致的心肌类缺血再灌注损伤有明显的对抗作用。

丙泊酚或与腺苷联合预处理对犬心脏缺血-再灌注损伤的作用

目的观察丙泊酚预处理及与腺苷联合预处理对犬心脏缺血-再灌注损伤的作用。方法21只杂种犬随机分为丙泊酚预处理组(A组)、丙泊酚与腺苷联合预处理组(B组)和缺血-再灌注组(C组),每组7只。C组经历稳定60min,左前降支结扎60min与松开结扎再灌注120min;A组在缺血前30min持续输注丙泊酚直至冠脉结扎前,再行上述缺血-再灌注;B组在丙泊酚输注期间、缺血前10min推注腺苷后续缺血-再灌注处理同C组。于缺血前、缺血15、30、60min及再灌注30、60、120min时抽取冠状静脉窦血样检测乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的活性。实验结束后用Even’s蓝与TTC双染法测量危险及梗死的心肌面积。结果从缺血30min起,各组血清CK显著升高直至实验结束;A、B组在缺血与再灌注期间CK显著低于C组(P<0.05,0.01)。各组心脏间危险面积无显著性差异,而A、B组梗死面积显著低于C组(P<0.01)。上述各指标A、B组间无显著性差异。结论丙泊酚单纯预处理与联合腺苷预处理均可减轻麻醉犬心脏缺血-再灌注损伤,缩小梗死面积。腺苷对丙泊酚预处理的心脏保护作用无附加影响。

碱性成纤维细胞生长因子对心脏缺血再灌注损伤的治疗作用

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在心脏缺血再灌注损伤(MIRI)中发挥的作用及机制。方法将30只SD大鼠随机分为正常对照组(Control)、MIRI组、MIRI后bFGF治疗(MIRI+bFGF)组。通过结扎大鼠冠状动脉左前降支构建MIRI动物模型,随后使用小动物超声影像系统检测心功能状况,包括左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(FS)和每搏输出量(SV);全自动生化检测仪分析心肌酶谱,包括肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH);TTC溶液染色法检测心肌梗死面积;TUNEL细胞凋亡检测分析心肌细胞的凋亡情况;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清炎性因子的含量,包括白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α。结果与MIRI组比较,bFGF治疗可缓解因MIRI引起的心功能降低、心肌酶谱增高、心肌梗死面积增大、心肌细胞凋亡率增高和血清炎性因子上升。结论 bFGF可通过降低心肌细胞的凋亡率和拮抗炎性因子的表达而在MIRI中发挥保护作用。

氢对家兔缺血再灌注损伤心脏血流动力学的影响

目的应用家兔缺血再灌注损伤模型探讨氢对心脏血流动力学的影响。方法新西兰白兔40只随机分组,正常组(n=10)为假手术组分离但不结扎前降支;模型组结扎60min再灌注后分别给予静脉盐水(n=5)10mLkg和腹腔空气(n=5)10mL/kg;静脉氢盐水组(n=10)结扎60min再灌注后,静脉泵入氢盐水10mL/kg;腹腔氢气组(n=10)结扎60min再灌注后给予腹腔氢气10mL/kg。结果氢对缺血再灌注家兔心血流动力学的左心收缩压(LVSP)、左心舒张压(LVDP)、左心室舒张压未压(LVEDP)及等容收缩期左心室内压上升最大速率(+dp/dtmax)等观察指标产生良好的有益影响,而且除个别指标外,腹腔氢气这种作用优于静脉氢水。结论氢气对家兔缺血再灌注损伤心脏血流动力学具有一定有益作用。

降纤酶对离体大鼠工作心脏缺血再灌注损伤的作用

目的 :探讨降纤酶 ( Df)对心脏缺血再灌注损伤的作用。方法 :采用离体大鼠工作心脏缺血再灌注损伤模型 ,通过检测缺血再灌注损伤前后对照组、Df低剂量组及 Df高剂量组的心功能参数 ,观察Df的作用。结果 :Df可降低实验动物的室颤发生率 ,增强心肌收缩力 ( P<0 .0 5 ) ,防止冠脉流量下降 ( P<0 .0 5 )及左室内压下降 ( P<0 .0 1) ,促进压力最大上升速度的恢复 ( P<0 .0 5 )。结论 :Df对心脏缺血再灌注损伤具有显著的保护作用。

非编码RNA在心脏缺血再灌注损伤中的研究进展

经典的遗传学中心法则认为RNA是DNA与蛋白质中间的信使，但随着RNA测序技术的发展，人们逐渐发现占人类基因组98．5％的不编码蛋白的基因同样发挥着重要生物学作用。曾被认为是转录过程中垃圾产物的非编码RNA（non—coding RNA，ncRNA），能够调节多种生物学信号通路，与DNA、RNA和蛋白质相互作用，参与人类疾病的发生发展，具有重要的研究价值。

荭草苷对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用研究

细胞自噬，一种细胞内源性保护机制，与心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury，MIRI）的发生发展密切相关，目前已成为MIRI新治疗靶点。荭草苷（Orientin）属黄酮类单体成分，是苗药都木油的主要药效物质基础之一，具有抗氧化、