妊娠糖尿病母鼠其胎儿心脏P38 MAPK的表达及意义

目的:了解p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,P38 MAPK)在妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)母鼠胎儿心脏中的表达规律,旨在探讨其与妊娠期糖尿病母鼠其婴儿发育异常的内在联系。方法:取成年雌性SD大鼠随机分成两组,通过阴道涂片确定怀孕后分别注射链脲佐菌素(streptozoto-cin,STZ)及柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,建立GDM组和对照组,给药后72 h隔天测血糖及体质量。两组大鼠分别于孕后第12、15、19 d随机抽取剖宫,进行胎鼠心脏取材,HE染色观察心脏组织病理变化,免疫组化检测P38 MAPK的蛋白表达量,荧光定量PCR方法检测心脏组织P38 MAPK mRNA的表达。结果:①对照组子鼠心脏发育情况正常,未见心肌壁异常增厚、房室间隔病理性缺损及动脉圆锥干畸形等异常情况。高倍镜下可见心肌细胞呈椭圆形,胞浆丰富,核大,形态规则,染色均匀。GDM组12、15、19 d均可见子鼠心脏发育异常,包括室间隔缺损、圆锥干发育畸形、心肌异常肥厚及心腔扩大等,高倍镜下可见12、15 d心肌细胞结构较清晰,细胞肿胀,胞浆溶解,胞核形态尚规则,细胞结构不清。19 d细胞可见胞浆溶解,成片的无结构区,胞核形态不规则。②第12、15、19 d GDM组p38MAPK蛋白在胎鼠心肌细胞胞浆中的表达显著增强,与相应时间点的对照组相比均明显增高,在GDM组中,以第12 d的表达最强。③第12、15、19 d GDM组胎鼠心脏组织中p38 MAPK mRNA的相对表达量明显高于相应时间点的对照组。结论:妊娠糖尿病母鼠其胎鼠心脏发育异常的发生率明显升高。p38 MAPK蛋白及mRNA在妊娠糖尿病胎鼠孕12、15、19 d三个观察点的心脏表达水平明显增高,提示其可能参与妊娠糖尿病致心脏发育异常的过程。

3例CHDFIDD患儿的分子遗传学分析及文献复习

目的分析先天性心脏缺陷、面部畸形和智力发育障碍[CHDFIDD,细胞周期蛋白依赖性激酶13(CDK13)相关疾病]患儿的临床表型及基因突变情况,探讨其遗传学病因。方法采用芯片捕获高通量测序技术对3例CHDFIDD患儿及其父母的基因组DNA进行全外显子组测序,对疑似致病突变进行Sanger测序验证和生物信息分析。以“CDK13基因”“CDK13相关疾病”为检索词,检索中国知网、万方数据库建库至2024年2月的文献;以“CDK13”“CDK13-related disorder”“CHDFIDD”为检索词,检索PubMed数据库建库至2024年2月的文献,对相关文献进行复习。结果全外显子组测序结果均提示3例患儿存在CDK13基因杂合突变,分别为c.2572C>T(p.Leu858Phe)、c.2579G>A(p.Arg860Gln)和c.2602C>T(p.Arg868Trp),Sanger测序也证实了3种突变,结合临床表型,3例患儿均被确诊为CHDFIDD。3例患儿在各自家系中表现为新发突变;但不排除患儿双亲之一为该突变的生殖系嵌合体。根据美国医学遗传学与基因组学学会的指南,3个突变位点均可能致病。文献复习检索到14篇相关文献共108例CHDFIDD病例,其中c.2572C>T突变未见文献报道。结论CDK13基因突变可能是该3例患儿的遗传学病因。本研究丰富了CDK13基因突变谱,为CHDFIDD相关疾病的诊疗提供了参考。

妊娠期糖尿病胎鼠心脏T-同源盒转录因子表达研究

目的探讨T-同源盒转录因子5(TBX-5)在母鼠妊娠糖尿病(GDM)胎鼠心脏中的分布、表达规律及其在胎鼠心脏发育异常中的作用。方法将成年SD雌鼠随机分成GDM组和对照组,通过阴道涂片确定怀孕后分别注射链脲佐菌素(STZ)及柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(PBS)制备GDM模型,于孕0、3、6、9、12、15、19天对母鼠进行尾静脉采血测血糖,并分别于孕后第12、15、19天进行胎鼠心脏取材,HE染色观察心脏组织病理变化,免疫组化检测TBX-5的表达并进行半定量检测。结果与对照组相比,GDM组胎鼠出现液化吸收胎、死胎、畸心胎的例数增多(P<0.01)。在大体观及高倍镜下,GDM组12、15、19天胎鼠心脏发育异常比例多于对照组(P<0.01)。在正常对照组及GDM组各亚组中,TBX-5均在第12天时表达最强,明显高于15、19天(P<0.01)。TBX-5在15天及19天时的表达无明显差别(P>0.05)。孕12、15、19天GDM组TBX-5在心肌细胞表达显著增强,与相应时间点的对照组相比均明显增高(P<0.01)。结论 TBX-5蛋白在妊娠糖尿病母鼠孕12、15、19天三个观察点胎鼠心脏的表达水平明显增高,提示其过度表达可能与妊娠期糖尿病致胎鼠心脏畸形的发生存在关联。