巯基修饰剂对硫化氢的离体心脏灌流效应的影响

目的观察巯基氧化剂及还原剂对大鼠离体心脏心功能的影响,以探讨巯基氧化剂二酰胺(diamide)及还原剂二硫苏糖醇(DL-dithiothreitol,DTT)对心肌活动的调节意义,并观察其对硫化氢的离体心脏灌流效应的影响。方法应用Langendorff灌流大鼠离体心脏,用生理浓度NaHS(100μmol.L-1)持续灌流20 min,测量心率(HR)、左室内压差(△LVP=左室收缩压-左室舒张压)、左室内压变化速率(±dp/dtmax)、冠脉灌流量(CPF)等指标;分别应用Diamide及DTT预灌流,后给予生理剂量NaHS灌流,观察其是否可以阻断NaHS的效应。结果生理剂量NaHS持续灌流20min内,可以明显抑制±dp/dtmax及△LVP(P<0.05),而对HR、CPF几乎没有影响。巯基氧化剂二酰胺可以大部分阻断H2S的心脏功能负性调节效应,而经巯基还原剂DTT灌流后,H2S可以发挥负性调节作用。结论内源性H2S可能通过作用于心肌组织蛋白质中Cys-SH位点,产生心肌的负性调节作用。

乌榄叶水提取物对大鼠离体心脏灌流的作用探究

目的探究乌榄叶水提取物对大鼠离体心脏的冠脉流量、心肌收缩力及心率的影响。方法采用Langendorff离体心脏灌流法,通过MedLab生物信号采集处理系统,观察药物对正常大鼠离体心脏的冠脉流量、心肌收缩力及心率的作用。结果乌榄叶水提取物对大鼠冠脉流量作用效果与丹参的类似,与生理盐水空白组比较差异有统计学意义,具有稳定和增加冠脉流量作用,给药后前6 min表现为加强心肌收缩力作用,而后均逐渐减弱恢复。心率在整个过程中持续下降,且下降速率快。结论乌榄叶水提取物对冠脉流量和心肌收缩力具有先增加后减少至给药前状态的双向作用,并有较快、较强的慢心率作用。结果提示乌榄叶可能有利于降低心脏耗氧量,维持心功能,起保护心肌的作用。

离体豚鼠心脏灌流法在冠心宁注射液生物活性检测中的应用

目的:研究豚鼠离体心脏灌流法在冠心宁注射液生物活性检测中的应用,为完善其质量标准提供参考。方法:采用离体豚鼠心脏灌流技术,对6个厂家27批冠心宁注射液样品进行生物活性检测。结果:冠心宁注射液能显著增加离体豚鼠心脏的冠脉流量。在一定剂量范围内,冠心宁注射液表现出一定的量效关系;在一定剂量下,其对同一只离体心脏的灌流增加量重复性较好,但在不同心脏上重复性较差。结论:此法有望成为冠心宁注射液的有效性质量控制方法。

哺乳动物离体心脏灌流技术与仪器设备

哺乳动物离体心脏主动脉逆行灌流法(Langendorff法),至今仍然是心血管研究领域中的一项重要技术方法,其内容也逐渐扩展到与心血管系统关联的转基因小鼠模型上。Langendorff法有恒压与恒流两种基本的灌流方式。两种方式各有优缺点和应用范围,实验装置也有所不同。近年来出现的新型仪器技术与设备装置,通过对蠕动泵的精确的反馈控制,将恒压与恒流灌流方式结合起来,并可适时进行转换和动态监测。采用新的仪器技术,只要严格控制实验条件,可大大提高实验效率,使离体心脏灌流法在研究和教学领域得到进一步的发展。

一种多用小动物离体心脏灌流装置的研制及应用

目的：探讨一种新的多用小动物离体心脏灌流装置。方法：通过２６例大鼠同时离体左室顺行灌流两鼠双心脏，探讨该灌流装置的适用性。结果：灌流心脏在０～３ ｈ 内各心功能指标均无明显变化。结论：本多用小动物离体心脏灌流装置满足医学科研实验的要求，具有极高的推广应用价值。

心衰灵对大鼠心脏灌流实验研究

用戊巴比妥钠造成大鼠实验性心力衰竭,并进行离体心脏灌流。结果表明:心衰灵可使心脏搏动持续时间延长,另外还可使心脏停搏后至复跳时间缩短,首次给药,心衰灵与哇巴因作用相似;再次给药,心衰灵作用超过哇巴因。心衰灵各浓度组尤以浓度为1.0g/ml 时作用最强。

Langendorff离体心脏灌流实验装置的改进

Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ离体心脏灌流实验装置的改进钟玲，刘建军（暨南大学医学院药理学教研室，５１０６３２，广州）动物离体心脏灌流的方法是Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ首创的，多年来虽有改进，但基本操作和装置大致相同￣［１，２］。Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ灌流法是恒...

家兔离体心脏灌流试验的改进及其效果

目的:通过改进离体心脏灌流试验,延长家兔离体心脏存活时间。方法:健康大耳长白家兔10只随机分为对照组与实验组,每组5只;通过改良Krebs-Henseleit液(K-H)配方与部分术式操作,比较两组的体外存活时间。结果:与对照组比较,改进组家兔离体心脏在体外稳定有节律跳动时间明显延长(P<0.01)。结论:改良部分手术操作以充分暴露离体心脏,加之去掉K-H配方之Na2EDTA而减少与Ca2+络合以相对提高有效Ca2+浓度,伴同时增加镁离子浓度,以共同改善心肌收缩功能和延长离体兔心脏存活时间。此简捷模型宜用于专业实验教学与筛选心脏药物等研究。

小型蛙离体心脏灌流实验方法的研究

以小型的泽蛙(Rana limnocharis)为实验动物,分别用传统实验操作方法和改进后的实验操作方法进行"蛙心灌流"实验.结果显示:与传统实验操作方法相比较,采用改进后的方法进行实验操作具有更高的成功率、更长的标本存活时间和更强的蛙心收缩力,而且均达到差异极显著水平(p<0.01或者p<0.001).

单管法离体心脏灌流实验教学改进

单管法离体心脏灌流是医学院校的机能实验学课程中的常规实验项目,是研究心脏功能的重要手段之一,在教学和科研中应用广泛。现有相关教材中对单管法的操作方式描述不一,甚至有较大差别;传统的单管法蛙心灌流实验装置本身结构缺陷使实验结果易受一些应避免的非处理因素的影响。为了优化单管法离体心脏灌流实验操作和实验装置,以提高学生操作技能和科研意识,收集整理了近年出版的教材中描述单管法离体心脏灌流实验相关资料。通过比较分析各教材中描述的单管法操作的长处和不足,提出了对操作方法和实验装置的改进措施。

蛙心脏灌流系统的自行组装及蛙心肌细胞分离

根据Langendoff心脏灌流系统原理,参照Langendoff心脏灌流系统模型,利用本实验室已有的恒温浴槽和医院常用的静脉输液管组装了蛙心脏灌流系统。利用该灌流系统,采用胶原酶溶液灌流蛙心脏,分离到游离的蛙心肌细胞。为观测蛙心肌细胞通道电生理学特性的实验打下了一定的基础。

大鼠Langendorff离体心脏灌流模型的制备经验及其影响因素分析

目的:建立稳定有效的大鼠Langendorff离体心脏灌流模型。方法:采用成年SD大鼠腹腔注射麻醉后,开胸取心,使用改良K-H液恒温、恒流灌注,通过传感器、放大器、信号记录仪,监测记录心室压、灌注压、心脏表面心电图和心脏表面温度。结果:制备成功的大鼠Langendorff离体心脏灌流模型,心室内压保持在75mm Hg左右,心率保持在250次/min左右,节律稳定,无或偶尔发生心律失常,10ml/min恒流灌注,灌注压保持在65mm Hg左右,在持续含氧灌流的情况下,心脏自主搏动可稳定保持2小时以上。结论:严格控制实验过程中的各个环节,熟练掌握操作技术,大鼠Langendorff离体心脏灌流模型均可制备成功,并保持稳定。

离体心脏灌流技术在抗心绞痛中药生物活性检测中的应用初探

目的:初步研究离体心脏灌流法在抗心绞痛中药生物活性测定中的应用。方法:用Langendorff法进行离体豚鼠心脏灌流,测定丹参注射液、冠心宁注射液、香丹注射液、注射用丹参、丹红注射液5个抗心绞痛中药注射剂在给药前后的心脏冠状动脉流量的变化。结果:以上5个注射剂在一定的浓度下均能扩张冠状动脉,增加冠脉流量,同一注射剂的不同批号在相同浓度下冠脉流量不一致。结论:Langendorff离体心脏灌流法很有可能成为检测抗心绞痛中药的生物活性的理想方法,值得进行深入研究。

门冬氨酸钾镁对离体灌流心脏缺氧的保护作用

目的探讨门冬氨酸钾镁对离体心脏缺氧的保护作用,及2种不同制剂组成方式的门冬氨酸钾镁注射液的效能比较。方法将60只SD大鼠取心脏行Langendorff离体心脏灌流,依照灌流液中钾、镁组成的不同分为A制剂组(门冬氨酸钾+门冬氨酸镁)、B制剂组(天门冬氨酸+氧化镁+氢氧化钾)及对照组(KCl+MgSO4)3组,每组各20只动物,3组的K+、Mg2+等剂量。记录离体大鼠心脏在缺氧条件下的HR、左室压力变化及心脏跳动持续时间。结果A制剂组中离体心脏在缺氧后HR及左室压力降低速度缓慢,心脏跳动持续时间达(273.9±65.2)min,与B制剂组(174.7±43.6)min及对照组(121.8±32.9)min相比明显延长(P<0.01)。结论门冬氨酸钾镁液对离体缺氧心脏有保护作用,明显延长缺氧状态下心脏的跳动时间,但制剂B比制剂A的抗缺氧效能差。

介绍一套小动物离体灌流心脏心电信号研究设备

作者开发了一套小动物离体心脏电活动研究设备。该设备集心脏灌流、起搏、表面心电图、His束电图、心房和心室单相动作电位记录等多项功能于一体 ,在国内外尚未见相同报道。

心脏灌流固定在大鼠视网膜石蜡切片中的应用

【摘要】目的评价心脏灌流固定视网膜在大鼠视网膜石蜡切片中的可靠性，优化大鼠视网膜石蜡切片的固定方法。方法实验研究。于2013年6—12月在山东中医药大学眼科研究所，根据固定方法的不同分为A组和B组，A组为常规固定方法，B组为心脏灌流固定。24h后制作标本进行苏木精一伊红染色，分析比较固定效果。结果A组均有眼球收缩变形，视网膜脱离。B组经心脏灌流固定的大鼠眼球外形无明显变形及收缩，视网膜未见明显脱离，显微镜下视网膜组织结构清晰，各层细胞排列紧密，无明显裂隙。结论多聚甲醛心脏灌流固定大鼠视网膜可保持视网膜无脱离、结构完整，是用于动物实验固定大鼠视网膜的一种有效稳定的方法。

离体灌流心脏希氏束电图记录方法

为稳定地记录离体心脏希氏束电图，我们研制成一种新型的二合一插管电极，利用这种电极可同时完成Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ法心脏灌流及希氏束电位记录。心脏取自成年家兔或幼狗，与Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ法相同，首先经主动脉逆行插入这种插管电极实现心脏灌流，然后在示波器监视下小心转动插管，当电极贴近希氏束部位时，即可记录到离体灌流心脏的希氏束电位。实践证明：这种方法操作简便，组织损伤小，波型记录稳定。如配合心电等指标的测量，可在生理学、药理学等多种实验中应用。

运用离体心脏灌流研究丹瓜方对正常大鼠心血管的影响

目的:通过离体心脏灌流技术,评估体现痰瘀同治法的丹瓜方药液干预正常大鼠心脏功能结果,探讨丹瓜方药液预防糖尿病心血管病变的可能机制。方法:SD大鼠按体质量分层,随机分为糖脉康组,丹瓜方低、中、高剂量组,空白对照组。丹瓜方低、中、高剂量组分别按丹瓜方原生药相当于每kg成人体质量的5、10、15倍给药,糖脉康相当于低剂量药量,配制容积相等糖脉康药液,都按6.83m L·kg-1·d-1的灌胃量给药。运用恒流式离体心脏灌流装置检测灌流液不含垂体后叶素及含有垂体后叶素时,各组大鼠的离体心脏冠脉流量、心率、心肌收缩幅度。结果:灌流液不含Pit:5、10、15、20、30min时间段,丹瓜方低、中、高剂量组及糖脉康组心率快于空白对照组(P<0.01);15min时间段,丹瓜方高剂量组冠脉流量多于空白对照组及糖脉康组(P<0.01);5、10、15、20、30min时间段丹瓜方高剂量组心肌收缩幅度大于空白对照组(P<0.01),15、20min时间段糖脉康组大于空白对照组(P<0.01),5、10、30min时间段丹瓜方高剂量组大于糖脉康组(P<0.01)。灌流液含有Pit:5min时间段,丹瓜方高剂量组心率快于空白对照组(P<0.01);5、20min时间段丹瓜方低剂量组冠脉流量多于空白对照组(P<0.05),10min时间段多于空白独照组(P<0.05),5min时间段丹瓜方高剂量组冠脉流量多于空白对照组(P<0.05);10、15、20、30min时间段丹瓜方高剂量组心肌收缩幅度大于空白对照组及空白对照组(P<0.01)。结论:丹瓜方具有改善心肌收缩幅度、稳定心率和抗心肌缺血缺氧作用。

离体心脏灌流法在丹参注射液生物活性检测中的应用

目的:考察豚鼠离体心脏灌流法检测丹参注射液生物活性的可行性,为进一步完善其质量控制标准提供参考。方法:采用豚鼠离体心脏灌流法检测丹参注射液对冠状动脉流量的影响,并以冠脉流量增量为指标考察其生物活性。分别进行量效关系考察和重复性研究,对4个厂家12批丹参注射液样品的生物活性进行检测。结果:丹参注射液在豚鼠离体心脏灌流模型中对冠脉流量有显著增加。在实验条件下,在原液0.1～0.6 mL剂量范围内,丹参注射液表现出一定的量效关系;在0.3 mL剂量下,在一定的时间内,丹参注射液对同一心脏和不同心脏的生物活性重复性都较好。结论:此模型用于丹参注射液生物活性质量控制指标具有一定的可行性,通过进一步方法改进和探索有望成为丹参注射液的有效性质量控制方法。

心脏离体灌流装置观察细胞移植对心脏功能的影响

目的观察胚胎心肌细胞移植到大鼠急性心肌梗死区后对大鼠心脏功能的影响及其存活情况。方法100只成年大鼠随机分成2组。移植组开胸结扎大鼠冠状动脉后在梗死区内注射培养的胚胎心肌细胞悬液;对照组结扎冠状动脉后在与移植组相同的部位注射等量的细胞培养液。各组分别在移植后的48h、72h、1周、2周收集心脏标本,HE染色及抗5鄄溴脱氧尿核苷(5鄄BrdU)免疫组化染色。Langendorff心脏离体灌流装置测定移植术后第2周各组大鼠的心脏功能。结果移植组大鼠心脏左室收缩峰压(LVSP)、左室内压最大上升与下降速率(+dp/dtmax,-dp/dtmax)与对照组相比明显升高,差异有非常显著意义(P<0.01),左室舒张期末压(LVEDP)明显降低,与对照组相比差异也有非常显著意义(P<0.01)。在移植组心肌梗死区内可以看到存活的胚胎心肌细胞,对照组未发现。结论胚胎心肌细胞移植能够改善大鼠的心脏功能,并且可以在大鼠的心肌梗死区内存活及分化。