志贺氏I型痢疾杆菌O-特异性多糖与破伤风类毒素结合疫苗的制备及其在小鼠体内的免疫原性

从志贺氏I型痢疾杆菌LPS中分离纯化出O SP半抗原 ,以ADH为连接剂将其与TT结合形成O SP TT结合疫苗 ,并用此结合疫苗免疫NIH小鼠 ,结果显示单独使用O SP免疫后 ,小鼠血清中没有抗LPS抗体产生 ,而用O SP TT免疫后小鼠血清中产生了抗LPSIgG和IgM抗体 ,且IgG抗体水平高于IgM抗体 ;O SP TT免疫组第二次和第三次免疫后IgG抗体水平均有显著的升高 (P <0 0 1) ,但第二次和第三次免疫后血清IgM抗体虽有升高 ,但与前一次免疫相比均无显著差异 (P >0 0 5 ) ,表明O SP TT结合疫苗具有加强免疫应答效应。补体介导的体外杀菌活性试验结果证明 ,O SP TT免疫血清在 1∶16 0倍稀释后仍对志贺氏I型痢疾杆菌具有特异性杀菌活性。

鼠伤寒沙门氏菌福氏志贺氏痢疾杆菌致小儿混合性医院感染1例

患儿高×,女,7个月,主因咳嗽5天,喘息2天,诊为哮喘性支气管炎于1995年6月5日入院,病历号165025。经治疗呼吸道症状明显好转,而于第4日体温升高,大便次数增多,每日数次、十余次,呈黄绿色粘液稀便,镜检脓细胞++,红细胞3—5,连续三次培养分离出鼠伤寒沙门氏菌;其后培养又分离出福氏志贺氏痢疾杆菌,经联合用药抗感染及支持疗法,患儿痊愈出院,疗程14天。 前三次大便培养,在SS培养基上均长成无色半透明的中等大小菌落,在双糖铁琼脂培养基发酵葡萄糖,产酸产气,不分解乳糖,产生硫化氢,有动力,赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶试验、甲基红试验、枸椽酸盐利用试验阳性,氧化酶、苯丙氨酸、尿素、葡萄糖酸盐及β-半乳糖苷酶试验阴性。噬菌体裂解试验阳性。

福氏志贺氏菌毒力基因ipaC在大肠杆菌中表达的初步研究

目的 构建福氏志贺氏菌毒力基因ipaC与质粒pET32a的重组质粒 ,转入大肠杆菌中表达 ,并检测表达产物的活性。方法 PCR扩增福氏志贺氏菌毒力质粒中ipaC基因 ,克隆到质粒 pET32aT7启动子下游 ,转化感受态大肠杆菌BL2 1(λDE3) ,IPTG诱导表达 ,SDS -PAGE以及Western -Blot分析。结果 获得pET32a -ipaC重组表达质粒 ,SDS -PAGE以及Western -Blot显示重组质粒表达产物的分子量约为 6 3kDa,并具有一定的免疫活性。结论 福氏志贺氏菌毒力基因ipaC可在大肠杆菌中表达 ,且表达产物具有一定的免疫活性。

痢疾志贺氏Ⅰ型菌在不同平板上生长情况的观察

我们在进行痢疾杆菌菌型分布检验中，发现部分痢疾志贺氏I型菌在ss琼脂平板上生长不佳，而在麦康凯平板上生长良好。为了便于观察，我们将2株痢疾I型菌和2株福氏志贺氏2a菌分别接种于ss琼脂平板和麦康凯平板上进行对比实验。结果如下。1

稳定、无抗药的痢疾福氏2a和宋内双价菌苗候选株的构建

通过体内外基因重组,将大肠杆菌粘附因子cs3基因定位整合到痢疾杆菌福氏2a疫苗株T32菌染色体的asd基因内,使asd基因灭活;将来内O抗原基因克隆至无抗药性表达载体pXL378,获得重组质粒pXL390,将其转化asd-的T32受体菌,构建成福氏2a和宋内双价苗苗株FS01。实验表明:重组质粒pXL390在不带任何抗菌素基因的情况下,在asd-的T32受体菌内是稳定的。FS01株遗传稳定,能表达两种痢疾菌的PLS-O抗原,无明显毒性作用。动物试验表明,以FS01株皮下免疫的小鼠对福氏2a和宋内有毒株的腹腔攻击有100％的保护。

痢疾杆菌不同群、型间交叉保护性试验研究

本文对痢疾杆菌不同群、型间的交叉保护作用进行了观察。试验模型为恒河猴，将其分为４组，第一、三组分别为感染过福氏１ａ和宋内菌并已康复的猴；第四组为用双价菌苗株ＦＳ（福氏２ａ和宋内）免疫的猴体，剂量依次为４×１０１０、６．５×１０１０、６×１０１０，共１６．５×１０１０活菌，第二组为空白对照。所有４组皆用福氏２ａ２５８００×１０８活菌攻击。从发病率来看，不同菌群与菌型间没有明显的交叉保护作用；从发病程度看则一组显著低于对照组，三组与对照组无显著差异，此结果表明痢疾杆菌Ｂ群内存在交叉保护作用，但较同型保护作用弱。

一起志贺氏 I 型痢疾暴发

1988年6月下旬至10月下旬,贵阳市花溪区青岩镇弓腰寨发生一次志贺氏Ⅰ型痢疾暴发。经流行病学,临床及病原学证实,是由人群生活接触传播引起。弓腰寨位于贵阳南郊,离市区30km,交通方便。有54户,297人。住房拥挤,环境、家庭、个人卫生差,苍蝇密度高。有喝生水习惯,经济文化落后。村前有一溪流绕过,是该寨饮用水源。

427株痢疾杆菌菌型分布及药敏调查

人类细菌性痢疾最为常见的病原菌为志贺氏菌属(Shigella),其又可分为A群(痢疾志贺氏菌);B群(福氏志贺氏菌);C群(鲍氏志贺氏菌);D群(宋内氏志贺氏菌)。目前,我国细菌性痢疾仍是严重威胁人群健康的一种常见病、多发病。虽然近年来头孢类、喹喏酮类抗生素的研制有新的进展,但目前对于细菌性痢疾的治疗难度较前几年仍明显增大,平均住院日明显延长,究其原因主要是由于日益严重的细菌耐药。

痢疾杆菌侵袭HeLa细胞基因表达谱的研究

采用cDNA微阵列技术检测了HeLa细胞被痢疾杆菌侵袭1h和3h后的基因表达变化,共发现2倍以上差异表达基因752个,上调基因有509个,下调基因有306个,并初步推测HeLa细胞通过激活某些信号通路,诱导表达多个基因,产生整体的细胞效应,以对抗痢疾杆菌的侵袭。对显著差异表达的两个基因TNFR 1B和ERBB2,在痢疾杆菌侵袭HeLa细胞1h和3h后的表达量经荧光实时定量PCR验证,确定这两个基因的确在痢疾杆菌侵袭期间高表达,它们在细胞对痢疾杆菌2457T侵袭反应中起重要的作用。这些结果促进了对痢疾杆菌分子致病机理的认识,也为形成预防和治疗痢疾的策略提供了理论基础。

痢疾杆菌耐药性及菌群分布特点

目的 :研究 90年代温州地区痢疾杆菌耐药性及菌群分布特点。方法 :对 1990年至 1999年来我院门诊及住院的腹泻病人进行粪便细菌培养及药敏试验。结果 :从 4136份标本中检出痢疾志贺氏菌共 5 84株 ,总检出率 14.12 % ,其中福氏菌 (B群 )占 98.76 %。药敏试验结果显示 ,痢疾杆菌 (B群 )对氯霉素、四环素、优力新等明显耐药 ,对庆大霉素、氟喹诺酮类等较敏感 ,对第三代头孢菌素、丁胺卡那、泰能皆敏感。结论 :90年代温州地区福氏菌为主要流行菌群 ,其耐药性有所增加 。

阳泉市三年来痢疾杆菌菌型分布及耐药性调查(摘要)

于1982—1984年每年6—9月痢疾流行季节,收集我市第三人民医院门诊菌痢患者的大便,进行分离培养。在采集的1450份大便中,共检出痢疾杆菌418株,阳性率28.83%(1982、83、84年的阳性率分别为32.48%、35.21%、16.06%)。分属4群17个型,其中福氏菌343株,占82.1%

痢疾杆菌与动物

<畜牧与兽医>2003年35卷11期34页有王桂英一文"诊断犊牛腹泻的几点体会",此文介绍了对于犊牛腹泻的几点体会,对临诊兽医工作者,有一定的参考价值.

HeLa细胞感染痢疾杆菌前后差异表达的新EST序列的电子延伸及验证

目的:研究痢疾杆菌福氏2a入侵前和入侵后3h的人上皮细胞差异表达的新基因.方法:采用增毒的痢疾杆菌福氏2a 2457T侵袭HeLa细胞,检查HeLa细胞中细菌的数量并用RT-PCR方法从HeLa细胞中提取总RNA,制备探针.采用含有约3000个代表新基因的芯片进行芯片杂交,分析杂交结果.将所获得的新的156条EST序列为种子序列用cDNA微阵列实验,以人类EST数据库为基础库,应用siClone软件进行EST拼接、校对并尽可能延长获得大片段或全长cDNA.选取基因组未注释的编码区序列作为新基因进行RT-PCR实验验证.结果:共鉴定到≥3倍或≤0.33的差异表达的代表新基因的EST序列45条,其中25个延伸序列鉴定为与重要的肠道功能相关的已知基因,并有3个在痢疾杆菌侵袭期间高表达的存在显著差异的新EST序列,他们分别名为:NPCCKH12、ADBCSB02和HTBAMG05,这3个基因是新的人基因或假基因.结论:鉴定出了在HeLa细胞感染痢疾杆菌前后差异表达的新EST序列,为进一步研究痢疾杆菌与寄主相互作用奠定了基础.

夏秋季腹泻标本痢疾杆菌的分离培养及耐药性分析

夏秋季腹泻标本痢疾杆菌的分离培养及耐药性分析单小云，徐瑞龙（浙江金华市中心医院，３２１０００）细菌性痢疾（菌痢）是我国夏秋季发病率最高的急性传染病［１］，志贺氏菌（痢疾杆菌）是引起菌痢最常见的病原菌。笔者于１９９４年７～１０月采集腹泻患者粪便标本３５...