副溶血弧菌TDH快速免疫胶体金检测板的研制

目的:开发特异性检测副溶血弧菌耐热直接溶血毒素(TDH)的快速免疫胶体金检测板。方法:利用本实验室前期制备的两株TDH单克隆抗体T6D4和T9H4,以双抗体夹心法研制胶体金检测板。结果:研制出的快速免疫胶体金检测板能够特异性地检测TDH,检测限为500 ng/ml。结论:成功研制出能够特异性检测副溶血弧菌TDH的快速免疫胶体金检测板,为TDH的快速检测提供了新的测试工具。

胶体金免疫层析法快速检测动物肌肉组织中喹乙醇代谢物

目的优化胶体金免疫层析法快速检测动物肌肉组织中喹乙醇代谢物。方法样品中的喹乙醇残留标志物3-甲基喹噁啉-2-羧酸经盐酸水解、乙腈提取、磷酸缓冲盐溶液复溶,用于胶体金试纸条的检测。依据GB 31650-2019《食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》拟定检出限,筛选符合要求的快速检测产品,根据《市场监管总局关于规范食品快速检测使用的意见》(国市监食检规〔2023〕1号)对快速检测产品进行评价,初步确定该方法的性能指标和交叉反应率要求,并与液相色谱-质谱法进行一致性分析。结果该方法适用于猪、鸡、鱼和虾肌肉组织的检测,猪肉的检出限为4μg/kg,鸡肉、鱼肉、虾肉的检出限为0.5μg/kg,方法灵敏度≥95%、特异性≥95%、假阴性率≤5%、假阳性率≤5%;卡巴氧代谢物喹噁啉-2-羧酸的交叉反应率≤8.0%,喹乙醇、卡巴氧、乙酰甲喹、乙酰甲喹代谢物2-(1-羟乙基)-3-甲基喹噁啉-1,4-二氧化物的交叉反应率<0.1%。该方法测定结果与液相色谱-质谱法一致。结论该方法前处理简单、快速准确,适用于喹乙醇残留物的快速筛查与确证,为喹乙醇残留物快速检测的研发与监测提供综合性的技术手段。

胶体金免疫层析法快速检测山药中的咪鲜胺

目的建立胶体金免疫层析法快速检测咪山药基质中的鲜胺残留量的方法。方法优化前处理过程中提取剂的pH和用量,将胶体金免疫层析快速检测方法应用于山药基质,验证方法的检出限、特异性、假阴性率和假阳性率,并通过液相色谱-串联质谱法确认方法的准确性。结果胶体金免疫层析法快速检测山药中咪鲜胺的检出限为0.3 mg/kg,假阳性率为2%,假阴性率为0;与咪鲜胺-脱氨基咪唑、咪鲜胺锰盐和咪鲜胺-脱咪唑甲酰胺基的交叉反应率分别为200%、100%、100%,可同时检测咪鲜胺及含有2,4,6-三氯苯酚部分的代谢物,实际样本的检测结果与液相色谱-串联质谱法的符合率为88.2%。结论本方法操作简便,检测速度快,准确性高,可应用于基层行政、农产品交易市场或餐饮配送公司快速检测实验室,从源头上保障食品安全。

胶体金免疫层析技术在食品快速检测中的应用

胶体金免疫层析技术在食品快速检测中展现出显著优势。该技术通过利用胶体金与抗原或抗体的特异性结合,实现对食品中多种有害物质如药物残留、病原微生物、生物毒素及违禁物质的快速检测。本文对胶体金免疫层析技术进行概述,在此基础上对该技术在食品快速检测中的实际应用进行分析,以期为相关检测人员提供支持。

胶体金免疫层析试纸条在生物毒素检测领域的研究进展

胶体金免疫层析试纸条是一种常用的检测方法,广泛应用于疾病诊断、生物毒素检测等领域。该技术基于胶体金标记的特异性抗原(抗体)与待检样品中的目标分子相互作用,在试纸条上形成可见的测试线或信号变化。其流程包括样品预处理、标记抗体制备、试纸条组装步骤。胶体金免疫层析试纸条可以用于快速检测食品中的毒素残留、环境中的有害物质以及临床诊断中的相关指标。该技术具有无创、快速、灵敏和准确的特点,在临床应急检测和大规模筛查中能快速获得结果。文章总结了胶体金免疫层析试纸条技术及其在生物毒素检测中的研究进展,并分析了当前胶体金免疫层析试纸条技术的优缺点,展望了该技术在生物毒素检测领域的未来发展方向。

胶体金免疫层析法快速检测黄曲霉毒素B_1的研究

本文应用胶体金免疫层析技术,建立了一种快速检测食品中黄曲霉毒素B1的方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体并喷于玻璃纤维上,黄曲霉毒素B1偶联抗原和二抗鼠抗驴分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装切割成胶体金试纸条并装入检测卡中。测试结果表明黄曲霉毒素B1快速检测试纸条的灵敏度为5ng/ml,检测时间为10min,批内和批间重复性为100%,假阳性率和假阴性率均为0。使用简单方便,非常适合现场快速检测黄曲霉毒素B1。

食品中镉离子胶体金免疫层析快速检测方法的建立及应用

目的:建立更加灵敏、特异的食品镉离子胶体金免疫层析快速检测方法。方法:用1-(4-异硫氰苄基)乙烯基二胺-N,N,N’,N’-四乙酸(1-(4-isothiocyanobenzyl)ethylenediamine-N,N,N’,N’-tetraacetic acid,iEDTA)鳌合镉离子合成Cd^(2+)-iEDTA半抗原,异硫氰酯法制备免疫原Cd^(2+)-iEDTA-牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)和包被原Cd^(2+)-iEDTA-鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA),电感耦合等离子体发射光谱法和聚丙烯酰胺凝胶法进行鉴定;用Cd^(2+)-iEDTA-BSA免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术筛选Cd^(2+)-EDTA单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备Cd^(2+)-EDTA mAb;应用Cd^(2+)-EDTA mAb建立Cd^(2+)残留胶体金免疫层析快速检测方法 (Cd^(2+)-Strip),并测定其性能。结果:免疫原偶联成功,Cd^(2+)-iEDTA-BSA中BSA与Cd^(2+)的含量分别为7.1 mg/mL和191.7μg/mL;筛选出1A3C11、2B7D8、2E10G9、4F3E7共4株杂交瘤细胞,经9次传代分泌抗体稳定,亲和力最高的2E10G9株亲和常数(Ka)为7.58×10~8 L/mol,对Cd^(2+)-iEDTA的半数抑制浓度为16.3μg/L,与Hg^(2+)-EDTA的交叉反应(cross-reaction,CR)率为18.6%,与其他重金属离子无CR;Cd^(2+)-Strip的检测时间为10 min,检出限为5μg/L,其检测结果与竞争ELISA试剂盒(Cd^(2+)ELISA-Kit)、电感耦合等离子体发射光谱法符合率为100%。结论:制备出了亲和力高、特异性强的Cd^(2+)mAb,建立了灵敏、特异、快速、简便的食品镉离子胶体金免疫层析快速检测方法。

免疫胶体金快速检测水产品中孔雀石绿残留的质量分析和评价

目的为推动免疫胶体金类现场快速检测技术在水产品药物残留监管领域中的应用。方法本研究采用一套"盲样式"免疫胶体金类快速检测产品质量评价方法,对10种市售的用于检测水产品中孔雀石绿残留的国产胶体金快速检测产品的假阳性率、假阴性率、检出率及稳定性等指标进行验证。结果结果显示,有3种产品能100%准确检测出84个鱼糜样品中是否残留孔雀石绿,且2个不同批次产品的检测结果一致;另外7种产品检出假阳性或假阴性样品,且2个不同批次间产品的稳定性有差异。结论将此类产品应用于水产品质量安全监管之前,有必要对其最低检出限、假阳性率、假阴性率、稳定性等参数进行验证,以确保检测结果的科学性和公正性。

胶体金免疫层析法快速检测流感病毒应用研究

目的:观察胶体金免疫层析(GICA)法检测流感病毒的效果.方法:用间接免疫荧光法(IFA)作为"金标准",比较GICA与IFA两种方法对同一份标本甲型及乙型流感病毒检测效果,对GICA法诊断试验做出评价.结果:两种方法的检测结果有较好的一致性,GICA法检测流感病毒与IFA法检测结果之间差异无统计学意义(P>0.05).结论:GICA法操作简单、方便、快速,特异、灵敏,在临床流感病毒抗原的检测中具有较好的应用价值.

莱克多巴胺胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制

应用胶体金免疫层析技术建立了一种快速检测莱克多巴胺的方法。采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记莱克多巴胺单克隆抗体并喷于玻璃纤维上,莱克多巴胺偶联OVA抗原和羊抗鼠IgG分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸组装切割成莱克多巴胺胶体金免疫层析快速检测试纸条。试验结果表明,该快速检测试纸条的灵敏度为5 ng/mL,检测时间为5 min,批内和批间重复性为100%,假阳性率和假阴性率均为0。

免疫胶体金法快速检测水产品中喹诺酮类药物

利用QH12杂交瘤细胞株生产抗体,研制高灵敏度的免疫胶体金试剂条,其对洛美沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、培氟沙星的最低检出限分别为2.0、2.5、2.5、5.0 ng·m L^(-1)。通过样品预处理方法优化,建立免疫胶体金快速检测方法(GICT)。将其与HPLC法进行比较,并用LC-MS/MS法验证效果。结果表明,GICT灵敏度高于HPLC法,检测结果与LC-MS/MS法较一致,单个样品检测耗时25 min。综合比较分析,GICT宜作为水产品中喹诺酮类药物残留的快速筛查检测方法进行推广。

基于胶体金免疫层析法快速检测蓝莓中的百菌清残留

为建立蓝莓样品中百菌清残留快速筛查方法,以农药百菌清为目标分析物,系统研究了胶体金标记参数及样品前处理方法对胶体金免疫层析方法(colloidal gold immunochromatographic assay,GICA)的影响。结果表明:以25 nm的胶体金颗粒标记百菌清单克隆抗体作为检测探针,分别将包被原百菌清-BSA(1 mg/mL)和羊抗鼠IgG抗体(0.1 mg/mL)包被于硝酸纤维膜(NC膜),形成检测线(T线)和质控线(C线),组装成百菌清胶体金免疫层析检测试纸条。蓝莓样品经酸化乙腈提取,双蒸水(dd H_(2)O)稀释后,应用该纸条对蓝莓中百菌清残留肉眼观察检出限(LOD)为0.1 mg/kg(T线完全消线),可实现15 min内蓝莓中百菌清的定性与半定量分析,同时,试纸条对样品中4-羟基百菌清、五氯硝基苯、多菌灵和腐霉利的检测不存在交叉反应。蓝莓中百菌清添加回收试验的胶体金免疫层析检测试纸条测试结果与超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱仪(UPLC-MS/MS)方法的检测结果一致。这两种方法都可以成功地应用于蓝莓中百菌清的检测,胶体金免疫层析检测试纸条有助于现场检测,基于UPLC-MS/MS的方法则能提供准确的定量。

胶体金免疫层析法在水产品快速检测中的应用和发展方向

胶体金免疫层析法具有简单快速、敏感特异,无需辅助仪器设备,结果判读容易,稳定性好等特点,该方法已成为现今最快速敏感的免疫学检测方法之一,广泛应用于生物医学等各个领域。本文主要阐述了胶体金免疫层析法的基本原理、技术特点等,并简要介绍了该方法在水产品快速检测中的应用及发展方向。

莱克多巴胺胶体金免疫层析法快速检测试纸条的研制

为研制一种快速、简便的基于胶体金免疫层析法的试纸条,快速检测猪尿中莱克多巴胺（ractopamine,RAC药物残留）,采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记莱克多巴胺单克隆抗体并喷于玻璃纤维上制备胶金垫,RAC-BSA偶联抗原和羊抗鼠IgG分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸组装并切割成莱克多巴胺胶体金免疫层析快速检测试纸条。试验结果表明该快速检测试纸条的检测限为5 ng/mL,可在8~10 min内完成测试,肉眼即可判断,无需其他检测设备。该试纸条灵敏度、特异性、稳定性和重复性均达到临床使用要求,适用于现场快速检测和筛选工作。

胶体金免疫层析法快速检测食品中庆大霉素残留

应用胶体金免疫层析技术,建立一种快速检测食品中庆大霉素残留的方法。采用免疫竞争法,柠檬酸三钠还原制备胶体金颗粒,标记抗庆大霉素单克隆抗体并喷于玻璃纤维上,庆大霉素偶联抗原和羊抗兔二抗分别包被在硝酸纤维素薄膜表面作为检测线(T线)和控制线(C线),制备检测庆大霉素的胶体金免疫层析试纸条,并对试纸条的灵敏度、特异性、准确性和稳定性进行测定。测试结果表明:庆大霉素快速检测试纸条的灵敏度为0.7μg/mL,检测时间为10min,稳定性和特异性良好,与其他同类物质无交叉反应,其检测结果与酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测结果呈现了很好的一致性。该方法快速简便、灵敏度高、特异性强、准确性和稳定性好,非常适合现场快速检测庆大霉素。

胶体金标记免疫分析及其在小分子化合物快速检测中的应用

胶体金标记免疫分析法是近十几年来迅速发展的一种新型的免疫标记分析技术 ,在生物医学中己经有比较广泛的研究和应用 ,但在小分子化合物残留检测中却很少见报道。文章比较详细地介绍了用于检测小分子化合物的胶体金检测试纸的检测原理、制备和应用。

食用油中致癌物苯并芘的快速免疫检测胶体金层析试纸条研制

采用免疫胶体金技术,首次建立了一种快速检测苯并芘的试纸条方法。先合成了苯并芘半抗原,并与载体蛋白偶联得到免疫抗原。再利用人工免疫的方法成功获得了单克隆抗体,通过酶联免疫检测方法的建立对制备的单克隆抗体性能进行了验证。将单克隆抗体用以标记胶体金,并将苯并芘包被抗原与二抗（羊抗鼠Ig G）分别喷制到硝酸纤维膜上,与样品垫、吸水垫依次粘贴在PVC衬板上制备成了胶体金层析试纸条。经验证该试纸条检测限可达5～10 ng/m L,具有检测速度快、操作简单、灵敏度高等优点,且该试纸条与大部分苯并芘结构类似物无交叉反应。经实际食用油样品的加标实验,证明了该试纸条可实现对当前食用油中致癌物苯并芘的快速、准确判定。

T-2毒素胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制

应用胶体金免疫层析技术,研制出一种快速检测T-2毒素的方法。采用柠檬酸三钠还原法制备20 nm胶体金,标记抗T-2毒素多克隆抗体并喷于玻璃纤维上,T-2毒素偶联抗原和羊抗兔二抗分别结合于硝酸纤维素膜上,经过试纸条层析条件优化,依次将样本垫、金标结合释放垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装切割成胶体金试纸条。测试结果表明T-2毒素快速检测试纸条的灵敏度为50μg/L,检测时间为10 min,批内和批间重复性好,保存期为3个月。使用简单方便,非常适合现场快速检测T-2毒素。

胶体金免疫层析试剂盒对甲型H1N1流感病毒(2009)抗原快速检测的敏感性分析

目的了解胶体金免疫层析试剂盒对甲型H1N1流感病毒(2009)抗原快速检测的敏感性。方法分别用甲型流感病毒抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)和甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)对171例疑似甲型H1N1流感(2009)患者鼻咽拭子标本进行检测,以实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)核酸检测结果为参考,比较胶体金免疫层析试剂盒对不同病程以及不同病毒核酸载量标本检测的敏感性。结果 2种试剂盒的检测敏感性与标本的病毒核酸载量呈正相关(P<0.01),病毒载量≥108拷贝/mL时均可达73.3%。同时,2种试剂盒的阳性检出率与标本的病程呈负相关(P<0.01),发病1～2 d时分别为66.7%和62.5%,推测其在实际应用中的理论敏感性分别可达77.3%和74.6%。结论胶体金免疫层析试剂盒检测甲型H1N1流感病毒(2009)在发病初期及病毒载量较高时有较好的检测效果,可帮助临床早期诊断和海关口岸等机构的现场筛查。但鉴于胶体金免疫层析法自身的局限性,其结果只能作为初步参考,最终的确认结果应以PCR结果为准。