超快速冷冻法在犬精子冷冻保存中的应用

目前,犬精子的传统慢速冷冻法虽已广泛应用,但仍存在诸多不足。超快速冷冻法可以实现精子玻璃化,有望进一步提高冷冻质量。研究分别以蔗糖浓度为0M、0.05M、0.1M、0.125M、0.15M、0.2M、0.25M等渗溶液(约300m Osm/L)作为冷冻液,利用微粒法对犬精子进行超快速冷冻,并对复苏后精子的总活力、存活率、顶体完整性、畸形率进行评价。结果表明,0.125M蔗糖组的总活力为40.1±2.0%,存活率60.4±2.8%,顶体完整性65.6±10.5%,存在显著优势。超快速冷冻法能够消除传统方法中冷冻保护剂的毒性和污染,操作快捷、

小鼠受精卵(胚)的快速冷冻法

在进行哺乳动物受精卵(胚)冷冻保存时,为了使冷冻装置简易化和缩短冷冻时间,进行了小鼠受精卵(胚)的快速冷冻实验。以甘油和蔗糖作为冷冻保护剂,将受精卵(胚)从室温直接移入液氮中,用超低温做瞬间冷冻。并对添加剂甘油和蔗糖的浓度与解冻后存活率的关系等方面进行了探讨。

人类胚胎快速冷冻法

体外受精-胚胎移植(IVF-ET)只移植1～2个胚胎,其剩余胚胎多冷冻保存,方法有缓慢冷冻法和快速冷冻法。前者需昂贵的程序冷冻器且费时。后者方法简便,但目前尚无快速冷冻胚泡出生的报道。现介绍将人胚胞快速冷冻获得理想的存活率、着床率与妊娠率,并已出生1例健康儿。 1999年3月～2000年3月将快速冷冻剩余胚胎分为3组,A组:为3～4d的剩余桑椹胚快速冷冻,隔日冻融后体外培养,行ET,5例。B组:为3～4d剩余胚胞继续体外培养至5～6d的囊胚,快速冷冻,隔日冻融后移植,18例。C组:为1～2d剩余胚胎,缓慢冷冻,冻融后培养至5～6d囊胚,再移植,9例。卵巢刺激使用GnRHa和hMG长调节法刺激卵泡发育,当优势卵泡>18mm时,给予hCG 10000IU肌肉注射,35小时后在B超下经阴道采卵。从媒精至3日用HTF液培养,

快速冷冻干燥法制备多孔氧化硅陶瓷

为制备氧化硅多孔陶瓷,尝试了快速冷冻干燥法,探索了氧化硅浆体的分散剂和pH值对孔结构的影响。结果表明:使用0.1wt%六偏磷酸钠作为分散剂时,孔壁处团聚现象明显;改用聚甲基丙烯酸钠团聚显著减少。主要原因是氧化硅表面的Si-OH可能与六偏磷酸钠络合成Si-Na_4P_6O_(18)^-,但其在水中易断裂,减弱了颗粒之间排斥力,未能抑制团聚;而聚甲基丙烯酸钠吸附在氧化硅表面,可能形成Si-C_4H_5O_2等空间位阻抑制团聚。在聚甲基丙烯酸钠的基础上再调节浆体pH值至~10使氧化硅的zeta电位达到^-60 mV,可更好抑制团聚。综上所述冻干法适合制备开口通孔结构的多孔氧化硅陶瓷。

快速冷冻干燥法制备网络纳米结构TKX-50的热分解和燃烧特性

为了研究纳米化1,1′?二羟基?5,5′?联四唑二羟铵盐(TKX?50)的热分解性能与燃烧特性,采用快速冷冻干燥法制备了具有网络纳米结构的TKX?50样品,用扫描电子显微镜(SEM)、X射线衍射仪(XRD)对其进行形貌、结构表征,用热重分析?差示扫描量热(TG?DSC)分析了热分解性能,用相机拍摄燃烧过程,讨论了纳米化结构对TKX?50热分解以及燃烧过程的影响。结果表明,采用快速冷冻干燥法得到的纳米化TKX?50具有纳米级网络骨架连接结构和良好的晶型稳定性;纳米化TKX?50两步热分解峰温为238.0℃和267.7℃,与原料TKX?50相比分别降低了12.1℃与5.6℃。纳米化TKX?50样品具有较低的点火延迟,以及更快的燃烧速率,表明对比原料TKX?50,采用快速冷冻干燥法制备的具有纳米网络结构的TKX?50样品的表面活性原子和基团增多,样品易活化,促进了TKX?50热分解以及燃烧。

不同冷冻方法对胎儿卵巢组织早期卵泡的影响

目的观察不同冷冻方法对胎儿卵巢组织早期卵泡的影响。方法分别采用程序冷冻法(PFG)、快速冷冻法(RFG)、玻璃化冷冻法(VG)冻存胎儿卵巢组织,解冻后进行光镜、电镜观察。结果光、电镜组织形态学观察发现冻后各组卵泡结构均存在一定程度的冷冻损伤。冷冻后的胎儿卵巢内形态正常的卵泡数明显下降,在2 mm×2 mm×1 mm的卵巢皮质内,形态正常的卵泡数在PFG、RFG、VG及新鲜对照组(FCG)中分别为(992.3±618.2)个、(542.8±202.5)个、(1604.8±964.0)个和(1888.2±645.3)个。RFG卵泡数显著低于FEG与VG(P<0.05),但与PFG间差异无统计学意义(P>0.05)。结论三种冷冻方法均可有效冻存胎儿卵巢组织,其中玻璃化法对卵巢内早期卵泡的损伤最小,单位体积内保存的卵泡数最多。

快速冷冻干燥法制备纳米级AP的热分解特性

为了研究纳米化高氯酸铵(AP)的热分解性能,采用快速冷冻干燥法制备了具有纳米结构的AP样品,对其形貌、结构进行表征,利用差式扫描量热法(DSC)得到纳米化AP在不同升温速率下的热分解曲线,用Kissinger公式计算了热分解的表观活化能并讨论了纳米化结构对AP热分解的影响。结果表明:采用快速冷冻干燥法得到的纳米化AP具有纳米级网络结构和良好的晶型稳定性,纳米化AP热分解峰温为424.2℃,与原料AP相比降低了4.4℃;纳米化AP的表观活化能为167.8kJ·mol^(-1),与原料AP相比降低了114.8kJ·mol^(-1)。研究表明采用快速冷冻干燥法制备的纳米级AP样品的表面活性原子和基团增多,样品易活化,促进了AP热分解。

三种冷冻方法对胎儿卵巢组织凋亡相关蛋白表达的Bcl-2、Bax、Caspase影响

目的观察三种冷冻方法对胎儿卵巢组织卵泡凋亡蛋白的影响。方法分别采用程序冻存法(PFG)、快速冻存法(RFG)、玻璃化冻存法(VG)冻存胎儿卵巢组织,解冻后采用免疫组织化学法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。结果各冷冻组卵泡Bcl-2蛋白阳性表达率下降,与新鲜组相比差异显著(P<0.05);Bax蛋白阳性表达率上升,PFG、VG组Bax蛋白阳性表达与新鲜组(FCG)差别不显著(P>0.05);RFG显著高于FCG、PFG、VG(P<0.001)。冷冻后,Caspase-3蛋白阳性表达率上升,PFG、RFG显著高于FCG(P<0.05),VG与FCG差别不显著(P>0.05)。结论玻璃化冻存法可有效冻存胎儿卵巢组织。

快速沉渣冷冻切片在细胞学病理诊断中的应用

对于脱落在液体中的肿瘤细胞，病理科最常用的方法是涂片法、沉渣石蜡切片法。但直接涂片法，细胞易堆积、厚薄不均，细胞易退变，肿瘤的阳性诊断率不高，易漏诊。而沉渣石蜡切片法可以弥补这一缺陷，但其制作过程需经过固定、脱水、包埋等一系列过程，速度较慢，抗原丢失现象较为常见。因此，本实验采用快速沉渣冷冻切片法进行分析，现报道如下．

哺乳动物胚胎冷冻保存的研究进展

哺乳动物胚胎冷冻保存技术按其进展分为缓慢冷冻法、快速冷冻法和玻璃冷冻法。玻璃化冷冻法又分为常规细管法和OPS法。本文综述了缓慢冷冻法、快速冷冻法以及玻璃化冷冻法的操作过程及所需的抗冻保护剂,并对各种方法的优缺点进行了初步分析。

小鼠胚胎的冷冻保存

1972年Whittingham等和Wilmut分别在超低温条件下冻存小鼠胚胎获得成功。20年来,先后研究出常规冷冻法、玻璃化法和快速冷冻法,已有十五种动物胚胎的冻存获得成功。这些方法和技术的出现极大地推动了低温生物学、畜牧业生产及医学的发展。胚胎冷冻保存现已成为实验动物长期保种的重要手段之一。应用冷冻胚胎技术建立实验动物胚胎库(embryo banking)可有效地防止种群的遗传漂变(genetic dreft)。遗传资源丢失和污染。

人类卵巢组织的冷冻保存

卵巢组织冷冻技术可以保存女性生殖内分泌功能.目前冷冻技术有慢速程序性冷冻法、超快速冷冻法和玻璃化法.虽然人类研究卵巢组织冷冻技术40多年,但建立卵巢组织库仍有一些问题需要解决.

小鼠冷冻胚胎库

一引言 1972年Whittingham等人和Wilmut分别在超低温冷冻条件下冷冻保存小鼠胚胎获得成功。由于这项工作的理论意义和实用价值,国内外一些实验室相继开展了这项研究工作并相互交流各自的实验方法。出于对冷冻胚胎贮存的广泛兴趣 , 1974年9月荷兰肿瘤研究所的Otto Mhlbock博士在美国杰克逊实验室组织了一个专题讨论会。Mhlbock博士积极倡导运用冷冻胚胎技术保存小鼠遗传资源。与会代表对冷冻胚胎所涉及的各个方面。

不同冷冻方法对种公牛冷冻精液质量的影响

种公牛精液的冻后活力是评定冷冻精液品质好坏的重要指标之一,也是影响牛人工授精受胎率的重要因素。影响冻精解冻后活力的因素很多,其中冷冻速度,即精子通过对细胞产生致死性伤害的0～-60℃温度区的速度,是决定冷冻精液冻后品质好坏的关键所在。在实际生产中,人们对于冷冻速度主要持有两种观点:一是认为以每分钟降低40℃的冷冻速度冷冻效果最佳;二是认为每分钟下降60℃冷冻效果最好。为此本试验使用两种不同的冷冻速度对牛精液进行冷冻,比较解冻后精液的活力。