乳腺癌组织中人表皮生长因子受体-2、雌激素受体、磷酸酶张力蛋白同源物的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的探讨乳腺癌组织中人表皮生长因子受体-2(HER-2)、雌激素受体(ER)、磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)的表达情况与临床病理特征的关系,以及和患者预后的关系。方法回顾性分析2018年1月至2022年1月临汾市中心医院收治的225例女性乳腺癌患者的临床资料,收集其癌旁正常组织与浸润性导管癌组织,将其分为正常组与癌化组,检测并比较两组HER-2、ER、PTEN表达情况,并分析其与患者临床病理特征的关系;随访1年,根据预后结果分为生存组(202例)与死亡组(23例),比较正常组与癌化组患者肿瘤组织HER-2、ER、PTEN表达情况;对生存组与死亡组资料进行单因素分析与多因素Logistic回归分析,筛选出影响预后生存的独立危险因素。结果癌化组HER-2和ER的阳性表达率及PTEN阴性表达率均高于正常组;HER-2、ER阳性患者中组织学分级为3级、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ、神经/脉管侵犯、淋巴结转移患者占比高于HER-2、ER阴性患者;PTEN阳性患者中组织学分级为3级、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ、神经/脉管侵犯、淋巴结转移均低于PTEN阴性患者;与生存组患者比,死亡组患者中组织学分级3级、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期、神经/脉管侵犯、淋巴结转移、HER-2阳性表达、ER阳性表达、PTEN阴性表达的患者占比均更高(均P<0.05);多因素Logistic回归模型分析结果显示,组织学分级3级、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期、神经/脉管侵犯、淋巴结转移、HER-2阳性表达、ER阳性表达、PTEN阴性表达均为影响乳腺癌患者预后生存的危险因素(OR=1.672、1.863、1.866、1.548、1.471、1.704、1.525,均P<0.05)。结论乳腺癌组织中HER-2、ER高表达,PTEN低表达,组织学分级3级、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期、神经/脉管侵犯、淋巴结转移、HER-2阳性表达、ER阳性表达、PTEN阴性表达均为影响乳腺癌患者预后生存的危险因素,检测肿瘤组织中HER-2、ER、PTEN表达情况对乳腺癌患者治疗及预后具有重要的临床价值。

大鼠胚胎胸椎发育中转化生长因子β1、骨形成蛋白2和Smad4的表达及意义

目的：探讨转化生长因子β1（TGF-β1）、骨形成蛋白2（BMP-2）和Smad4蛋白在大鼠胚胎发育不同时期胸椎的表达情况及意义。方法：用免疫组织化学SABC法与RT-PCR法检测第11-19日在大鼠胚胎胸椎TGF-β1、BMP-2和Smad4表达情况。结果：TGF-β1、BMP-2和Smad4在大鼠不同发育时期胸椎表达部位的变化情况较一致,在E11-E16的脊索细胞及随后的髓核细胞一直呈阳性表达,在E11、E12的生骨节细胞不表达或表达很少;在E13-E19的成软骨细胞及软骨细胞的表达随胚龄的增加而增多;在E14-E19的软骨膜有阳性表达,在骨膜细胞有微弱表达;在软骨基质及围索管始终呈阴性表达。其中TGF-β1和BMP-2在E11-E13.5的细胞外基质有阳性表达,而Smad4无表达。TGF-β1的表达丰度相对恒定;BMP-2与Smad4的表达丰度各有不同程度的变化。结论：TGF-β1、BMP-2和Smad4可能与其他细胞外基质分子共同调节生骨节细胞的迁移、黏附以及围索管和软骨基质的产生有关,促进软骨细胞增殖、分化、成熟与凋亡,并进一步诱导软骨细胞的骨化。

脐血中胰岛素、胰岛素样生长因子-Ⅰ及胰岛素样生长因子结合蛋白-2与胎儿生长发育的关系

目的探讨脐血中胰岛素、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)及胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)的水平与胎儿生长发育的关系及意义。方法单胎足月正常妊娠(无产科并发症)孕妇及其新生儿各90例,根据出生体重将新生儿分为低体重儿(SGA)组、正常体重儿(AGA)组、巨大儿(LGA)组。胎儿娩出后即抽脐静脉血5ml,标本收集后用高效液相色谱法测定脐血中胰岛素、IGF-Ⅰ及IGFBP-2的水平。结果 SGA组脐带血清胰岛素、IGF-Ⅰ水平明显低于AGA、LGA组,AGA组脐血胰岛素、IGF-Ⅰ水平低于LGA组,差异均有统计学意义(P<0.01);SGA组脐血IGFBP-2水平明显高于AGA、LGA组,AGA组脐血IGFBP-2水平高于LGA组,差异均有统计学意义(P<0.01);脐血中IGF-Ⅰ与胰岛素水平呈正相关(r=0.462,P<0.05),而与IGFBP-2呈负相关(r=-0.451,P<0.05);脐血胰岛素、IGD-Ⅰ水平与新生儿出生体重呈正相关(r=0.511,0.562,P<0.05),而IGFBP-2与之呈负相关(r=-0.432,P<0.05)。结论脐血胰岛素、IGF-Ⅰ、IGFBP-2参与胎儿生长发育的病理、生理过程。

胰岛素样生长因子结合蛋白2在新生鼠肺发育中的作用

目的探索胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)2在新生鼠肺发育中的作用。方法SD孕鼠80只分为4组,即A:对照组;B:地塞米松(Dex)1组;C:Dex2组;D:维A酸(RA)组。A、B、D组分别于孕18～20d皮下注射生理盐水、Dex,腹腔注射RA;C组于生后1～3d皮下注射Dex。各组分别于孕18、20、21d(C组孕期不取)、生后1、3、5、7、10、14、21d取肺标本作形态学检查、免疫组织化学、Westernblot及RT PCR检测。结果1.肺组织形态学:B、C组早期肺泡发育提前,数目多,壁薄,晚期则明显落后于A、D组。2.IGFBP2肺表达:A组中IGFBP2主要在胎肺组织中表达,孕18d左右表达最强,随后表达渐减弱。B、C组表达趋势同A组,但生后各时间点均较A组增强;D组生后各时间点均较A组减弱。3.Westernblot:IGFBP2多肽表达强度各组孕18d表达最强,随后渐降低;B、C组生后各时间点表达强度明显高于A组(P均<0.01);D组各时间点浓度均明显低于A组(P均<0.01)。4.RT PCR:IGFBP2mRNA表达的强度变化规律与其肽浓度变化相似。结论IGFBP2在肺发育过程起重要作用,其浓度过高则影响肺发育。

骨形态发生蛋白-2及转化生长因子-β2在大鼠角膜成长过程中的表达

目的探讨转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员骨形态发生蛋白-2(BMP-2)及转化生长因子-β2(TGF-β2)在正常大鼠角膜生长发育过程中的表达及作用。方法用免疫组织化学方法观察TGF-β超家族成员BMP-2及TGF-β2分别在大鼠胚胎17d,出生当天,出生后4、7、10 d和11周角膜蛋白水平的表达。结果BMP-2和TGF-β2在大鼠胚胎17 d时有表达,于出生当天至出生后10 d及成年鼠角膜生长发育过程中呈动态变化过程。结论TGF-β超家族成员BMP-2及TGF-β2在鼠角膜的表达随着角膜的生长发育而调节,BMP-2可能与角膜的生长发育及维持出生后角膜的动态平衡有关。

乳腺癌患者血清血管细胞黏附分子1 B7-同源物2及组织分泌型蛋白Dickkopf-1血管内皮生长因子水平变化和临床意义分析

目的探讨乳腺癌患者血清血管细胞黏附分子1(VCAM-1)、B7-同源物2(B7-H2)及组织分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK-1)、血管内皮生长因子(VEGF)水平变化和临床意义。方法选取2020年2月—2021年7月间嘉兴市妇幼保健院收治的乳腺癌患者50例,另收集同期健康女性志愿者30例为健康对照组。采集空腹外周静脉血4 ml,酶联免疫吸附法检测血清VCAM-1、B7-H2浓度。术中采集乳腺癌患者的肿瘤病灶组织和癌旁正常组织,Western Blot检测不同组织标本中DKK-1、VEGF蛋白表达。收集乳腺癌患者和健康女性志愿者的人口学资料,以及乳腺癌患者的临床病理资料。术后对乳腺癌患者进行1年随访,记录不良预后发生情况。结果乳腺癌组血清VCAM-1浓度(67.81±19.27)ng/ml、B7-H2浓度(484.29±31.70)μg/L明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。乳腺癌组织中DKK-1蛋白相对表达量(4.46±1.32)、VEGF蛋白相对表达量(4.81±1.56)明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.01)。血清VCAM-1、B7-H2浓度在不同病理类型、TNM分期、淋巴结转移及远处转移的乳腺癌患者间比较差异均有统计学意义(均P<0.01);其中病理类型为浸润性导管癌的乳腺癌患者血清VCAM-1、B7-H2浓度明显低于其他病理类型,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移及有远处转移的乳腺癌患者血清VCAM-1、B7-H2浓度明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移及无远处转移的乳腺癌患者。血清VCAM-1、B7-H2浓度在不同年龄、肿瘤直径、孕激素受体表达、雌激素受体表达及表皮生长因子受体2表达的乳腺癌患者间比较差异无统计学意义(P>0.05)。DKK-1、VEGF蛋白表达水平在不同病理类型、TNM分期、淋巴结转移及远处转移的乳腺癌患者间比较差异均有统计学意义(均P<0.05);其中病理类型为浸润性导管癌的乳腺癌患者DKK-1、VEGF蛋白表达水平明显低于其他病理类型,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移及有远处转移的乳腺癌患者DKK-1、VEGF蛋白表达水平明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移及无远处转移的乳腺癌患者。DKK-1、VEGF蛋白表达水平在不同年龄、肿瘤直径、孕激素受体表达、雌激素受体表达及表皮生长因子受体2表达的乳腺癌患者间比较差异无统计学意义(P>0.05)。手术后乳腺癌患者血清VCAM-1、B7-H2浓度明显低于手术前,随着术后时间的延长血清VCAM-1、B7-H2浓度明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。预后不良组乳腺癌患者血清VCAM-1浓度(75.39±22.61)ng/ml、B7-H2浓度(531.74±34.19)μg/L及组织DKK-1相对表达量(5.25±1.61)、VEGF相对表达量(5.91±1.73)明显高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清VCAM-1、B7-H2及组织DKK-1、VEGF蛋白表达水平对乳腺癌患者预后均具有较高的评估价值(P<0.01);其中各指标联合检测对乳腺癌患者预后的评估价值最高。结论乳腺癌患者血清VCAM-1、B7-H2及组织DKK-1、VEGF蛋白表达水平明显升高,且与临床病理特征密切相关,联合检测可用于患者预后评估。

BMP-2在骨骼生长发育中的作用及研究进展

骨形态发生蛋白(BMPs)是一类多功能的生长因子,属于转化生长因子-β(TGF-β)超家族,其在心脏、神经、软骨的形成以及成骨等发育过程中都是必不可少的。而骨形态发生蛋白2(BMP-2)作为第一个被发现的BMP,近年来已被广泛研究,其在骨骼发育、成年后骨形成与改建过程中发挥着关键性作用。本文就BMP-2的结构与功能、其激活和调节的信号通路、临床应用和并发症等方面做一综述,旨在为基础研究和临床治疗提供帮助。

Sprouty2蛋白调节去势抵抗性前列腺癌细胞增殖、迁移和凋亡的机制研究

目的 探讨快速发育生长因子同源蛋白2抗体(Sprouty2)蛋白调节去势抵抗性前列腺癌细胞增殖、迁移和凋亡的机制.方法 根据试验目的将人去势抵抗性前列腺癌细胞分为Sprouty2蛋白高表达组、阴性对照组、空白对照组.Sprouty2蛋白高表达组通过siRNA技术将小激活RNA(saRNA)转入人去势抵抗性前列腺癌细胞中进行干预;阴性对照组通过siRNA技术将空载体质粒转入人去势抵抗性前列腺癌细胞中进行干预;空白对照组进行常规培养;取对数生长期细胞用于后续实验.噻唑蓝(MTT)测定细胞增殖情况;划痕实验测定细胞迁移能力;Annexin V-FITC和PI双染色测定细胞凋亡情况.Western blot测定Myc促癌基因(c-Myc)、SRY盒转录因子4(Sox4)、E-box结合同源盒1(ZEB1)蛋白、E-钙黏蛋白、波形蛋白表达.结果 Sprouty2蛋白免疫细胞百分比、Sprouty2蛋白免疫细胞荧光强度在各组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05).细胞增殖活力在阴性对照组与空白对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);Sprouty2蛋白高表达组细胞迁移率明显低于阴性对照组和空白对照组,细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.01);细胞迁移率和细胞凋亡率在阴性对照组与空白对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).E-钙黏蛋白表达水平明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.01);c-Myc、Sox4、ZEB1蛋白、E-钙黏蛋白、波形蛋白表达水平在阴性对照组与空白对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 Sprouty2蛋白高表达可能通过下调c-Myc、Sox4、ZEB1蛋白、波形蛋白表达,上调Sprouty2蛋白表达抑制去势抵抗性前列腺癌细胞的增殖、迁移和凋亡.

入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平与CHB肝纤维化严重程度的相关性及对疾病预后的预测价值

目的探讨入院时血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad同源蛋白2(Smad2)、Smad同源蛋白3(Smad3)及透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)水平与慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化严重程度的相关性及联合检测对疾病预后的预测价值。方法选取河南省中医院2021年3月至2022年3月收治的78例CHB肝纤维化患者作为研究组,选择同期78名健康体检者作为对照组。比较研究组和对照组及不同肝纤维化分期、不同炎症活动分级CHB肝纤维化患者入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、PCⅢ、LN、CⅣ水平;分析入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、PCⅢ、LN、CⅣ水平与肝纤维化分期、炎症活动分级的相关性。CHB肝纤维化患者治疗3个月后,根据患者预后分为预后良好和预后不良亚组,比较预后良好和预后不良患者入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、PCⅢ、LN、CⅣ水平;分析入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、PCⅢ、LN、CⅣ水平联合检测对CHB肝纤维化患者预后不良的预测价值。结果研究组入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、LN、PCⅢ、CⅣ高于对照组(P<0.05);不同肝纤维化分期、炎症活动分级CHB肝纤维化患者入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、LN、PCⅢ、CⅣ比较:S1<S2<S3<S4、G1<G2<G3<G4,差异有统计学意义(P<0.05);入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平与肝纤维化分期、炎症活动分级均呈正相关(P<0.05)。预后良好患者入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平均低于预后不良患者(P<0.05);入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平联合预测肝纤维化患者预后不良的曲线下面积(AUC)优于各指标单一检测(P<0.05)。结论CHB肝纤维化患者入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、PCⅢ、LN、CⅣ水平均呈现高表达,且与肝纤维化分期、炎症活动分级密切相关,其联合检测对CHB肝纤维化患者预后有较高的预测价值,可用于评估CHB肝纤维化患者病情严重程度和预后,为制定针对性治疗措施提供参考。

lncSIL通过EZH2/P21/CDK6信号通路负向调控TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞间质转化

目的研究在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺泡上皮细胞间质转化(EMT)进程中lncSIL的作用及其相关信号通路。方法采用Western blot法研究沉默lncSIL后对TGF-β1诱导EMT进程中细胞标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)表达的影响;通过RNA pulldown分析lncSIL相互作用蛋白,并检测过表达或沉默lncSIL后对其靶基因组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)以及下游因子P21蛋白(P21)和细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)表达的影响,并结合流式细胞术分析lncSIL对细胞周期进程的作用。结果沉默lncSIL后,间质细胞标志蛋白α-SMA和Col I表达升高,肺泡上皮细胞标志蛋白E-cad表达下降;RNA pulldown实验结果显示EZH2是与lncSIL相互作用的靶蛋白,并且沉默lncSIL后EZH2表达升高,其下游基因P21表达下调,CDK6表达上调,同时S期细胞的数量显著升高;过表达lncSIL时,EZH2与CDK6表达下调,P21表达上调,同时S期细胞的数量明显降低。结论lncSIL通过负向调控EZH2/P21/CDK6信号通路抑制细胞周期进程进而抑制TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞向间质转化。

非小细胞肺癌组织中胶质瘤相关癌基因同源蛋白2、TGF-β_1的表达变化

目的观察非小细胞肺癌组织中胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(Gli2)与转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达变化。方法非小细胞肺癌患者89例,术中留取肺癌组织和癌旁正常余肺组织,采用免疫组化SP法检测Gli2、TGF-β1,分析二者表达与非小细胞肺癌临床病理参数的关系。结果非小细胞肺癌组织及正常肺组织中Gli2阳性表达率分别为94.4%、13.5%,TGF-β1阳性表达率分别为100.0%、30.3%,两者相比,P均<0.05。不同肿瘤分期、淋巴结转移情况及血管侵犯情况的非小细胞肺癌患者肿瘤组织中Gli2阳性表达率相比,P均<0.05;不同肿瘤直径、淋巴结转移情况和血管转移情况的非小细胞肺癌患者肿瘤组织中TGF-β1阳性表达率相比,P均<0.05;非小细胞肺癌组织中Gli2、TGF-β1的表达呈正相关关系(r=0.438,P<0.05)。结论非小细胞肺癌组织中Gli2、TGF-β1阳性表达率较高,二者可能共同参与了非小细胞肺癌的发生、发展。

甲基化SIM2、GNA12、CTGF在子痫前期孕妇中表达水平及其对疾病的预测价值

目的 探究子痫前期孕妇血浆中甲基化DNA的表达水平及对子痫前期发生的预测价值。方法 纳入2022年1-12月在该院确诊的82例子痫前期孕妇作为观察组,另外纳入82例健康孕妇作为对照组。提取患者游离总DNA,经过DNA亚硫酸氢盐修饰后通过实时荧光定量PCR反应(qRT-PCR)检测患者血浆中甲基化单意同源物2(SIM2)、结缔组织生长因子(CTGF)及鸟嘌呤核苷酸结合蛋白(GNA12)基因的相对表达水平,并采用相关性分析及受试者工作特征(ROC)曲线对各甲基化DNA预测子痫前期发生的价值进行评估。结果 观察组血浆甲基化SIM2、GNA12、CTGF相对表达水平均高于对照组(P<0.05),且重度子痫前期孕妇各甲基化DNA相对表达水平更高(P<0.05)。相关性分析结果表明,血浆甲基化SIM2、GNA12、CTGF相对表达水平与孕妇发生子痫前期均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果表明,血浆甲基化SIM2、GNA12、CTGF相对表达水平单独及联合检测对预测孕妇子痫前期的效能均较好,且三者联合检测的预测效能最高(曲线下面积为0.888,95%CI:0.827~0.949)。结论 相较于健康孕妇,子痫前期孕妇血浆中甲基化SIM2、GNA12、CTGF相对表达水平均较高,且其与孕妇子痫前期的发生率呈正相关,血浆甲基化SIM2、GNA12及CTGF相对表达水平有望成为判断子痫前期是否发生的重要指标。

胃癌患者病灶组织CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6的表达变化研究

目的:探究胃癌患者病灶组织角蛋白7(CK7)、人表皮生长因子受体-2(HER2)、错配修复蛋白MutL同源物1(MLH1)、错配修复蛋白MutS同源物2(MSH2)及错配修复蛋白MutS同源物6(MSH6)的表达变化情况。方法:选取2020年2月—2023年1月苏州市相城人民医院收治的120例胃癌患者为研究对象,比较病灶组织及癌旁组织的CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6的表达情况,并比较不同性别、年龄、TNM分期、分化程度、淋巴结转移情况及病灶位置者的病灶组织CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6表达情况。结果:胃癌患者病灶组织CK7、HER2阳性率及MLH1、MSH2、MSH6表达缺失率显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄及病灶位置病灶组织的CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);Ⅲ期、Ⅳ期病灶组织CK7、HER2阳性率高于Ⅰ期、Ⅱ期,MLH1、MSH2、MSH6表达缺失率均显著低于Ⅰ期、Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05)。分化程度较低者病灶组织的CK7、HER2阳性率显著高于分化程度较高者,MLH1、MSH2及MSH6表达缺失率显著低于于分化程度较高者,差异有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移者CK7、HER2阳性率显著高于无淋巴结转移者,MLH1、MSH2及MSH6表达缺失率显著低于无淋巴结转移者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胃癌患者病灶组织的CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6的表达相对异常,且不同TNM分期、分化程度及淋巴结转移情况者的差异较大。

抑制SHP2和FGFR2调控RAS/ERK及PI3K/AKT通路治疗FGFR2融合胃癌

目的:探究共抑制成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)和Src同源2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(Src homology region 2-containing protein tyrosine phosphatase 2,SHP2)在FGFR2融合胃癌中的应用前景与作用机制。方法:构建过表达TACC2-FGFR2融合基因与对照慢病毒载体的人胃癌细胞系MKN45ACC2T-FGFR2、MKN45NC、NUGC4TACC2-FGFR2、NUGC4NC,分别用FGFR2抑制剂AZD4547、SHP2抑制剂SHP099或联药进行处理,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕实验检测肿瘤细胞的增殖、迁移能力。以不同处理方式作用于MKN45TACC2-FGFR2、MKN45NC1 h或48 h后,采用Western blot法检测FGFR2、SHP2以及下游RAS/ERK、PI3K/AKT信号通路变化。结果:在MKN45TACC2-FGFR2与NUGC4TACC2-FGFR2中联用AZD4547与SHP099可以比单药更显著地抑制肿瘤细胞的增殖与迁移。药物处理1 h后,相较于AZD4547单药,联药在MKN45TACC2-FGFR2中进一步抑制了RAS/ERK、PI3K/AKT信号通路。药物处理48 h与1 h相比,AZD4547单药组中磷酸化FGFR与磷酸化SHP2出现了反馈性激活,且始终不能抑制RAS/ERK通路,但联药组可以持续地抑制上游的FGFR2、SHP2信号以及下游的RAS/ERK、PI3K/AKT通路。结论:共抑制FGFR2和SHP2可以通过下调RAS/ERK及PI3K/AKT通路有效抑制FGFR2融合胃癌,为FG-FR2融合突变胃癌患者带来新的治疗模式。

RAD51C表达下调对小鼠卵巢癌体内成瘤和VEGF、NRP-2表达的调控

目的探讨RAD51旁系同源基因C(RAD51C)表达下调对小鼠卵巢癌体内成瘤和血管内皮生长因子(VEGF)、神经纤毛蛋白-2(NRP-2)表达调控的影响。方法使用A2780卵巢癌细胞,通过培养检测细胞中RAD51C的表达,构建3种RAD51C干扰载体(SiRNA-47、SiRNA-183和SiRNA-285),并包装成慢病毒,转染细胞,逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证转染效果,进行稳筛,构建稳转细胞株。使用Balb/c雌性裸鼠建立细胞系来源的异体移植肿瘤模型(CDX)模型,将18只建模成功的裸鼠分为3组:A2780细胞组(Control组)、A2780细胞+空载体对照组(NC组)、A2780细胞+RAD51C干扰组(Si-RAD51C组),每组各6只。Control组注射生理盐水,NC组注射空载慢病毒50μL,Si-RAD51C组注射RAD51C干扰慢病毒50μL。观察各组成瘤情况,取肿瘤组织,采用蛋白质印迹法(WB)、免疫组织化学检测RAD51C、VEGF、NRP-2蛋白表达情况。结果RT-qPCR验证RAD51C干扰慢病毒转染效果以SiRAN-285最明显(P<0.05)。Si-RAD51C组与Control组、NC组比较瘤体的体积最小、重量也最轻,且RAD51C、NRP-2及VEGF蛋白的表达显著降低(P<0.05)。结论RAD51C干扰慢病毒可抑制小鼠A2780卵巢癌细胞肿瘤的形成,且对RAD51C、NRP-2及VEGF蛋白的表达均有抑制作用。

SPRY2基因在细胞表型中的研究进展

SPRY2作为重要信使RNA,参与多种疾病的病理过程,在维持细胞稳态中发挥关键作用,甚至是研究癌症发病机制潜在治疗靶点。虽然SPRY2已在诸多疾病中进行较为广泛和深入的探讨,但尚未见其在细胞表型研究中的系统报道。对SPRY2研究现状和动态分析,发现其在细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭、细胞自噬、上皮间充质转化与血管生成等方面具有特异性,尤其在细胞增殖上,为SPRY2后续研究提供思路。

尾侧型同源转录因子-2、肝素结合性表皮生长因子样生长因子和骨形态发生蛋白-4在Barrett食管中的表达及相互关系

目的 探讨食管间质组织中肝素结合性表皮生长因子样生长因子（HB-EGF）和骨形态发生蛋白-4 （BMP-4）在Barrett食管发病中的意义.方法 116例患者根据胃镜下表现和送检标本HE染色结果进行分组.分为对照组（29例）、反流性食管炎（RE）组（32例）、Barrett食管组（35例）、RE治疗组（10例）和Barrett食管治疗组（10例）.采用免疫组织化学法对各组食管黏膜病变组织中尾侧型同源转录因子2（CDX-2）、HB-EGF和BMP-4的表达情况进行检测.应用方差分析比较各组间CDX-2、HB-EGF和BMP-4阳性表达水平的变化,卡方检验分析此三者表达的关系.结果 对照组、RE组和Barrett食管组的CDX 2阳性表达细胞数[（0.0±0.0）/高倍视野（HPF）、（43.1±10.6）/HPF、（67.8±11.3）/HPF]依次升高,三组间差异有统计学意义（F=67.664,P＜0.01）;此三组的HB-EGF阳性细胞数[（6.4±1.4）/HPF、（39.4±13.5）/HPF、（55.8±13.9）/HPF]和BMP-4阳性细胞数[（0.0±0.0）/HPF、（22.6±6.4）/HPF、（25.1±10.3）/HPF]也呈现相同趋势,三组间差异均有统计学意义（FHB-EGF=22.925;FBMP-4=10.463,P均＜0.01）,且除RE组与Barrett食管组的BMP-4表达外,其他各组间两两比较,差异均有统计学意义（LSD检验,P均＜0.05）.CDX-2、HB-EGF和BMP-4在RE治疗组的表达[（21.7±1.7）/HPF、（16.6±5.0）/HPF、（9.2±1.0）/HPF]以及在Barrett食管治疗组的表达[（51.4±8.7）/HPF、（31.0±10.4）/HPF、（12.7±3.9）/HPF]分别低于其在RE组和BE组的表达,差异均有统计学意义（LSD检验,P均＜0.05）.在RE组中,CDX-2的阳性率[31.2％（10/32）]明显低于HB-EGF和BMP-4的阳性率[62.5％（20/32）,56.2％（18/32）],差异有统计学意义（x2=6.275、4.063,P均＜0.05）.但在Barrett食管组中,CDX-2的阳性率[85.7％（30/35）]与HB-EGF、BMP-4的阳性率[88.6％（31/35）,74.3％（26/35）]差异无统计学意义（P均＞0.05）.结论 CDX-2、HB-EGF和BMP-4可能在RE和Barrett食管病程的中发挥重要作用.HE-EGF和BMP-4可能是Barrett食管发生中的早期事件,二者对CDX-2的表达可能具有某种促进作用.HB-EGF和BMP-4有可能成为Barrett食管研究和治疗的新靶点.

儿童髓母细胞瘤组织中生长因子受体结合蛋白2的相关接头蛋白-1、胶质瘤相关肿瘤基因同源物-1表达的临床意义

目的探讨生长因子受体结合蛋白2的相关接头蛋白－1（Gab－1）、胶质瘤相关肿瘤基因同源物－1（Gli－1）在儿童髓母细胞瘤中的表达，分析其蛋白表达与肿瘤临床病理特点及预后的关系。 方法应用免疫组织化学Elivision法检测Gab－1、Gli－1在40例儿童髓母细胞瘤组织芯片中的表达，运用Chi－square检验或Fisher′s精确概率检验分析Gab－1、Gli－1蛋白表达与年龄、性别、肿瘤部位、病理分型的关系，结合随访资料进行Kaplan－Meier生存分析及Cox比例风险回归分析。 结果Gab－1及Gli－1蛋白在儿童髓母细胞瘤组织中的阳性率分别为35.0%和55.0%。髓母细胞瘤患儿肿瘤组织Gab－1阳性表达率在不同性别[男：30.4%（7/23例）比女：41.2%（7/17例）]、年龄[〈3岁：40.0%（6/15例）比≥3岁：32.0%（8/25例）]、肿瘤部位[小脑：25.0%（5/20例）比第四脑室：45.0%（9/20例）]及病理类型[经典型：33.3%（7/27例）比促纤维增生/结节型：50.0%（5/10例）比间变型/大细胞型：66.7%（2/3例）]之间差异均无统计学意义（χ2＝0.496、0.264、1.758、3.289，均P〉0.05）。不同年龄段[〈3岁：80.0%（12/15例）比≥3岁：40.0%（10/25例）]和不同病理分型[经典型：40.7%（11/27例）比促纤维增生/结节型：90.0%（9/10例）比间变型/大细胞型：66.7%（2/3例）]髓母细胞瘤患儿Gli－1阳性表达率差异均有统计学意义（χ2＝6.061、7.333，均P〈0.05）；不同性别[男：60.9%（14/23例）比女：47.1%（8/17例）]及肿瘤部位[小脑：55.0%（11/20例）比第四脑室：55.0%（11/20例）]髓母细胞瘤患儿之间Gli－1阳性表达率差异均无统计学意义（χ2＝0.753、0.000，均P〉0.05）。Kaplan－Meier生存分析提示患儿年龄、Gab－1、Gli－1蛋白表达均与儿童髓母细胞瘤的预后相关（均P〈0.05），Cox比例风险回归分析显示患儿年龄、病理分型和Gli－1阳性表达是儿童髓母细胞瘤的独立危险因素（均P〈0.05）。 结论Gab－1、Gli－1在儿童髓母细胞瘤中的表达与预后相关，阳性表达可作为肿瘤预后不良的指标。

Her-2和PTEN蛋白在胃腺癌中的表达及意义

目的探讨人类表皮生长因子2(Her-2)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)在胃腺癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学法检测临朐县人民医院2009年6月至2012年7月经手术常规病理证实的66例胃腺癌组织和25例正常胃组织中Her-2和PTEN的表达情况。结果 Her-2在癌组织中的阳性表达率明显高于正常组织,Her-2在浸润全层组的阳性率明显高于浸润黏膜层肌层组(45.5%vs 15.2%);Her-2在有淋巴结转移组的阳性率显著高于无淋巴结转移组(34.8%vs 25.8%)。PTEN在癌组织中的阳性表达率明显低于正常组织,PTEN在浸润全层组的阳性率显著低于浸润黏膜层肌层组(13.6%vs 22.7%);在有淋巴结转移组的阳性率显著低于无淋巴结转移组(7.6%vs 28.8%)。Her-2和PTEN在胃腺癌中的表达水平与患者年龄、性别、肿瘤直径和肿瘤的分化程度差异显著(P<0.05)。结论 Her-2的过表达与PTEN低表达或失表达,对胃癌的发生、发展及预后可能起重要作用。