金樱子果实中蔷薇酸的快速富集方法及活性研究

金樱子果实中富含一种5环三萜类活性成分——蔷薇酸(EA),这是一种重要的天然产物,因其多样的药理活性而被广泛研究。由于传统的分离纯化工艺效率低、耗时长,因此亟需一种方便快捷的方法提高EA的富集效率。通过一种自制的减压真空柱色谱装置对金樱子果实中富含的蔷薇酸进行富集,该方法不仅省时省力,极大提高了EA的富集效率,同时也为其他天然活性成分的快速富集提供了一种真实有效的方法。此外,对EA进行分子对接,发现它与乙酰胆碱酯酶(AChE)活性位点的结合能为-36kJ·mol^(-1),具有高度亲和力;对EA进行乙酰胆碱酯酶活性研究,发现在质量浓度为120μg·mL^(-1)时,EA和阳性药加兰它敏对AChE的抑制活性分别可达83.20%和92.91%,这意味着EA具有抗阿尔兹海默症的潜在活性。

Feammox污泥快速富集、脱氮特性和微生物群落结构

通过短期实验,在微氧环境下考察了pH值对三价铁氨氧化(Feammox)性能的影响.结果表明,批式装置内初始NH_(4)^(+)-N和Fe^(3+)浓度分别为70.0和300.0mg/L.无Fe^(3+)投加时,活性污泥可以利用溶解氧进行氨氧化,NH_(4)^(+)-N去除量为8.8mg/L;加入Fe^(3+)后,NH_(4)^(+)-N去除量增至76.9mg/L,和未添加Fe^(3+)实验相比,活性污泥的NH_(4)^(+)-N去除量增加了7.7倍.通过长期实验考察了活性污泥Feammox反应器的脱氮性能和功能微生物.经过驯化,反应器的NH_(4)^(+)-N平均去除速率达到1.6mg N/(g VSS·d).典型周期内,pH值从9.0降至7.8,反应器内的NH_(4)^(+)-N从35.5mg/L降至1.9mg/L,NO_(2)^(-)-N从11.2mg/L增至18.1mg/L,NO_(3)^(-)-N从8.1mg/L增至13.4mg/L,总无机氮从54.8mg/L降至33.3mg/L.在成熟的Feammox污泥中,优势铁还原菌属及丰度分别为unclassified Acidobacteria(1.92%)和Pseudomonas(0.22%),这些菌属可能对于Fe^(3+)氧化氨氮起到了重要的作用.

活性天然产物19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷快速富集

19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷是一种重要的天然来源的三萜类成分,具有良好的抗神经炎症、抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,是一种潜在的抗阿尔茨海默病(AD)的先导药物,具有深入研究价值。介绍了一种在金樱子果实中快速富集19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的新方法,并研究其与潜在抗AD活性靶点的分子对接。以94 g金樱子果实粉末中提取该化合物为例,通过自制减压真空色谱装置,利用少量流动相,快速便捷地得到19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷0.172 5 g。此外,该化合物与靶蛋白结合能为-24.7 kJ·mol^(-1)。结果表明:19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷具有潜在的抗AD活性,提取的方法具有样品耗损低、操作方便、快速稳定、得率高等优点,在一定程度上为环境保护做出了贡献。

海水中^(137)Cs的快速富集与分析

以亚铁氰化铜(CuFC)作为吸附剂,采用循环吸附的方法制备用于海水中137Cs富集的富集材料,同时采用湿样制源的方法制备样品源.研究结果显示当流量在5.0、6.0 dm3/min,且富集体积保持在900 dm3以下时,对海水中137Cs的富集效率保持在85%以上,且随富集体积的变化并不明显;当流量增大到7.0、8.0 dm3/min,且富集体积从500 dm3增大到1 000 dm3时,其富集效率从85%左右下降到75%左右,呈现出明显的下降趋势;而当流量进一步增大到10 dm3/min时,富集效率急剧下降到68%左右.研究结果表明,将流量控制在5.0~8.0dm3/min且富集体积在500 dm3以下时,可以在保证较高的富集效率的同时有效地减少富集时间,达到快速富集的目的.此外,湿样制源的方式缩短了样品前处理时间,提高了样品处理效率.本研究中所使用的海水中137Cs的富集和分析方法总计耗时约需8h左右,只相当于传统分析方法耗时的1/5左右.

大体积海水镭同位素现场快速富集与γ谱直接测定

水泵抽取的海水通过锰纤维富集柱，富集体积达 400 L 以上。用 HPGe γ谱仪直接测定样品中的镭同位素 224Ra、226Ra 和228 Ra。研究了胶州湾水体镭同位素的分布。

聚磷菌的快速富集及其除磷特性研究

在序批式活性污泥反应器(SBR)中快速富集聚磷菌(PAOs),考察PAOs中Candidatus Accumulibacter phosphatis(以下简称Accumulibacter)种群的除磷特性。结果表明,在水温(20.0±0.5)℃下控制厌氧初始pH为7.50～7.80,好氧段DO为2.0～4.0mg/L,进水乙酸与丙酸摩尔比为3.0的条件下,PAOs能够在60d内实现快速富集,荧光原位杂交检测(FISH)显示,Accu-mulibacter占全菌比例达到62.4%±4.7%;厌氧溶解性正磷酸盐(SOP)释放量(SOPr)与挥发性脂肪酸(VFA)吸收量(VFAa)的比值与活性污泥中Accumulibacter占全菌比例呈线性关系,说明全菌中Accumulibacter的相对数量对活性污泥的除磷特性具有显著影响;在长期没有硝酸盐的条件下培养的Accumulibacte反硝化除磷能力较弱,Accumulibacte不能有效驯化为反硝化聚磷菌(DPAOs)。

基于两相向声表面波快速富集悬液中微粒

为提高生化分析灵敏度,提出了一种快速富集悬液中微粒的新方法。它在127.68°旋转Y切割X传播方向的LiN-bO3基片上采用微电子工艺制作了2×2叉指换能器阵列,在该叉指换能器阵列的一对对角叉指换能器上同时加经功率放大器放大后的RF信号,以激发两相向声表面波,采用微量进样器将待富集的微流体(微液滴)进样到两相向传播的声路径上,微液滴中的微粒在该两相向的声表面波作用下快速向心富集。淀粉溶液微液滴富集实验结果表明,两相向声表面波作用下,10秒内实现微液滴中淀粉微粒的快速富集。

一次性抗凝负压注射器在自体骨髓快速富集术中的应用

目的探讨一次性抗凝负压注射器在自体骨髓快速富集术中的应用方法及效果。方法选择2015年6月-2017年12月来我院就诊并择期进行股骨钻孔减压合并骨髓生物治疗的患者42例为研究对象,根据随机数字表法将患者分为对照组和观察组,每组21例。对照组采用传统注射器抽取骨髓血法,观察组采用一次性抗凝负压注射器抽取骨髓血法。观察两组抽取骨髓血的速度、所需时间、骨髓血凝集次数、采集成功率。结果经过对比分析发现,手术期间两组抽取骨髓血150 mL的速度、所需时间、采集成功率、骨髓血凝集次数比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论一次性抗凝负压注射器可以一次性抽取骨髓血,抽取过程负压稳定,方便省力,而且抽取到的骨髓血不会凝集,便于富集单个核细胞,并减少医务人员工作量,提高采取骨髓血的质量,从一定程度上克服了目前临床抽取骨髓血费力、易凝的缺点,具有较好的临床应用前景。

厌氧氨氧化微生物的快速富集及微生物群落分析

为加速厌氧氨氧化微生物(Anammox)的富集过程,在厌氧、35℃和pH值7.2~7.5的条件下,采用2个SBR反应器富集培养Anammox菌,并对微生物群落进行分析。其中,1#反应器第97d获得359.44mgTN/(L·d)的脱氮速率;第121d,浮霉菌门(Planctomycetes)及厌氧氨氧化优势菌属Candidatus Kuenenia分别占比32.10%和30.20%。2#反应器(投加1/1000功能菌源)第42d获得455.36mgTN/(L·d)的脱氮速率;第60d,浮霉菌门(Planctomycetes)和厌氧氨氧化优势菌属Candidatus Kuenenia分别占比45.22%和37.25%,1/1000菌源策略显著加速了Anammox菌的富集过程。

正压式线虫快速富集装置对土壤线虫分离效果的研究

在线虫口岸检疫工作中,线虫与其寄主分离过程耗时最长,由于线虫无法像昆虫一样直接被肉眼看到并抓取,实验室中一般采用贝尔曼漏斗和过筛法,利用线虫的趋水性,使其慢慢游离寄主,再进行富集和显微观察。该方法一般耗时16~24h,且对操作人员经验要求高,例如,用于过滤土壤、栽培介质的纱布和滤纸没有具体标准,全凭操作人员经验。采用正压式线虫快速富集装置,对土壤中的线虫进行分离并做出效果评价,以期找到分离效果最佳的使用方法。

纳米铁改性生物炭载体强化厌氧氨氧化菌富集与脱氮效果研究

为实现厌氧氨氧化菌(AnAOB)在载体生物膜中快速富集,本文采用液相还原方法制备了纳米铁改性生物炭(nZVI@BC)载体,并设置两组相同的厌氧氨氧化(ANAMMOX)富集装置(R_(1)、R_(2)),通过对R_(1)、R_(2)装置添加不同载体(分别为BC和nZVI@BC),考察在富集过程中ANAMMOX装置的脱氮性能、载体表面特征和微生物群落结构差异.结果表明:①BC表面成功负载nZVI,nZVI@BC载体比BC载体具有更高的比表面积,改性后载体的比表面积从47.17 m^(2)/g增至210.82 m^(2)/g,可为微生物提供更多的附着位点.②R_(2)装置NH_(4)^(+)-N和NO_(2)^(−)-N去除率稳定达到90%所需时间均比R_(1)装置短,且稳定运行后,R_(1)、R_(2)装置的TN去除率最高分别为86.99%、89.65%.③nZVI@BC载体表面颜色由黑色变为红褐色,表明红色的ANAMMOX生物膜初步形成,且其表面生物量比BC载体表面生物量高23倍.④第20天,R_(1)、R_(2)装置中AnAOB的相对丰度分别为10.47%和29.15%;R_(1)、R_(2)装置载体表面主要的AnAOB属均为Candidatus Kuenenia,其相对丰度分别为7.49%和23.76%.研究显示,改性的nZVI@BC载体显著促进了ANAMMOX生物膜的快速形成和AnAOB的高效富集,提升了ANAMMOX过程的脱氮性能.

噬菌体Pu29特性分析及其在沙门氏菌磁分离富集中的应用

以1株鸡白痢沙门氏菌噬菌体Pu29为研究对象,全面分析其生物学及基因组特性,将其作为识别元件,建立基于噬菌体Pu29的沙门氏菌磁分离富集技术。该噬菌体属于轮状病毒属(Roufvirus),具有二十面体的头部和不可收缩的长尾部。Pu29具有较宽的宿主谱,15min时对宿主细胞的吸附率为88.67%,潜伏期为30min,裂解期为180 min,裂解量为115.74 PFU/cell。同时Pu29具有较好的耐热性(30~60℃)和pH值耐受性(pH 4~11)。Pu29基因组由45715bp(GC含量46.08%)和81个开放阅读框组成,包括18个具有已知功能的阅读框,不携带编码毒性或抗性因子的基因。通过酰胺反应将噬菌体Pu29与羧基化的纳米磁珠偶联制备探针PhagePu29-MBs。使用25μg探针与沙门氏菌在37℃孵育20min时,对沙门氏菌的捕获效率最高可达到83.93%,最低捕获细菌浓度为45CFU/mL。采用透射电镜观察到PhagePu29-MBs能够特异性地捕获沙门氏菌。在加标样品中,PhagePu29-MBs分离富集沙门氏菌的捕获效率最高能达到92.92%。该方法分离富集沙门氏菌的时间大约为30min。因此,本研究基于噬菌体Pu29建立了一种快速、特异性强的沙门氏菌磁分离方法,可为基于噬菌体快速分离富集食源性病原菌奠定研究基础。

厌氧氨氧化菌快速富集培养及微生物机制解析

为快速筛选培养高丰度的厌氧氨氧化污泥,解决厌氧氨氧化菌培养难、倍增速率慢的难题,采用UASB反应器富集培养厌氧氨氧化污泥,并对群落结构的演替进行了解析。通过进水除氧和逐步提高容积负荷的方法富集厌氧氨氧化菌,当总氮容积负荷在0.96 kg/(m^3·d)时,总氮去除率和去除负荷分别约为84.63%和0.817 kg/(m^3·d)。扫描电镜发现反应器中的污泥群落由短杆菌和粘性物质逐步转变成以球菌聚集体为主,呈球形或卵形,直径在0.8~1μm之间。采用高通量测序法对菌群结构进行检测后发现,随着厌氧氨氧化菌富集程度的增加,浮霉菌门(Planctomycetes)含量从13.1%提高到54.7%,而变形菌门(Proteobacteria)则从58.3%降低至24.8%。在55 d中厌氧氨氧化菌Candidatus Kuenenia丰度从4.7%提高至48.8%,实现了快速高效富集。

MABR快速富集HN-AD菌强化处理高氨氮废水

对比研究贯通式、闭端式2种膜组件形式的膜曝气生物膜反应器(MABR)对高氨氮模拟废水的处理性能。结果表明:MABR在8 d内实现菌液快速挂膜,且贯通式MABR的生物附着量、脱氮效率均高于闭端式。贯通式MABR对高氨氮废水中NH+4-N、TN、COD的去除率均比闭端式高出20%左右,具有更好的脱氮除碳效果。高通量测序分析显示,贯通式MABR于挂膜阶段实现了HN-AD菌快速富集,并在处理高氨氮废水过程中仍保持其较高丰度(不动杆菌属Acinetobacter占22.1%、假单胞菌属Pseudomonas占43.2%),但闭端式MABR未优势富集HN-AD菌。贯通式MABR相比闭端式MABR具有更高DO条件促进HN-AD菌富集,从而强化了对高氨氮废水的处理效果。

介孔氧化铁材料快速、高效富集分离磷酸化肽段和蛋白的新方法研究

以0.1μmol/Lβ-casein磷酸化蛋白酶解液为对象,利用在酸性条件下对PO43-能够特异性吸附的氧化铁材料为新载体,对介孔氧化铁材料富集分离磷酸化肽段的孵育液酸含量、孵育液有机溶剂含量和洗脱液选择的条件进行了优化,结果表明:室温条件下,在含有0.1%乙酸和30%乙腈的孵育液中孵育5min后,经1mol/LNH3.H2O溶液的洗脱,介孔氧化铁可有效地将磷酸化肽段从蛋白酶解液中富集分离。本方法也可以选择性地提取α-casein磷酸化蛋白,实现了简单、快速、高效的磷酸化肽段和蛋白的富集分离。同时,通过MALDI-TOF串级质谱分析,成功地完成了在优化条件下分离出的磷酸化肽段磷酸位点的鉴定。

一种快速富集生乳中沙门氏菌的方法

目的:确定一种可以快速富集生乳中沙门氏菌的方法条件,可用于生乳沙门氏菌的快速检测。方法:通过对缓冲液种类及浓度,去除脂肪、蛋白质等干扰物质方式,洗脱液种类及浓度的研究,确定生乳快速富集沙门氏菌条件,并将该方法与国标方法进行对比验证实验,确定其准确性和灵敏性。结果:缓冲液选择0.01 mol/L PBS,采用滤纸过滤、离心和0.22μm微孔滤膜过滤相结合的方法去除脂肪和大分子蛋白质,洗脱液选择5 mL PBS+5 mL TTB混合液,沙门氏菌的富集分离效果最佳。经实验验证,按照该方法检测灵敏度可达到10 cfu/mL,高于国标方法。结论:建立了最佳的快速富集生乳中沙门氏菌的方法条件,使沙门氏菌检测时间从(4~7)d缩短至50 min,敏感性和特异性较好。

纳米技术在食品安全快速检测中的应用

纳米技术中的磁性分离技术因其具有操作简便、高效快速等特点,目前已被广泛地应用于生物医学的快速分离纯化和检测等领域中。近年来,食品安全的磁分离快速检测技术发展迅速。介绍了磁分离技术在食品安全快速检测方面的应用研究现状,主要包括快速分离、富集和快速检测的应用研究。

乳中阪崎克罗诺杆菌的快速捕获方法的建立

利用免疫磁捕获技术,建立了高效、快速的乳中阪崎克罗诺杆菌的捕获方法。将阪崎克罗诺杆菌抗体与Fe_3O_4磁珠偶联,制备特异性免疫磁珠并快速富集乳中的阪崎克罗诺杆菌。结果表明:此方法特异性强,且针对纯培养物中阪崎克罗诺杆菌的检测灵敏度达到104~10~5m L^(-1),乳中阪崎克罗诺杆菌的灵敏度达到10_5~10~6m L^(-1)。该方法能够大大缩短阪崎克罗诺杆菌的增菌时间,辅以适宜的检测方法即可实现对乳中阪崎克罗诺杆菌的快速富集,并且具有更高的特异性。

中空纤维膜生物反应器富集反硝化厌氧甲烷氧化菌群的研究

反硝化厌氧甲烷氧化（DAMO）过程可以由一种称为Methylomirabilis oxy f era的DAMO细菌在有或者没有DAMO古菌下完成．已经报道的DAMO过程的菌群富集时间长（一般需要7～18月），且DAMO体系反硝化速率低．利用中空纤维膜生物反应器（HFMB）提高甲烷的传质来试图实现快速启动DAMO反应，结果发现HFMB在不到3个月时间内就表现出DAMO反应，其反硝化速率达到50 mg · L －1· d－1硝酸盐氮．二代测序显示，HFMB中微生物以 A naerolineaceae ， A zospira ，CL500‐3占绝对优势，分别为39.08％，13.68％和11.54％，而 DAMO 细菌（Methylomirabilis）和与厌氧甲烷氧化有关的古菌 Methanosarcina分别占0.02％和0.13％，因此推测在HFMB中DAMO过程是由一群新的菌群主导完成．