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快速直接PCR检测猪肺炎支原体方法的建立及其应用
被引量:
2
1
作者
徐引弟
张青娴
+4 位作者
王治方
焦文强
李海利
朱文豪
王克领
《养猪》
2019年第6期100-102,共3页
为了对河南省猪场猪肺炎支原体的感染情况进行调查,试验设计1对引物,对疑似猪肺炎支原体的肺组织进行直接PCR扩增,并进行了特异性、敏感性、重复试验,建立了猪肺炎支原体的快速直接PCR方法。2017年1月至2018年12月从河南省猪场发生重症...
为了对河南省猪场猪肺炎支原体的感染情况进行调查,试验设计1对引物,对疑似猪肺炎支原体的肺组织进行直接PCR扩增,并进行了特异性、敏感性、重复试验,建立了猪肺炎支原体的快速直接PCR方法。2017年1月至2018年12月从河南省猪场发生重症呼吸困难猪的实变肺脏共采集348份,用建立的PCR方法进行鉴定,猪肺炎支原体阳性226份,阳性率为64.94%。表明猪肺炎支原体的感染率极高,是危害猪场的较为普遍、严重的病原。
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关键词
猪肺炎支原体
快速直接pcr
感染情况
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职称材料
牛支原体快速PCR检测方法的建立及其应用
被引量:
3
2
作者
徐引弟
李海利
+3 位作者
王治方
张青娴
索延乐
宋振宇
《中国奶牛》
2017年第6期41-44,共4页
本试验旨在建立一种可直接从病料中快速检测牛支原体的PCR方法,并且应用于临床。根据牛支原体16S rRNA基因设计一对引物,配制PCR扩增体系,样品经简单处理后加入体系进行扩增,最终扩增出1 390bp片段,进一步的试验证明该方法具有良好的特...
本试验旨在建立一种可直接从病料中快速检测牛支原体的PCR方法,并且应用于临床。根据牛支原体16S rRNA基因设计一对引物,配制PCR扩增体系,样品经简单处理后加入体系进行扩增,最终扩增出1 390bp片段,进一步的试验证明该方法具有良好的特异性和敏感性。临床样品检测结果显示,该方法的检出率与传统PCR的符合率为100%。试验表明,该方法能快速直接从临床样品中检测出牛支原体,可用于牛支原体的大量临床样品的检测。
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关键词
快速直接pcr
牛支原体
特异性
敏感性
临床应用
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职称材料
直接快速多色荧光PCR技术在高危型HPV分型中的应用探讨
被引量:
2
3
作者
刘淑园
肖湘文
+4 位作者
丁渭
曾烨
张天海
王盼盼
陈华云
《分子诊断与治疗杂志》
2017年第6期386-390,共5页
目的探讨直接快速多色荧光PCR技术在高危型人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染分型检测中的应用。方法对2014年3月至2014年10月794例患者宫颈粘液样本,采用直接快速多色荧光PCR技术与传统荧光PCR技术同步进行HPV分型检测,并...
目的探讨直接快速多色荧光PCR技术在高危型人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染分型检测中的应用。方法对2014年3月至2014年10月794例患者宫颈粘液样本,采用直接快速多色荧光PCR技术与传统荧光PCR技术同步进行HPV分型检测,并对比分析。对于检测试剂与对比试剂检测结果不一样的样本,采取测序法复核。选择中国生物制品检定研究院HPV标准品进行18种HPV型别最低检出量和特异性分析。同时测试直接快速多色荧光PCR技术在AB7500FAST、Bio-Rad CFX96、Roche480、AGS9600等多种荧光扩增仪上的扩增效果并进行比较。结果 794例样本中,检测试剂检出高危型HPV阳性患者600例,阴性样本194例。对比试剂检出HPV阳性患者595例,阴性样本199例。直接快速多色荧光PCR技术检测HPV的18个型别的最低检测量在100~1 000 copies/m L之间;在AB7500FAST、Bio-Rad CFX96、Roche480、AGS9600等仪器的比对分析中,Bio-Rad CFX96检测结果表现最佳。Roche480反应时间最长,本底相对较高。国产安杰思AGS9600仪器检测与AB7500持平居中。结论直接快速PCR技术无需核酸提取,样本直接进行快速PCR扩增,检测时间短,反应速度快,特异性高,重复性好,试剂本身带有颜色示踪,对于解决我国临床HPV检测的普及具有重要意义。
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关键词
人乳头状瘤病毒
基因分型
直接
快速
多色荧光
pcr
宫颈上皮内瘤变(CIN)
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职称材料
题名
快速直接PCR检测猪肺炎支原体方法的建立及其应用
被引量:
2
1
作者
徐引弟
张青娴
王治方
焦文强
李海利
朱文豪
王克领
机构
河南省农业科学院畜牧兽医研究所
河南省畜禽繁育与营养调控重点实验室
出处
《养猪》
2019年第6期100-102,共3页
基金
河南省财政预算项目(20188110)
河南省农业科学院自主创新基金项目(2017ZC49)
文摘
为了对河南省猪场猪肺炎支原体的感染情况进行调查,试验设计1对引物,对疑似猪肺炎支原体的肺组织进行直接PCR扩增,并进行了特异性、敏感性、重复试验,建立了猪肺炎支原体的快速直接PCR方法。2017年1月至2018年12月从河南省猪场发生重症呼吸困难猪的实变肺脏共采集348份,用建立的PCR方法进行鉴定,猪肺炎支原体阳性226份,阳性率为64.94%。表明猪肺炎支原体的感染率极高,是危害猪场的较为普遍、严重的病原。
关键词
猪肺炎支原体
快速直接pcr
感染情况
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
牛支原体快速PCR检测方法的建立及其应用
被引量:
3
2
作者
徐引弟
李海利
王治方
张青娴
索延乐
宋振宇
机构
河南省农业科学院畜牧兽医研究所
河南省畜禽繁育与营养调控重点实验室
济源市动物卫生监督所
出处
《中国奶牛》
2017年第6期41-44,共4页
基金
河南省科技攻关计划项目(162102110042)
河南省农业科学院自主创新基金项目(2016ZC51
2017ZC49)
文摘
本试验旨在建立一种可直接从病料中快速检测牛支原体的PCR方法,并且应用于临床。根据牛支原体16S rRNA基因设计一对引物,配制PCR扩增体系,样品经简单处理后加入体系进行扩增,最终扩增出1 390bp片段,进一步的试验证明该方法具有良好的特异性和敏感性。临床样品检测结果显示,该方法的检出率与传统PCR的符合率为100%。试验表明,该方法能快速直接从临床样品中检测出牛支原体,可用于牛支原体的大量临床样品的检测。
关键词
快速直接pcr
牛支原体
特异性
敏感性
临床应用
Keywords
Rapid and direct
pcr
method
Mycoplasma bovis
Specificity
Susceptibility
Clinical application
分类号
S858.23 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
直接快速多色荧光PCR技术在高危型HPV分型中的应用探讨
被引量:
2
3
作者
刘淑园
肖湘文
丁渭
曾烨
张天海
王盼盼
陈华云
机构
广州和实生物技术有限公司
出处
《分子诊断与治疗杂志》
2017年第6期386-390,共5页
文摘
目的探讨直接快速多色荧光PCR技术在高危型人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染分型检测中的应用。方法对2014年3月至2014年10月794例患者宫颈粘液样本,采用直接快速多色荧光PCR技术与传统荧光PCR技术同步进行HPV分型检测,并对比分析。对于检测试剂与对比试剂检测结果不一样的样本,采取测序法复核。选择中国生物制品检定研究院HPV标准品进行18种HPV型别最低检出量和特异性分析。同时测试直接快速多色荧光PCR技术在AB7500FAST、Bio-Rad CFX96、Roche480、AGS9600等多种荧光扩增仪上的扩增效果并进行比较。结果 794例样本中,检测试剂检出高危型HPV阳性患者600例,阴性样本194例。对比试剂检出HPV阳性患者595例,阴性样本199例。直接快速多色荧光PCR技术检测HPV的18个型别的最低检测量在100~1 000 copies/m L之间;在AB7500FAST、Bio-Rad CFX96、Roche480、AGS9600等仪器的比对分析中,Bio-Rad CFX96检测结果表现最佳。Roche480反应时间最长,本底相对较高。国产安杰思AGS9600仪器检测与AB7500持平居中。结论直接快速PCR技术无需核酸提取,样本直接进行快速PCR扩增,检测时间短,反应速度快,特异性高,重复性好,试剂本身带有颜色示踪,对于解决我国临床HPV检测的普及具有重要意义。
关键词
人乳头状瘤病毒
基因分型
直接
快速
多色荧光
pcr
宫颈上皮内瘤变(CIN)
Keywords
Human papillomavirus
HPV genotyping
Direct and rapid multi-color fluorescence
pcr
Cervical intraepithelial neoplasias
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
快速直接PCR检测猪肺炎支原体方法的建立及其应用
徐引弟
张青娴
王治方
焦文强
李海利
朱文豪
王克领
《养猪》
2019
2
下载PDF
职称材料
2
牛支原体快速PCR检测方法的建立及其应用
徐引弟
李海利
王治方
张青娴
索延乐
宋振宇
《中国奶牛》
2017
3
下载PDF
职称材料
3
直接快速多色荧光PCR技术在高危型HPV分型中的应用探讨
刘淑园
肖湘文
丁渭
曾烨
张天海
王盼盼
陈华云
《分子诊断与治疗杂志》
2017
2
下载PDF
职称材料
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