快速老化SAMP6小鼠骨代谢及其分子机制研究进展

老年性骨质疏松(senile osteoporosis, SOP)是一种易发骨折的全身性骨病,发病过程复杂,机制研究不足。目前,快速老化小鼠P6品系(senescence accelerated mouse prone 6,SAMP6)是用于研究SOP发病机制和防治SOP的理想模型。该模型表现出骨脆性增加、骨微观结构退化、骨基质流失、骨内细胞代谢异常与功能紊乱等特征,从宏观到微观均能复制SOP发生和发展的过程。

电针对快速老化模型小鼠骨骼肌线粒体动力学的影响

目的观察电针对快速老化模型(SAMP8)小鼠运动功能及骨骼肌线粒体动力学的影响,从线粒体动力学角度探讨电针改善阿尔茨海默病(AD)运动功能障碍的作用机制。方法18只SAMP8小鼠随机分为模型组和电针组,每组9只,另9只同龄抗快速老化(SAMR1)小鼠作为对照组。电针组选取“百会”“大椎”“肾俞”,每日电针20 min,8 d为1个疗程,间隔2 d,共3个疗程,模型组和对照组不予干预。抓力测试、悬挂实验、后肢伸展实验和Morris水迷宫实验检测小鼠运动功能,HE染色观察腓肠肌组织形态,比色法检测腓肠肌组织三磷酸腺苷(ATP)含量,实时荧光定量PCR检测腓肠肌组织视神经萎缩症蛋白1(OPA1)、线粒体融合蛋白2(MFN2)和线粒体动力相关蛋白1(DRP1)mRNA表达,Western blot检测腓肠肌组织OPA1、MFN2和DRP1蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠抓力、悬挂实验评分及Morris水迷宫实验平均速度和最大速度显著降低(P<0.01);腓肠肌纤维排列混乱、间隙变宽、细胞核分布不均匀,腓肠肌组织ATP含量显著降低(P<0.01),OPA1、MFN2 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),DRP1 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组小鼠抓力、悬挂实验评分及Morris水迷宫实验平均速度和最大速度显著升高(P<0.01);腓肠肌纤维排列较整齐、间隙变窄、细胞核分布较均匀,腓肠肌组织ATP含量显著升高(P<0.01),OPA1、MFN2 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01),DRP1 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论电针可改善SAMP8小鼠骨骼肌形态结构和运动功能障碍,其机制可能与调节骨骼肌线粒体动力学失衡状态,提高骨骼肌ATP含量有关。

洗心汤对快速老化模型小鼠血脑屏障通透性及海马组织P-gp、CB1、CB2蛋白表达的影响

目的观察洗心汤对快速老化模型(SAMP8)小鼠血脑屏障通透性及海马组织P-糖蛋白(P-gp)、大麻素受体1(CB1)和大麻素受体2(CB2)蛋白表达的影响,探讨洗心汤治疗阿尔茨海默病(AD)的可能机制。方法60只SAMP8小鼠随机分为模型组、益生菌组和洗心汤高、中、低剂量组,每组12只,另12只抗快速老化(SAMR1)小鼠作为对照组,各给药组分别予相应药物灌胃10周,对照组和模型组灌胃等体积蒸馏水。Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,伊文思蓝法检测小鼠血脑屏障通透性,ELISA检测血清基质金属蛋白酶9(MMP9)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、核因子(NF)-κB含量,Western blot检测海马组织P-gp、CB1、CB2蛋白表达,免疫荧光染色检测海马组织P-gp表达。结果与对照组比较,模型组小鼠学习记忆能力明显降低,脑组织伊文思蓝渗出量明显增加,血清MMP9、TNF-α和NF-κB含量明显增加,海马组织P-gp、CB2蛋白表达明显降低,CB1蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,洗心汤高剂量组小鼠学习记忆能力明显提高,脑组织伊文思蓝渗出量明显减少,血清MMP9、TNF-α和NF-κB含量明显降低,P-gp、CB2蛋白表达明显升高,CB1蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论洗心汤可改善AD模型小鼠学习记忆能力,其机制与调节血脑屏障通透性及相关蛋白表达,抑制神经炎症有关。

远志总苷对快速老化模型(SAM-P/8)小鼠学习记忆能力的作用及其机理研究

目的探讨远志总苷对快速老化模型小鼠学习记忆能力的作用及其机制。方法以SAM-P/8小鼠为对象,给予远志总苷,连续灌胃30d,采用水迷宫方法逐日测定小鼠的学习记忆能力,用化学比色法测定脑组织总蛋白含量、总抗氧化能力和乙酰胆碱酯酶活性,用放免法测定血清中IL-2含量。结果远志总苷能明显提高SAM-P/8小鼠的学习记忆能力,缩短到达目的地的时间;显著提高脑组织总蛋白含量、总抗氧化能力、降低乙酰胆碱酯酶活性及血清中IL-2含量。结论远志总苷可提高SAM-P/8小鼠的学习记忆能力,其作用机理可能与降低脑组织氧化损伤有关。

快速老化小鼠SAMP8研究进展

快速老化小鼠SAMP8(senescence-accelerated mouseprone/8)是一个从普通的遗传群AKR/J系小鼠中通过表型选择培育出的快速老化小鼠,表现为早期增龄性学习记忆缺陷,同时伴有Aβ淀粉样蛋白沉积,是目前公认的有效的研究阿尔采末病(Alzheimer’s disease,AD)动物模型。同属SAMR1表现为抗快速老化,具有正常的老化特性,常用作正常对照。目前SAMP8已被广泛应用于研究快速学习记忆缺陷的发病机制,以及评价抗衰老及改善学习记忆功能的药物等。

三七总皂苷对快速老化模型小鼠SAMP8脑内APP基因转录的影响

目的:研究三七总皂苷(PNS)对快速老化模型小鼠(SAMP8)学习记忆能力及脑内淀粉样前体蛋白(APP)基因转录水平的影响。方法:将SAMP8随机分为PNS高剂量组、PNS低剂量组、石杉碱甲(阳性对照组)组、模型组,各给药组分别按设定剂量灌胃给药,模型组给予等体积双蒸水灌服,连续8 w后应用Morris水迷宫、实时逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,检测PNS高、低剂量组SAMP8学习记忆和脑内APP mRNA含量的影响。结果:PNS能改善SAMP8的学习记忆能力(P<0.05或P<0.01),PNS高剂量还能显著降低其脑内APP mRNA含量(P<0.05)。结论:PNS能显著改善SAMP8的学习记忆能力,其作用途径可能与在转录水平下调APP基因的表达有关。

淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP10脑组织单胺类及氨基酸类神经递质的影响

目的:探讨淫羊藿苷(ICA)对快速老化小鼠SAMP10脑组织单胺类及氨基酸类神经递质的影响。方法:本实验采取8月龄快速老化小鼠SAMP10为实验对象,随机分为模型SAMP10组、阳性药多奈哌齐组(1mg/kg)、ICA 3个剂量(50、100、200mg/kg)组,每组12只,以12只同月龄抗快速老化小鼠SAMR1为正常对照。灌胃给药30d,一天一次,高效液相-电化学法检测快速老化小鼠SAMP10大脑皮层的去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)及其代谢产物3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量来探讨ICA对SAMP10脑组织单胺类神经递质的影响,通过检测谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)、天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GA-BA)、牛磺酸(Tau)、甘氨酸(Gly)的含量来探讨ICA对SAMP10脑组织氨基酸类神经递质的影响。结果:ICA可显著降低SAMP10大脑皮层内Glu、Gln、GABA含量(P<0.01),升高NE、DA、DOPAC、5-HT、HVA、Asp以及Tau的含量(P<0.01或P<0.05),但对SAMP10大脑皮层内Gly的含量并没有显著影响(P>0.05)。结论:ICA可能通过升高脑内单胺类神经递质的含量、调节兴奋性氨基酸类递质的代谢平衡以及调节抑制性氨基酸的代谢平衡达到改善SAMP10的学习记忆的作用。

淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP8脑线粒体的保护作用

目的:探讨淫羊藿苷(ICA)对快速老化小鼠SAMP8脑线粒体功能的影响。方法:将8月龄快速老化小鼠SAMP8随机分为模型组、盐酸多奈哌齐1mg/kg组、吡啦西坦200mg/kg组、ICA75mg/kg组和150mg/kg组,每组6只;8只同月龄抗快速老化小鼠SAMR1作为正常对照组。给药30d后,提取小鼠脑线粒体,测定线粒体呼吸功能、肿胀度、膜电位、活性氧(ROS)和ATP含量。结果:与SAMR1正常对照组相比,SAMP8小鼠脑线粒体呼吸功能显著降低,表现为线粒体Ⅲ态呼吸明显降低,Ⅳ态呼吸改变不明显,呼吸控制指数和磷氧比值降低(P<0.05);线粒体膜肿胀度增高,膜电位降低,线粒体内ROS含量增高,而ATP含量明显降低(P<0.05)。与SAMP8模型组相比,ICA75mg/kg和150mg/kg均可明显改善SAMP8小鼠脑线粒体结构和呼吸功能(P<0.05,P<0.01)。结论:ICA可明显改善SAMP8小鼠脑线粒体结构和功能。

针刺对快速老化小鼠SAMP10氧化应激相关基因表达的影响

[目的]探讨快速老化小鼠SAMP10脑衰老的机制 ,揭示“益气调血、扶本培元”针法改善SAMP10脑衰老症状的部分机制。[方法]应用cDNA阵列技术 (cDNAArray) ,观察快速老化小鼠SAMP10与正常老化小鼠SAMR1前脑588个基因表达的差异 ,同时观察“益气调血、扶本培元”针法对上述基因表达的影响。[结果]SAMP10与SAMR1相比 ,谷胱甘肽S转移酶、热休克蛋白86、成纤维细胞生长因子8、NF -kappa -B转录因子p65亚单位4个与氧化应激反应有关的基因表达上调 ,而针刺可使这些基因的表达下调。[结论]SAMP10的快速老化可能与其脑内的氧化应激水平升高有关 ,针刺可改善氧化应激水平进而达到延缓脑衰老的作用。

葡萄内酯对快速老化小鼠SAMP8学习记忆的影响及其机制研究

目的探讨葡萄内酯对快速老化小鼠学习记忆能力的影响及其机制。方法以SAMP8小鼠为研究对象,给予葡萄内酯,连续灌胃45 d。采用Morris水迷宫方法测定小鼠学习记忆能力,用比色法测定脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活力、丙二醛(MDA)和谷氨酸(Glu)含量。结果葡萄内酯中、高剂量组到达平台的时间明显缩短,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);葡萄内酯剂量组AChE活性、MDA和Glu含量明显降低,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论葡萄内酯可以明显改善SAMP8小鼠学习记忆能力,其作用机制可能与抑制脑组织AChE活性有关。

“益气调血,扶本培元”针法对快速老化小鼠SAMP8海马和颞叶皮质神经元数量及形态的影响

目的探讨针刺疗法对阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)的治疗作用和机制。方法18只快速老化的SAMP8小鼠随机分为针刺组、非穴组、SAMP8对照组(P8组),每组6只,6只正常老化的SAMR1小鼠作为SAMR1对照组(R1组)。针刺组采用“益气调血,扶本培元”针法;非穴组针刺非穴点;P8及R1对照组捉抓,均每日1次,共14日。处理结束后,制备脑切片,作甲苯胺蓝染色,光镜下观察,并用病理图像分析系统进行定量分析。结果P8组海马和颞叶皮质神经元形态发生退行性改变,尼氏体平均总面积和积分光度、平均单位面积细胞数目、平均单个细胞面积及平均CA1区厚度均明显小于R1组(P<0.01);针刺组神经元形态接近R1组,上述指标均大于P8组(P<0.05),平均单位面积细胞数目在CA3区与R1组无差异(P>0.05),在颞叶皮质大于R1组(P<0.05),尼氏体平均总面积和积分光度、平均单个细胞截面积及平均CA1区厚度均小于R1组(P<0.01)。结论“益气调血,扶本培元”针法可以改善SAMP8小鼠神经元形态和功能状态,减少或延迟神经元的丢失,对阿尔茨海默病可能有较好的治疗作用。

地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8定位导航学习记忆影响的研究

目的:探讨地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8的定位导航学习记忆的影响。方法:运用Morris水迷宫实验检测地黄饮子对SAMP8小鼠的定位导航学习记忆的改善情况。结果:地黄饮子能够显著缩短SAMP8小鼠在定位导航实验中的逃避潜伏期,提高SAMP8小鼠的学习记忆能力,地黄饮子治疗组与模型组比较差异具有显著性意义。结论:地黄饮子对SAMP8小鼠的定位导航学习记忆能力有一定的改善作用。

三七总皂苷对快速老化小鼠SAMP8大脑β-淀粉样蛋白前体蛋白表达的影响

目的探讨三七总皂苷(PNS)对快速老化小鼠SAMP8β-淀粉样蛋白前体蛋白(APP)表达的影响。方法采用免疫组织化学方法,在高倍显微镜下随机选取小鼠大脑顶叶皮层和海马周围白质连续五个视野,并计数五个视野APP免疫阳性细胞平均个数。结果PNS能明显减少快速老化小鼠大脑APP阳性细胞数量。结论PNS对SAMP8 APP的表达有明显抑制作用。

快速老化小鼠SAMP8的增龄性老化特征研究

目的探讨快速老化小鼠8(SAMP8)增龄性学习记忆能力、海马区Tau蛋白磷酸化及电镜下细胞超微结构等老化特征。方法用Morris水迷宫评测2、7和12月龄SAMP8和抗衰老系列小鼠1(SAMR1)小鼠的学习和空间记忆能力。利用蛋白免疫印迹法分别检测不同月龄SAMP8和SAMR1小鼠海马区磷酸化Tau蛋白的水平,利用透射电镜观察SAMP8和SAMR1小鼠海马神经元的超微结构变化。结果与SAMR1小鼠相比,7、12月龄的SAMP8小鼠出现明显学习、记忆功能下降(P均<0.05)。7、12月龄SAMP8小鼠的海马和皮质区Tau[pS199]蛋白表达水平明显升高(P均<0.05)。透射电镜观察示7月龄SAMP8小鼠与对照组相比,海马神经元内细胞核出现线粒体轻度肿胀、脊和膜轻度消失,内质网肿胀;12月龄的SAMP8小鼠海马神经元出现胞浆空泡化,核质边移,细胞器减少,线粒体肿胀,在胞浆和轴突内可见大量的致密物。结论 SAMP8小鼠在7和12月龄时表现出学习和记忆能力下降,Tau蛋白磷酸化水平增高,并且细胞超微结构出现相应改变,表现出年龄相关的神经退行性变特征,是优质的快速脑老化动物模型。

快速老化小鼠SAMP8脑内神经病理学变化的研究进展

快速老化小鼠（SAMP8）是由日本京都大学竹田俊男教授开发,以学习记忆功能呈增龄性加速衰退为主要特征,自从1986年Miyamoto等人首次报道了SAMP8小鼠的这一基本特征,之后成为了研究老化和学习记忆障碍的理想哺乳动物模型之一,为了阐明其中的神经生理学机制,人们进行了大量的研究。本文主要对SAMP8小鼠老化过程中神经病理学的研究进行了综述。

赖氨大黄酸对快速老化小鼠SAMP 10肾组织COL1A1、COL3A1和COL4A1表达的影响

目的研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对快速老化小鼠(senescence accelerated mouse prone 10,SAMP 10)肾组织Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)、Ⅲ型胶原α1链(COL3A1)和Ⅳ型胶原α1链(COL4A1)蛋白表达的影响。方法选取7月龄SAMP 10小鼠18只,并根据随机数字表分为空白对照组、低剂量RHL组(25 mg/kg)和高剂量RHL组(50 mg/kg),每组6只;另选抗快速老化小鼠(senescence accelerated mouse resistance 1,SAMR 1)6只作为青年对照,给药时间6个月。采用HE染色观察肾脏组织病理改变,Masson染色观察肾脏组织纤维化改变,Western blot方法检测肾组织COL1A1、COL3A1、COL4A1和NF-κB蛋白的表达。结果与SAMP 10空白对照组相比,25和50 mg/kg RHL组治疗后SAMP 10小鼠精神状态、活动度、毛色等方面较好;肾脏指数升高。HE染色显示SAMP 10空白对照组小鼠肾组织有节段性肾小球萎缩、硬化和明显的间质纤维化,SAMR 1组和RHL组小鼠则无肾小球萎缩、硬化和明显的间质纤维化。RHL能够抑制SAMP 10小鼠衰老过程中出现的肾组织COL1A1、COL3A1和NF-κB蛋白过度表达(P<0.05)。结论 RHL可通过抑制COL1A1、COL3A1和NF-κB蛋白过度表达,减轻衰老过程中SAMP 10小鼠肾组织纤维化程度,发挥肾脏保护作用。

丁苯酞对快速老化小鼠SAMP8学习记忆的影响

目的观察丁苯酞(NBP)对快速老化小鼠SAMP8学习记忆能力的影响。方法选用4月龄SAMP840只,随机分为SAMP8空白组、NBP低、中及高剂量组;另选4月龄SAMR110只作正常对照组。各组分别灌药60d后,以Morris水迷宫实验检测各组小鼠学习记忆能力的变化。结果与SAMR1组比较,SAMP8小鼠在隐蔽平台实验中表现出明显的学习记忆障碍,逃避潜伏期显著延长,NBP组从第4天起逃避潜伏期比SAMP8组显著缩短(P<0.05);探索实验中NBP组原平台象限的停留时间明显多于SAMP8组,且高剂量组与低剂量组也有显著性差异(P<0.05);反向实验中NBP高剂量组第3天的逃避潜伏期比SAMP8组显著缩短(P<0.05);可视平台实验结果各组无显著性差异。结论NBP能改善SMAP8鼠的学习记忆能力。

快速老化小鼠SAMP8在阿尔茨海默病研究中的应用

阿尔茨海默病以进行性认知功能障碍、记忆能力下降为主要特征。脑内β-淀粉样蛋白(Aβ)异常沉积、神经原纤维缠结、胆碱能神经元功能减退、突触和树突棘缺失等为阿尔茨海默病特征性病理改变。快速老化小鼠SAMP8在早期即出现学习记忆功能障碍、Aβ异常沉积、tau蛋白磷酸化、神经递质改变、突触结构和功能障碍、生理节律紊乱,以及基因表达等多方面的特征性改变,与人类阿尔茨海默病病理改变较为一致,可以作为较理想的动物模型,用于阿尔茨海默病防治药物的研究。

中药复方脑还丹对快速老化鼠SAM-P/8海马CA1区超微结构的影响

目的探讨中药复方脑还丹对快速老化鼠海马CAl区超微结构的影响。方法3月龄雄性SAM/P 8小鼠30只,随机分成对照组、脑还丹低剂量组、脑还丹高剂量组,分别给予生理盐水及不同剂量中药复方脑还丹灌胃治疗4月,取海马制作电镜标本,透射电镜观察海马CAl区神经元超微结构。结果对照组脂褐素增多,溶酶体数目增多且空化,粗面内质网偶有扩张或膜结构断裂,核糖体数目明显减少,线粒体数目减少,线粒体肿胀、核膜增厚,嵴断裂或萎缩成中空状,细胞核核膜模糊, 核周池不清,染色质呈凝聚样改变,核周空泡明显。脑还丹组上述变化明显减轻。结论脑还丹能够减轻神经元退行性变化。

淫羊藿苷对去卵巢快速老化小鼠(SAMP8)学习记忆及皮层氧化应激的影响

目的研究淫羊藿苷(ICA)对去卵巢雌性快速老化模型小鼠(SAMP8)学习记忆能力及抗氧化能力的影响。方法本实验以10月龄去卵巢雌性SAMP8小鼠为模型,以同月龄抗快速老化小鼠(SAMR1)为正常对照,以SAMP8假手术作为对照。实验共分为SAMR1组、SAMP8假手术组、SAMP8手术组、多奈哌齐组、己烯雌酚组、ICA75mg/kg组、ICA150mg/kg组7组。灌胃给药8周,通过Morris水迷宫检验ICA对SAMR1和SAMP8学习记忆能力的影响;测定大脑皮层中NO、MDA、SOD、GSH-Px活性。结果ICA150mg/kg、75mg/kg可明显改善OVX SAMP8定位航行潜伏期(P<0.05),提高空间探索能力,平台象限停留时间为ICA150mg/kg45.88±2.98s,ICA75mg/kg40.26±3.66s,OVX SAMP817.13±3.73s(P<0.05);可明显提高大脑皮层内SOD及GSH-Px活性(P<0.05),显著降低MDA及NO的水平(P<0.05)。结论ICA可以改善OVX SAMP8的学习记忆能力,可显著提高OVX SAMP8抗氧化能力。