洗心汤对快速老化模型小鼠血脑屏障通透性及海马组织P-gp、CB1、CB2蛋白表达的影响

目的观察洗心汤对快速老化模型(SAMP8)小鼠血脑屏障通透性及海马组织P-糖蛋白(P-gp)、大麻素受体1(CB1)和大麻素受体2(CB2)蛋白表达的影响,探讨洗心汤治疗阿尔茨海默病(AD)的可能机制。方法60只SAMP8小鼠随机分为模型组、益生菌组和洗心汤高、中、低剂量组,每组12只,另12只抗快速老化(SAMR1)小鼠作为对照组,各给药组分别予相应药物灌胃10周,对照组和模型组灌胃等体积蒸馏水。Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,伊文思蓝法检测小鼠血脑屏障通透性,ELISA检测血清基质金属蛋白酶9(MMP9)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、核因子(NF)-κB含量,Western blot检测海马组织P-gp、CB1、CB2蛋白表达,免疫荧光染色检测海马组织P-gp表达。结果与对照组比较,模型组小鼠学习记忆能力明显降低,脑组织伊文思蓝渗出量明显增加,血清MMP9、TNF-α和NF-κB含量明显增加,海马组织P-gp、CB2蛋白表达明显降低,CB1蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,洗心汤高剂量组小鼠学习记忆能力明显提高,脑组织伊文思蓝渗出量明显减少,血清MMP9、TNF-α和NF-κB含量明显降低,P-gp、CB2蛋白表达明显升高,CB1蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论洗心汤可改善AD模型小鼠学习记忆能力,其机制与调节血脑屏障通透性及相关蛋白表达,抑制神经炎症有关。

电针对快速老化模型小鼠骨骼肌线粒体动力学的影响

目的观察电针对快速老化模型(SAMP8)小鼠运动功能及骨骼肌线粒体动力学的影响,从线粒体动力学角度探讨电针改善阿尔茨海默病(AD)运动功能障碍的作用机制。方法18只SAMP8小鼠随机分为模型组和电针组,每组9只,另9只同龄抗快速老化(SAMR1)小鼠作为对照组。电针组选取“百会”“大椎”“肾俞”,每日电针20 min,8 d为1个疗程,间隔2 d,共3个疗程,模型组和对照组不予干预。抓力测试、悬挂实验、后肢伸展实验和Morris水迷宫实验检测小鼠运动功能,HE染色观察腓肠肌组织形态,比色法检测腓肠肌组织三磷酸腺苷(ATP)含量,实时荧光定量PCR检测腓肠肌组织视神经萎缩症蛋白1(OPA1)、线粒体融合蛋白2(MFN2)和线粒体动力相关蛋白1(DRP1)mRNA表达,Western blot检测腓肠肌组织OPA1、MFN2和DRP1蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠抓力、悬挂实验评分及Morris水迷宫实验平均速度和最大速度显著降低(P<0.01);腓肠肌纤维排列混乱、间隙变宽、细胞核分布不均匀,腓肠肌组织ATP含量显著降低(P<0.01),OPA1、MFN2 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),DRP1 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组小鼠抓力、悬挂实验评分及Morris水迷宫实验平均速度和最大速度显著升高(P<0.01);腓肠肌纤维排列较整齐、间隙变窄、细胞核分布较均匀,腓肠肌组织ATP含量显著升高(P<0.01),OPA1、MFN2 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01),DRP1 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论电针可改善SAMP8小鼠骨骼肌形态结构和运动功能障碍,其机制可能与调节骨骼肌线粒体动力学失衡状态,提高骨骼肌ATP含量有关。

远志总苷对快速老化模型(SAM-P/8)小鼠学习记忆能力的作用及其机理研究

目的探讨远志总苷对快速老化模型小鼠学习记忆能力的作用及其机制。方法以SAM-P/8小鼠为对象,给予远志总苷,连续灌胃30d,采用水迷宫方法逐日测定小鼠的学习记忆能力,用化学比色法测定脑组织总蛋白含量、总抗氧化能力和乙酰胆碱酯酶活性,用放免法测定血清中IL-2含量。结果远志总苷能明显提高SAM-P/8小鼠的学习记忆能力,缩短到达目的地的时间;显著提高脑组织总蛋白含量、总抗氧化能力、降低乙酰胆碱酯酶活性及血清中IL-2含量。结论远志总苷可提高SAM-P/8小鼠的学习记忆能力,其作用机理可能与降低脑组织氧化损伤有关。

艾燃烧生成物对快速老化模型小鼠大脑SOD、MDA和GSH-Px的影响

目的研究艾燃烧生成物对快速老化模型小鼠SAM-P/8大脑内抗氧化酶活性的影响。方法选用6月龄雄性快速老化模型小鼠50只,其中SAM-R/1系10只作为空白组,SAM-P/8系40只随机分为模型组、单纯艾烟熏吸组、无烟艾灸组和常规艾灸组,每组10只。选取关元穴为治疗穴位,对小鼠进行艾灸干预。治疗后采用化学发光法测定小鼠脑组织中SOD和GSH-Px活性及MDA含量。结果模型组同空白组相比,SOD、GSH-Px的活性均显著降低(P<0.01),MDA含量显著升高(P<0.01);三组治疗组同模型组相比,SOD、GSH-Px的活性均显著提高(P<0.01),MDA含量显著下降(P<0.01)。清除自由基的能力得到增强。结论艾燃烧生成物可提高大脑内抗氧化酶活性,增强自由基清除能力,这可能是艾灸延缓快速老化模型小鼠衰老发生的作用机制之一。

三七总皂苷对快速老化模型小鼠SAMP8脑内APP基因转录的影响

目的:研究三七总皂苷(PNS)对快速老化模型小鼠(SAMP8)学习记忆能力及脑内淀粉样前体蛋白(APP)基因转录水平的影响。方法:将SAMP8随机分为PNS高剂量组、PNS低剂量组、石杉碱甲(阳性对照组)组、模型组,各给药组分别按设定剂量灌胃给药,模型组给予等体积双蒸水灌服,连续8 w后应用Morris水迷宫、实时逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,检测PNS高、低剂量组SAMP8学习记忆和脑内APP mRNA含量的影响。结果:PNS能改善SAMP8的学习记忆能力(P<0.05或P<0.01),PNS高剂量还能显著降低其脑内APP mRNA含量(P<0.05)。结论:PNS能显著改善SAMP8的学习记忆能力,其作用途径可能与在转录水平下调APP基因的表达有关。

快速老化模型小鼠海马蛋白质组学初步研究

应用双向凝胶电泳结合质谱鉴定,分析比较6月龄和12月龄快速老化模型小鼠(Senescence-accele-rated mouse,SAM)的快速老化亚系SAM-prone/8(SAMP8)及抗快速老化亚系SAM-resistance/1(SAMR1)海马蛋白表达的差异,从蛋白质水平初步探讨与老化相关的学习记忆功能障碍的发生机制.结果表明,与同龄SAMR1比较,6月龄SAMP8海马中有15个蛋白点表达显著上调,5个蛋白点表达显著下调;12月龄SAMP8海马中有12个蛋白点表达显著上调,2个蛋白点表达显著下调,2个蛋白点只在SAMP8中有表达.应用质谱分析结合数据库检索,共鉴定了22种蛋白质.6月龄和12月龄SAMP8与SAMR1海马中表达有明显变化的蛋白按功能可分为如下4类:(1)能量代谢相关蛋白;(2)线粒体功能相关蛋白;(3)信号转导相关蛋白;(4)其它蛋白.研究结果表明,SAMP8和SAMR1海马蛋白表达存在明显差异,其中一些蛋白与SAMP8随龄出现的学习记忆功能减退相关,并可能为研究或发现促智药物作用的新蛋白靶标提供线索.

针刺单穴对快速老化模型鼠衰老相关基因表达的影响

目的:探讨针刺单穴水沟、内关、太冲、肾俞、后三里对快速老化模型鼠(SAM)P10品系脑中衰老相关性基因片段表达水平的影响。方法:应用由磁珠分离法纯化信使核糖核酸(mR-NA),5’末端模板转换机制进行逆转录—多聚酶链式反应(SMART-PCR)合成互补脱氧核糖核酸(cDNA)和扩增片段长度多态性分析(AFLP)—银染法结合形成的mRNA—AFLP分析技术。展示各组mRNA之间的差异。结果:随机应用20对引物作选择性AFLP扩增,共发现42条带型清晰的SAM P、R两系组间差异表达带。其中,各有34、26、26、8和17条差示带的表达分别受针刺水沟、内关、太冲、肾俞、后三里穴的显著调节而趋同于R系。结论:针刺不同单穴能不同程度地影响衰老相关性基因片段的表达,从而发挥不同程度的抗衰老作用。

当归芍药散对快速老化模型小鼠海马蛋白表达的影响

目的研究当归芍药散(powder of Chinese Angelica and Peony,DSS)对快速老化模型小鼠(senescence-accel-erated mouse,SAM)海马蛋白表达的影响。方法选择12月龄SAM的快速老化亚系SAMP8和抗快速老化亚系SAMR1作为研究对象,分为SAMR1组、SAMP8组和SAMP8+DSS组(3.2g/kg),每组10只,连续给药30d。应用双向凝胶电泳结合质谱鉴定,观察DSS对SAMP8海马蛋白表达的影响。结果与SAMR1组比较,SAMP8组海马中有9个蛋白表达下调,13个蛋白表达上调;SAMP8+DSS组与SAMP8组比较,海马中有14个蛋白表达下调,21个蛋白表达上调。经肽质量指纹谱分析及蛋白数据库检索,表达有明显变化的蛋白根据功能可分为5类:线粒体相关蛋白、能量代谢相关蛋白、突触形成相关蛋白、细胞骨架蛋白、其他蛋白。结论SAMP8和SAMR1海马蛋白表达存在明显差异,DSS可影响快速老化模型小鼠海马蛋白的表达,其作用是多途径多靶点的。

枸杞叶及枸杞多糖对快速老化模型小鼠行为学的影响

目的观察不同剂量枸杞叶和枸杞多糖对不同月龄快速老化模型小鼠(SAMP8)老化征象和学习记忆能力的影响。方法选用3、5、7月龄SAMP8,以同龄正常老化小鼠(SAMR1)为正常对照。SAMP8随机分为给药组和对照组,给药组分为枸杞叶全汁高(枸杞叶1.0g.kg-1)、低剂量组(枸杞叶0.5g.kg-1)和枸杞多糖高(0.1g.kg-1)、低剂量组(0.05g.kg-1);对照组分为安慰剂对照组和空白对照组。给药组灌胃服用高、低剂量枸杞叶全汁或枸杞多糖,每天1次,连续8周,安慰剂对照组灌胃服用等量蒸馏水,空白对照组正常饲养,不做任何处理。应用老化度评分评估老化征象和Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力。结果①3、5、7月龄SAMP8组与同月龄SAMR1对照组比较:3月龄SAMP8各组均较3月龄SAMR1对照组老化度明显增加,学习记忆能力明显下降(P<0.05),5、7月龄与3月龄结果相同;②3、5、7月龄SAMP8给药组与同月龄SAMP8空白和安慰剂对照组比较:3月龄SAMP8各给药组均较3月龄SAMP8空白和安慰剂对照组老化度减少、学习记忆能力提高,但差异无统计学意义(P>0.05);5月龄枸杞叶高、低剂量组和枸杞多糖低剂量组均较5月龄SAMP8空白和安慰剂对照组老化度减小,学习记忆能力提高,具有统计学意义(P<0.05);7月龄各给药组结果与5月龄相同;③3、5、7月龄SAMP8各给药组间比较:5月龄SAMP8枸杞叶低剂量较3、7月龄各给药组老化度减小,学习记忆能力提高(P<0.05);④同月龄SAMP8高、低剂量组间比较:3月龄SAMP8枸杞叶、枸杞多糖低剂量组均较3月龄高剂量组老化度减小,学习记忆能力提高,但无统计学意义(P>0.05);5月龄SAMP8枸杞叶、枸杞多糖低剂量组均较5月龄高剂量组老化度减小,学习记忆能力提高(P<0.05);7月龄与5月龄结果相同。结论枸杞叶全汁和枸杞多糖对各月龄快速老化模型小鼠SAMP8的老化征象和学习记忆能力均有改善作用,但改善的程度与服用剂量及起始干预年龄有关。

针刺对快速老化模型小鼠肝抗氧化酶活性及其基因表达水平的影响

目的 :探讨针刺对快速老化模型小鼠 (SAM- P/10 )肝抗氧化酶活性及基因表达的影响。方法 :采用生化及分子生物学技术 Northern Blot方法 ,观察针刺水沟、内关、太冲穴后 ,SAM- P/10小鼠肝丙二醛含量 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)活性及其基因表达水平的改变。结果 :针刺可降低模型动物自由基代谢产物 MDA含量 ,提高抗氧化酶活性 ,并对 SOD m RNA表达有上调作用 ,且具有腧穴的特异作用。结论 :针刺可在基因调控水平影响抗氧化酶活性 ,减少自由基代谢产物 。

快速老化模型小鼠血清蛋白质组学分析比较

以6月及12月龄SAMP 8及同龄SAMR 1为研究对象,应用双向凝胶电泳法,分析比较了快速老化模型小鼠(Senescence accelerated m ice,SAM)的快速老化亚系SAMP 8及抗快速老化亚系SAMR 1血清蛋白表达的差异.与同龄SAMR 1比较,6月龄SAMP 8血清中有15个蛋白点表达显著上调,3个蛋白点表达显著下调,7个蛋白点只在SAMP 8中有表达;12月龄SAMP 8血清中有9个蛋白点表达显著上调,7个蛋白点表达显著下调,12个蛋白点只在SAMP 8中有表达.应用质谱进行肽质量指纹图谱分析和数据库检索共鉴定了19种蛋白质.其中6个蛋白只在6月龄SAMP 8中表达,4个蛋白只在12月龄SAMP 8中表达.此外,在6月龄及12月龄SAMP 8血清差异蛋白中,存在9个共同的差异蛋白,按照功能可分为4类:(1)免疫相关蛋白;(2)老化相关蛋白;(3)糖代谢及神经元凋亡相关蛋白;(4)其它蛋白.上述研究结果显示,SAMP 8和SAMR 1血清蛋白表达存在明显差异,其中一些差异蛋白可能是SAMP 8老化进程中相关病理生理变化的重要原因.

“补肾活血”针法对快速老化模型小鼠SAMP8学习记忆能力及海马CA1区NEP表达的影响

目的研究"补肾活血"针法对快速老化模型小鼠SAMP8(Senescence Accelerated Mouse Prone 8,SAMP8)学习记忆能力及海马CA1区中性内肽酶(neprilysin,NEP)表达的影响。方法将6月龄雄性快速老化模型小鼠SAMP8 20只随机分为针刺组和SAMP8对照组,各组10只;另选取10只同龄雄性正常老化小鼠SAMR1(Senescence Accelerated Mouse/resistant 1)为正常对照组。针刺组针刺"百会"、双侧"血海"、"肾俞"以及"膈腧"4周。治疗结束后,采用Morris水迷宫测定"补肾活血"针法对小鼠学习记忆能力的影响,免疫组化方法检测小鼠海马CA1组织中NEP的表达情况。结果针刺组学习记忆能力明显较SAMP8对照组增强(潜伏期缩短、跨平台象限次数增加)(P<0.05);针刺组NEP相对表达量明显较SAMP8对照组增高(P<0.05)。结论"补肾活血"针法可能通过上调NEP表达,促进Aβ降解,改善Aβ相关的认知障碍来防治阿尔茨海默病,这可能是"补肾活血"针法防治阿尔茨海默病作用机制的一部分。

调心方对快速老化模型小鼠海马学习记忆有关基因表达的影响

目的 :研究调心方对快速老化模型小鼠 (senescenceacceleratedmouse ,SAM )海马学习记忆有关基因表达的影响。方法 :应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)的方法 ,以 β actin为内参照 ,检测SAM海马盐皮质激素受体 (MR)、早老蛋白 1(PS 1)、早老蛋白 2 (PS 2 )、tau、APP、apoE及bcl 2等学习记忆有关基因表达水平的变化及调心方对其影响。实验中选用E2 0 2 0为对照药物。结果 :与同龄抗快速老化的R系(SAMR1)比较 ,5月龄快速老化亚系 (SAMP8)海马MR、tau、PS 2、APP基因表达水平显著升高 ,apoE基因表达水平降低 ,而PS 1和bcl 2基因表达水平无明显变化 ;12月龄SAMP8海马MR、tau基因表达水平升高 ,bcl 2基因表达水平降低 ,而PS 1、PS 2、apoE、APP基因表达水平无明显变化。连续口服给予调心方对5月龄SAMP8海马MR、tau、apoE基因的异常表达具有纠正作用 ,对 12月龄SAMP8海马MR、bcl 2基因的表达异常亦具有纠正作用。结论 :连续口服给予调心方对 5月龄及 12月龄SAMP8海马学习记忆有关基因的异常表达有纠正或调节作用。

快速老化模型小鼠学习记忆行为及有关脑区单胺递质水平的增龄性变化(英文)

目的 研究快速老化模型小鼠 (senescenceacceleratedmice ,SAM )学习记忆能力及其大脑皮层、海马和下丘脑单胺递质含量的增龄性变化及它们之间的关系。方法 分别采用跳台实验和穿梭箱实验测定SAM的被动和主动回避反应能力 ,采用高效液相色谱电化学检测法测定脑内单胺递质的含量。 结果 2月龄快速老化亚系SAM prone/ 8(SAMP8)的被动和主动回避反应能力已较同龄抗快速老化亚系SAM resistance/ 1(SAMR1)明显降低 ,且其主动回避反应能力随增龄进一步降低。同时 ,SAMP8大脑皮层、海马及下丘脑内单胺递质水平多明显高于同龄SAMR1,且随增龄明显增高。 结论 SAMP8学习记忆能力的衰退可能与其相关脑区单胺递质的变化密切相关。

RhG-CSF与VEGF联合应用对快速老化模型小鼠P10认知障碍的影响

目的:观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)与血管内皮生长因子(VEGF)联合应用,对快速老化模型小鼠P10(SAM-P10)认知功能的改善作用。方法:选用72只SAM-P10为实验动物,随机分为对照组、rhG-CSF治疗组(单治组)、rhG-CSF与VEGF联合治疗组(联合组),每组24只。对照组给予生理盐水,单治组皮下注射rhG-CSF100μg/(kg.d),连续7 d。联合组首先腹腔注射VEGF50μg/(kg.d),连续3 d,随后皮下注射rhG-CSF50μg/(kg.d),连续7 d。并于给药前及给药后第7、14、28、56 d进行Morris水迷宫测试,观察其认知功能的变化。结果:对照组小鼠学习记忆能力下降,单治组和联合组均较对照组逃避潜伏期缩短,目的象限游泳距离百分比增加,且联合组优于单治组(P<0.05)。结论:rhG-CSF与VEGF联合应用能改善SAM-P10的认知障碍。

快速老化模型小鼠海马正反向抑制消减cDNA文库的构建

目的:构建快速老化模型小鼠(SAM)海马正反向抑制消减cDNA文库,以揭示SAMP8学习记忆脑老化的机制,同时为研究阿尔茨海默病(AD)的发病机制提供线索。方法:以快速老化模型小鼠SAMP8和SAMR1海马的总RNA为材料,采用抑制消减杂交方法和蓝白斑筛选克隆构建文库,并用PCR鉴定了文库的质量。结果:成功构建了12月龄雄性SAMP8和SAMR1海马的正反向抑制消减cDNA文库,其中正向文库包含864个克隆,反向文库包含960个克隆,阳性克隆率为96.16%,插入片段范围为250～2000bp。结论:SAMP8和SAMR1海马的正反向抑制消减cDNA文库的构建,为进一步筛选鉴定SAMR1和SAMP8海马差异表达基因提供了丰富的实验材料。

快速老化模型小鼠SAMP6骨组织形态计量学观察

目的 验证SAMP6小鼠自日本引进中国以来 ,其自发性骨质疏松的病理特点是否得以保持。方法 通过观察比较快速老化模型小鼠SAMP6与正常老化小鼠SAMR1骨组织形态计量学及其增龄性变化 ,确定SAMP6小鼠是否存在骨质疏松。结果 SAMP6不仅骨量低 ,骨的显微结构也表现为骨小梁稀疏、细小 ,骨小梁间隙大。结论 SAMP6小鼠引进成功 。

当归芍药散活性部位JD-30对快速老化模型小鼠学习记忆功能的影响及其机理的初步研究

目的：研究当归芍药散活性部位JD-30对快速老化模型小鼠（senescence accelerated mouse，SAM）学习记忆行为的影响及其可能的作用机理。方法：采用Moms水迷宫观察空间记忆能力；采用Aβ1—16单克隆抗体进行免疫组化染色检测SAM脑内β-淀粉样蛋白（Aβ）的含量；采用细胞外微电极记录技术记录离体海马片CA1区的长时程增强（LTP）。

快速老化模型小白鼠（SAM）的老化诸特征

快速老化模型小白鼠（ＳＡＭ）的老化诸特征韩景献天津中医学院第一附属医院老年病研究室（天津和平区多伦道３０００２０）绪言快速老化模型小白鼠简称老化鼠，英文名为ＳｅｎｅｓｃｅｎｃｅＡｃｃｅｌｅｒａｔｅｄＭｏｕｓｅ简称ＳＡＭ，日文名为“老化促进 ...

醒脑开窍针法对快速老化模型小白鼠痴呆状态影响的实验研究

本研究应用日本老化鼠开展了针刺对痴呆状态影响的实验研究。研究结果表明,高架实验中 SAM-P/8小鼠较 SAM-R/1小鼠进入无屏壁区的次数、时间及距离明显提高(P<0.05或 P<0.01),表明老化鼠处于痴呆所表现的低恐怖不安状态,且脑组织 NE水平低下(P<0.05)。醒脑开窍针法对上述异常状态有明显的改善作用,可提高脑 NE 水平(P<0.01),而且可显著提高脑组织 SOD 活性(P<0.05)。非穴位针刺法对上述异常状态未观察到明显的作用,并可使脑5-HT 含量明显增多,估计与疼痛刺激使小鼠产生焦虑不安情绪有关。