浅析食品中蛋白质快速检测技术

目前,我国食品检测技术的发展日益成熟,但是食品中蛋白质检测暴露出了不少问题,检测准确性难以得到保证。在传统的蛋白质检测技术中,较为常见的是生物试验检测技术、凯氏定氮法检测技术,这些传统检测技术在检测成本、时间、质量等方面都存在一定问题,影响到蛋白质食品检测的准确性。为了更好地保障食品中蛋白质检测质量,还需要进一步加强对蛋白质快速检测技术的掌握,对新技术、新方法的研究,实现快速检测技术创新,引进相应的检验技术和仪器,提高蛋白质检测的稳定性。

蛋白质快速检测仪测定乳及乳制品中蛋白质

采用研制的蛋白质快速检测仪,系统地考察了温度、时间和干扰物质等因素对蛋白质测定的影响及检测仪的重复性,并将检测仪应用于新鲜乳、纯牛奶、牛奶饮料(核桃、燕麦、红枣)、牛初乳、奶粉、豆奶粉、豆浆粉和鸡蛋等样品中蛋白质的定量测定。实验结果表明,在17～40℃条件下,蛋白质试剂与蛋白质在1min内即可完成反应,整个蛋白质含量测定过程仅需5～10min,测定结果的精密度(RSD)小于1%,与凯式定氮法测定结果和标准物质比较,测定结果的相对误差均小于5%,且不受三聚氰胺、尿素、甘氨酸和硝酸铵等非蛋白氮的干扰,表明此仪器具有较好的准确度和重复性,可应用于乳及乳制品中蛋白质的快速定量测定。

用近红外光谱技术快速测定籼稻品种的蛋白质含量

分别以稻谷、糙米、精米和精米粉为扫描材料,应用近红外光谱法建立了籼稻蛋白质含量的预测模型。结果表明,采用光谱预处理的校正效果比不采用预处理的好,用偏最小二乘法(PLS)获得的籼稻稻谷、糙米、精米、精米粉的回归模型和交叉验证结果为:最优校正决定系数(R2)和交叉检验均方误差(RMSECV)分别为0.772 10、.507,0.888 40、.379,0.911 6、0.336,0.951 0、0.258,稻谷的误差最大,粉样的误差最小。育种实践中,低世代可选用糙米、高世代可选用精米和精米粉作为扫描样本测定稻米蛋白质含量。

食品中蛋白质快速检测技术的研究

蛋白质是生命的物质基础。随着社会生活水平的提高,人们更加注重对食物中蛋白质的摄入。三聚氰胺事件的发生促使了蛋白质检测工作的重大变革,相关部门更加重视对蛋白质含量的检测工作。本文综述了快速测定蛋白质的各种方法,分析它们的检测原理、检测时间,将其与传统的凯氏定氮法相比较并对其以后的应用前景进行了展望,为进一步研究蛋白质检测工作提供一定的参考价值。

基于近红外光谱的藏区酥油脂肪和蛋白质含量快速检测分析

为了建立藏区酥油中脂肪和蛋白质含量快速检测方法,以藏区不同产地酥油为研究对象,采用组合区间偏最小二乘法优选出脂肪和蛋白质的红外光谱特征波段,在此基础上分别对几种光谱预处理方法进行比较挑选出最佳预处理方法,最后建立脂肪和蛋白质的定量分析模型并对模型进行外部验证。结果表明:在脂肪和蛋白质的特征波段内采用SNV+数据归一化+二阶导数+S-G滤波法对光谱预处理后建立脂肪和蛋白质定量模型,模型相关系数(R)分别为0.994和0.997,交叉验证均方差(RMSECV)分别为4.09%和0.286%。对验证样本的预测值和实测值进行配对t检验,两种测量值之间没有显著性差异(P>0.05),表明建立的脂肪和蛋白质的近红外定量模型具有良好的预测能力,基于近红外光谱快速测定藏区酥油中脂肪和蛋白质的含量是可行的。

快速老化模型小鼠海马蛋白质组学初步研究

应用双向凝胶电泳结合质谱鉴定,分析比较6月龄和12月龄快速老化模型小鼠(Senescence-accele-rated mouse,SAM)的快速老化亚系SAM-prone/8(SAMP8)及抗快速老化亚系SAM-resistance/1(SAMR1)海马蛋白表达的差异,从蛋白质水平初步探讨与老化相关的学习记忆功能障碍的发生机制.结果表明,与同龄SAMR1比较,6月龄SAMP8海马中有15个蛋白点表达显著上调,5个蛋白点表达显著下调;12月龄SAMP8海马中有12个蛋白点表达显著上调,2个蛋白点表达显著下调,2个蛋白点只在SAMP8中有表达.应用质谱分析结合数据库检索,共鉴定了22种蛋白质.6月龄和12月龄SAMP8与SAMR1海马中表达有明显变化的蛋白按功能可分为如下4类:(1)能量代谢相关蛋白;(2)线粒体功能相关蛋白;(3)信号转导相关蛋白;(4)其它蛋白.研究结果表明,SAMP8和SAMR1海马蛋白表达存在明显差异,其中一些蛋白与SAMP8随龄出现的学习记忆功能减退相关,并可能为研究或发现促智药物作用的新蛋白靶标提供线索.

硒粉催化法快速测定污泥中的蛋白质含量

以污水处理厂的剩余污泥为研究对象,采用硒粉催化法测定其中的蛋白质含量,探讨了样品消化时间、硒粉用量、K2SO4用量对消化反应的影响,并将该方法与凯氏定氮法作了对比。结果表明:污泥样品的最佳消化时间为1h,硒粉的最佳用量为0.15g,K2SO4为3g。该法与凯氏定氮法相比,具有快速、方便、可靠和准确等优点,可用于污泥中蛋白质的快速测定。

高效亲和膜色谱快速分析及小量制备蛋白质

以甲基丙烯酸缩水甘油酯纤维素复合膜为基质，分别以蛋白Ａ（ＰｒｏｔｅｉｎＡ）、人免疫球蛋白Ｇ（ＨＩｇＧ）、三嗪染料（ＣｉｂａｃｒｏｎｂｌｕｅＦ３ＧＡ）、亚胺二乙酸铜离子为配基，用不同方法制备了适合于分析及小量制备的高效亲和膜色谱介质，并对高效亲和柱的基本性能及其应用于各种相应蛋白的定量测定情况进行了考察。利用这种方法可以针对不同的目标蛋白及所存在的环境采用不同的配基，对各种蛋白的定量测定及小量制备可达到较为满意的结果。

用分光光度法快速测定蛋白质含量的研究

基于分光光度法检测技术,建立了样品中蛋白质含量的快速分析方法.利用试样中蛋白质与染色剂考马斯亮蓝G-250间的快速结合反应,生成有色结合物,在最大吸收波长610 nm处生成物吸光值与样品中蛋白质浓度成比例,线性范围0～100μg/mL,相关系数为0.997,检测时间少于2 min,可用于样品中蛋白质含量的快速测定.

双向电泳分析快速老化痴呆鼠脑蛋白质的异常表达及针刺的影响

目的:从整体上观察快速老化及伴随的痴呆对脑蛋白质组的影响以及针刺对其的调节作用。方法:以8月龄快速老化痴呆鼠SAMP10和同源正常老化鼠SAMR1为材料,分为P10针刺组、P10非穴组、P10对照组和R1对照组。针刺组施以“益气调血,扶本培元”针法,针刺“膻中”“中脘”“气海”“血海”“足三里”;非穴组针刺双胁下非穴固定点。双向电泳展示各组小鼠大脑蛋白图谱。结果:双向电泳显示,伴随着快速老化和痴呆,3个蛋白发生了质的变化,其中一个蛋白为P10所特有,两个为R1所特有;9个蛋白发生了量的变化,其中7个蛋白伴快速老化和痴呆高表达,2个低表达。针刺穴位具有良性调节作用,可明显改善上述某些蛋白的表达异常,减缓衰老;而非穴无特异性。结论:伴快速老化,SAMP10痴呆鼠大脑某些蛋白的表达发生了异常,针刺可改善其中某些蛋白的异常,并具有穴位特异性。

基于温敏型材料的固定化酶的制备及其在蛋白质组快速分析中的应用

蛋白质组学通过规模化鉴定、分析从细胞、组织或有机体中提取的蛋白质,从而获得蛋白表达、修饰、组成和定量的变化信息。在目前最为有效的"鸟枪法"蛋白质组学策略中,固定化酶试剂基质常用固相载体材料,该固定化酶试剂在酶解蛋白质时为异相体系,存在固液界面传质阻力和空间位阻,限制了酶解效率和样品处理通量。针对这一技术瓶颈,本研究利用温敏聚合物对外界温度变化的响应能力,制备了一种新型的基于可溶性温敏聚合物的固定化胰蛋白酶试剂。该固定化酶特有的温度敏感特性,使其具有"高温均相酶解,低温异相分离"的特色,且兼具酶切时间显著缩短、酶可重复利用的优势。BSA 1 min固定化酶解产物肽段的氨基酸序列覆盖率可达94%,高于传统溶液酶解12 h所得覆盖率为(74%)。进一步将该固定化酶试剂应用于HeLa细胞全蛋白质组的酶解,其酶解效果与相同条件下溶液酶解12 h相当。该固定化酶试剂对复杂蛋白质的快速、高效酶解充分证明其在蛋白质组学研究中的应用潜力。

快速老化模型小鼠血清蛋白质组学分析比较

以6月及12月龄SAMP 8及同龄SAMR 1为研究对象,应用双向凝胶电泳法,分析比较了快速老化模型小鼠(Senescence accelerated m ice,SAM)的快速老化亚系SAMP 8及抗快速老化亚系SAMR 1血清蛋白表达的差异.与同龄SAMR 1比较,6月龄SAMP 8血清中有15个蛋白点表达显著上调,3个蛋白点表达显著下调,7个蛋白点只在SAMP 8中有表达;12月龄SAMP 8血清中有9个蛋白点表达显著上调,7个蛋白点表达显著下调,12个蛋白点只在SAMP 8中有表达.应用质谱进行肽质量指纹图谱分析和数据库检索共鉴定了19种蛋白质.其中6个蛋白只在6月龄SAMP 8中表达,4个蛋白只在12月龄SAMP 8中表达.此外,在6月龄及12月龄SAMP 8血清差异蛋白中,存在9个共同的差异蛋白,按照功能可分为4类:(1)免疫相关蛋白;(2)老化相关蛋白;(3)糖代谢及神经元凋亡相关蛋白;(4)其它蛋白.上述研究结果显示,SAMP 8和SAMR 1血清蛋白表达存在明显差异,其中一些差异蛋白可能是SAMP 8老化进程中相关病理生理变化的重要原因.

快速埋线对偏头痛肝阳上亢证大鼠下丘脑差异蛋白质表达的影响

目的:探讨快速埋线缓解肝阳上亢型偏头痛大鼠与相关蛋白的机理。方法:30只大鼠随机抽取20只制成肝阳上亢证模型后又复制为实验性偏头痛模型,其中10只给予快速埋线治疗(埋线组);10只给予蒸馏水灌服(上亢组);另10只为正常组。用双向凝胶电泳检测3组大鼠下丘脑的总蛋白质的表达。结果:与正常组匹配,上亢组与埋线组大鼠下丘脑图象匹配率分别为92%、96%,且重复性较好,其蛋白质主要分布在等电点PI4-8,分子量Mr20-75 kD。与正常组比较,上亢组蛋白质点表达上升2倍及以上12个,下降2倍及以上14个;埋线组以上表达上升的点有13个下降2倍以上,其中8个点下降后接近正常组,而表达下降的点均上升,有9个点上升达2倍以上,其中6个点上升后接近于正常组。结论:与正常组差异有显著的蛋白质可能是偏头痛肝阳上亢证证候相关蛋白;快速埋线可缓解头痛和改善临床症状可能与上述蛋白质的改变有关。

一种可用于皮革分析的蛋白质快速检测方法

本文针对常规蛋白质检测法分析速度慢、难以实现在线自动检测的缺陷 ,建立起了一种新颖、简便、快速的分析方法 ,实现了 Lowry试剂—Folin试剂体系、双通道流路的蛋白质快速流动注射分光光度分析法。本文进行了方法精密度、线性回归、检测限等可行性参数的测定和干扰试验 ,并将该方法应用于皮革分析上。本方法测得的蛋白质含量与双缩脲法分析的结果较为一致。试验结果表明 ,本方法的线性好、分析速度快、精密度高、检测限低、节省人力物力 ,可应用于皮革分析检验 ,为皮革工业的科研和生产提供可靠的依据。

蛋白质快速测定中硒粉最佳用量的探讨

研究了高效催化剂(Se粉)在蛋白质快速消化中的最佳用量,通过单因素分析得出:Se粉0 15g,K2SO4lg,浓H2SO410ml;并用末方法与标准方法进行比较,经t检验,结果一致。

快速黏度分析仪表征籼米陈化过程中蛋白质与淀粉相互作用的研究

以新收获籼米为原料,在温度37℃、相对湿度85%条件下储藏20周,采用快速黏度分析仪研究,以不同浓度氯化钠、十二烷基硫酸钠(SDS)、β–巯基乙醇和抗坏血酸为测试溶剂对储藏过程中籼米峰值黏度和回生值的影响。结果发现,随着储藏时间的增加,籼米峰值黏度先上升后下降,回生值则持续上升;随着四种测试溶剂浓度的增加,峰值黏度增加,其中以β–巯基乙醇和SDS为测试溶剂峰值黏度增加最为显著;回生值随氯化钠、β–巯基乙醇和抗坏血酸浓度的增加而下降,随SDS浓度的增加而增加,其中以β–巯基乙醇为测试溶剂回生值下降最为显著。表明陈化导致大米蛋白形成二硫键以及疏水相互作用,通过抑制大米淀粉颗粒的糊化性质从而降低稻米的蒸煮食用品质。

奶粉中蛋白质的快速测定法

劣质奶粉的出现严重地损害了人民群众的健康，劣质奶粉的主要特点是蛋白质含量远低于正常值。寻求一个简单、快速地测定奶粉中蛋白质含量的方法对于在大范围内，迅速鉴定奶粉的质量，及时发现劣质奶粉非常必要。经典的测定奶粉中蛋白质的方法为凯氏定氮法，该法要经过消化、蒸馏、滴定等步骤，手续繁琐，耗费时间长。本文在文献基础上，建立了一个快速测定奶粉中蛋白质的方法。

快速测定微量蛋白质的方法

随着生化技术的日益发展,越来越需要对微量蛋白质进行快速定量。劳里(Lowry)蛋白质测定法是目前最经典的方法之一,但根据需要产生了一些改良法,而仍费时,操作也较繁琐,并有许多试剂干扰劳里法的测定结果。最重要的缺点是它不能用于测蛋白含量在10μg以下的样品,因此在实验工作中受到限制。

多维液相色谱仪的研制与开发

大连化学物理研究所及其合作单位承担了多维液相色谱仪器研制与开发任务。研制了包括高压色谱恒流泵、紫外检测器、多维接口以及一体化控制软件的多维液相色谱仪,整个系统最高工作压力可达到40MPa,泵流量范围可以从1μL/min到9.999 mL/min;检测器可以在190～720 nm的波长范围内进行检测。将多维液相色谱仪应用于珠蛋白酶解产物的分析,离子交换色谱作为第一维,反相色谱作为第二维,整个系统的峰容量可以达到3306。