RRLC(高分离度快速液相色谱)法测定孕钙片中叶酸的含量

目的:采用RRLC(高分离度快速液相色谱)仪测定孕钙片中叶酸的含量。方法:色谱柱为Zorbax XDB-C18(4.6×50mm,1.8um),流动相:乙腈-5%甲酸(31∶69),检测波长:280nm,流速:1.0mL.min-1,柱温:30℃。结果:叶酸在0.2-1.0μg.ml-1(r=0.9996)内峰面积与浓度呈良好的线性关系,加样回收率为99.28%(RSD=2.65%)。结论:采用RRLC(高分离度快速液相色谱)仪测定孕钙片中叶酸的含量,可缩短分析时间,提高效率,降低成本。本方法简便、准确,结果稳定。

高分离度快速液相色谱法检测人参皂苷的研究

目的建立高分离度快速液相色谱(RRLC)法定量检测人参中的主要成分人参皂苷,并应用于人参根、人参花及人参花不同部位中主要人参皂苷成分的含量测定。方法采用反向色谱柱进行梯度洗脱。结果人参根、人参花及人参花不同部位人参皂苷Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd在15min内得到完全分离,并且测得人参花中皂苷含量约是人参根中皂苷含量10倍,人参花不同部位皂苷含量为花蕾>花托>花柄。结论本方法具有快速、准确、分离效果好、高灵敏度、节约溶剂、可操作性强、重现性好的优点,比传统HPLC法更为方便快捷,能更有效的控制药材质量。

快速高分离度液相色谱-质谱联用方法筛选Tau蛋白激酶2抑制剂

建立了测定Tau蛋白激酶2(Tau protein kinase 2,TPK2)催化反应产物磷酸化十肽(PKpTPKKAKKL)的快速高分离度液相色谱-质谱方法(RRLC/MS)用于筛选TPK2抑制剂.反应溶液总体积为50μL,将终浓度为20 nmol/L的TPK2与终浓度为5μmol/L的底物十肽(PKTPKKAKKL)于30℃反应30 min,用等体积乙腈终止反应并加入终浓度为1μmol/L的磷酸化十肽(PKpTPKKAKKV)作为内标,采用Agilent SB-C18色谱柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱分离后,用RRLC/MS进行定性及定量分析.该方法可通过精确定量一定时间内的酶促反应产物来反映酶活性被抑制的程度,作为TPK2抑制剂的筛选方法,本方法具有简单、灵敏、快速的优点,能够避免光谱法筛选可能产生的假阳性结果,可用于TPK2的先导化合物的高通量筛选.

超高效/高分离度快速/超快速液相色谱在中药及其制剂研究中的应用

超高效液相色谱(UPLC)、高分离度快速液相色谱(RRLC)和超快速液相色谱(UFLC)是近几年来推出的一种新的液相色谱技术,峰容量、分析效率、灵敏度和分辨率较常规HPLC有了很大的提高。其主要用于中药成分分析、中药指纹图谱、中药及其复方定量测定。此外,与TOF-MS、MS/MS联用还可用于中药代谢产物、中药复方血清化学成分和药动学等复杂体系的生物分析,以及药物的研究与开发,是复杂体系中药分离分析的重要手段。着重就其在中药及其复方研究中的应用进行介绍。

快速高分离液相色谱-串联质谱法测定植物组织中雌激素玉米赤霉醇类化合物

应用快速高分离液相色谱-串联质谱仪(RRLC-MS/MS),建立了植物组织中玉米赤霉醇类化合物(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、玉米赤霉烯酮)的检测方法。植物组织样品采用乙腈提取,碱性水溶液反萃取,经混合阴离子(MAX)固相萃取柱进行净化和富集后,用RRLC-MS/MS检测,多反应监测(MRM)模式下进行定性与定量分析。结果表明:玉米赤霉醇类化合物在0～20μg/kg的线性范围内均具有良好的线性关系,方法检出限(LOD)为0.5μg/kg,定量限(LOQ)为1.0μg/kg,6种玉米赤霉醇类化合物的平均回收率为75.8%～105.4%,相对标准偏差为2.4%～12.1%。本方法可用于植物组织中玉米赤霉醇类化合物含量的测定。

高分离快速液相色谱-四极杆飞行时间质谱法检测人参皂苷Re在大鼠体内的分布

建立了高分离快速液相色谱-四极杆飞行时间质谱（RRLC-Q-TOF MS）法检测大鼠尾静脉注射人参皂苷Re（G-Re）后,不同组织（心、肝、脾、肺、肾、脑）中G-Re的分布情况。样本经蛋白沉淀处理,Supelco AscentisExpress C18色谱柱（50mm×3.0mm×2.7μm）分离,采用含0.1%甲酸的水溶液（A）-乙腈（B）为流动相,梯度洗脱,以人参皂苷Rc（G-Rc）作为内标,在电喷雾负离子模式下检测。结果表明：组织匀浆标准曲线的线性范围为10-20 000μg/L,线性关系良好（r〉0.99）,最低检出限（S/N=3）为3μg/L,最小定量限为10μg/L;准确度、日内和日间精密度、提取回收率均符合生物样品的分析要求。大鼠尾静脉注射20mg/kg G-Re溶液后,在大鼠体内不同组织中均能检测到G-Re,主要分布在肺、脾、肾、心、脑、肝等器官,其中在肺中分布最多,在肝中分布最少。该方法简单、灵敏、快速、检出限低,适用于检测人参皂苷Re在生物体内的分布。

高分离快速液相色谱法分析五味子与人参配伍化学成分变化

目的：建立高分离快速液相色谱（RRLC）测定五昧子中主要活性成分五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素含量的方法。对五味子与人参配伍后五味子中主要木脂素类物质的变化规律进行系统研究，为五味子与人参配伍的临床应用提供依据。方法：五味子与人参按不同比例配伍，采用ZORBAX Eclipse XDB—C18（4．6×50mm，1．8um，600Bar）色谱柱；流动相：甲醇（B）-水，梯度洗脱（0min，20％B；0～1min，20％～70％B；7～8min，85％B）；流速：1．0ml·min-1；检测波长：254nm；柱温：30℃；进样量：10ul进行检测。结果：五味子与人参配伍比例对共煎液的pH值有显著影响，五味子单独煎煮和加入不同量的人参共同煎煮，五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量随着人参加入量的增加而降低，当五味子与人参比例为6：3时五昧子甲素、五味子乙素含量变化比较显著。结论：该方法快速、准确、重复性好，可用于五味子与人参配伍复杂体系的木脂素类成分含量变化的快速定量分析，为临床合理配伍应用提供一定的化学物质基础。

快速高分离液相色谱/四级杆串联飞行时间质谱分析山楂籽中的主要黄酮成分

采用快速高分离液相色谱/四级杆串联飞行时间质谱(RRLC/Q-TOF MS)联用技术进行山楂籽中的黄酮类化合物分析方法研究.山楂籽黄酮经超声辅助提取后,选用Welch Materials C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相组成分别为0.1%甲酸水溶液和乙腈,梯度洗脱.在正离子模式下,经飞行时间质谱分离并检测了15种黄酮成分.结果表明,快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱联用技术可以快速准确鉴定样品中的黄酮成分.

高分离度液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用法检测不同种类茶叶对人参皂苷的影响

目的明确不同种类茶叶对人参中主要化学成分人参皂苷的影响。方法利用高分离度液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用(RRLC-Q-Tof MS)法进行检测分析。结果人参茶叶配伍合煎液中,人参乌龙茶合用对人参皂苷影响最大,人参绿茶合用对人参皂苷的影响最小。结论不同种类茶叶对人参的影响不同,服用人参后饮茶可能影响人参的药效。

快速高分离液相色谱-质谱联用法测定减肥药中3种违禁成分的含量

[目的]建立盐酸西布曲明、呋塞米和盐酸麻黄碱的快速高分离液相色谱-质谱联用(rapid resolution liquid chromatography-mass spectrometry,RRLC-MS)方法,检测7种减肥药中是否含有非法添加成分。[方法]色谱条件:Agilent SB-C18柱(2.1mm×50mm,5μm),乙腈(含0.1%甲酸)-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.2m L·min-1;质谱条件:电喷雾离子(electrospray ionization,ESI)源,以正负离子、多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描模式检测减肥药中违禁成分。[结果]7种减肥药中均检测到盐酸西布曲明和盐酸麻黄碱,含量范围分别为0.39~4.29μg·g-1和1.63~8984.18μg·g-1,1种减肥药中检测到呋塞米,含量为8.71μg·g-1。[结论]本研究建立的快速高分离液相色谱-质谱联用法方便快捷、灵敏度好、准确度高,适用于减肥药中非法添加成分的定性定量检测。

快速高分离液相色谱-串联质谱法检测化妆品中马来酸二乙酯含量

建立了化妆品中马来酸二乙酯的快速高分离液相色谱-串联质谱（RRLC-MS/MS）的定性定量检测方法.试样经乙腈60℃超声提取,RRLC-MS/MS多反应监测模式（MRM）定性、定量分析.马来酸二乙酯在2.1 min快速出峰,0.06～20.0 mg/L上机溶液浓度范围内呈线性（相关系数R＞0.996）;方法检出限为0.1mg/kg,最低定量浓度为0.3 mg/kg;在0.5 mg/kg和5.0 mg/kg添加水平时,加标回收率86.2％～96.4％;日内精密度3.19％～8.18％,日间精密度3.72％～7.64％（n=6）.该方法适用于防晒乳（霜）、香水、指甲油中马来酸二乙酯的标准化检测.

快速液相色谱法测定龟苓膏中绿原酸和芦丁

建立高分离度快速液相色谱RRLC法同时测定龟苓膏中绿原酸、芦丁的方法。采用采用ZORBAX SB-C18柱(150 mm×4.6 mm,1.8μm),乙腈-0.4%磷酸水溶液为流动相的梯度洗脱模式分离各测定组分,采用可变波长的方式测定相应组分的峰面积并计算样品含量。绿原酸和芦丁分别在0.009 42μg^0.471μg(r=0.999 9)和0.000 85μg^0.044 25μg(r=0.999 8)范围内具有良好的线性关系;且平均加样回收率分别为101.77%(RSD=1.2%,n=6)和99.84%(RSD=1.4%,n=6);重复性试验,2个成分含量的RSD均小于2.0%(n=6)。

高分离度快速液相色谱-三重串联四极杆质谱快速检查半夏和虎掌南星中水麦冬酸

目的建立半夏及其伪品虎掌南星中水麦冬酸的专属性检测方法。方法样品经水超声提取,利用高分离度快速液相色谱-三重四极杆质谱(rapid resolution liquid chromatography coupled with triple quadrupole electrospray tandem mass spectrometry,RRLC-QQQ/MS)检测水麦冬酸。采用Agilent SB-C18(2.1 mm×50 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸(5∶95)为流动相。柱温30℃,体积流量0.2 m L/min,进样量1μL。离子化模式为ESI-,选择m/z187→143和m/z187→99作为检测离子对,进行多反应监测。结果检出限为4.6μg/L。11批半夏中有3批检出水麦冬酸,7批虎掌南星均检出水麦冬酸,半夏中水麦冬酸含量低于虎掌南星。结论所建方法专属、准确、快速、简便,可为半夏的质量控制提供参考。

高分离度快速液相色谱质谱联用同时测定不同部位和不同加工方法的萝藦中氨基酸和核苷类成分含量

目的高分离度快速液相色谱质谱联用(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定不同组织部位和加工方法萝藦中15种氨基酸和12种核苷类成分的方法。方法采用Waters XBridge Amide色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm),以0.2%甲酸乙腈-0.2%甲酸水为流动相,梯度洗脱,流速0.6 m L·min^(-1),柱温为30℃,正离子多反应监测(MRM)模式测定。用灰色关联度分析(GRA)和TOPSIS分析进行综合性评价。结果 15种氨基酸成分和12种核苷成分在一定范围内线性关系良好,相关系数均大于0.997 3,平均加样回收率为98.17%~100.75%,相对标准偏差在0.90%~2.49%之间。不同部位和加工方法有一定的差异性,低温烘干的叶中氨基酸和核苷综合质量较好。结论该方法准确可靠,为选择最优处理方法提供可靠的方案。

高分离度快速液相色谱-三重串联四极杆质谱快速检查消渴灵片中山麦冬

目的:建立消渴灵片中山麦冬的专属性检测方法。方法:样品经甲醇-氨水超声提取,利用高分离度快速液相色谱-三重串联四极杆质谱(RRLC-QQQ/MS)检测山麦冬。采用Thermo Accla imTM RSLC120 C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以乙腈(A)-20 mmol·L^(-1)乙酸铵溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~20 min,5%A→90%A),流速0.2 m L·min^(-1),柱温30℃,进样量2μL。离子化模式为ESI^(+),选择m/z723.4→251.2和m/z 723.4→269.2作为山麦冬皂苷B检测离子对,m/z 893.5→463.1和m/z 893.5→481.2作为短葶山麦冬皂苷C检测离子对,进行多反应监测。结果:山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C的检测下限分别为0.28μg·片^(-1)和0.20μg·片^(-1)。111批次消渴灵片中有8家企业的25批样品掺伪,其中6批次样品同时掺入湖北麦冬和短葶山麦冬,4批次样品为湖北麦冬掺伪,15批次样品为短葶山麦冬掺伪。结论:所建方法专属、准确、快速、简便,可为消渴灵片的专项治理提供有力的技术支持。

RRLC法快速测定克咳胶囊中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和吗啡

目的建立RRLC—uV法快速分离测定克咳胶囊（麻黄、罂粟壳、甘草、苦杏仁、莱菔子、桔梗、石膏）中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和吗啡3种生物碱的方法。方法采用AngilentZORBAXSB—C8色谱柱（100mm×2．1mm，1．8μm）；以乙腈-2mmoL／L乙酸铵水溶液（含0．04％乙酸）（4：96）为流动相；体积流量为0．2mL／min；检测波长为210mm；柱温30℃。结果RRLC成功地分离吗啡、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱。吗啡、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的线性范围分别为3．06～48．96μg／mL（r=0．9992），2．72～43．58μg／mL（r=0．9997）和2．57—41．15μg／mL（r=0．9994），平均加样回收率（n=9）分别为98．9％、101．5％和100．1％，RSD分别为2．1％、1．5％和2．4％。结论所建立的方法准确、快速，操作简便，可用于克咳胶囊的质量控制。

高分离度快速液相色谱法测定牛黄解毒片中黄芩苷的含量

采用高分离度快速液相色谱(RRLC)测定牛黄解毒片中黄芩苷的含量。色谱柱为Zorbax XDB-C18(4.6×50mm,1.8μm),流动相为甲醇-水-磷酸(45∶55∶0.2),检测波长315nm,流速0.5mL.min-1,柱温为30℃。黄芩苷在0.15—1.35μg(r=0.9999)范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,加样回收率为100.41%,RSD=1.42%。采用高分离度快速液相色谱(RRLC)测定复方牛黄解毒片中黄芩苷的含量,缩短了保留时间,提高了效率,降低了成本。本方法简便、准确,结果稳定。

RRLC测定纺织品中分散黄23和分散橙149及不确定度评定

建立了采用高分离度快速液相色谱同时测定纺织品中分散黄23和分散橙149的方法。样品经简单的前处理后,通过Agilent Zorbax Eclipse XDB C18快速高通量色谱柱分离,一次进样分析仅需10 min,方法简便、快捷且准确,适用于纺织品上分散黄23和分散橙149的分析。以分散橙149为例,对RRLC定量分析过程的不确定度来源进行分析总结,并对不确定度各个分量进行评定、合成,最后给出相对合成不确定度和相对扩展不确定度。通过不确定度的分析评定该定量方法的准确性和适用性。

快速高分离液相色谱-电喷雾质谱联用法测定市售蛇酒中5种糖皮质激素的含量

目的:建立同时测定蛇酒中醋酸泼尼松、醋酸氢化可的松、醋酸地塞米松、布地奈德和甲泼尼龙的快速高分离液相色谱-电喷雾质谱联用方法。方法:采用Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱(100mm×3mm,2.7μm),乙腈(含0.1%甲酸)-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3m L/min;采用电喷雾离子源,以正离子、多反应监测扫描模式对蛇酒中的5种糖皮质激素进行定性定量检测,并对其裂解方式进行解析。结果:醋酸泼尼松、醋酸氢化可的松、醋酸地塞米松、布地奈德和甲泼尼龙线性关系良好,R2均>0.99,8种蛇酒中检测到糖皮质激素。结论:本研究建立的快速高分离液相色谱-电喷雾质谱联用法方便快捷、灵敏度好、准确度高,适用于蛇酒中非法添加成分的定性定量检测。

RRLC法同时测定橘红痰咳颗粒中苦杏仁苷和柚皮苷

目的建立用快速高分离度液相色谱(RRLC)同时测定橘红痰咳颗粒(化橘红、苦杏仁、百部、水半夏、茯苓、白前、五味子、甘草)中苦杏仁苷和柚皮苷的方法。方法采用BDS HYPERSIL C18(4.6 mm×100 mm,2.4μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量为2.0 mL/min;检测波长为207 nm;柱温为30℃;进样体积为2.5μL。结果样品中苦杏仁苷、柚皮苷在6 min内完全分离并对其进行了定量测定,苦杏仁苷、柚皮苷进样量分别在0.041 68～0.416 8μg、0.063 06～0.630 6μg范围内有良好的线性关系(r=0.999 9)。平均回收率(n=6)分别为99.8%,101.0%;RSD分别为0.5%,1.0%。结论 RRLC法可大幅提高苦杏仁苷和柚皮苷的分析速度,同时减少了溶剂消耗,在多组分复杂体系的快速分析中仍然可以保持出色的分离重现性,可作为传统HPLC方法的一种更新、替代方法。