抗生素诱导SPF级BALB/c小鼠胃肠道白念珠菌定植模型

目的:建立抗生素诱导SPF级BALB/c小鼠胃肠道白念珠菌定植模型.方法:SPF级♀Balb/c小鼠随机饮用抗生素头孢曲松水溶液5d(120h)后,单次口服灌胃107CFU(50μL)白念珠菌以诱导其定植.并运用平板计数和基于细菌16SrDNA的PCR-DGGE技术分析小鼠胃肠道的白色念珠菌定植与微生物区系变化.结果:抗生素处理5d后,减少了胃肠道99.99%以上的可培养厌氧菌和肠杆菌,与处理前相比,有极显著差异(厌氧菌:8.53±0.31Log10CFU/gvs4.18±0.90Log10CFU/g,P<0.01;肠杆菌:3.67±0.14Log10CFU/gvs0,P<0.01),而且DGGE图谱分析显示,抗生素处理后小鼠细菌微生物区系的多样性明显减少(条带数由27-32条减少到2-7条).对抗生素处理小鼠单次口服灌胃107CFU白念珠菌2d后,在小鼠胃、小肠、盲肠和大肠检测到大量的C.albicans,数量分别为4.44±0.02Log10CFU/tissue,5.05±0.19Log10CFU/tissue,5.62±0.06Log10CFU/tissue,4.95±0.14Log10CFU/tissue,并且单次口服灌胃白念珠菌1wk后,小鼠胃肠道内仍维持有4.01±0.06Log10CFU/g的白念珠菌定植.与正常Control组和Antibioticonly组相比,Antibiotic+Candida模型组小鼠肠杆菌增殖了10到100倍(3.65±0.16Log10CFU/g,3.21±0.18Log10CFU/gvs5.42±0.33Log10CFU/g,P<0.05);同时DGGE图谱分析显示,Antibiotic+Candida模型组小鼠细菌微生物区系多样性较低(条带数Antibiotic+Candida/22-24条,Control/28-34条和Antibioticonly/27-34条),各小鼠细菌微生物区系之间的相似性为63.8%-67.0%.结论:抗生素处理诱导了胃肠道微生物区系紊乱,导致了白念珠菌在SPF级Balb/c小鼠胃肠道定植成模.

胃炎患者消化道念珠菌菌株分离与鉴定及定植分析

目的:探究胃炎患者中白念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌等念珠菌属的流行情况及感染危险因素。方法:用调查问卷收集患者相关资料,无菌操作下收集胃炎患者消化道的黏膜标本以及胃液,进行分离鉴定,以此来探究胃炎患者中念珠菌的定植和(或)感染情况。结果:共收集57例胃炎患者标本,其中有2例人口学特征及临床信息缺失。55例患者中,幽门螺杆菌(Hp)阳性患者25例(45.45%),Hp阴性30例(54.55%);临床诊断为萎缩性胃炎的患者15例(27.27%),非萎缩性胃炎患者33例(60.00%)。胃炎患者上消化道的主要念珠菌菌种为白念珠菌和克柔念珠菌,其次为热带念珠菌,光滑念珠菌比例较低;在下消化道样本中,主要的念珠属为克柔念珠菌,其次为热带念珠菌,白念珠菌。部分胃炎患者出现念珠菌的混合阳性。结论:胃炎患者上下消化道定值的菌株不同;消化道念珠菌阳性率与年龄、性别、胃炎类型无显著相关性(P>0.05)。Hp感染对于胃炎患者的念珠菌感染来说可能是一个危险因素。

校正念珠菌定植指数在重症侵袭性念珠菌感染抢先治疗中的应用——多中心前瞻性随机对照临床研究

目的评价运用校正念珠菌定植指数（CCI）对发生侵袭性念珠菌感染（ICI）高危重症患者进行抗念珠菌抢先治疗的有效性，并获取念珠菌流行病学资料。方法选择2008年10月1日-2009年4月30日天津市5家三级甲等医院重症监护病房（ICU）内急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHEⅡ）评分10分以上住院患者110例，随机分为CCI组（55例）和对照组（55例）对CCI进行监测。对照组依据临床医师经验对患者制定治疗方案。CCI组临床出现脓毒症且CCI≥0．4者立即给予抗念珠菌治疗，CCI〈0．4者则不予抗念珠菌治疗；如临床症状加重甚至生命体征不稳定，则进行补救性抗念珠菌治疗。结果两组患者一般资料、治疗方法、APACHEⅡ评分及脓毒症发生率、ICU停留时间等指标比较差异均无统计学意义（P均〉0．05）。CCI组和对照组分别有48例和50例发生脓毒症，自发生脓毒症起至临床应用抗念珠菌药物所需时间分别为（0．94±0．67）d，（3．75±3．62）d（P〈0．05）；CCI≥0．4（57例）与CCI〈0．4（53例）两者间ICU内停留时间[分别为（15．34±6．63）d，（7．24土3．75）d]、不能建立肠内营养支持率（分别为64．9％，43．4％）也存在显著差异（P均〈0．05），而APACHEⅡ评分、需要机械通气和血液净化等脏器支持治疗者的比例差异均无统计学意义（P均〉0．05）。分析110例患者575株念珠菌多部位定植菌种分布显示，白色念珠菌仍占较大比例（59．3％），热带念珠菌占10．8％，其他依次为光滑念珠菌、罗伦特隐球菌、克柔念珠菌。结论运用CCI可增加对ICU内ICI实施抢先治疗的准确性和时效性，同时可获得患者ICI菌种流行病学资料。

贵州汉族慢性阻塞性肺疾病患者Toll样受体1基因多态性与肺念珠菌感染及定植的相关性

目的 Toll样受体(TLRs)基因多态性与中国汉族人群真菌感染的相关性研究鲜有报道。文中探讨贵州汉族人群TLRs基因单核苷酸多态性(SNP)与慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺念珠菌感染及定植的相关性。方法采用聚合酶链反应-直接测序分型(PCR-SBT)法检测344例COPD汉族患者TLR1、2和4基因6个SNP位点的基因型。其中80例合并肺念珠菌感染(肺念珠菌感染组),103例合并念珠菌定植(念珠菌定植组),161例为阴性对照(对照组)。SNPstats在线软件分析在不同遗传模式下单个SNP与COPD患者肺念珠菌感染、念珠菌定植的相关性。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肺念珠菌感染者血浆中IL-6、IL-8、IL-1β及TNF-α蛋白水平,评估多态性的功能性结果。结果所有样本均未检测到rs5743611、rs5743708、rs4986790及rs4986791的多态性。rs4833095位点在共显性、显性与超显性遗传模式下肺念珠菌感染组与对照组间基因型的分布差异有统计学意义(P<0.05),显性遗传模型是该位点最佳遗传模式。念珠菌定植组与对照组间rs4833095基因型分布差异无统计学意义(P>0.05)。rs5743618基因型分布在所有组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。肺念珠菌感染组rs4833095的T等位基因能降低血浆中IL-6、IL-8、IL-1β水平,差异有统计学意义(P<0.05)。该位点的T等位基因降低血浆中TNF-α水平,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TLR1基因rs4833095多态性与慢性阻塞性肺疾病患者肺念珠菌感染的易感性有关。该位点的T等位基因可能影响TLR1的功能,降低血浆中IL-6、IL-8、IL-1β蛋白水平。rs4833095与rs5743618多态性与念珠菌定植易感无关。

ICU患者呼吸道念珠菌是否需要去定植

ICU机械通气患者肺部念珠菌定植较为常见。研究显示呼吸道念珠菌定植可促进机械通气患者呼吸机相关性肺炎(VAP)进展,是VAP患者死亡和多重耐药菌(MDR)产生的独立预测因素,对念珠菌呼吸道定植的VAP患者经验性采用抗真菌治疗可产生有益作用。本文就呼吸道念珠菌是否需要去定植这一热点话题做一聚焦以供临床参考。