念珠菌生物被膜特性及抗生物被膜治疗

随着广谱抗生素的广泛使用,骨髓实体器官移植与医用材料植入治疗的增加,艾滋病、恶性肿瘤等免疫功能低下的患者增多,耐药念珠菌感染呈逐年上升趋势。耐药念珠菌感染通常与生物被膜的形成有关,生物被膜被认为是念珠菌重要的毒力因子,其形成与耐药性、侵袭力增强以及免疫逃避密切相关。本文从念珠菌生物被膜形成、耐药机制、免疫逃避及抗生物被膜治疗方面进行评述,以期为寻找新的药物靶点、为念珠菌感染的新型治疗策略提供新的思路。

Tyrosol和Farnesol对白念珠菌生物被膜形成作用的基因表达谱研究

目的研究Tyrosol和Famesol对不同时相白念珠菌生物被膜形成的调控机制。方法研究对象为白念珠茵标准株SC5314。设立Tyrosol处理组、Farnesol处理组、Tyrosol和Famesol联合处理组、对照组。生物被膜6h和24h收集细胞，提取RNA，反转录cDNA。cDNA与白念珠菌全基因组8K表达谱芯片杂交。采用LuxSean双通道激光扫描仪进行扫描。LttxSean3．0图像分析软件对芯片图像进行分析。借助KEGG基因库对芯片数据进行生物信息学分析。结果不同生物被膜时相，Tyrosol和Famesol对白念珠菌基因表达调控作用不同。Tyrosol和Farnesol调控生物被膜形成相关基因、菌丝相基因和酵母相基因。Tyrosol是生物被膜基因表达的正向调控效应因子。Farnesol是负向调控效应因子。Tyrosol和Famesol主要调控的基因包括生物学过程、分子功能及细胞成分相关基因，这些基因主要通过参与物质代谢通路调控白念珠菌生物学特点及生物被膜形成。结论Tyrosol和Famesol通过调控白念珠菌哇物被膜形成相关基因调控毕物被膜形成。

Tyrosol和Farnesol对白念珠菌生物被膜形成作用初探

目的研究密度感应分子（quorum sensing molecule）tyrosol（对羟基苯乙醇）和farnesol（法呢醇）对白念珠菌生物被膜形成的调控作用。方法在tyrosol和farnesol干预下构建白念珠菌临床株和标准株生物被膜，在倒置显微镜下观察细胞形态，应用RT-PCR技术检测密度感应分子对白念珠菌HTA1和EFG1基因表达的调控作用，并采用MTT法观察密度感应分子对细胞活性的影响。结果tyrosol对白念珠菌生物被膜的菌丝发生和细胞活性无明显促进作用，也无法中和farnesol对菌丝发生和细胞活性的抑制作用。tyrosol使白念珠菌生物被膜内细胞HTA1的表达增强，对EFG1的表达并无明显影响；tyrosol不能改变farnesol对HTA1和EFG1表达的抑制作用。结论tyrosol能在一定程度恢复口腔白念珠菌生物被膜内细胞的活跃状态，但当tyrosol与farnesol同时存在时，tyrosol的作用被后者的抑制效应所掩盖，细胞对farnesol更敏感。

白念珠菌的菌体密度与生物被膜形成及tyrosol分泌

目的观察不同接种浓度条件下白念珠菌生被物膜的形成，研究菌体密度在白念珠菌生物被膜形成及密度感应分子tyrosol产生中的作用。方法白念珠菌标准株SC5314和临床株通过YPD增菌，细胞计数和梯度稀释将白念珠菌细胞悬液调配至5×10^6个／ml、5×10^5个／ml、5×10^4个／ml、5×10^3个／ml不同浓度，随后将不同浓度的白念珠菌接种到培养皿中，形成白念珠菌生物被膜。1、5、3、4．5、24、36h高效液相色谱检测白念珠菌tyrosol产生情况，在同样的时间点对生物被膜取样进行扫描电镜观察。结果菌体密度对白念珠菌生物被膜tyrosol产生存在作用；接种浓度低的白念珠菌分泌tyrosol少，接种浓度高的白念珠菌分泌tyrosol较多。生物被膜形成24h产生tyrosol最多，随后减低。菌体密度影响白念珠菌早期生物被膜的形成；扫描电镜观察到接种浓度低的白念珠菌细胞出芽少，分裂繁殖少；而接种浓度高的白念珠菌出芽较多，分裂繁殖更多；随着时间的延长，接种浓度高的情况下更早形成成熟生物被膜。结论菌体密度与白念珠菌生物被膜形成及tyrosol的产生之间存在相关性。