怀地黄新品种怀地6号

怀地6号全生育期220天左右,出苗整齐,苗势壮。叶片半直立、大小中等、勺形,叶色灰绿,叶尖椭圆,叶脉凹陷,叶面有明显凹凸,叶缘波浪状,叶基楔形。块根纺锤形,表皮橘红色,芯白色,呈菊花形放射状,一般每株有块根3~4个。抗性强,耐寒性好,遗传性状具有特异性、稳定性、一致性。该品种块根整体粗大均匀,块根长7~10厘米、直径4~6厘米,适宜机械化收获。焙干率高,鲜干重比为3.9∶1,药材指标检测符合《中华人民共和国药典(2020年版)》指标要求。一般亩产鲜地黄4300公斤左右。

怀地黄种栽繁育关键技术

怀地黄为玄参科多年生草本药用植物,为我国四大怀药之一,主产于河南省焦作市怀庆府辖区一带,其以疗效独特、质量佳在国内外享有极高声誉。怀地黄主要含梓醇、生物碱、氨基酸、地黄素等药用成分,是多种方剂配伍用药及中成药的主要原料。怀地黄栽培历史悠久,种栽质量是保证怀地黄生产的基础。怀地黄种栽繁育分为春地黄栽和秋地黄栽两种,为提高怀地黄种栽质量和产量,以下对怀地黄种栽繁育的关键技术进行提炼,供种植户参考。

怀地黄不同品种根部特征和有效成分含量比较

以怀地黄6个栽培品种为材料,初步探讨了怀地黄不同品种的根部性状和品质性状.在相同的栽培条件下,测量了怀地黄6个主流栽培品种的块根外观性状,利用石蜡切片法观察并测量不同品种块根的解剖结构,微量元素和梓醇含量的测定分别用荧光光度计和高效液相色谱法.结果表明怀地黄不同品种梓醇含量、单株块根鲜重和块根中木质部的面积都有明显差异,梓醇含量和块根中木质部的比例呈显著正相关.

怀地黄块根的形态发生和结构发育

观察了怀地黄 Rehmannia glutinosa cv.H ueichingensis Hsiao. 块根的形态发生和生长发育过程中的形态结构变化 .采用怀地黄的传统栽培方法 ,即用上一年的块根作母根进行繁殖 ,分别从母根和不定芽的茎基部发生不定根 .怀地黄不定根的初生结构和维管形成层的发生与一般双子叶植物相同 ,但其次生生长却有两种方式 ,即正常次生生长和异常次生生长 .一类不定根的形成层产生的次生结构与一般双子叶植物相同 ,即次生木质部中主要是导管 ,而薄壁细胞较少 .这类不定根其次生生长为正常次生生长 normal secondary growth ,是担负吸收和固着作用的正常根 .另一种类型的不定根 ,其形成层产生的次生木质部含有大量的薄壁细胞 ,少量的导管分散在薄壁细胞之间 .这种次生生长为异常次生生长 anom alous secondary growth ,从而使不定根膨大 ,形成块根 .因此 ,怀地黄的药用部分在起源和结构上都属于根的性质 。

怀地黄85-5品种内遗传多样性的RAPD和ISSR分析

采用CTAB法提取了怀地黄85-5品种16个单株的基因组DNA,使用紫外分析和琼脂糖凝胶电泳检测其纯度和大小,利用RAPD及ISSR分析其品种内遗传多样性.从24个RAPD引物和43个ISSR引物中分别筛选出具有稳定多态性条带的RAPD引物3个和ISSR引物2个,分别对16个单株基因组DNA进行PCR扩增.3个RAPD引物共扩增出7条带,其中多态性条带为4个,多态性比率为57.14%.2个ISSR引物共扩增出17条带,其中多态性条带为11个,多态性比率为64.7%.结果表明,怀地黄85-5品种内存在遗传差异,但遗传多样性比地黄品种间的低.

怀地黄试管苗脱毒技术研究

对怀地黄试管苗的脱毒技术进行了研究.结果发现：以MS为基本培养基并附加适宜浓度细胞分裂素（6-BA0.5 mg·L^-1或KT0.5 mg·L^-1）时,茎尖成苗率最高（75%）,出愈率较低（20%）;切离的茎尖大小为0.2-0.5 mm时,既能保证较高的脱毒率又可保证较高的成苗率;两次切离茎尖并与热处理相结合,试管苗的脱毒率最高（96%-100%）,建立了一种有效的怀地黄脱毒方法和技术.

怀区地黄遗传多样性的ISSR鉴定

目的利用ISSR标记技术对怀区地黄的8个品种和2个茎尖培养脱毒系进行了遗传多样性分析。方法用44条ISSR引物进行初选,然后用其中适合的10个ISSR引物进行ISSR分析。结果10条ISSR引物共扩增出110条带。基于这些条带,用SPSS10.0软件分析,建立了遗传Jaccard相关系数矩阵,构建了分子树状图,将怀区地黄的8个品种和2个组培系分为2类:其中一类群含有6个材料,包括组培85.5、大田85.5、组培9302、大田9302、金状元和金白地黄;另一类群含有4个材料,包括北京1号、大红袍、地黄9104和野生地黄。而且主成分分析结果支持上述的聚类分析结果;用POPGENE32软件分析知,多态性指数为0.3775,有效等位基因数为1.4037,多态性比率为71.82%;用一个ISSR6引物建立了10个供试地黄样品的DNA指纹图谱并且能将其彼此区分出来。结论ISSR标记适合于构建怀区地黄的DNA指纹图谱、品种鉴定和遗传多样性分析。

怀地黄营养器官中梓醇的积累动态

目的 揭示梓醇在怀地黄不同营养器官中的积累规律。方法 高效液相色谱法。结果 在怀地黄根、茎和叶 3种营养器官中都含有梓醇 ,但不同器官中梓醇含量有显著差异。其中 ,茎、叶中梓醇含量较高 ,块根中梓醇含量较低。在同一营养器官中梓醇积累呈现规律性变化。幼叶梓醇含量低 ,随着叶发育成熟 ,其梓醇含量逐渐增高。在块根中梓醇含量随着块根的发育增粗逐渐增高。结论 怀地黄块根有效成分的含量高峰与其产量高峰一致 ,都在11月初地上部分枯萎时 ,因此 ,此时应为怀地黄的适宜采收期 ,与传统的怀地黄采收期相吻合。叶和茎中也含有梓醇 ,且含量高于块根 ,因此 ,建议对怀地黄地上部分进行综合开发利用。

怀地黄补血作用的实验研究

通过生、熟怀地黄对小鼠失血性贫血的治疗及对骨髓造血细胞CFU-S、CFU-E培养的影响,了解到地黄可促进血虚动物RBC、Hb的恢复,加快CFU-S、CFU-E的增殖、分化,具显著的“生血”作用。

响应面分析法优化怀地黄多糖的微波提取工艺

为了优化怀地黄多糖的微波提取工艺,采用苯酚—硫酸比色法对怀地黄多糖含量进行测定,通过设定不同单因素研究了微波处理时间、微波功率和液料比对怀地黄多糖提取率的影响,以响应面分析法确定了微波提取怀地黄多糖的最佳工艺。结果显示:微波处理时间、微波功率和液料比对地黄多糖得率具有显著影响,其中在微波处理功率为720W,微波处理时间为210s,料水比为1:6条件下,地黄多糖提取率可达到61.9%,并且该工艺有很好的重现性。

怀地黄叶片愈伤组织的诱导形成及其可溶性糖含量变化的研究

对怀地黄叶片愈伤组织诱导形成及其可溶性糖含量变化的研究结果表明:1/2MS+6-BA0.5mg/L培养基有利于怀地黄块茎诱导形成无菌苗。单独使用2,4-D有利于叶片愈伤组织的诱导,但不利于愈伤组织的继代培养;2,4-D和6-BA配合使用时,对愈伤组织的增殖具有良好的促进作用,当2,4-D浓度为1.0mg/L时,随6-BA浓度的增加,愈伤组织的生成量也增加,其中,以MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.4mg/L培养基诱导的愈伤组织的量为最大,且呈黄色、疏松、颗粒状。愈伤组织诱导形成期间可溶性糖含量在不同培养基中均呈现先下降后上升,达到峰值后再下降的趋势。

怀地黄茎尖培养和植株再生技术的研究

目的 研究怀地黄茎尖培养技术 ,为怀地黄茎尖脱毒苗建立最佳培养条件。方法 利用植物组织培养技术 ,将怀地黄茎尖分别在不同组合的培养基上进行培养 ,诱导其成为完整植株。结果 怀地黄茎尖在MS +6 -BA0 .3mg·L-1+NAA0 .0 2mg .L-1+GA0 .1mg·L-1培养基上能生长成健壮苗 ;在MS +PP3 3 3 1培养基上能生成健壮根系 ,长成完全小植株。结论 利用怀地黄茎尖在合适的培养基上 。

怀地黄块根内含梓醇结构的组织化学和超微结构研究

应用半薄切片、组织化学和透射电子显微镜观察相结合的方法,研究了梓醇在地黄块根中的贮存位置及其细胞的超微结构。结果表明,地黄块根的韧皮部和木质部的薄壁细胞是梓醇的贮存场所。

怀地黄的降压镇静抗炎作用及有效部分分析

目的探讨怀地黄降压、镇静、抗炎作用的有效部分。方法用怀地黄的乙醚、乙醇、水提取物分别进行动物实验，以观察其药理作用，将水提取物分离得到中性、酸性、碱性提取物，分析其有效部分。结果怀地黄的水提取物有显著降压、镇静、抗炎作用（Ｐ＜０．０１），而乙醚、乙醇提取物无这种作用。怀地黄水提取物的酸性部分有上述药理作用（Ｐ＜０．０５），而中性、碱性部分作用不显著。水提取物酸性部分主要含甙类、生物碱类及磷酸等成分。结论怀地黄的降压、镇静、抗炎作用的有效成分存在于水提取物中。

怀地黄分生组织培养脱病毒及快速繁殖技术的研究

采用茎尖分生组织培养技术,获得了怀地黄的脱病毒试管苗。通过基本培养基和激素配比试验,筛选出最佳的培养基组成,用于脱病毒苗的快速繁殖。建立了怀地黄根尖染色体鉴定的最佳条件。结果表明:诱导丛生芽的最适培养基为:MS+6-卞基腺嘌呤(6-BA)0.5mg/L+萘乙酸(NAA)0.1mg/L+6-糠氨基嘌呤(KT)0.05mg/L,技术上达到了快速繁殖规模生产的要求。诱导试管苗生根的最适培养基为:1/2MS+吲哚乙酸(IAA)0.05mg/L。用电子显微镜进行了反复的病毒检测,证明脱病毒彻底,脱毒试管苗将作为今后提供无病毒优质种苗的种源。

怀地黄SRAP分子标记体系的建立与DNA指纹图谱的构建

以怀地黄DNA为模板,进行SRAP反应条件的优化及DNA指纹图谱构建,优化的反应体系为:25μL的体积中,模板DNA 20 ng,Mg2+浓度2.5 mmol.L-1,上下游引物各0.36μmol.L-1,dNTPs 0.30 mmol.L-1,Taq DNA酶2.0 U.构建了怀地黄23个品种的DNA指纹图谱,为怀地黄品种鉴定、遗传多样性分析、分子标记辅助育种和质量综合评价等研究奠定了基础.

怀地黄根际土壤水提物的GC-MS分析

采用GC-MS分析方法,鉴定了怀地黄根际土壤的水提物。结果表明,怀地黄根际土壤含有12种特有的化感物质,它们是邻苯二甲酸正丁酯、邻苯二甲酸异丁酯、邻苯二甲酸二异辛酯、2-甲氧基-5-(1-丙烯基)苯酚、苯丙烯酸、苯甲酸、1-十八醇、1-二十一醇、3-甲氧基-4-羟基苯甲酸、3-甲基-4-羟基苯乙酸、邻苯二甲酸癸基辛酯和邻苯二甲酸异癸基辛酯。

怀地黄6个主流品种产量相关性状及其相关分析

以6个怀地黄主流品种为材料,用测量法、观察法、称量法、紫外分光光度法和SPSS软件统计分析了单株鲜重产量和鲜重产量的相关性状及其相关性。结果表明,单株鲜重产量与叶绿素a含量、花序高度呈显著正相关,而与蒴果长度呈显著负相关,和花冠长度/宽度的比值呈极显著正相关。鲜重产量与块根长度/直径的比值呈显著负相关,而与块根直径、块根长度呈显著正相关。鲜重产量与蒴果长度之间有较强的负相关性。

怀熟地黄多糖对血虚大鼠血像及细胞因子水平的影响

目的:研究怀熟地黄多糖补血作用机理。方法:用放血与环磷酰胺并用所致血虚模型大鼠为研究对象。结果:怀熟地黄多糖可显著提高放血与环磷酰胺并用致血虚模型大鼠的血像,提高模型大鼠血IL-2、IL-6、EPO的水平。结论:怀熟地黄多糖可促进机体的造血机能。

怀地黄脱毒试管苗培养条件的优化

研究了怀地黄脱毒试管苗在不同pH值、不同光照强度和不同温度下形态指标的差异,以寻求怀地黄脱毒试管苗的最适培养条件。结果表明：适合培养怀地黄脱毒试管苗的pH值在5.8~6.2,该pH值范围内,试管苗生长较健壮,株高和繁殖系数最大,分别为6.66 cm和4.8。最适合培养怀地黄脱毒试管苗的光照强度为2 500 lx,此光照强度下,试管苗生长较健壮,叶色浓绿,株高和繁殖系数分别为5.2 cm和4.6。最适合培养怀地黄脱毒试管苗的环境温度值为30℃,该温度下试管苗生长较健壮,株高和繁殖系数最高,分别为5.8 cm和4.8。因此,适合怀地黄脱毒试管苗生长的pH值为5.8~6.2、光照强度为2 500 lx、温度为30℃。