怀牛膝多糖对雏鸡疫苗免疫效果的影响

150羽14日龄蛋公鸡随机均分成3组,用新支二联弱毒苗点眼滴鼻免疫的同时,2个试验组分别肌肉注射高、低剂量的怀牛膝多糖溶液,对照组注射生理盐水,每天注射1次,连续注射3次。分别于免疫后第7、14、21、28、35和42天各组随机抽取8只鸡翼下静脉采血,分离血清,用微量法测定新城疫血凝抑制(HI)抗体效价,于免疫后第10、20、30、40和50天每组随机抽取5只鸡心脏采血,分离淋巴细胞,用MTT法测定淋巴细胞增殖的动态变化,流式细胞仪双染色法检测CD4+、CD8+T淋巴细胞含量,并放血致死称取体重和胸腺、脾脏、法氏囊的质量,计算器官指数。结果表明,怀牛膝多糖高剂量组的HI抗体效价、CD4+/CD8+比值和免疫器官指数都明显高于对照组,并且高剂量怀牛膝多糖可以显著促进T淋巴细胞增殖。提示怀牛膝多糖对鸡新支二联疫苗的免疫效果有明显的增强作用。

怀牛膝多糖抗凝血作用实验研究

为探索怀牛膝的活血机制 ,实验初步研究了怀牛膝多糖的抗凝血作用。发现怀牛膝多糖 ABP能延长小鼠凝血时间(CT)、大鼠血浆凝血酶原时间 (PT)、白陶土部分凝血活酶时间 (KPTT)。提示怀牛膝活血的功效可能与怀牛膝多糖 ABP的抗凝血作用有关。

怀牛膝多糖对肺腺癌细胞系凋亡的调节

目的:研究怀牛膝多糖的抗肿瘤作用.方法:应用MTT法检测怀牛膝多糖在体外对肺腺癌细胞系(LTEP-a-2)增殖的调节,同时采用流式细胞术(FCM)检测其对LTEP-a-2细胞周期和凋亡的影响.结果:怀牛膝多糖对LTEP-a-2的增殖具有抑制作用,并可以诱导其凋亡.结论:怀牛膝多糖在体外能抑制肺癌细胞的生长,可作为一种抗肺癌药物.

怀牛膝多糖对RAW264.7细胞吞噬活性、表型和细胞因子表达的调节

研究怀牛膝多糖(ABPS)对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞活性、表型及细胞因子表达的影响。先用不同浓度的ABPS溶液(0,0.4,0.6,0.8,1.0 mg/mL)处理RAW264.7细胞48 h,后采用MTT法、中性红吞噬实验、流式细胞术分别检测了ABPS对巨噬细胞的增殖活性、吞噬能力、细胞表型及细胞因子表达的影响。ABPS对RAW264.7细胞的增殖活性没有明显的影响,但能显著提高细胞对中性红的吞噬活性和表面分子CD80,CD86及CD40的表达,降低单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的表达。ABPS能够增加RAW264.7细胞的吞噬活性并促进其成熟,且能发挥一定的抗炎活性。

怀牛膝多糖的柱前衍生化-HPLC指纹图谱建立及单糖成分含量测定

目的:建立怀牛膝多糖的柱前衍生化-高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,测定其主要单糖成分的含量,为怀牛膝饮片的质量评价提供参考。方法:以10批不同生产厂家的怀牛膝饮片为样品,采用水提醇沉法提取其多糖后,以三氟乙酸进行水解,再采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化处理后,进行HPLC分析。色谱柱为Hanbon Hedera C18,柱温为30℃,流速为1.2 mL/min,流动相为乙腈-0.02 mol/L乙酸铵溶液(梯度洗脱),检测波长为250 nm,进样量为20μL。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012A版)建立10批怀牛膝多糖的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,通过与对照品比对进行共有峰指认,并采用SPSS 25.0软件进行聚类分析。采用HPLC法对指认的单糖成分进行含量测定。结果:10批怀牛膝多糖样品的相似度均大于0.95;共标定了9个共有峰,并指认了其中5个共有峰,分别为无水葡萄糖(峰1)、甘露糖(峰2)、鼠李糖(峰4)、半乳糖醛酸(峰5)、阿拉伯糖(峰7)。聚类分析结果显示,编号为S1的样品单独为一类,编号为S2、S5、S8和S9的样品聚为一类,编号为S3、S4、S6、S7和S10的样品聚为一类。含量测定结果显示,10批样品中无水葡萄糖的含量为6.17~17.55 mg/g、甘露糖的含量为3.31~7.66 mg/g、鼠李糖的含量为38.80~73.97 mg/g、半乳糖醛酸的含量为2.49~8.95 mg/g、阿拉伯糖的含量为11.30~28.58 mg/g。结论:本研究建立的柱前衍生化-HPLC指纹图谱及单糖组分的含量测定方法可为怀牛膝饮片质量评价提供参考。

怀牛膝多糖的提取分离及生物活性研究进展

怀牛膝,“四大怀药”之一,是一种珍贵的中国传统药材。近年来,多糖作为广泛存在于微生物、动植物的生物大分子被报道具有多种生物活性而受到学者们的关注。本文综述了国内外有关怀牛膝多糖的分离、提取、含量测定和生物活性等方面的研究成果。为进一步研究、开发和应用怀牛膝多糖在功能性食品及治疗剂领域提供科学依据与基础。

川牛膝和怀牛膝多糖抗炎免疫调节活性研究

目的检测川牛膝多糖和怀牛膝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞(Ana-1细胞)中PGE_2、TNF-α、IL-12因子分泌的影响,探究两种多糖的抗炎、免疫调节活性。方法配制3.125、6.25、12.5、25、50、100、200、400μg/ml系列浓度的两种多糖溶液,体外刺激Ana-1细胞,采用ELISA技术,450nm波长处检测并计算两种多糖抑制Ana-1细胞中PGE_2产生的IC_(50)及促进TNF-α、IL-12分泌的EC_(50)值。结果怀牛膝多糖抑制Ana-1细胞中PGE_2产生的IC_(50)值为(46.151±1.408)μg/ml,而川牛膝多糖抑制Ana-1细胞中PGE_2产生的能力较弱,并未计算出IC_(50)值;两种多糖促进Ana-1细胞中TNF-α因子分泌的EC_(50)值分别为(21.247±3.521)、(23.532±1.160)μg/ml;川牛膝和怀牛膝多糖促进Ana-1细胞中IL-12因子分泌的能力不明显,均未算出EC_(50)值。结论怀牛膝多糖在抑制Ana-1细胞中PGE_2产生的模型下具有一定的抗炎活性优势;两种多糖主要通过促进Ana-1细胞中TNF-α因子分泌的途径产生免疫活性,但在此模型下两种多糖的免疫调节活性无显著性差异。

响应面法优化牛膝多糖的微波法提取工艺研究

采用响应面法优化微波提取怀牛膝多糖的条件。在单因素试验的基础上,选取微波提取功率、提取时间、料液比和提取次数为影响因子,应用Box-behnken中心组合进行四因素三水平的试验设计,以怀牛膝多糖得率作为响应值,进行响应面分析(RSM)。结果表明,微波法提取多糖的最佳工艺参数为提取功率800 W,提取时间2.5 min,料液比1∶30(g∶mL),提取次数2次,模型预测值为29.38%,实际测得多糖得率为29.40%,与模型预测值的相对误差为0.07%,模型预测值为与模型预测值基本相符。微波辅助法适用于提取怀牛膝多糖。