思茅松毛虫染色体制备方法

染色体是生物体遗传物质的主要载体,是思茅松毛虫从分子水平开发新型防治措施的重要前提。以卵、5龄幼虫性腺、初羽化成虫性腺、老熟幼虫脑神经节为研究材料,采用传统压片法和空气干燥法两种鳞翅目常见方法,对处理溶液进行时间梯度设置,对思茅松毛虫染色体制备方法、染色体数目和形态进行了研究。研究表明:空气干燥法优于传统压片法;在空气干燥法下,以5龄幼虫精巢制备的染色体效果最好;秋水仙素以作用时间为5 h为宜;低渗溶液选用0.075 mol/L KCI溶液低渗20 min时观察到的中期分裂相最多;思茅松毛虫染色体数目为2n=58,呈颗粒状,为弥散性着丝粒。本研究结果为其他松毛虫属染色体研究提供借鉴和研究思路,为其分子防治提供理论基础。

宣城市思茅松毛虫的生物学特性及综合防治措施

思茅松毛虫是宣城市宣州区松林内常发的一类害虫,对林业发展危害较大,近些年在当地呈重发趋势。本文结合宣城地区思茅松毛虫的发生实际,总结了思茅松毛虫的形态特征和生物学特性,提出了综合防治措施,包括重视植物检疫管理、科学进行混交林的营造和改造、科学开展日常营林管理、开展预测预报工作、人工防治、物理防治、生物防治、化学防治等内容,以期为当地科学开展思茅松毛虫的防控工作提供参考。

林业生产中思茅松毛虫的虫害防治

简述了思茅松毛虫防治原则;阐述了提升林业资源的多样性、保证林业生产可持续发展、增强爱林护林意识等推进思茅松毛虫防治工作的意义;介绍了化学防治、生物防治、物理防治及其他防治手段等思茅松毛虫防治方法;提出了由化学防治向生物防治转变、由事后处理向事前预防转变、由人工监测向智能化监测转变、由零散防治向体系防治转化等提升思茅松毛虫防治效果的策略。

受害马尾松针叶营养及次生物质含量与思茅松毛虫种群参数的相关分析

为了揭示受害马尾松Pinus massoniana针叶主要化学物质变化对思茅松毛虫Dendrolimus kikuchii Matsumura种群变动的影响,本研究以受思茅松毛虫危害程度不同(轻度、中度和重度)的马尾松针叶喂养思茅松毛虫幼虫,测定思茅松毛虫饲养种群的特征参数和不同受害程度马尾松针叶营养物质与次生物质含量,用综合相关系数分析法对试验结果进行分析。结果表明:(1)随植株受害程度加重,针叶黄酮含量增加,可溶性糖、蛋白质、多糖含量减少,各龄幼虫平均历期延长、死亡率升高。单宁和总酚含量的变化与各龄幼虫平均历期、死亡率之间没有显著的相关性;(2)除6龄幼虫外,其他各龄幼虫的平均历期、死亡率均与松针营养物质和次生物质含量有直接的和综合的相关性;(3)随受害程度加重,7龄幼虫体重、幼虫平均取食量、蛹重、化蛹率、雌性比、每雌生殖力减小。单宁、总酚含量的变化对7龄幼虫体重、幼虫平均取食量、蛹重、幼虫平均死亡率、化蛹率、雌性比、每雌生殖力都没有显著影响。总体上,松针营养和次生物质含量对思茅松毛虫种群参数有重要影响,其重要性依次为可溶性糖>蛋白质>多糖>黄酮,单宁和总酚的作用相对较小。

紫茎泽兰乙醇提取物对五龄思茅松毛虫肠道细菌的抑制作用

以思茅松毛虫五龄幼虫肠道细菌为供试菌,采用牛津杯法测定紫茎泽兰不同部位乙醇提取物的抑菌效果。结果表明:紫茎泽兰不同部位乙醇提取物除茎提取物外,对5种思茅松毛虫肠道细菌(共10株)均有不同程度的抑制作用,抑制作用大小顺序为叶>根>茎。在相同质量浓度下,叶提取物对5种肠道细菌的抑菌作用大小顺序为雷金斯堡约克氏菌(Yokenella regensburgei)>弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)>产酸克雷伯氏杆菌(Klebsiella oxytoca)>克雷伯氏杆菌(Klebsiella peneumoniae)>苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis),其对雷金斯堡约克氏菌、产酸克雷伯氏杆菌以及弗氏柠檬酸杆菌的最低抑菌质量浓度为0.125g/mL,对其余2种细菌的最低抑菌质量浓度分别为0.25g/mL、0.5g/mL。根提取液对雷金斯堡约克氏菌和克雷伯氏杆菌无抑制作用,在相同质量浓度下,其对其余3种细菌的抑制作用大小顺序与叶提取液相同,最低抑菌质量浓度为0.25g/mL。紫茎泽兰乙醇提取物具有良好的抑菌效果,可用于开发新型的植物源生物农药。

板栗苞壳提取物对思茅松毛虫肠道细菌的抑菌作用

【目的】研究板栗苞壳提取物对思茅松毛虫肠道细菌的抑菌作用,为害虫防治及新型植物源生物农药开发提供理论依据。【方法】以10株思茅松毛虫3龄和5龄幼虫肠道细菌为供试菌种,采用牛津杯法测定不同有机溶剂板栗苞壳提取物的抑菌效果。【结果】不同有机溶剂板栗苞壳提取物对思茅松毛虫肠道细菌均有一定的抑菌作用,且随着质量浓度的增大抑菌作用逐渐增强,各提取物的抑菌作用大小顺序为乙酸乙酯>乙醇>氯仿>正丁醇>石油醚,其中以乙酸乙酯提取物对思茅松毛虫肠道细菌的抑菌作用最强,最低抑菌质量浓度(MIC)为6.250mg/mL,石油醚提取物的抑菌作用不明显或无抑菌作用。【结论】板栗苞壳提取物可作为新型植物源生物农药在思茅松毛虫防治中加以开发利用。

青蒿乙醇提取物对5龄思茅松毛虫肠道细菌的抑制作用

以思茅松毛虫5龄幼虫肠道细菌为供试菌种,采用牛津杯法测定青蒿不同植株部位乙醇提取物的抑菌效果。结果表明:青蒿乙醇提取物对10株供试菌种均有一定抑制作用,且随着浓度增大抑菌作用增强,不同植株部位乙醇提取物抑菌作用顺序为叶>茎>根。在相同浓度下青蒿乙醇提取物对10株供试思茅松毛虫5龄幼虫肠道细菌抑菌作用大小顺序为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)>雷金斯堡约克氏菌(Yokenella regensburgei)>苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)>产酸克雷伯氏杆菌(Klebsiella oxytoca)>克雷伯氏杆菌(Klebsiella peneumoniae)。雷金斯堡约克氏菌和弗氏柠檬酸杆菌的叶乙醇提取物最低抑菌浓度为0.125 g/mL,茎乙醇提取物最低抑菌浓度为0.250 g/mL;产酸克雷伯氏杆菌、克雷伯氏杆菌、苏云金芽孢杆菌的叶乙醇提取物最低抑菌浓度为0.250 g/mL,茎乙醇提取物最低抑菌浓度为0.500 g/mL。因此,青蒿乙醇提取物可作为防治思茅松毛虫新型植物源生物农药进行开发。

思茅松毛虫6龄幼虫肠道细菌的ARDRA分析与鉴定

从自然种群的思茅松毛虫(Dendrolimus kikuchii Matsumura)6龄幼虫肠道环境中分离、纯化、培养获得了6株细菌。以细菌基因组DNA为模板进行PCR扩增,用2种双酶组合HaeⅢ和Hin dⅢ、HinfⅠ和TaqⅠ对PCR产物进行核糖体DNA扩增片段限制性内切酶分析(ARDRA),得到了3个操作分类单元(OTUs)。对每个操作分类单元(OTU)的代表菌株进行16 S rDNA序列测定,序列分析结果表明,分离到的6株肠道细菌中,6N01、6N02、6N03、6N04和6N05属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.),6N06属于克雷伯氏杆菌属(Klebsiella sp.)。

思茅松毛虫2龄幼虫肠道好氧细菌的筛选及毒力测定

[目的]筛选思茅松毛虫(Dendrolimu.kikuchii Matsumura)2龄幼虫肠道好氧细菌并测定其毒力。[方法]将思茅松毛虫2龄幼虫中肠样品倍比稀释后涂布平板分离菌株,共分离得到5株好氧细菌。以细菌基因组DNA为模板,用细菌16S rDNA通用引物(27f和1492r)对模板扩增,并用4种限制性内切酶Hae Ⅲ和Hind Ⅲ、HinfⅠ和TaqⅠ对PCR扩增产物进行ARDRA多态性分析。[结果]聚类图谱分析发现,5株好氧细菌在95%的相似水平上聚成2个不同分类操作单元(OTU),表明思茅松毛虫2龄幼虫肠道内好氧细菌的遗传多样性水平偏低。室内毒力试验表明,肠道细菌杀虫死亡高峰期在4～10d,菌株4杀虫效果最佳,12d时校正死亡率达到53.57%。[结论]为防治思茅松毛虫提供了参考。

柿子叶提取物对思茅松毛虫肠道细菌抑制作用的研究

以3龄和5龄的思茅松毛虫幼虫肠道细菌为供试菌种,采用牛津杯法测定柿子叶5种不同的提取物对思茅松毛虫肠道细菌的抑菌效果。结果显示:除柿子叶石油醚提取物对供试菌株没有抑制作用外,其余4种柿子叶提取物对供试菌株都有不同程度的抑制作用,且随着浓度的降低其抑制作用也降低,抑制作用大小顺序为乙酸乙酯提取物>氯仿提取物>乙醇提取物>正丁醇提取物,这四种柿子叶提取物对302号菌株都表现出了极强的抑制效果。因此,柿子叶提取物有作为良好的新型植物源生物农药进行开发利用的潜力。

思茅松毛虫肠道产脂肪酶菌株的筛选鉴定及酶学性质初步研究

利用纯培养和筛选培养,从思茅松毛虫幼虫肠道中分离得到7株产脂肪酶的菌株。通过提取基因组DNA并进行16S rDNA序列测定,构建产酶菌株的系统发育树,初步鉴定结果显示:菌株D2、D12、D19属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.),菌株D7、D17属于芽胞杆菌属(Bacillus sp.),菌株D9、D16属于克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)。初步研究所产脂肪酶的酶学性质,确定这些酶的最适作用温度30～40℃、最适作用pH值8.0～9.0,为中温碱性脂肪酶。

3龄思茅松毛虫幼虫肠道好氧细菌的分离及ARDRA多态性分析

从3龄思茅松毛虫(Dendrolimus kikuchii)幼虫肠道样品中分离得到11株好氧细菌。以细菌基因组DNA为模板,扩增16 S rDNA,并用4种限制性内切酶HaeⅢ和HindⅢ、HinfⅠ和TaqⅠ对PCR扩增产物进行ARDRA多态性分析。对聚类图谱的分析结果发现11株好氧细菌在70%的遗传相似度水平上聚成4个不同分类操作单元(OTU),表明3龄松毛虫中肠道内好氧细菌的遗传多样性水平偏低。

不同波长诱虫灯对思茅松毛虫监测研究

为探究思茅松毛虫最佳诱集波长及种群动态,本研究使用10种不同光谱范围和峰值光波的诱虫灯,选择思茅松毛虫虫口密度较高的湖南省岳阳市进行野外诱集试验,分析了思茅松毛虫最佳诱集波长、种群动态及雌雄性比。研究结果显示:10盏诱虫灯中5#诱虫灯(光谱范围408.87~433.49 nm,峰值光波422.55 nm)效果最好,13#(光谱范围439.87~543.92 nm,峰值光波494.93 nm、498.57 nm)诱集效果最差;思茅松毛虫雄虫先于雌虫羽化,在雌虫羽化位点等待雌虫羽化后与之交尾;后期,诱集的思茅松毛虫雌雄性比偏向于雌性。总体上,诱集的思茅松毛虫雌性较多,表明思茅松毛虫在林间雌虫占多数。本研究结果为利用频振式诱虫灯监测思茅松毛虫,同时为利用诱虫灯的最佳诱集波长及种群动态进行思茅松毛虫的防治提供了参考依据。

思茅松毛虫发生期预测预报研究初报

绘制了思茅松毛虫化蛹及成虫羽化的发育进度“S”形曲线 ,统计计算出了各虫态的平均发育历期和各主要虫态间的期距及其标准差 ,测定了各虫态的发育起点温度和有效积温 。

禄丰县思茅松毛虫成灾与林分因子相关性调查研究

对思茅松毛虫成灾与 1 4个林分因子进行逐步回归分析 ,从中筛选出主层林郁闭度、林木生长势、坡向和海拔高度 4个关键因子 ,并用这 4个因子建立多元回归模型 。

银杉重大害虫-思茅松毛虫的生物学特性及综合治理技术研究

银杉(Cathaya argyrophylla)为我国一级保护植物,思茅松毛虫(Dendrolimus kikuchii)是为害其生长的重大害虫。对该虫在广西花坪自然保护区生物学特性的观察研究表明:1年发生2代,以3至4龄幼虫越冬。根据该虫取食量、银杉的生长状况和年生长量,制定划分虫灾级别指数,提出综合治理技术。

思茅松毛虫空间分布型及抽样技术的研究

寄生于滇油杉上的思茅松毛虫幼虫的空间分布为聚集分布。以平行线式和棋盘式抽样所得结果误差较小。文中还给出了序贯抽样方案。

禄丰县思茅松毛虫生物学特性的初步研究

对禄丰县思茅松毛虫 (DendrolimuskikuchiiMatsumura)的生物学特性观测表明 :思茅松毛虫在禄丰县 1年发生 1代 ,以 4龄幼虫越冬。幼虫在林分内的空间分布型为聚集分布 ,m 与 x之间的直线回归关系式为 :m =0 80 4 0 +1 2 873 x ,最适抽样数量为 :N =180 4 / x +2 8 73。组建了思茅松毛虫 2个世代的自然种群平均生命表 ,揭示了该虫在禄丰县种群消长趋势 ,其指数 (I)为 0 33,呈下降趋势。

思茅松毛虫幼虫取食量及排粪规律研究

采用湿地松针叶喂食思茅松毛虫幼虫,观察取食量和排粪规律,结果表明,进入5龄后的思茅松毛虫是危害湿地松的主要时期,思茅松毛虫幼虫排粪量随着虫龄的增大而增多,粪重与食叶量成线性正相关关系,一定程度上可以用思茅松毛虫粪重来预测食叶量的大小和危害程度。

思茅松毛虫肠道脂肪酶高产菌株的筛选及其酶特性研究

从思茅松毛虫幼虫肠道中分离出3属7株产脂肪酶菌,以思茅松松节油为底物,筛选高产脂肪酶菌株,测定脂肪酶活性,确定酶解特性,生长量和产酶特性。结果表明:以思茅松松节油和橄榄油为底物时,7株产脂肪酶菌均表现出不同的产脂肪酶活性,其中以菌株D12的产脂肪酶活性最高。以思茅松松节油为底物时,菌株D12的脂肪酶活力高达4.06 U·mL-1;菌株D12为中温型产碱性脂肪酶菌株,最适作用温度40℃,最适pH值为8.0;菌株D12经发酵至60 h时,OD600值高达0.68,说明其生长量达到最大,在48 h左右时酶活力达到最高,为6.6 U·mL-1。