异种器官移植排斥反应及其预防治疗策略

异种器官移植是解决人类器官短缺问题的潜在方案。在过去的上百年里,异种器官移植经历了早期尝试和不断进步,目前已进入新的高速发展阶段,取得了一系列的成果,但异种器官移植排斥反应的管理较同种异体器官移植排斥反应更为棘手。为此,研究者们开发出了一系列免疫抑制策略,如使用基因修饰猪供体、使用传统和新型免疫抑制药、将供体猪的胸腺与供器官一同移植等,以实现调整受体免疫系统反应,降低排斥反应强度并延长移植物存活时间。本文就异种器官移植排斥反应发生机制、预防和治疗策略的相关研究进行评述,以期为促进异种器官移植的进一步发展提供参考。

草麻黄中补体抑制成分抑制大鼠异种心脏移植超急性排斥反应的实验研究

目的初步探讨草麻黄中补体抑制成分(comp lem ent inh ib iting component,C IC)对异种心脏移植超急性排斥反应的作用。方法按是否给予C IC灌胃处理,将动物模型分为对照组和实验组,观察对照组和实验组术后供心存活时间,在术后早期及供心失活时取两组心脏组织行光镜、电镜病理检查,并在术后固定时间分别抽鼠血行血清学检查,用微量法测定CH50、APH50,用透射比浊法测定C3。结果实验组移植心脏存活时间为(51.00±3.46)m in,与对照组(30.30±3.46)m in比较差异极显著(P<0.01)。结论豚鼠至大鼠异种心脏移植后,补体的经典途径和替代途径均被激活。C IC能明显抑制补体活性,延缓超急性排斥反应的发生,从而使移植心脏的存活时间延长。

人α-半乳糖苷酶、α-1,2-岩藻糖转移酶cDNA序列转染克服异种移植超急性排斥反应

半乳糖α 1,3 半乳糖抗原是引起异种器官移植超急性排斥反应 (hyperacuterejection ,HAR)的主要抗原 .α 半乳糖苷酶和α 1,2 岩藻糖转移酶基因可以以不同的方式降低半乳糖α 1,3 半乳糖抗原在内皮细胞表面的表达量 .将人α 半乳糖苷酶基因和α 1,2 岩藻糖转移酶基因单独或连接在一起导入猪血管内皮细胞PEDSV .15中 ,检测细胞表面的抗原及异种天然抗体对细胞杀伤作用 .结果表明α 半乳糖苷酶基因可以将猪血管内皮细胞表面的半乳糖α 1,3 半乳糖抗原清除 74 13%,而α 1,2 岩藻糖转移酶基因也可以清除 4 7 75 %的细胞表面异种抗原 ,但二者都不能达到完全清除的目的 .当α 半乳糖苷酶和α 1,2 岩藻糖转移酶双基因在内皮细胞内共表达时 ,则可以基本清除半乳糖α 1,3 半乳糖抗原 .抗原的减少也可以相应地减弱内皮细胞对异种天然抗体介导的杀伤作用的敏感性 ,尤其是双基因共表达时细胞基本不被杀伤 .结果表明 ,α 半乳糖苷酶基因和α 1,2 岩藻糖转移酶基因可以有效地清除血管内皮细胞表面的半乳糖α 1,3 半乳糖抗原 ,克服HAR的发生 ,为下一步进行动物实验 。

细胞毒T淋巴细胞在异种肝移植急性排斥反应中的作用

目的 探讨异种肝移植中细胞毒T淋巴细胞 (CTL)参与急性排斥反应的机制。 方法 三袖套法建立仓鼠到大鼠原位肝移植模型 ;免疫组化方法检测同基因组与异种移植组 (XT组 )移植肝术后CD8和CD4型淋巴细胞浸润及Fas L ,穿孔素的表达情况 ,并运用原位末端标记法检测移植肝细胞的凋亡情况。 结果 XT组移植肝术后第 2d汇管区出现淋巴细胞浸润 ,逐日增多 ,至术后 5～ 6d达高峰 ;术后第4d穿孔素及Fas L开始表达 ,术后第 5～ 6d达高峰 ;穿孔素的表达始终高于Fas L。 结论 异种肝移植中T淋巴细胞参与了其免疫排斥反应 ,通过表达穿孔素或Fas L使靶细胞坏死或凋亡。

异种器官移植配型现状及解决思路

器官移植术前配型是器官移植成功与否的关键,当前的异种器官移植术前配型方法源于人类同种异体器官移植,但方法简单,不能准确预判移植术后是否会发生排斥反应。异种器官移植的一个显著特点是供体来源稳定、基因型明确,因此取材方便,可重复性强。充分利用异种器官移植中供体可控的优势,在完善传统细胞学配型基础上,拓展组织水平配型手段,重视内皮细胞在配型中的作用,开发器官水平配型方法,通过多环节、多维度的术前配型有利于精确筛选出合适的供体,有利于减少异种器官移植术后排斥反应的发生。为此,本文从同种异体器官移植配型方法,当前异种器官移植配型方法、存在问题及可能的突破点进行综述,以期为异种器官移植配型的进一步研究提供参考。

种植受者血管内皮细胞对抗异种移植超急性排斥反应的初步探讨

为探讨种植受者血管内皮细胞在抗异种移植超急性排斥反应方面的意义,选用豚鼠→大鼠移植模型，先分离、培养大鼠动脉内皮细胞，然后将其种植于去内皮的豚鼠动脉内壁，并以免疫组化技术检测了种植大鼠内皮细胞的豚鼠动脉与大鼠血清反应的情况。结果显示：大鼠血清与正常的豚鼠动脉一起培养后，前者所含IgM、C3沿后者内皮细胞表面沉积；种植大鼠内皮细胞的豚鼠动脉与大鼠血清反应后免疫荧光反应呈阴性，即无IgM和C3。以上结果表明，血管内皮细胞可在异种血管壁上种植，如将受者血管内皮细胞预先种植于供者的血管内壁，可能避免超急性排斥反应的发生。

中华眼镜蛇毒抑制豚鼠至大鼠异种肾移植超急性排斥反应的实验研究

目的 :探讨中华眼镜蛇毒对异种移植超急性排斥反应的影响。方法 :观察质量分数为0 1%中华眼镜蛇毒 ( 0 4mg/kg)腹腔注射对豚鼠到大鼠异种移植肾存活时间、病理及血清补体C3的影响。结果 :中华眼镜蛇毒能延长移植肾存活时间 ,降低受体血清C3水平 ,减轻移植肾病理损害。结论 :补体抑制剂中华眼镜蛇毒能有效抑制豚鼠到大鼠的异种超急性排斥反应。

免疫活性细胞在异种移植急性血管性排斥反应中的意义

目的探讨免疫活性细胞在异种移植急性血管性排斥反应(AVR)中的意义。方法猪到猕猴腹腔内异位心脏移植,使用高纯度的眼镜蛇毒因子完全清除受体体内补体,建立AVR模型。常规病理检查,并采用免疫组化法检测移植心CD4+T细胞、CD8+T细胞和巨噬细胞浸润程度,检测细胞间黏附分子1(ICAM1)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的表达水平。结果移植心内大量淋巴细胞浸润,其中50%为巨噬细胞,CD4+T细胞占15%,CD8+T细胞占25%;ICAM1和TNFα表达明显上调。结论细胞机制在异种移植AVR发生、发展过程中发挥重要作用。

豚鼠-大鼠异种心脏移植急性血管排斥反应期组织因子mRNA的表达

目的 通过检测组织因子mRNA在异种心脏移植急性血管排斥反应期的动态表达与排异反应强度之间的关系 ,初步了解组织因子在该反应期的意义。方法 建立豚鼠 大鼠异种异位心脏移植动物模型 ,使用CVF抑制超急性排异反应 ,FK5 0 6抑制细胞免疫排斥反应 ,分别在移植术后 4、8、12、16、2 4h切取移植心脏 ,通过病理切片观察排异反应和凝血强度 ,同时通过RT PCR方法检测组织因子mRNA表达强度 ,未移植豚鼠心脏作对照。结果 在移植后 ,移植心脏的排异反应和凝血逐渐加重 ,豚鼠组织因子mRNA表达强度逐渐减弱 ,大鼠组织因子mRNA表达强度逐渐增强。结论 组织因子在异种心脏移植急性血管排斥反应期中起重要作用 ,其中供体的组织因子可能与凝血的激发有关 ,受体的组织因子可能与凝血的发展有关。

异种移植超急性排斥反应中血浆灭活补体成份作用的免疫组织化学研究

目的：应用免疫组织化学方法研究血浆成份在异种移植超急性排斥反应中的作用机制。方法：用离体大鼠心脏异种血浆体外灌注，建立超急性排斥反应模型，通过人血浆及灭活补体人血浆的异种器官灌注后，以荧光免疫组织化学研究天然抗体及补体对血管内皮细胞的激活反应。结果：在超急性排斥反应中，免疫球蛋白（Ｉｇ）Ｇ、ＩｇＭ和补体Ｃ３在血管内皮细胞附着，同时，有膜攻击复合物（ＭＡＣ）存在，表明ＩｇＧ、ＩｇＭ及补体Ｃ３参与超急性排斥反应时的内皮细胞激活，并形成ＭＡＣ；灭活补体虽仍见ＩｇＭ附着于内皮细胞膜，但超急性排斥反应被阻断，内皮细胞膜也未见补体Ｃ３及ＭＡＣ的附着。结论：ＩｇＧ、ＩｇＭ和补体Ｃ３在超急性排斥反应中起重要作用，用免疫组织化学方法来研究超急性排斥反应机制是可行的。

猪到人异种移植超急性排斥反应的靶抗原

目的 探索猪到人异种移植超急性排斥反应的靶抗原。方法 对近年来国内、外有关文献进行检索 ,并作综述。结果 α半乳糖基 (α Gal)是目前公认的猪到人异种移植超急性排斥反应的主要抗原 ,其表达受α 1,3半乳糖转移酶 (α 1,3GT)控制。克服α Gal引起的超急性排斥反应的方法有免疫吸附天然抗体、酶消化α Gal、α GT基因敲除及转基因技术等。除α Gal外 ,还存在与人血清中天然抗体相结合的其它抗原 ,如红细胞表面相对分子质量为 40× 10 3 的分子 ,猪胚胎脑细胞上相对分子质量为 2 10× 10 3 、10 5× 10 3 及 5 0× 10 3 的抗原分子等。结论 α Gal是异种移植超急性排斥反应的主要靶抗原 ,除α Gal外还存在有待进一步研究的非α Gal。

补体系统在异种器官移植超急性排斥反应中作用的研究进展

超急性排斥反应（Ｈｙｐｅｒａｃｕｔｅｒｅｊｅｃｔｉｏｎ，ＨＡＲ）是异种器官移植的第一道障碍，也是目前最主要的障碍。补体系统在ＨＡＲ的发生和发展中扮演着重要角色，成为９０年代以来异种器官移植研究的焦点之一。本文就补体系统在ＨＡＲ发生中的作用。

猪人异种移植超急性排斥反应补体激活途径的探讨

异种移植最大障碍是由体液免疫造成的超急性排斥反应(Ｈｙｐｅｒａｃｕｔｅｒｅｊｅｃｔｉｏｎ,ＨＡＲ)。本实验用猪胸主动脉血管内皮细胞和人血清建立ＨＡＲ体外模型,ＬＤＨ释放法检测补体依赖的细胞毒作用,探讨ＨＡＲ中补体激活途径。1 材料与方法11 猪血管内皮细胞的...

猪-人异种移植超急性排斥反应中IL-1质量浓度的变化

为了探讨在猪 人异种移植超急性排斥反应中的细胞毒作用及细胞因子白细胞介素 1 (IL 1 )的变化 ,用体外培养的猪血管内皮细胞和人血清共同反应 ,建立猪 人异种移植超急性排斥反应的体外实验模型 ,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法观察补体依赖的细胞毒作用 ,换算出内皮细胞溶解率 ,将其作为评定血管内皮细胞激活和损伤的标志 ;采用ELISA法检测上清液中IL 1 β。结果 :1 )在相同时间点上 ,正常人血清组 (HS组 )的细胞溶解率明显高于对照组 ,与其他各组比较无明显差异 ;随着时间的延长 ,HS组内皮细胞溶解率逐渐增高 ,于 3～ 4h接近高峰。 2 )反应 0 .5h后 ,正常人血清组IL 1 β的质量浓度明显高于对照组 (P <0 .0 1 ) ;灭活人血清组、C1q缺乏组与对照组组间比较无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;随着时间的延长 ,HS组IL 1 β质量浓度继续升高 (P <0 .0 1 ) ,3～ 4h保持稳定。IL 1的变化过程与内皮细胞溶解率的变化趋势基本一致。结果提示 :在猪 人异种移植中 ,血管内皮细胞激活及IL

丹参及金钱草对抗豚鼠-大鼠异种心脏移植超急性排斥反应作用的初步观察

目的:研究丹参、金钱草单用或与环孢素 A(CsA)、硫唑嘌呤(Aza)、泼尼松(Pred)三联免疫抑制药物合用对异种心脏移植超急性排斥反应的作用。方法:选用豚鼠—大鼠异种心脏移植模型,分别观测 B 组(单纯豚鼠—大鼠心脏移植,对照组)、C 组(CsA、Aza、Pred 治疗组)、D 组(丹参联合 CsA、Aza、Pred 治疗组);E 组(金钱草联合 CsA、Aza、Pred 治疗组)、F组(丹参治疗组)及 G 组(金钱草治疗组)移植心脏存活时间。结果:各实验组移植心脏存活时间分别为14.7±5.6、13.6±4.9、24.5±4.4、15.4±6.4、25.8±4.1及14.3±4.1min。结论:与金钱草治疗组及 CsA、Aza、Pred 治疗组比较,丹参能够延长异种移植心脏存活时间(P<0.05),但不能阻断超急性排斥反应的发生,丹参可能对大鼠补体有抑制或清除作用。丹参、金钱草分别与 CsA、Aza、Pred 合用无抑制协同作用。

c-myc基因信使核糖核酸在异种移植超急性排斥反应中的表达

目的 :研究 c- myc基因在异种移植超急性排斥反应时的表达及功能。 方法 :应用离体大鼠心脏人血浆体外灌注的异种移植超急性排斥反应模型 ,同时应用分子原位杂交技术进行 c- myc基因信使核糖核酸 (m RNA)在超急性排斥反应中的表达及细胞定位。 结果 :超急性排斥反应后 c- myc基因 m RNA在心脏血管内皮细胞表达升高 ,实验组阳性信号值为 45 0 .0 9± 40 9.99,对照组信号值为 174.40± 5 1.5 0 (P<0 .0 5 )。 结论 :在异种移植超急性排斥反应中 ,c- myc基因表达升高可能与血管内皮细胞活化有关。

协同性异种肝移植急性排斥反应模型的探索

目的探索协同性异种肝移植急性排斥反应模型的建立。方法参照Kamada"二袖套法"并加以改良,分别对Wistar-Wistar大鼠(A组)15对及金黄地鼠-Wistar大鼠(B组)21对进行原位肝移植术,术后观察大鼠一般情况,并于第1、3、5、7天时各处死1只取肝脏组织进行病理观察,余留做观察生存时间。结果A、B两组供体手术时间、修肝时间、无肝期分别为(23±3)min、(8±2)min、(45±5)min、(17±2.5)及(46±3)min、(21±2.5)min、(18±2)min,手术成功率分别为81.0%与93.3%。A、B两组生存期分别为27.4±3.4天及5.5±1天。A组术后Williams分级均为0级,B组术后第1天1级,第3天2级,超过第5天均为3级。结论①利用改良Kamada"二袖套法"可建立稳定的金黄地鼠-Wistar异种肝移植模型;②同时建立了协同性急性排斥反应肝移植模型,并为解决供肝来源不足方面提供了研究基础。

异种移植超急性与急性排斥反应及其对策研究进展

器官移植作为治疗终末期器官衰竭患者的一种比较有效的方法，在临床上得到了越来越广泛的应用，然而这也使人类器官供体相对缺乏的状况越来越严重，激起人们对异种移植的强烈兴趣。考虑到器官的功能特点、形状和大小，基因调控和控制病毒传播的难易程度等因素。使得猪成为理想异种移植供体之一。然而，异种移植后将出现比同种异体移植更为复杂的排斥反应。