低温致急性全身性冷损伤小鼠动物模型建立

目的通过环境低温条件,建立急性全身性冷损伤小鼠动物模型。方法C57BL/6小鼠98只,雌雄各半,体质量22~27 g,周龄10周。根据寒冷环境条件小鼠肛温变化将其随机(随机数字法)分成7组(n=14),即A组(38.5±1)℃、B组(35±1)℃、C组(30±1)℃、D组(25±1)℃、E组(20±1)℃、F组(15±1)℃、G组(10±1)℃,其中A组为空白对照组,其余各组为实验组。空白对照组小鼠置于常规环境(205)℃,实验组小鼠置于-20℃低温人工气候箱内,间断测量小鼠肛温(作为核心体温),记录小鼠核心体温分别降至B组、C组、D组、E组、F组、G组所需时间。翻正反射评估小鼠意识状态,观察小鼠行动能力和各器官大体状态,检测小鼠血常规和各器官HE染色。结果随着实验组小鼠设置核心体温越低,则所需时间越长。B、C、D三组小鼠意识状态、行动能力以及各器官大体状态、血常规、各器官HE染色与A组基本一致,未出现急性全身性冷损伤,因此B、C、D组的血常规、器官大体观察、器官HE染色与A组的比较不再展示;与A组相比,E组小鼠开始出现意识状态和行动能力障碍,随着核心体温的降低损伤加重,G组小鼠死亡;与A组相比,E组小鼠血常规(WBC、RBC、HGB、PLT)各指标开始出现降低,单因素方差计算仅WBC变化具有统计学意义(P<0.05);与A组、E组相比,F组小鼠血常规(WBC、RBC、HGB、PLT)各指标进一步降低,单因素方差计算各指标变化均具有统计学意义(P<0.05);大体观察结果显示,与A组相比,E组小鼠肺脏、肝脏、脾脏表面开始出现颜色变暗,与A组、E组相比,F组小鼠肺脏、肝脏、脾脏、肾脏及心脏颜色进一步加深、变暗,可见边缘不齐;各器官HE染色结果显示,与A组相比,E组小鼠开始出现部分肺泡结构破坏以及少量炎症细胞浸润,肝脏中央静脉轻度充血,脾脏红髓与白髓部分见界限不清,与A组、E组相比,F组小鼠的肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、心脏及大脑组织病理结构损伤进一步加重。结论通过环境低温条件进行小鼠意识状态、行动能力、各器官大体状态、血常规及各器官HE染色指标检测,可模拟临床急性冷损伤进展过程,急性全身性冷损伤小鼠动物模型制备成功。