用药包材急性全身毒性检查法替代异常毒性检查法的可行性分析

目的:比较药品包装材料(药包材)异常毒性与急性全身毒性检查法,研究用急性全身毒性检查法代替异常毒性检查法的可能性。方法:对不同国家、地区的药典、法规和标准中急性全身毒性检查法和异常毒性检查法进行分析对比。在此基础上,选择93批不同类型药包材进行急性全身毒性和异常毒性检查并进行结果分析。结果:结合各国、地区对药包材急性全身毒性和异常毒性检查的要求,以及两者方法学之间的对比分析结果,急性全身毒性检查法具有更加广泛的适用性。结论:针对药包材急性毒性风险,特别是不断涌现的新型药包材产品,从生物学风险控制的角度出发,使用急性全身毒性检查法可以更加科学、合理地控制风险,用急性全身毒性检查法替代异常毒性检查法具有实际可行性。

评价生物材料不同给予方法致急性全身毒性作用的实验初探

目的 探讨不同给予方法评价生物材料致急性全身毒性作用的实验研究。方法 选用小白鼠作为实验动物 ,聚 DL 乳酸可吸收高分子材料为实验材料 ,经制备不同剂量的材料浸提液和采用进入动物体内的三种不同方法 :尾静脉注射 ,腹腔注射和经口灌胃 ,观察动物的急性全身毒性反应。结果 三种给予方法均显示 2倍浓度组动物在灌注 2 4h后出现体重减轻 ,经口灌胃组在以后的 48和 72h后持续体重下降 ,标准浓度组的三种给予方法之间统计学上无显著性差异。结论 随着材料浸提浓度的增加 ,动物体重会出现短暂的减轻。经口灌胃途径比静脉和腹腔注射途径对动物的影响更大 。

脂肪乳剂救治局部麻醉药急性全身毒性反应的研究

背景局部麻醉药（local anesthetic，LA）急性全身毒性反应（local anesthetic systemtic toxicity，LAST）指LA误入血管内或单位时间内吸收入血的LA剂量过大引起的毒性反应，主要表现为中枢神经系统毒性和心血管功能障碍。随着新技术如超声引导下神经阻滞的开展和连续输注导管的引进，IJA误入血管的发生率降低，但若LA误人血管，引起的全身反应往往是致命的，需引起重视。1998年Weinberg建立的动物模型中脂肪乳剂（lipid emulsion，LE）对LAST发挥有效治疗，其复苏疗效得到认同。目的探讨LE治疗LAST的机制和临床应用进展。内容综述LE治疗LAST的机制、适应证、剂量及复苏的注意事项等。趋向LE可能为临床治疗LAST提供有效的预防及治疗措施。

高熵合金AlCoCrCuFeTix小鼠急性全身毒性及兔皮下植入实验研究

目的通过小鼠急性全身毒性试验及兔皮下植入实验评价AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金的生物相容性。方法依据GB/T 16886.11-2011和GB/T 16886.6-2015标准分别对AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金进行小鼠急性全身毒性实验和兔皮下植入实验。结果小鼠急性全身毒性实验:72 h观察期内实验组和对照组小鼠未出现任何急性毒性反应。兔皮下植入实验:植入1周后试件周围均可见不同程度炎细胞浸润,主要为中性粒细胞和淋巴细胞。植入4周、12周后炎细胞主要为淋巴细胞,纤维包膜已形成,随时间延长炎细胞数量明显减少;纤维包膜变薄,与试件结合更紧密,包膜内毛细血管数量增加。其中,各植入周期内AlCoCrCuFeTi0高熵合金组织反应最佳,但是其余高熵合金组尤其在植入1周时随着Ti含量的增加炎症反应逐渐加重,植入4周以后炎症反应基本接近对照组。结论可初步认为AlCoCrCuFeTi0高熵合金具有良好的生物相容性。

海藻酸钙/聚组氨酸微胶囊的毒性试验研究

为了考察海藻酸钙/聚组氨酸微胶囊的毒性特征,我们利用MTT比色法和小鼠尾静脉注射法,分别考察了该微胶囊的细胞毒性和急性全身毒性。结果表明:微胶囊浓度≤1.0mg/mL时,材料对L929细胞生长无明显抑制作用;微胶囊浸提液即使在高浸提比(10.0mg/mL)下,浸提产物也无细胞毒性作用。急性全身毒性试验结果显示:微胶囊浸提液不引起急性全身毒性反应,表明微胶囊浸提液无有毒的沥滤物和降解产物产生。说明海藻酸钙/聚组氨酸微胶囊无明显毒性。

纤维蛋白止血敷料的生物相容性研究

目的评价纤维蛋白止血敷料的生物相容性。方法对纤维蛋白止血敷料进行如下生物学检测:细胞毒性试验(MTT法)、急性全身毒性试验、皮肤刺激试验、皮内刺激试验和溶血试验,根据标准对实验数据进行分析和评估。结果纤维蛋白止血敷料的细胞毒性分级0—1级;无急性全身毒性作用,无皮肤刺激反应、皮内刺激反应,无溶血性。结论纤维蛋白止血敷料具有良好的生物相容性。

丝素蛋白／左旋聚乳酸复合组织工程纳米材料的生物相容性及安全性评价

目的:研究新型组织工程纳米材料丝素蛋白/左旋聚乳酸(SF/PLLA)无纺网的生物相容性和安全性,探讨其作为生物植入材料的可行性。方法:采用静电纺丝方法制备SF/PLLA复合组织工程纳米材料,制备浸提液,并以生理盐水作为对照,注射入小鼠体内,观察2周内小鼠的一般情况和不良反应;将材料植入小鼠背部,以3-0缝线作为对照,于术后1、2、3和4周分别取材,HE染色并拍照,比较实验组与对照组周围组织的炎症反应情况;培养兔膝关节软骨细胞,传代后接种至材料表面,在体外继续培养,倒置光学显微镜观察细胞的黏附和生长情况。将关节软骨细胞分为阴性对照组(空白培养液)、实验组(含材料的培养液)和阳性对照组(含苯酚培养液),不同组材料浸提液与细胞共培养24和48h,MTT法检测材料对软骨细胞增殖的影响。结果:注射浸提液后小鼠的全身状况与注射生理盐水后无差别;材料植入小鼠背部后,开始有少量成纤维细胞长入材料中,伴随出现少量的淋巴细胞及异物巨细胞,随后成纤维细胞数量增加,淋巴细胞及异物巨细胞无明显增多,材料慢慢降解,直至第4周时材料出现明显的降解;材料周围组织炎症反应,第2周时最严重,然后逐渐减轻,其周围组织炎症反应与缝线周围组织一致或略轻;将细胞接种于支架上24h后有细胞贴附于材料纤维上,48h后贴附于纤维上的细胞数量增多。MTT法检测,实验组24和48h细胞毒性均为Ⅰ级。除阳性对照组外,其他各组随着培养时间的延长,吸光度(A)值均增加;同一时间点,实验组与阴性对照组A值比较差异无统计学意义(P>0.05),与阳性对照组比较A值明显升高(P<0.01)。结论:SF/PLLA无纺网支架材料属于安全植入性材料,具有良好的生物相容性。

复合水凝胶人工角膜裙边支架材料的生物相容性评价

背景:β-磷酸三钙/聚乙烯醇复合水凝胶具有高含水量、良好柔软性优点,有利于成纤细胞生长及胶原沉积,适用于做人工角膜裙边支架材料。目的:评价β-磷酸三钙/聚乙烯醇复合水凝胶人工角膜裙边支架材料的生物相容性。方法:①迟发型超敏反应:在豚鼠脊柱两侧皮内由头到尾分别注射A液(完全弗氏佐剂与生理盐水等体积混合液)、B液(β-磷酸三钙/聚乙烯醇复合水凝胶浸提液或生理盐水或2-巯基苯并噻唑)、C液(A液与B液等体积混合稳定性乳化剂),并进行局部诱导及激发。②急性全身性毒性实验:由昆明小鼠尾静脉分别注射生理盐水与β-磷酸三钙/聚乙烯醇复合水凝胶浸提液。③体外细胞毒性实验:分别以β-磷酸三钙/聚乙烯醇复合水凝胶浸提液、细胞培养液及含苯酚的细胞培养液培养MRC-5细胞。④皮内反应:在兔脊柱皮内分别注射β-磷酸三钙/聚乙烯醇复合水凝胶生理盐水(或芝麻油)浸提液、生理盐水及芝麻油。结果与结论:β-磷酸三钙/聚乙烯醇复合水凝胶人工角膜裙边支架材料的迟发型超敏反应分级为0-1级,急性全身毒性实验结果为正常无症状,体外细胞毒性均为0级或1级,皮内反应为极轻微。表明β-磷酸三钙/聚乙烯醇复合水凝胶人工角膜裙边支架材料生物相容性指标达到生物植入医用材料的要求。

纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸新型可吸收材料的短期生物安全性

背景:课题组前期制备出具有良好生物活性的纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸[nano-hydroxyapatite/collagen/poly(L-lactic)acid,nHAC/PLA]复合材料。目的:评估纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸材料的生物安全性。方法:取含聚乳酸分别为100,150,200 g/L的nHAC/PLA材料,制备浸提液,分别记为nHAC/PLA1、nHAC/PLA2、nHAC/PLA3。①细胞毒性实验:采用nHAC/PLA1、nHAC/PLA2、nHAC/PLA3浸提液、细胞培养基培养L929细胞,采用MTT比色法评价材料的细胞毒性;②急性全身毒性实验:取C57小鼠(郑州大学动物实验中心提供),尾静脉分别注射nHAC/PLA1、nHAC/PLA2、nHAC/PLA3浸提液与生理盐水,注射后24,48,72 h,观察动物一般情况及体质量变化;③血清毒性实验:取SD大鼠(郑州大学动物实验中心提供),分别胃饲nHAC/PLA1、nHAC/PLA2、nHAC/PLA3浸提液与生理盐水,7 d后,采用酶联免疫法检测大鼠血清中白细胞介素1蛋白水平;④致敏实验:将25只白色豚鼠(郑州大学动物实验中心提供)随机分为5组:实验组采用nHAC/PLA1、nHAC/PLA2、nHAC/PLA3浸提液,阴性对照组采用生理盐水,阳性对照组采用体积分数5%甲醛溶液,经过皮内诱导、局部诱导和激发阶段后24,48,72 h,观察各组激发部位皮肤情况;⑤溶血实验:向nHAC/PLA1、nHAC/PLA2、nHAC/PLA3浸提液、生理盐水、蒸馏水中分别加入兔抗凝血,检测溶血率。实验方案经郑州大学伦理委员会审查批准。结果与结论:纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸材料的体外细胞毒性为0级,急性全身毒性、血清毒性、致敏性和溶血实验结果均为阴性,表明纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸材料均具有良好的生物安全性。

一种新型可切削生物活性微晶玻璃的生物安全性评价

背景:自主设计的可切削生物活性微晶玻璃,在保证抗弯强度的同时,有效降低了熔制温度、制备成本。在临床应用前,除必要的机械、理化性能研究外,还需进行生物相容性评估。目的:观察新型可切削生物活性微晶玻璃对小鼠有无全身毒性作用,评价其生物安全性。方法:将纯系昆明种小鼠随机分为实验组、阴性对照组和阳性对照组,实验组经口灌注可切削生物活性微晶玻璃的阿拉伯胶混悬液,阴性对照组灌注等体积阿拉伯胶,阳性对照组灌注醋酸铅溶液,于灌注后24,48,72h观察小鼠一般状态、毒性表现并记录体质量变化。最后处死小鼠取出肝、肾,做光、电镜检查。结果与结论:72h内,实验组小鼠体质量未下降,与阴性对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05),肝、肾组织未见病理改变。提示该新型可切削生物活性微晶玻璃经短期口服后对机体无全身毒性。

碳纤维增强型树脂基复合材料的生物安全性评价

目的评价碳纤维增强型树脂基复合材料(CFRP)的生物相容性,为其在口腔临床中的应用提供依据。方法本研究进行三种体内外试验,即短期全身毒性试验(经口途径),静脉注射急性全身毒性试验和溶血试验。结果实验一:对照组和试验组大鼠均未出现毒性反应,对照组和实验组的体重增长率和食物利用率无明显差异(P>0.05),肉眼观察动物重要脏器,均未出现病理变化;实验二:对照组和试验组小鼠均未出现毒性症状,试验组和对照组小鼠体重无明显差异(P>0.05);实验三:测的体外溶血率2%。结论碳纤维增强型树脂基复合材料对动物无全身毒性作用也无溶血作用。

新型羟基磷灰石涂层钛种植材料生物安全性的初步评价

目的 评价表面诱导矿化(SIM)法羟基磷灰石涂层钛种植材料的生物安全性。方法 本实验共选择了三种体内外试验,即短期全身毒性试验(经口途径)、静脉注射急性全身毒性试验和溶血试验。结果经口毒性试验中试验组大白鼠都无明显毒性体征,其食物利用率、体重相对增长率等指标均与对照组无明显差别(P>0.05),内脏组织无病理性改变;急性全身毒性试验:试验组小白鼠无明显毒性表现,体重分别增加了2.8～4.8g,其体重变化量同对照组无显著性差异(P>0.05),内脏组织均未见病理性改变;体外急性溶血率为1.16％。结论 SIM法羟基磷灰石涂层钛种植材料对动物无急性全身toxic action,也无体外溶血作用,可初步认为其具有良好的生物安全性。

颌骨缺损修复用多孔镁合金支架材料的生物安全性评价研究

背景:研究已证实部分生物医用镁合金产品生物安全性及其他优势性能,但在其合金成分基础上改变制作工艺及产品形态制得的多孔支架材料生物安全性尚不明确。目的:探讨生物医用多孔镁合金支架材料的生物安全性能。方法:制取多孔镁合金支架材料浸提液,参照GB/T16886医疗器械生物学评价系列标准,进行体外细胞毒性实验、体外溶血实验、皮内反应实验、热源实验、急性全身毒性实验及遗传毒性实验,评估多孔镁合金支架材料浸提液对人骨髓间充质干细胞活性及血细胞胞膜结构完整性的影响,对动物皮内组织、体温、体质量、嗜多染红细胞染色体结构的影响;制备动物下颌骨缺损模型,将多孔镁合金材料植入缺损区,评估其对动物血清及尿液Mg2+浓度、血细胞数目和重要脏器等的影响。实验已通过北京大学医学部动物伦理委员会审核批准,批号为LA2017217。结果与结论:(1)多孔镁合金支架材料浸提液可促进骨髓间充质干细胞的增殖,细胞毒性为0级;(2)多孔镁合金支架材料浸提液的溶血率为0.94%,皮内刺激反应为0分,符合医疗器械溶血实验(<5%)及皮内反应实验(最终记分≤1.0)相关要求;(3)注射多孔镁合金浸提液后,所有动物体温升高均≤0.4℃,升高总度数≤0.8℃,符合医疗器械热源实验相关要求;(4)多孔镁合金浸提液未引起动物全身毒性反应,未破坏嗜多染红细胞染色体结构;(5)多孔镁合金支架材料植入动物骨缺损1个月内,动物血清及尿液Mg^2+浓度无明显变化,红细胞、白细胞、血小板处在正常范围,未引起心、肝、肾、脾组织明显的病理性改变;(6)结果表明,多孔镁合金支架材料具备优良的生物安全性能。

羟基磷灰石涂层钛合金材料生物相容性研究初探

目的探讨一种新型的代骨材料--羟基磷灰石涂层的钛合金材料的生物相容性。方法制备羟基磷灰石涂层钛合金材料浸提液后,采用细胞毒性实验以观察实验样品浸提液对L929小鼠成纤维细胞的毒性反应;通过对小鼠尾静脉及腹腔注射试验样品浸提液后,观察其对小鼠的急性全身毒性反应;Ames实验及迟发型超敏反应实验对其遗传毒性及致敏性进行安全性评价。结果羟基磷灰石涂层钛合金材料浸提液对L929小鼠成纤维细胞的相对增殖率(RGR)为96.9%,细胞毒性反应为1级,无细胞毒性反应;对小鼠亦无明显的急性全身毒性作用,实验样品组与阴性对照组动物体质量差异无统计学意义(P>0.05);遗传毒性Ames实验表明,在活化与非活化条件下,该材料浸提液对鼠伤寒沙门氏菌株的回变菌落数与对照组比均未增加2倍,对该菌株无诱变性;迟发型超敏反应实验显示,该材料浸提液无潜在的皮肤接触致敏性。结论羟基磷灰石涂层的钛合金材料具有良好的生物相容性。

异丁基壳聚糖多功能敷料的生物安全性

目的研究以壳聚糖衍生物-异丁基壳聚糖为生物基质材料而制成的多功能(止血、镇痛、抗菌、促愈合)创面敷料的安全性。方法采用皮肤刺激、皮内刺激、眼刺激法考察其刺激作用;利用皮肤斑贴试验观察其致敏作用;采用腹腔注射法观察其全身急性毒性作用。结果异丁基壳聚糖多功能敷料无刺激、无致敏及无明显急性毒性。结论异丁基壳聚糖多功能敷料具有良好的生物安全性。

纳米增韧陶瓷的初步生物安全性评价

目的初步评价牙科全瓷材料纳米增韧(NF)氧化铝陶瓷的生物安全性。方法根据ISO 7405/GB 16886标准,分别通过体外细胞毒性(琼脂覆盖法)、急性溶血、口腔黏膜刺激以及经口急性全身毒性实验,初步评价材料的生物安全性。结果NF陶瓷材料无细胞毒性;溶血率仅0.275%,远低于5%的安全标准;与实验材料接触的颊黏膜未见异常反应,组织切片观察评分为0,无病理性改变;急性全身毒性实验中动物无中毒反应,肝肾等重要组织切片未见病理改变。结论新型纳米增韧氧化铝陶瓷具有较好的生物安全性。

水溶性异丁基壳聚糖的生物安全性评价

目的:评价异丁基壳聚糖作为生物材料的安全性。方法:采用细胞生长抑制法测定其细胞毒性;利用接触斑贴试验测定其致敏作用;根据皮肤刺激试验、眼刺激试验、皮内刺激试验考察其刺激作用;采用腹腔注射试验观察其全身急性毒性作用。结果:异丁基壳聚糖无细胞毒性、无致敏、刺激及全身毒性作用。结论:水溶性的异丁基壳聚糖可作为一种安全无毒的生物材料。

生物止血海绵的安全性评价

目的评价一种自制止血海绵作为医用生物材料的安全性。方法通过体内埋植法和体外酶降解法考查其降解作用;采用MTT法评价其对鼠成纤维细胞L929的细胞毒性;采用腹腔注射法观察其全身急性毒性;采用皮肤刺激、皮内刺激、眼刺激法考察其刺激作用。结果该止血海绵具有一定的降解性,无细胞毒性和急性毒性,无刺激性。结论实验结果提示该止血海绵是一种安全的,具有潜在临床应用价值的生物医用材料。

丹参纳米银复合材料的生物安全性研究

目的:研究丹参纳米银复合材料(Salvia Miltiorrhiza/Nano-Silver Composite)的生物安全性。方法:通过无菌试验、热原试验、皮肤刺激试验、皮内刺激试验、全身急性毒性试验及SD大鼠对该材料中银的吸收、代谢情况对自制的丹参纳米银复合材料进行生物安全性评价。结果:丹参纳米银复合材料无菌、无热原、无刺激、无明显急性毒性,且机体对纳米银的吸收比对经典创面抗感染药磺胺嘧啶银少。结论:丹参纳米银复合材料作为创面修复材料具有良好的生物安全性。

载银珊瑚羟基磷灰石的生物相容性评价

目的评价负载8×10-5 mol/L银离子后珊瑚羟基磷灰石(CHA)的生物相容性。方法采用珊瑚羟基磷灰石材料与AgNO3及NaCl复合,经真空冷冻干燥后制备成8×10-5 mol/L Ag+浓度的载银珊瑚羟基磷灰石(Ag-CHA),并对健康成年昆明小白鼠、新西兰大白兔、白化豚鼠进行了全身急性毒性实验、热原实验、溶血实验和致敏实验。结果全身急性毒性实验中,负载8×10-5 mol/L银离子的Ag-CHA材料对小鼠无全身急性毒性作用,72 h内小鼠无毒性表现,体重无下降;热原实验中,家兔体温升高数最高分别为0.2、0.2、0.4℃,材料无热原反应;材料的急性溶血率为0.64%,无溶血作用;致敏实验中,实验组豚鼠皮肤无红斑无水肿。结论载银浓度为8×10-5 mol/L的Ag-CHA有良好的生物相容性,无全身急性毒性作用和溶血作用,无热原和致敏原。