严重急性呼吸道综合征冠状病毒疫苗研究现状

冠状病毒被认为是新近爆发的严重急性呼吸道综合征的病原体 .迄今公共数据库中已发表了不同国家和地区分离的 12个SARS病毒株基因组完整序列 .突起蛋白是冠状病毒的主要抗原 ,包含许多抗原决定簇 .SARS冠状病毒突起蛋白的相对保守性为有效疫苗的开发奠定了很好的研究基础 .灭活或减毒的冠状病毒疫苗存在一定的局限性和危险性 .

湖北地区医务人群严重急性呼吸道综合征冠状病毒血清学调查分析

目的 确定医务人群中是否存在严重急性呼吸道综合征 (SARS)冠状病毒 (SARS CoV)隐性或亚临床感染及健康带毒者。方法 以问卷调查方式抽样调查湖北地区有可能接触SARS CoV的高危医务人群的流行病学状况 ;以酶联免疫吸附法测定血清SARS CoVIgM、IgG ;以一步法双重RT PCR检测受试者喉漱液是否存在SARS CoV。结果 接受调查的 10 2名医务人员中 ,均曾在抗SARS一线工作过 ,9名曾到过SARS流行疫区 ,84名 ( 82 .3 % )在 2 0 0 3年SARS流行期间 ,否认曾与确诊SARS患者有过接触 ;18名报告与确诊SARS患者有过接触 ,其中 1名曾无防护接触过数天 ,但无任何不适 ,其他 17名均为有防护接触 ,其中 3名在接触后 2 0天内曾有过感冒样不适。全部 10 2名受调查者的血清SARS CoVIgM、IgG以及喉漱液SARS CoV检测均为阴性。结论 本次抽样调查未发现湖北地区医务人群中曾经有过SARS CoV隐性或亚临床感染 ,也未发现有上呼吸道SARS

严重急性呼吸道综合征冠状病毒包膜蛋白的研究

2002年11月以来,中国大陆、中国香港和台湾地区等地先后经历一次严重急性呼吸道综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)感染的流行,由于其传播快,病情凶险,病死率高,又是新发现的传染病,目前世界上尚不清楚其真正的传染源,未明确其确实的传播途径;还不完全清楚其致病和机体对其免疫的机制;尚未开发出可靠的疫苗,也未找到特效的治疗药物.因此研究SARS-CoV结构蛋白的结构及其功能,对研究其入侵宿主细胞机制、开发特异性抗SARS药物和疫苗等具有十分重要的意义.现就SARS-CoV基因组所编码的S、M、E和N等主要结构蛋白的研究现状作一综述.

严重急性呼吸道综合征冠状病毒S蛋白可介导病毒进入肝癌细胞系

本文作者利用重组带有严重急性呼吸道综合征冠状病毒(SARS-CoV)S蛋白的慢病毒属假病毒颗粒，研究了SAILS-COV的嗜性及介导的病毒感染。首先用瞬时转染，SARS-CoV的S蛋白可以在转染细胞表面表达，随后用S蛋白的表达质粒和缺少env基因但带有报告基因的HIV质粒共转染293T细胞，

猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用

为建立一种猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)血清抗体的快速检测方法,本研究首先经PCR扩增SADS-CoV N基因,纯化鉴定后克隆至表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-N。重组N蛋白诱导表达并通过SDS-PAGE和Western blot鉴定后,采用纯化的重组N蛋白作为包被抗原,以兔抗猪HRP-IgG作为二抗,利用方阵滴定法优化各反应条件,建立了一种以SADS-CoV N蛋白为靶标的检测SADS-CoV血清抗体的间接ELISA方法,并对此方法的敏感性、特异性、重复性及临床应用价值进行鉴定。SDS-PAGE及Western blot结果显示,重组表达的N蛋白约为70 ku,且具有良好的反应原性。采用该方法检测SADS-CoV阳性血清抗体效价可达1∶3 200,并且与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪丁型冠状病毒(PDCoV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪圆环病毒(PCV)阳性血清均无交叉反应,具有良好的敏感性和特异性。批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,具有较好的重复性。利用该方法和间接免疫荧光方法(IFA)分别对50份猪临床血清样品进行检测,结果显示二者的总符合率为98%。综上,本研究建立了一种基于SADS-CoV N蛋白的间接ELISA抗体检测方法,可用于临床SADS-CoV血清抗体检测以及流行病学的监测,对防控SADS-CoV的流行具有重要意义。

猪急性腹泻综合征冠状病毒病的研究进展

猪急性腹泻综合征冠状病毒病是2017年新发现的一种由猪肠道α冠状病毒(第5种猪冠状病毒)感染致哺乳仔猪急性腹泻和死亡的传染病,死亡率高达90%。猪肠道α冠状病毒(porcine enteric alphacoronavirus,PEAV)也称猪急性腹泻综合征冠状病毒(swine acute diarrhea syndrome coronavirus, SADS-CoV)或猪肠道甲型冠状病毒(Swine enteric alphacoronavirus, SeA-CoV),该病毒细胞嗜性较强,可侵袭多种啮齿动物源和原代人肠细胞和肺细胞,存在人兽共患病传播风险。目前尚无针对该病毒的商业化疫苗和抗病毒药物。本文通过对猪急性腹泻综合征冠状病毒病的病原学、流行病学、临床症状、病理变化、检测方法及防治策略等方面进行综述,以期为后续相关研究提供参考。

静脉-静脉体外膜肺氧合支持下影响新型冠状病毒相关急性呼吸窘迫综合征患者预后的因素

目的研究静脉-静脉体外膜肺氧合(V-V ECMO)治疗新型冠状病毒感染(COVID-19)导致的重度急性呼吸窘迫综合征(ARDS)时患者预后的影响因素。方法回顾性分析,纳入2022年12月10日至2023年4月30日在郑州大学第二附属医院ICU接受V-V ECMO治疗的57例COVID-19导致的重度ARDS患者,并根据出院30 d后的存活情况将患者分为死亡组和幸存组。比较两组基础信息、临床指标、药物疗程以及与COVID-19关联紧密的高血压、糖尿病、炎症反应等,筛选出影响预后和存活率的可能因素,通过受试者工作特征(ROC)曲线和logistic多因素分析,初步明确新冠重度ARDS患者接受V-V ECMO治疗时影响预后的因素。结果57例患者中,幸存组19例(33.3%),死亡组38例(66.7%)。V-V ECMO使用48 h后,两组乳酸(Lac)、白介素-6(IL-6)以及抗菌药物使用种类比较差异有统计学意义(P<0.05),糖尿病和高血压对患者的存活率无影响,但糖尿病对V-V ECMO治疗后患者的二氧化碳分压有影响(P<0.05)。结论抗菌药物使用种类和糖尿病对COVID-19导致的重度ARDS患者接受V-V ECMO治疗的效果有一定影响,Lac、IL-6是影响患者预后的危险因素。

布地奈德/福莫特罗粉吸入剂联合复方甲氧那明治疗急性呼吸综合征冠状病毒-2感染亚急性咳嗽的临床疗效分析

目的回顾性分析信必可都保[布地奈德/福莫特罗粉吸入剂(Ⅰ)=320μg/9.0μg]联合阿斯美(复方甲氧那明)治疗急性呼吸综合征冠状病毒-2(SARS-COV-2)感染后亚急性咳嗽的临床疗效。方法收集2022年12月—2023年6月确诊的SARS-COV-2(Omicron BA.5.2、BF.7感染)亚急性咳嗽患者220例,分为观察组和对照组,每组各110例。观察组给予信必可都保吸入(1吸/次,2次/日),阿斯美口服(2粒/次,3次/日);对照组给予咳必清、酮替芬和孟鲁司特钠三联药物常规止咳、平喘对症治疗。采用咳嗽程度评分表(CET)观察并记录治疗后第3、5、7天咳嗽缓解情况,检测呼出气一氧化氮(FeNO),并进行疗效评价。结果治疗后第3、5、7天患者的CET评分、FeNO值均较前下降。观察组临床控制86例,显效11例,有效9例,无效4例,总有效率96%;对照组临床控制68例,显效17例,有效13例,无效12例,总有效率89%。2组的总有效率比较,差别有统计学意义(P<0.05)。结论信必可都保和阿斯美联合治疗SARS-COV-2(Omicron BA.5.2、BF.7感染)亚急性咳嗽,可明显改善患者的咳嗽症状。

严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染后突发性耳聋发生机制研究进展

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒感染(COVID-19)传播迅速,影响范围广,除了肺部并发症外还包括突发性耳聋。然而,其病理机制尚不清楚。可能的机制包括:病毒直接侵入并损伤耳蜗神经或耳蜗组织;耳蜗微血管血栓形成并导致耳蜗血管阻塞;病毒引起细胞因子风暴,导致耳蜗炎症。研究SARS-CoV-2作为突发性感音神经性听力损失病因的作用,可能为疾病的早期诊断、制定治疗策略以最大限度地提高临床恢复和避免不良反应提供机会。

严重急性呼吸道综合征冠状病毒Spike蛋白抗原特异性的临床应用研究

目的探讨严重急性呼吸道综合征(SARS)患者的SARS冠状病毒(SARSCoV)抗体产生情况以及SARSCoVSpike蛋白抗原的特异性。方法运用酶联免疫法(ELISA)和蛋白质印迹法(WesternBlotting)检测95例SARS患者体内抗体的产生情况和验证病毒Spike蛋白抗原的特异性。结果95例SARS患者血清抗体结果中,大部分患者出现抗体阳性,抗SARSCoVIgM总阳性率为91.6%(87/95),抗SARSCoVIgG总阳性率为97.9%(93/95);高暴露人群组和正常对照组的抗SARSCoVIgM和抗SARSCoVIgG阳性率为0%。经过携带Spikeprotein基因的重组病毒AdSn感染COS1细胞后表达的S蛋白抗原,使用SARS患者抗血清能够检测出特异性蛋白条带;重组病毒感染CNE2细胞后,表达的S蛋白抗原,能够通过不同患者抗血清同时检测到相应的特异性抗原蛋白。结论SARS患者感染SARSCoV后,体内可产生相应抗体;利用SARS患者所产生特异性抗血清,可以检测出克隆SARSCoV的Spike基因所表达的Spike蛋白。

两种酶联免疫吸附试验方法检测人血清抗严重急性呼吸道综合征冠状病毒IgG抗体

目的 为观测不同人群 ,尤其是≤ 1 4岁正常儿童血清中抗严重急性呼吸道综合征 (SevereAcuteRespiratorySyndrome,SARS)冠状病毒IgG抗体的存在状况和分布特征 ,印证分析不同酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法的可靠性和一致程度 ,评估特异性IgG抗体检测在诊断SARS中的实用价值。 方法 分别用以全病毒裂解液或纯化N蛋白为抗原的ELISA方法 ,检测 70例SARS患者、55名 3～ 6月龄正常婴儿、2 97名≤ 1 4岁正常儿童、1 56名≥ 1 5岁正常人的血清特异性抗体。以敏感性、特异性、阳性预测值 (PPV)、阴性预测值 (NPV)、准确度评价其诊断价值 ,以Kappa值和卡方值评价检测结果的一致性及差异。结果 全病毒裂解液试剂检测SARS患者、3～ 6月龄正常婴儿、≤ 1 4岁正常儿童、≥ 1 5岁正常人血清 ,抗体阳性率分别为 75.71 %、36 36%、2 3.91 %、1 .92 %。≤ 1 4岁正常儿童按 <1、1、2、3、4、5～ 9、1 0～ 1 4岁组划分 ,抗体阳性率依次为 51.1 6%、41. 86%、30 . 95%、1 8.60 %、1 6.67%、2.38%、4.76% ,随年龄增长阳性率呈下降趋势。以纯化N蛋白为抗原的试剂检测上述血清 ,除SARS患者抗体阳性率为 80 .0 0 %外 ,正常人群血清抗体全部阴性。两种方法检测≥ 1 5岁人群 (含正常人群和SARS患者 )血清 ,检测结果高度一致 。

严重急性呼吸道综合征相关冠状病毒疫苗的研制现状

新型冠状病毒作为严重急性呼吸道综合征暴发流行的病原体(SARS-CoV),目前仍无抗SARS-CoV的特效药物,因此疫苗的研究为预防SARS再次流行具有重大意义.目前研制的SARS-CoV疫苗有SARS-CoV灭活疫苗、SARS-CoV DNA疫苗、SARS-CoV腺病毒载体疫苗、重组SARS-CoV刺突蛋白-减毒痘苗病毒等.体外及体内动物攻毒保护实验结果显示,所研制的SARS疫苗均可诱生体液和细胞免疫应答,并对免疫动物具有保护性作用.本文将近期有关研究结果作了综述.

严重急性呼吸道综合征冠状病毒2全长cDNA的构建新途径

目的构建严重急性呼吸道综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus-2,SARS-CoV-2)全长cDNA,为SARS-CoV-2基因功能、药物筛选和安全减毒灭活疫苗株的研究提供重要工具,也为大基因组RNA病毒cDNA的构建提供新的方法。方法结合In-Fusion、Gibson Assembly以及Recombineering技术对SARS-CoV-2基因组进行全长cDNA克隆的从头合成。首先将SARS-CoV-2全长基因组分17个片段进行扩增,利用In-Fusion试剂盒将这些小片段连接、克隆,以获得插入序列约5000 bp的6个pUC19重组质粒;然后利用Gibson Assembly试剂盒将30000 bp SARS-CoV-2全长基因组分3次逐步连接至pBR322载体,每次连接10000 bp,得到含30000 bp SARSCoV-2全长cDNA的重组质粒;最后利用Recombineering技术修复逐步连接过程中通过NotⅠ位点引入的两处多余GC碱基。结果构建了SARS-CoV-2 WIV04株的全长cDNA,插入基因组的重组质粒经酶切和测序鉴定正确。为区别于野生型毒株SARS-CoV-2 WIV04,分别在全长cDNA的8791 nt和12655 nt进行了同义突变,引入了两处BglⅠ酶切位点,以此作为遗传标记。结论成功构建了SARS-CoV-2全长cDNA,为SARS-CoV-2基础研究和应用研究提供了技术平台。

猪急性腹泻综合征冠状病毒S蛋白多克隆抗体的制备及在检测该病毒感染中的应用

为制备猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)纤突蛋白(S)的多克隆抗体(PAb),本研究经PCR扩增SADS-Co V S蛋白S1亚基C端结构域(S1-CTD)基因片段(384 bp),并将其克隆至原核表达载体p GEX-6p-1中,构建重组质粒p GEX-6p-1-S1-CTD,经双酶切和测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG诱导表达,通过western blot鉴定重组S1-CTD蛋白(rS1-CTD)的表达及反应原性。结果显示,r S1-CTD以包涵体的形式表达,在40 ku处出现特异性条带。诱导表达后的r S1-CTD经不同浓度尿素重悬并超声离心,SDS-PAGE检测后切胶纯化,得到纯化的重组蛋白。利用BCA试剂盒测得蛋白的浓度为33μg/m L。将该重组蛋白乳化后经3次免疫新西兰大白兔,并在3免一周后采血,分离血清获得S1-CTD蛋白PAb。将SADS-Co V感染Vero E6细胞24 h后,以获得的兔PAb为一抗,分别采用western blot和间接免疫荧光试验(IFA)检测该PAb的反应原性。Western blot结果显示,在约250 ku处出现特异性条带,而阴性对照组无该条带;IFA结果显示,SADS-Co V感染的细胞中出现绿色荧光,而阴性对照细胞无绿色荧光。将SADS-Co V感染仔猪的回肠组织制备病理切片,以制备的PAb为一抗,通过免疫组织化学(IHC)检测SADS-Co V的抗原。结果显示,该组织切片中出现棕色阳性信号,而阴性对照仔猪回肠组织切片则无该棕色信号。表明该PAb可与感染SADS-Co V的仔猪回肠组织中的相应抗原发生特异性免疫反应。综上所述,本实验制备的S1-CTD蛋白PAb具有良好的反应原性和免疫原性,可以用于western blot、IFA、IHC检测体内外SADS-Co V的感染,为后续SADS-Co V检测方法的建立及S蛋白生物学功能的研究奠定基础。

猪急性腹泻综合征冠状病毒诱导细胞自噬并增强病毒复制的研究

为研究猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)感染细胞是否诱导自噬及自噬对病毒复制的影响,本研究将SADS-CoV(MOI 0.1)接种Vero E6细胞培养36 h后,经透射电子显微镜观察可见,SADS-CoV感染的细胞中出现了包裹胞浆的自噬体样双层膜结构,证实SADS-CoV可以诱导Vero E6细胞发生自噬。构建pEGFP-LC3的真核表达质粒并经双酶切及测序鉴定正确后转染Vero E6细胞,24 h后以SADS-CoV感染,24 h后经激光共聚焦显微镜观察可见,与阴性对照组细胞相比,感染SADS-CoV的细胞出现绿色荧光的点状聚集。进一步将SADS-CoV(MOI 0.1)感染Vero E6细胞不同时间后通过western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和p62表达水平的变化,结果显示,与阴性对照组相比,SADS-CoV感染组LC3-Ⅱ的表达水平升高,LC3-Ⅱ/GAPDH比值呈上升趋势,而p62蛋白表达水平则显著降低(P<0.05),表明SADS-CoV感染能够诱导Vero E6细胞产生完整的自噬应答。为了探究自噬对病毒复制的影响,本研究分别采用自噬抑制剂3-MA和自噬诱导剂Rapamycin处理Vero E6细胞后以SADS-CoV感染,于感染后不同时间收获细胞,通过western blot和病毒滴度(TCID_(50))测定检测SADS-CoV N蛋白表达水平的变化。结果显示,与仅感染病毒的对照组相比,采用3-MA处理Vero E6细胞后SADS-CoV N蛋白的表达水平及TCID_(50)均显著降低(P<0.05),而采用Rapamycin处理后SADS-CoV N蛋白的表达水平及TCID_(50)则均显著升高(P<0.05)。针对ATG5基因设计3条特异性的ATG5 si RNA(siATG5-1/2/3),将干扰效率较好的siATG5-1转染Vero E6细胞后再以SADS-CoV感染,24 h后检测病毒滴度并利用western blot检测SADS-CoV N蛋白表达水平的变化。结果显示,与未转染siATG5的3组阴性细胞相比,转染细胞中SADS-CoV N蛋白的表达水平及病毒滴度均显著降低(P<0.05)。本研究首次表明SADS-CoV感染可以诱导宿主细胞自噬并促进病毒的复制,该结果为深入研究SADS-CoV感染与其致病机理以及防控该病毒的感染奠定了基础。

猪急性腹泻综合征冠状病毒的流行、致病机制及防控研究进展

目前发现的猪肠道冠状病毒主要有猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪三角冠状病毒(PDCoV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)4种。其中SADS-CoV是2017年首次在我国广东省发现的一种猪肠道冠状病毒,该病毒感染后可致小于5日龄仔猪出现严重急性腹泻、急性呕吐、脱水等症状,死亡率较高,给养猪业造成巨大的经济损失。目前还未见针对SADS-CoV的有效药物和疫苗产品上市,从病毒传播、致病机制、诊断及预防控制等方面综述SADS-CoV的研究进展,期望为SADS-CoV的防控提供参考。

猪急性腹泻综合征冠状病毒S1蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)S1蛋白抗体的间接ELISA检测方法,本研究通过构建重组真核分泌型表达质粒p CAGGS-S1-His并转染HEK293F悬浮细胞进行可溶性表达S1蛋白。转染重组质粒5 d后的细胞上清利用HisTrapTMExcel亲和层析柱纯化,浓缩后的蛋白经SDS-PAGE、western blot鉴定显示获得了分子量约为130 ku且大于理论大小的重组S1蛋白,表明该蛋白为分泌表达且具有良好的翻译后修饰。利用获得的重组S1蛋白作为包被抗原,通过优化反应条件,初步建立了SADS-CoV S1蛋白抗体的间接ELISA检测方法。该方法与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)阳性血清均无交叉反应,仅与SADS-CoV阳性血清反应,表明该方法特异性较强;该方法检测SADS-CoV阳性血清,当稀释至1:3 200时仍为阳性,表明该方法具有较高的敏感性;对4份阳性血清的批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,表明该方法具有良好的重复性和稳定性;利用该方法和间接免疫荧光试验(IFA)对50份临床样品检测,结果显示该间接ELISA检测到9份阳性样品,41份阴性样品;IFA检出5份阳性样品,45份阴性样品,二者的总符合率为92%。综上表明,本研究建立的间接ELISA检测方法能够特异、灵敏地检测SADS-CoV S1蛋白抗体,可以用于SADS-CoV灭活疫苗的免疫效果评价以及该病原的血清学流行病学调查和免疫水平监测,为SADS-CoV所致疫病的鉴别诊断和防控奠定基础。

新型冠状病毒感染对急性冠状动脉综合征患者住院期间主要不良心血管事件的影响

目的探究新型冠状病毒感染对于急性冠状动脉综合征(ACS)患者住院期间主要不良心血管事件(MACE)的影响。方法对2022年12月至2023年1月首都医科大学附属北京安贞医院收治的因ACS入院的147例患者的临床资料进行分析。按照是否感染新型冠状病毒将患者分为合并新型冠状病毒感染组(49例)和未合并新型冠状病毒感染组(98例),比较2组的临床特征以及住院期间MACE的发生情况,采用Cox回归模型分析新型冠状病毒感染是否与患者住院期间发生MACE有独立关联。结果ACS合并新型冠状病毒感染组患者的年龄、女性比例、D-二聚体水平、住院时间大于/高于/长于未合并新型冠状病毒感染组,淋巴细胞计数和入院后行血运重建比例低于未合并新型冠状病毒感染组(均P<0.05)。合并新型冠状病毒感染组住院期间MACE的发生率显著高于未合并新型冠状病毒感染组[32.7%(16/49)比11.2%(11/98)](P=0.002)。多因素Cox回归分析显示,新型冠状病毒感染是ACS患者住院期间MACE的独立危险因素(风险比=3.217,95%置信区间:1.151~8.987,P=0.031)。结论新型冠状病毒感染可增加ACS患者住院期间MACE的发生率。

靶向严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2的人工microRNAs设计与思考

动植物人工miRNAs(artificial miRNAs,amiRNAs)在抗病毒感染中发挥重要作用。然而,有关amiRNAs靶向抑制重症急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的相关研究未见报道。目的:本研究旨在设计靶向SARS-CoV-2的amiRNAs,进一步分析amiRNAs对不同变异株的匹配程度。方法:利用Invitrogen Block-iT RNAi Designer成功设计靶向SARS-CoV-2的amiRNAs。结果:分别命名为amiR-Cov23utr-1、2、3、4;其中amiR-Cov23utr-1、3和4在Omicron BA.5/2022中靶向区域序列十分保守;amiR-Cov23utr-2在Omicron BA.5/2022中的靶点缺失。结论:本研初步设计和分析了靶向SARS-CoV-2的amiRNAs,为后续深入研究amiRNAs抗SARS-CoV-2感染提供了重要基础资料。

严重急性呼吸综合征(SARS)患者不同组织中冠状病毒的分离和鉴定

严重急性呼吸综合征(SARS)自2002年11月在中国广东爆发后,已迅速蔓延成为全球性传染疾患。为了了解SARS冠状病毒的特征,对先前SARS冠状病毒PCR检测呈阳性的来自广东的3份尸检肺组织标本、2份尸检脾组织标本,来自北京的2份咽拭子标本和1份血清标本,利用10种不同的细胞系分离病毒。结果显示,上述标本在感染细胞后,分别可在293、Vero-E6、Vero、RD和HeLa细胞系中产生细胞病变(CPE)。不同标本在上述细胞系中致CPE的能力不同,但CPE出现的时间和病变形态学特征无显著性差异。以恢复期SARS病人血清为抗体,用间接免疫荧光法对感染后细胞培养的检测,冠状病毒RT-PCR对感染后细胞RNA的检测,初步证明分离的病毒为冠状病毒。结果再次证明冠状病毒为SARS的病原,它具有较广泛的器官分布和细胞感染能力。血清中SARS冠状病毒的分离,高度提示在SARS发病过程中存在有病毒血症。