甲基转移酶样蛋白14对急性早幼粒白血病细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的调节作用

目的 探讨过表达和敲低甲基转移酶样蛋白14(METTL14)对急性早幼粒白血病细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的调节作用。方法 取人急性早幼粒白血病细胞NB4进行培养,分为过表达对照组、过表达组、干扰对照组、干扰组,过表达对照组及过表达组分别转染空白质粒和METTL14质粒,干扰对照组和干扰组分别转染si-NC和si-METTL14质粒。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,Dot Blotting法检测细胞N-6甲基腺苷(m6A)修饰水平。结果 与过表达对照组相比,过表达组细胞增殖率升高、细胞凋亡率降低、细胞迁移数、细胞侵袭数升高,NB4细胞m6A修饰水平提高(P均<0.05);与干扰对照组相比,干扰组细胞增殖率降低、细胞凋亡率增加、细胞迁移数、细胞侵袭数降低,NB4细胞m6A修饰水平降低(P均<0.05)。结论 METTL14可促进NB4细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与提高m6A修饰水平有关。

淫羊藿甙对急性早幼粒白血病细胞端粒酶活性的影响

目的 :探讨淫羊藿甙 (ICA)对急性早幼粒白血病细胞端粒酶活性的影响。方法 :采用ICA与全反式维甲酸 (ATRA)对比试验 ,观察ICA对白血病细胞端粒酶活性及增殖分化的影响。结果 :ICA可明显抑制端粒酶活性 ,对白血病细胞均有较明显的诱导分化和抑制增殖作用 ,且与ATRA合用可产生明显的协同效应。结论 :ICA具有抑制急性早幼粒白血病细胞端粒酶活性的作用。

全反式维甲酸诱导人急性早幼粒白血病HL-60细胞分化的机制(英文)

目的 研究全反式维甲酸诱导人急性早幼粒白血病HL 6 0细胞分化机制。方法 用流式细胞仪分析维甲酸对HL 6 0细胞周期变化的影响 ,用自制的含 9984个已知基因和EST的高密度基因芯片检测HL 6 0细胞在维甲酸诱导作用下不同时期的基因表达变化。结果 HL 6 0细胞在 1μmol·L- 1 维甲酸持续作用 2 ,4和 6d时 ,流式细胞仪结果显示 4 8%～ 73%细胞阻断在G0 G1 期 ;基因表达谱分析发现 ,黏附分子、组织重建蛋白、转运蛋白、核蛋白体蛋白和涉及氧化酶激活途径的基因表达明显升高。结论 基因表达谱的研究结果表明 ,维甲酸作用HL 6 0细胞与氧化酶激活途径及组织重建蛋白的表达相关联 ,并揭示了一些已知和未知功能的基因在HL 6 0细胞分化与细胞凋亡过程中的作用。

毫米波辐射对急性早幼粒白血病细胞增殖及分化的影响

目的：探讨毫米波（millimeter wave）对急性早幼粒白血病细胞增殖及分化的影响。方法：将体外培养的NB4细胞株接种于培养瓶，24小时后应用波长7．1mm、功率密度分别为1mW／cm2和5mW／cm2的毫米波辐射培养细胞30分钟，连续4天，每天观察细胞形态及数量改变，流式细胞术测定细胞增殖分化相关基因p53、p21、c－myc、c－fos及TGF－β1表达的改变。结果：1mW／cm2和5mW／cm2毫米波辐射能明显抑制NB4细胞增殖，辐射4天后的抑制率分别为35．6％和25．8％，1mW／cm2毫米波可诱导NB4细胞向终末细胞分化，诱导分化率为45．0％，主要为中、晚幼粒细胞；流式细胞术分析发现，经1mW／cm2毫米波辐射后，NB4细胞增殖分化相关基因p53、p21、c－fos表达增加，而c－myc和TGF－β1表达降低。结论：毫米波辐射能抑制体外培养的NB4细胞增殖并诱导其分化，作用机制可能与调控细胞增殖、分化相关基因的表达有关。

转录因子NF-κB对急性早幼粒白血病细胞程序性死亡的调节

目的 :探讨转录因子NF κB对砷制剂诱导下NB4细胞程序性死亡的调控作用。 方法 :将NB4细胞与不同浓度的三氧化二砷共同孵育 ,在不同时间用流式细胞仪检测胞质内转录因子NF κB的表达 ,同时作细胞周期分析、PI和HO双染以及DNA梯度 ,以鉴定As2 O3的致程序性死亡的作用。 结果 :NB4细胞在 1μmol/L、2 μmol/LAs2 O3的诱导下 ,在 16～ 2 4h的期间内均有明显的程序性死亡现象。NF κB在 6～ 16h期间的对照组和加药组 ( 1μmol/L的As2 O3)均有表达 ,对照组中 12h后表达明显下降 (P <0 .0 5 ) ,加药组较对照组也明显减低 (P <0 .0 5 ) ,但不存在时间依从性。 结论 :As2 O3可诱导早幼粒细胞程序性死亡 ,在这一过程中 ,NF

人参皂甙Rb1对耐长春新碱的急性早幼粒白血病(HL60/VCR)细胞多药耐药逆转的实验研究

目的:研究中药人参皂甙Rb1在多药耐药(MDR)逆转中的作用。方法:培养细胞,将细胞分为对照组和实验组,阳性对照组给异搏定,阴性对照组不给药,实验组给人参皂甙Rb1。通过细胞毒试验、药敏试验、RT-PCR方法和流式细胞术了解中药人参皂甙Rb1的毒性、细胞对药物的敏感性及在细胞水平和分子水平对多药耐药的逆转作用。结果:Rb180μM时,细胞存活95.47%,100μM时存活81.43%,对照组96.9%,因此选择80μM为实验剂量。在药敏实验中,80μM人参皂甙Rb1组IC50约在0.49μg/ml,不加药组IC50约在1.3μg/ml,用药前细胞耐药倍数为335.8倍,用药后耐药倍数为126倍,人参皂甙Rb1的逆转倍数为2.65倍,小于其耐药倍数,为部分逆转。RT-PCR结果显示,对照组和给药组均有明显的扩增片段区带,流式结果显示,破膜前给药组细胞膜表面的Pgp含量明显低于对照组,而破膜后由于细胞内的Pgp释放出来,则二组的表达差异不大。结论:总之本文通过一定的检测技术,主要说明可以通过人参皂甙Rb1抑制Pgp的功能,从而提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,这对于今后研究和发展肿瘤治疗来说都有着十分重要的意义。

鲍氏威酸诱导急性早幼粒白血病细胞分化与PML/RARα关系的研究

目的:研究鲍氏威酸(BC4)诱导不同融合基因PML/RARα基因型的急性早幼粒白血病(APL)细胞分化的能力及对APL细胞分化相关基因c-myc的表达影响,探讨鲍氏威酸诱导分化作用的机制。方法:采用RT-PCR检测APL细胞PML/RARα的基因型;运用骨髓干、祖细胞集落培养技术分析各基因型APL细胞分别在生理盐水(NS)对照组,鲍氏威酸(BC4)组,全反式维甲酸(ATRA)组培养体系中增殖与分化能力,测定各组集落与丛的形成率,形态分化率,NBT还原率以及粒细胞吞噬率,培养前后各组APL细胞c-myc表达阳性率。结果:与NS对照比较,BC4和ATRA均使PML-RARα+组APL细胞丛形成率明显增高(P<0.01),而集落形成率无明显变化(P>0.05),3项细胞分化指标增高(0.01<P<0.05),c-myc表达阳性率降低(P<0.05);BC4对PML/RARα+(L型)诱导分化作用强于PML-RARα+(S型)APL,BC4对部分ATRA治疗后复发耐药病例有诱导分化能力。BC4及ATRA对PML/RARα-APL细胞的各项诱导分化指标无明显改变。结论:BC4对APL具有诱导分化作用,下调c-myc基因表达,其诱导分化能力与PML/RARα-基因型有关,并能诱导部分ATRA耐药细胞分化。

急性早幼粒白血病(APL)病人服用硫化砷后的血尿发砷测定

目的 :通过对急性早幼粒白血病 (APL)病人服用硫化砷后的血、尿及发中砷浓度进行测定 ,对急性早幼粒白血病人服用硫化砷后体内砷吸收及蓄积水平进行评估。方法 :氢化物 -原子吸收法。结果 :服药期病例服用硫化砷 1 .5 g以上 ,服药 8d以上 ,血砷平均水平为 5 3 .0±2 2 .5 (n=48) μg/L(1 4.7～ 1 40 .4μg/L) ,尿砷平均水平为 1 73 3 .6± 1 3 6 5 .9(n=44) μg/L(3 92 .6～ 6 847.1μg/L) ,尿砷排出量为 3 .93± 2 .44(n=3 2 ) mg/d(1 .1 4～ 1 1 .8mg/d)。停药期病例 ,停药 8d以上 ,血砷平均水平为 1 5 .3± 8.8(n=5 7)μg/L(2 .0～ 43 .5μg/L) ,尿砷平均水平为 2 3 2 .9± 2 5 7.3 (n=5 2 )μg/L (8.8～ 1 1 6 0 .7μg/L) ,尿砷排出量为 0 .3 3± 0 .3 0 (n=3 2 )mg/d(0 .0 1 9～ 1 .3 mg/d)。服药期病例血砷水平、尿砷水平及尿砷排出量水平均明显高于停药期病例 (P<0 .0 1 )。结论 :服用硫化砷 1 .5 g以上 ,服药 8d以上的服药期病例砷的吸收量为5 .6 1± 3 .48mg/d,停药

硒化壳聚糖诱导急性早幼粒白血病细胞凋亡的研究

目的研究硒化壳聚糖对体外培养的NB4细胞增殖和凋亡的影响,探讨这种作用与端粒酶活性和survivin蛋白的关系。方法MTT法检测细胞增殖;细胞形态学观察和流式细胞仪检测细胞凋亡;PCR-ELISA法检测端粒酶活性;western blot法检测survivin蛋白含量。结果50～200 mg/L硒化壳聚糖可时间剂量依赖性地抑制NB4细胞增殖,诱导其凋亡,降低端粒酶活性和下调survivin蛋白含量。结论硒化壳聚糖可通过抑制端粒酶活性,下调survivin蛋白含量,诱导细胞凋亡从而抑制体外培养的NB4细胞增殖。

硫化砷对急性早幼粒白血病细胞PNAS-2基因表达的影响

目的探讨硫化砷诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞凋亡的分子机制。方法应用基因表达谱芯片、RTPCR技术,检测硫化砷作用前后NB4细胞、APL原代细胞PNAS-2基因表达的变化。结果基因表达谱芯片杂交显示,硫化砷作用于NB4细胞后,PNAS-2基因表达下调;RTPCR结果发现,NB4细胞在硫化砷作用后PNAS-2表达有明显下调,并呈时间依赖性;APL原代细胞经硫化砷作用后,PNAS-2表达也呈下降趋势。结论硫化砷能够下调PNAS2基因在NB4细胞株和APL原代细胞中的表达,推测PNAS-2基因可能是硫化砷治疗APL的靶基因之一。

淫羊藿苷对急性早幼粒白血病细胞体内外效应的研究

目的 :探讨淫羊藿苷 (ICA)对急性早幼粒白血病细胞的诱导分化作用。方法 :采用ICA与全反式维甲酸 (ATRA)对比试验 ,观察ICA在体外及小鼠体内对白血病细胞增殖分化的影响。结果 :ICA在体内外对白血病细胞均有较明显的诱导分化和抑制增殖作用 ,且与ATRA合用可产生明显的协同效应。结论

姜黄素对急性早幼粒白血病细胞增殖分化及cofilin表达的影响

目的探讨姜黄素对急性早幼粒白血病HL-60细胞(以下简称"HL-60细胞")增殖、分化及丝切蛋白(cofilin)表达的影响。方法以不同浓度(6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L)姜黄素作用于HL-60细胞,同时设立空白对照组。作用24 h后,采用MTT法检测姜黄素对细胞增殖能力的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态改变,流式细胞仪检测细胞周期变化,双向电泳与质谱分析检测cofilin蛋白表达。结果不同浓度姜黄素作用24 h后,空白对照组细胞生长抑制率为0,6.25μmol/L组、12.5μmol/L组和25μmol/L组分别为(6.46±0.73)%、(9.79±1.36)%和(79.48±7.99)%,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),且随药物浓度递增,抑制作用逐渐增强,呈浓度依赖性(P<0.05);倒置相差显微镜观察可见典型细胞生长阻滞的形态改变;流式细胞仪检测发现当姜黄素浓度为12.5μmol/L时,细胞阻滞在G2/M期;双向电泳与质谱分析发现姜黄素可下调HL-60细胞cofilin的表达。结论姜黄素可在体外抑制急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖,具有浓度依赖性,且在一定血药浓度时可使细胞周期发生阻滞,从而阻滞细胞分化,其作用机制可能与姜黄素下调细胞内cofilin的表达有关。

急性早幼粒白血病的细胞形态学与免疫表型研究

目的研究急性早幼粒白血病细胞(Acute promyelocytic leukemia,APL)形态学和免疫表型的相关性,为进一步提高APL患者诊断率和优化分型提供依据。方法选取2015年8月至2016年8月某医院收治的首次确诊为APL的80例患者为研究对象。采用骨髓细胞涂片镜检进行FAB分型,以及流式细胞术(Flow cytometery,FCM)对患者骨髓细胞进行免疫表型分析。结果 80例APL患者经FAB分型,确诊为M3a型47例,M3b型33例。两种亚型患者的Hb、RBC均值均低于正常;M3a型患者的Hb、RBC、BPC、WBC均显著低于M3b型,早幼粒细胞占比显著高于M3b型,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。CD13、CD33、CD117、CD9、CD34抗原在APL患者中表型均为阳性高表达,M3a型患者中CD9阳性率(68.08%)明显低于M3b型患者(90.09%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 APL患者骨髓细胞免疫表型有一定的特征性,值得进一步深入研究。其中CD9与APL患者FAB分型相关。

毫米波辐射对人急性早幼粒白血病细胞诱导凋亡的作用

目的 探讨毫米波对人急性早幼粒白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法 以波长7.1mm ,频率 42 .2GHz的毫米波辐射体外培养的NB4 细胞 ,光镜及电镜观察细胞形态改变 ,生长曲线测定细胞生长及增殖情况 ,流式细胞仪 (FCM)检测细胞周期分布、细胞凋亡指数及凋亡相关基因表达的改变。结果 1mW /cm2 的毫米波辐射 ,每日 1次 ,30min ,可明显抑制NB4 细胞的生长 ,辐射第 3天细胞生长抑制率为 44 .1% ;光镜及电镜下可见凋亡细胞形态 ,FCM示G0 /G1期细胞及凋亡百分比增加 ;p2 1、p5 3、Bax和Fas表达增加 ,c-Myc、Bcl- 2表达下降。 5mW /cm2 的毫米波对细胞增殖及凋亡的影响却不明显 ,虽然 p5 3、Bax和Fas表达增加 ,Bcl- 2表达下降 ,但c-Myc和p2 1的表达却无改变。结论 1mW /cm2 毫米波辐射适当时间后能显著抑制NB4 细胞增殖、诱导细胞凋亡 ;其凋亡诱导机制可能与调控细胞凋亡相关基因的表达有关 ,其中对c -Myc蛋白表达的下调可能具有关键作用。

腺花素通过靶向Prx Ⅲ诱导急性早幼粒白血病细胞分化的研究

目的:探讨腺花素(Adenanthin)靶向PrxⅢ诱导急性早幼粒白血病(acute promyelocyticleukemia,APL)细胞分化。方法:以HL-60细胞株作为研究对象,取对数生长期细胞,分为对照、全反式维甲酸(ATRA)、Adenanthin和ATRA+Adenanthin,共4组。观察各组细胞形态的变化;用NBT还原实验分析细胞分化能力的变化;流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b的表达变化;采用Western blot检测PrxⅢ表达的变化。结果:Adenanthin可诱导HL-60细胞分化;ATRA+Adenanthin组NBT还原阳性率明显高于ATRA组和Adenanthin组(P<0.05);ATRA+Adenanthin组CD11b阳性细胞百分率(43.62%±1.38%)均明显高于Adenanthin组(28.15%±1.78%)、ATRA组(36.72%±1.33%)及空白对照组(7.99%±1.78%)(P<0.05);Adenanthin组PrxⅢ蛋白水平明显高于空白对照组及ATRA组(P<0.05)。结论:腺花素能协同ATRA使HL-60细胞分化成熟,其作用机制可能与调控PrxⅢ的表达有关。

临床护理路径在急性早幼粒白血病患者健康教育中的应用效果体会

目的:本文就临床护理路径在急性早幼粒白血病患者健康教育中的应用效果进行分析与探讨。方法:选择我院自2013年2月至2015年4月期间收治的急性早幼粒白血病患者66例,依据不同护理方法将其平均分为参照组(n=33)和实验组(n=33)。实验组患者予以临床护理路径,参照组患者予以基础护理,最后对比两组白血病患者的护理效果。结果:经不同方法护理后,实验组患者的感染发生率低于参照组,护理满意度同参照组进行比对也明显较高,统计学计算两组间的数据,结果呈正相关。结论:在急性早幼粒白血病患者的健康教育中实施临床护理路径,效果理想,具有较高的临床实践价值。

漆姑草醇提物对人急性早幼粒白血病细胞的诱导分化作用

目的:探讨漆姑草醇提物(HSJ)对人急性早幼粒白血病细胞(NB4)的诱导分化作用。方法:以NB4细胞为研究对象,设HSJ低(30μg/mL)、中(60μg/mL)、高(120μg/mL)剂量组和阴性对照组,共4组;HSJ作用NB4细胞48 h后,采用透射电镜法观察NB4细胞形态;硝基四唑氮(NBT)还原实验检测NB4细胞分化能力;流式细胞术检测NB4细胞周期分布;流式细胞术检测NB4细胞表面分化抗原CD14和CD11b细胞的表达率;实时荧光定量PCR(qPCR)检测c-fos mRNA表达;Western blot检测c-fos蛋白表达。结果:与对照组比较,3个不同剂量HSJ处理组NB4细胞胞核均缩小,胞浆呈空泡状,核形呈肾形或蚕豆形;各HSJ处理组NB4细胞的NBT还原率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);HSJ处理组NB4细胞中G2期细胞比例均高于对照组,而S期细胞比例均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);HSJ处理组CD14和CD11b阳性细胞表达率均高于对照组(P<0.05);HSJ低剂量组cfos mRNA和蛋白表达与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),HSJ中、高剂量组c-fos mRNA和蛋白表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:HSJ可能诱导NB4细胞向成熟粒细胞方向分化。

ASON对急性早幼粒白血病细胞株HL60/VCR多药耐药的逆转作用

目的:探讨反义寡核苷酸(ASON)对耐长春新碱的急性早幼粒白血病细胞(HL60/VCR)多药耐药(mdr1)的逆转效果。方法:以HL60/VCR细胞为模型,合成正、反义寡核苷酸作用于HL60/VCR细胞,采用RT-PCR方法、流式细胞术及药敏试验等观察细胞mdr-1mRNA表达、mdr-1基因产物P-糖蛋白(P-gp)的表达和对药物长春新碱(VCR)的敏感性。结果:反义寡核苷酸处理的细胞mdr-1mRNA表达、P-gp表达较正义组及HL60/VCR细胞显著降低,且可明显提高HL60/VCR细胞株对长春新碱的敏感性。结论:反义寡核苷酸具有逆转HL60/VCR细胞多药耐药的作用。其作用机制可能是抑制mdr1mRNA的转录,使P-gp的表达受到明显抑制,提高对长春新碱的敏感性。

以左下肢动脉栓塞为首发症状的急性早幼粒白血病1例

患者:男性,48岁,已婚,以左下肢痛10天为主诉于2002年5月27日人院.病程中无发热,出血,头晕,疲乏等症状.既往素健.体检:神志清,T 37.2℃,BP 13/80 mm Hg,皮肤无出血点,左足背皮肤苍白,第4、5趾皮肤呈黑色,趾间见一约2×2cm皮肤破溃,浅表淋巴结元肿大,胸骨无压痛,心肺无异常,肝脾未触及,左下肢无肿胀、压痛,足背动脉搏动减弱.实验室检查:尿常规正常.