急性高眼压模型大鼠视网膜病理变化及视网膜中胶质原纤维酸性蛋白表达变化动态观察

目的动态观察急性高眼压模型大鼠视网膜病理变化及视网膜中胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达变化,探讨急性高眼压大鼠视网膜的损伤情况。方法将24只SD大鼠随机分为正常对照组6只和急性高眼压模型组18只,正常对照组不做任何处理。急性高眼压模型组采用沿角巩膜缘结膜下环扎缝合法制备急性高眼压模型。急性高眼压模型组大鼠造模前、缝合即刻、缝合后1 h、缝合后1 d、缝合后2 d、缝合后3 d、缝合后4 d、缝合后5 d、缝合后7 d时,分别使用Tonolab眼压计监测眼压,正常对照组于同一时间点测量眼压。取急性高眼压模型组大鼠,于缝合后1 d、缝合后3 d、缝合后7 d时分别处死后,采用HE染色法观察视网膜组织形态变化,采用Thy-1免疫组化染色法测算视网膜神经节细胞数量,采用免疫组织化学染色法检测视网膜中GFAP蛋白。结果急性高眼压模型组大鼠缝合即刻、缝合后1 h、缝合后1 d、缝合后2 d眼压均高于正常对照组(P均<0.05),且急性高眼压模型组大鼠缝合即刻、缝合后1 h、缝合后1 d、缝合后2 d眼压均高于其他时间点眼压,呈下降趋势(P均<0.05)。正常对照组视网膜各层结构未发生明显改变,急性高眼压模型组大鼠缝合后1 d时视网膜神经纤维层出现水肿,大鼠缝合后3 d时视网膜水肿开始减轻,大鼠缝合后7 d时视网膜厚度及神经纤维层厚度均变薄。急性高眼压模型组大鼠缝合后3 d、7 d时视网膜神经节细胞数量均低于正常对照组和急性高眼压模型组大鼠缝合后1 d时(P均<0.05),且急性高眼压模型组大鼠缝合后7 d时视网膜神经节细胞数量低于缝合后3 d时(P均<0.05)。正常对照组、急性高眼压模型组大鼠缝合后1 d、3 d、7 d时大鼠视网膜中GFAP蛋白表达水平分别为65.762±16.246、115.777±18.780、145.056±9.777、169.751±10.378,两两相比,P均<0.05。结论急性高眼压模型大鼠视网膜发生病理变化,出现神经节细胞丢失,视网膜中GFAP蛋白表达升高。

MPTP诱导帕金森病小鼠亚急性与慢性模型的比较及评价

背景:1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的帕金森病小鼠模型是较为广泛使用的帕金森病动物模型之一,可以部分反映帕金森病的发病过程和病理特征。目的:利用MPTP诱导建立小鼠亚急性和慢性帕金森病模型,观察两种动物模型在行为学、组织病理学及相关蛋白水平变化上的异同及其与疾病临床症状的差异性。方法:C57BL/6J雄性小鼠40只随机分为4组:亚急性模型组小鼠腹腔注射MPTP,25 mg/kg,1次/d,连续注射7 d诱导亚急性模型;对照1组腹腔注射生理盐水;慢性模型组小鼠皮下注射MPTP(25 mg/kg)并腹腔注射丙磺舒(Probenecid,250 mg/kg),每间隔3.5 d注射1次,共10次诱导慢性模型;对照2组腹腔注射Probenecid溶剂。通过疲劳转棒实验与爬杆实验测试小鼠行为变化;利用免疫荧光染色检测脑黑质区酪氨酸羟化酶阳性细胞分布;采用免疫印迹法检测脑组织中酪氨酸羟化酶蛋白表达水平。研究所涉及的动物实验获得广东省实验动物监测所AAALAC认证机构动物实验动物使用与管理委员会(IACUC)批准[IACUC2020137]。结果与结论:①在亚急性小鼠模型中,疲劳转棒实验结果显示小鼠在加速转动的转棒上停留时间较对照1组显著降低(P<0.05);在爬杆实验中,小鼠从杆顶部运动到底部的时间较对照1组显著增加(P<0.05),但黑质区的酪氨酸羟化酶的阳性细胞数及酪氨酸羟化酶蛋白表达与对照1组相比无显著差异;②在慢性模型小鼠中,疲劳转棒的停留及爬杆实验总时间与对照2组相比均无显著差异,但黑质区酪氨酸羟化酶阳性细胞数量及酪氨酸羟化酶蛋白表达水平显著低于对照2组(P<0.05);③结果说明,MPTP诱导的亚急性和慢性帕金森小鼠模型由于造模方式的差异,分别在运动损伤和病理改变中表现出与人帕金森病部分相似的表型,提示在利用上述两种模型开展相关研究中,需根据实验目的选择适当的动物模型开展。

D-半乳糖亚急性衰老大鼠模型的建立及评价

目的建立D-半乳糖致大鼠亚急性衰老模型,对该模型进行探讨和评价。方法健康青年SD大鼠共60只,雌雄各半。分别分为2组,半乳糖组大鼠皮下每天注射半乳糖400 mg/kg,对照组每天注射等量生理盐水;老年鼠20只,雌雄各半,不做处理。实验开始后,每周记录体重变化情况,第7周末测试大鼠空间学习能力,第8周末测试大鼠空间记忆能力,计算大鼠胸腺、脾脏、睾丸和卵巢的脏器系数,测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。结果半乳糖注射4 w后,雄性大鼠的体重比对照组显著性降低(P<0.05),注射6 w后,体重差异非常显著性降低(P<0.01);半乳糖组雌雄大鼠的空间学习能力和记忆能力较对照组显著性降低(P<0.05),听力阈值显著增加(P<0.05),胸腺指数非常显著性降低(P<0.01),雄性大鼠睾丸系数显著性降低(P<0.05),血清SOD活性显著性降低(P<0.05),MDA含量显著性增高(P<0.05);其余实验结果组间比较差异没有显著性(P>0.05)。结论 D-半乳糖皮下注射8 w可以复制出与24月龄老年大鼠自然衰老程度相似的亚急性衰老模型,雄性大鼠优于雌性大鼠。

松花粉对亚急性衰老模型大鼠抗衰老作用的实验研究

目的通过对亚急性衰老大鼠模型血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化能力(T-AOC)的测定,观察大鼠精子数量、活动度和存活率的变化,从而探讨松花粉的抗衰老作用。方法D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老大鼠模型,采用生物化学方法检测了各实验组血清中SOD、MDA、GSH-Px和T-AOC的含量;观察了大鼠精子数量、活动度和存活率的变化。结果D-半乳糖所致亚急性衰老大鼠模型组SOD活力、GSH-Px活力和T-AOC均明显下降,MDA含量明显上升,与正常对照组比较差异显著(P<0.01);而经松花粉给药后SOD活力、GSH-Px活力和T-AOC三者均有显著提高,MDA含量明显下降;松花粉可提高D-半乳糖所致亚急性衰老大鼠精子的数量、活动度和存活率。结论松花粉可显著提高亚急性衰老大鼠抗氧自由基的能力,提高精子的数量、活动度和存活率,具有延缓衰老的作用。

小鼠常压急性缺氧模型装置及其应用

设计了一种建立小鼠常压急性缺氧模型的简易装置 ,并通过实验与常规缺氧模型装置进行了比较。结果表明 :此装置避免了高浓度CO2 或低气压对实验的影响 ,而且造价低廉 ,制作简单 ,使用方便 ,为完善缺氧的研究提供了一种手段。

虎杖苷降低急性血瘀模型大鼠血液粘度的研究

目的 :探讨虎杖苷降低急性血瘀模型大鼠血液粘度的作用。方法 :采用大鼠急性血瘀模型 ,以全血高切变率及低切变率粘度值、红细胞压积值、血小板粘附率、纤维蛋白原含量、血浆粘度为观察指标。结果 :虎杖苷可以显著降低模型大鼠的纤维蛋白原含量和血小板粘附率 ,其药效对血浆粘度降低所致全血粘度降低比其它原因所致更显著 ,它主要通过降低血浆粘度来降低全血粘度 ,从而显著改善大鼠血液循环。结论 :虎杖苷对血液粘度降低有重要应用价值。

何首乌苷对亚急性衰老模型小鼠学习记忆能力及海马内ChAT和AChE表达的影响

目的研究何首乌苷(Polygonum multiflorum Thunb.glycoside)对亚急性衰老模型小鼠学习记忆能力及海马组织内胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)表达的影响。方法采用AlCl_3(10mg·kg^(-1))灌胃及D-半乳糖(120 mg·kg^(-1))颈部皮下注射,持续处理60 d井通过跳台逃避行为学实验法筛选出亚急性衰老KM小鼠模型;将成功构建的衰老模型小鼠,雌雄各半,随机分为5组,包括:衰老模型组、雌二醇阳性对照组(10 mg·kg^(-1))和何首乌苷高、中、低剂量组(剂量分别为:80mg·kg^(-1)、40 mg·kg^(-1)、20 mg·kg^(-1));并选择健康小鼠作为正常对照组。治疗组小鼠在造模后15 d起分别颈部皮下注射高、中、低剂量的何首乌苷和雌二醇,持续给药15 d;衰老模型组和正常对照组小鼠分别给予等体积生理盐水。利用跳台逃避行为学实验法判断各组小鼠的学习记忆能力的变化和差异;利用Western Blot法检测小鼠海马体组织细胞内胆碱酯酶系统ChAT和AChE蛋白表达情况。结果与正常对照组比较,各实验组小鼠学习记忆能力显著下降,小鼠跳台回避错误次数显著增加(P<0.05);与衰老模型组比较,不同剂量何首乌苷组与雌二醇阳性对照组小鼠学习记忆能力明显改善,小鼠跳台回避错误次数明显减少(P<0.05或P<0.001),而不同剂量何首乌苷组与雌二醇阳性对照组小鼠跳台回避错误次数相近(P>0.05);与衰老模型组比较,不同剂量何首乌苷组与雌二醇阳性对照组小鼠海马体组织细胞内的ChAT表达量升高而AChE表达量下降,差异有统计学意义或高度统计学意义(P<0.05或P<0.001)。结论何首乌苷能有效改善亚急性衰老模型小鼠的学习记忆能力障碍,其机制与其使海马内组织细胞的ChAT表达升高和AChE表达降低,从而增加乙酰胆碱的含量以改善胆碱能系统损害有关。

茜草炭对急性血瘀模型大鼠抗凝血倾向的活性部位筛选

筛选茜草炭抗凝血作用有效部位,以急性血瘀模型大鼠为研究对象,云南白药为阳性药,除空白组外,其余各组均ih盐酸肾上腺素加冰水浴复制大鼠急性血瘀模型,考察茜草炭各极性部位对血瘀模型大鼠体外血栓、血液流变学、内/外源性凝血系统、血小板系统以及纤溶系统的影响。结果表明茜草炭正丁醇部位具有较强的抗凝血作用,可显著降低急性血瘀模型大鼠体外血栓干重,中、低切黏度,纤溶酶原激活物抑制物、血栓素含量,升高纤溶酶原激活物、6-酮-前列腺素含量(P<0.05或P<0.01)。其他极性部位对急性血瘀模型大鼠抗凝血作用不及正丁醇部位。结果显示正丁醇部位为茜草炭抗急性血瘀模型大鼠凝血倾向的活性部位。

葛根素注射液对急性血淤模型大鼠血液流变学及血小板聚集的影响

目的:观察葛根素注射液对急性血淤模型大鼠血小板聚集的影响。方法:给大鼠注射大剂量盐酸肾上腺素和施以冰水浸 泡,制作急性血淤模型大鼠;采用全自动血流变学仪测定不同切变率的全血粘度、血浆粘度、血液屈服应力和红细胞聚集指数等指 标;以比浊法测定各组的血小板最大聚集率。结果:急性血淤模型大鼠的血液流变性呈异常改变,血小板聚集明显增高,葛根素注 射液对异常改变的血流变学和血小板聚集均有明显的改善作用。结论:葛根素注射液可明显改善急性血淤模型大鼠的血液流变学 作用和抑制异常增高的血小板聚集功能,且呈现一定的量效关系。

不同产区连翘对小鼠急性炎症模型影响的研究

目的:探讨不同产区连翘对二甲苯引起的小鼠急性炎症模型的影响。方法:不同产区青翘、老翘药材水煎液和青翘挥发油灌胃给药5 d,末次灌胃30 min后,小鼠右耳外侧涂抹二甲苯造成急性炎症模型,涂抹二甲苯1 h后脱颈椎处死,打下双侧耳片,称取质量,比较不同产区青翘、老翘药材水煎液和青翘挥发油对小鼠耳廓肿胀的抑制作用。结果:不同产区的连翘均具有一定的抗炎活性,其中山西太行山区域青翘的抗炎作用最好;伏牛山区域老翘次之;三个区域的挥发油抗炎作用相似;河南南阳、三门峡、陕西商洛等地区的青翘和山西太行山区域的老翘抗炎活性相似,但略低于挥发油;伏牛山区域青翘和河南南阳地区、三门峡地区、陕西商洛地区等区域老翘抗炎作用不明显。结论:不同产区连翘对二甲苯引起的小鼠急性炎症模型的影响存在差异。

戊四氮急性癫痫模型齿状回分子层突触的可塑性变化

目的 :探讨戊四氮 ( pentetrazole,PTZ)急性癫痫模型大鼠齿状回分子层突触的可塑性变化。 方法 :采用PTZ诱发大鼠急性癫痫发作 ,采用透射电镜观察 ,对癫痫大鼠海马齿状回分子层内突触的密度、不同形式突触连接面的数量变化进行了研究。结果 :( 1 )PTZ后 3d ,大鼠海马齿状回分子层内突触密度明显下降 ,PTZ后 7d、1 4d ,突触密度则恢复到与对照组相似的水平。 ( 2 )与对照组及PTZ后 3d相比 ,PTZ后 7d ,笑型突触占突触总数比例明显减少 ,愁型突触所占比例明显增加。结论 :癫痫敏感性长期增强是癫痫长期反复发作的原因之一 ,而癫痫敏感性增强的时间出现于急性癫痫发作后

鼻渊合剂对急性鼻窦炎模型大鼠鼻窦黏膜p38MAPK信号通路及IL-9/IL-10的影响

目的观察鼻渊合剂治疗急性鼻窦炎的临床疗效,并探讨其对大鼠急性鼻窦炎模型鼻窦黏膜p38MAPK信号通路及IL?9、IL-10的影响。方法建造大鼠急性鼻窦炎模型,设中、西药组、生理盐水组,分别使用鼻渊合剂、克拉霉素分散片及桉柠蒎肠溶软胶囊、生理盐水灌胃,观察症状积分,并设空白组,测定造模后0、7、14、21d鼻窦黏膜IL-9、IL-10及p-p38水平,进行统计学分析。结果通过大鼠症状积分比较,表明中、西药都有治疗作用。造模后大鼠IL-9及p-p38水平明显增高;用药后中药、西药组大鼠鼻窦黏膜IL-9及p-p38水平随治疗周期明显下降,与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05),中药组IL-9及p-p38水平下降与西药组无显著性差异。用药后中药组、西药组及生理盐水组鼻窦黏膜IL-10水平随治疗周期逐步升高,中药组、西药组与生理盐水组比较均存在显著性差异(P<0.05),中药组与西药组比较无显著性差异。结论鼻渊合剂治疗急性鼻窦炎有确切疗效,IL-9、IL-10参与了急性鼻窦炎发病的免疫过程,与p38MAPK通路存在一定关系,鼻渊合剂有促进IL-10、抑制p-p38活化阻断p38MAPK通路抑制IL-9产生的作用。

光裸方格星虫纤溶酶对急性血瘀模型大鼠血液流变性异常及血管内皮损伤的改善作用研究

目的:研究光裸方格星虫纤溶酶(SNFE)对急性血瘀模型大鼠血液流变性异常及血管内皮损伤的改善作用。方法:将SD大鼠随机分为对照组、模型组、阿司匹林组(100 mg/kg)和SNFE低、高剂量组(2 500、5 000 U/kg),每组10只,每天灌胃1次,连续给药7 d,第6天给药后1 h,除对照组外,其余各组大鼠均皮下注射盐酸肾上腺素0.8 mg/kg,再以冰水浴复制急性血瘀模型。次日给药后2 h腹主动脉采血,使用全自动血流变仪测定全血黏度(高、中、低切变率)、血浆黏度、红细胞比容、红细胞聚集指数、红细胞变形指数等血液流变学指标,酶联免疫吸附法测定血浆中一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)含量及其比值,苏木精-伊红(HE)染色观察主动脉血管内皮的损伤程度。结果:与对照组比较,模型组大鼠的高、中、低切变率的全血黏度以及血浆黏度、红细胞聚集指数、ET-1含量均显著升高,红细胞变形指数、NO含量和NO/ET-1比值均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,SNFE高剂量组大鼠的高、中、低切变率的全血黏度以及血浆黏度、红细胞比容、红细胞聚集指数、ET-1含量均显著降低,红细胞变形指数、NO含量和NO/ET-1比值均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);SNFE低剂量组大鼠仅红细胞变形指数和NO/ET-1比值均显著增加,ET-1含量显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。血管内皮染色图显示,与对照组比较,模型组大鼠主动脉各层结构松散无序,内膜缺损不完整,空泡增加,内皮损伤明显;各给药组大鼠内皮也均有不同程度损伤,但损伤程度均较模型组轻。结论:SNFE对急性血瘀模型大鼠的血液流变性异常和血管内皮损伤均有改善作用。

尿酸钠诱导HUVEC损伤的急性痛风模型研究

目的:通过尿酸钠(MSU)体外直接刺激血管内皮细胞(HUVEC),促进胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达,建立体外急性痛风细胞模型。方法:刺激组分别用终浓度为0、25、50、75、100(μg/mL)MSU处理HU-VEC24h、48h,MTT法测定细胞活力,流式细胞仪检测HUVEC的ICAM-1表达。结果:24h时,随着MSU浓度的提高,HUVEC活力显著下降(P(0.01),同时细胞上清液中的ICAM-1表达提高;结论:100μg/mLMSU刺激HUVEC24h,造成急性痛风细胞模型。

复方丹参片对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响

目的研究复方丹参片对急性血瘀模型大鼠血液流变的影响。方法采用皮下注射盐酸肾上腺素复加冰水浴造成大鼠急性血瘀模型,给予高、中、低剂量的复方丹参片,观察复方丹参片对急性血瘀模型大鼠红细胞变形和聚集、红细胞压积、全血和血浆黏度、凝血时间、纤维蛋白原含量、血小板数及血小板最大聚集率的影响。结果复方丹参片高、中剂量能明显降低血瘀模型大鼠红细胞聚集、红细胞压积、全血和血浆黏度、纤维蛋白原含量、血小板数和血小板最大聚集率,而对凝血时间和红细胞变形影响不大。结论复方丹参片对急性血瘀模型大鼠血液流变学异常改变有改善作用,降低血液的高黏状态,对心脑血管疾病治疗具有一定的益处。

藏药翁布对急性炎症模型小鼠超氧化物歧化酶的影响

目的:研究单味藏药翁布对小鼠急性炎症作用与组织内超氧化物歧化酶(SOD)关系。方法:以小白鼠为实验动物,采用二甲苯作为致炎因子,复制急性炎症模型,用藏药翁布水提取物高剂量(7 50 g·kg-1)、低剂量(3 75 g·kg-1)灌胃7 d,测定炎症反应与组织内SOD。结果:藏药翁布水提物高、低剂量显著抑制二甲苯所致耳郭肿胀,并且组织SOD含量高于对照组,低于模型组。结论:藏药翁布水提物对小鼠急性炎症模型有显著抑制作用,并可有效抑制急性炎症引起的小鼠组织内自由基的升高。

家兔全氟异丁烯吸入急性肺损伤模型的建立

[目的 ]建立家兔全氟异丁烯 (perfluoroisobutylene,PFIB)吸入急性肺损伤 (acutelunginjury ,ALI)模型。 [方法 ]家兔麻醉后气管切开并插管 ,在已有的大、小鼠全身暴露动态染毒装置尾端串联呼吸机 ,呼吸机连接气管插管后对兔通过机械通气染毒。 2 0只家兔按染毒时间 0、1 0、2 0、2 7、33min(染毒浓度 0 3mg/L)随机分为对照组和实验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ ,每组 4只。连续监测染毒前后心率、血压、呼吸频率和PaO2 ,PaCO2 ;1 2h采血检测血浆总蛋白浓度后处死动物 ,检测支气管肺泡灌洗液 (bronchoalveolarlavagefluid,BALF)的蛋白浓度 ,计算肺毛细血管通透系数 ;剪取右肺上叶称湿、干重 ,记算肺湿干重比 ;取右下肺缘组织行病理学检查。 [结果 ]①各实验组染毒期间混合室各时点PFIB平均浓度与染毒起始浓度相比无统计学差异 (P >0 0 5) ;②实验组Ⅲ 8h和实验组Ⅳ 4h与对照组相比PaO2 开始显著下降、呼吸频率显著增加 (P <0 0 5) ;③实验组Ⅱ、Ⅲ、ⅣBALF中总蛋白浓度、肺湿干重比、肺毛细血管通透系数与对照组相比显著升高 (P <0 0 5) ;④实验组Ⅳ动物在染毒后 9h内全部死亡。 [结论 ]家兔经呼吸机染毒混合室PFIB浓度可保持相对稳定。PFIB浓度 0 3mg/L ,染毒时间在 2 0～ 2 7min范围内时 ,动物染毒后 1

DSF对急性心肌缺血大鼠模型NO系统的影响

目的:探讨中药复方制剂DSF对于心肌缺血大鼠血液及组织中NO系统的影响。方法:将40只大鼠随机分为对照组,模型组,DSF组和丹参片组。用大鼠冠状动脉左前降支结扎的手术方法制备急性心肌缺血缺氧模型,以试剂盒法测试血清及心肌组织中的NO、NOS、iNOS、cNOS的含量;用免疫组化的方法测定DSF对心肌组织中的cNOS mRNA表达的影响。结果:与模型组比较,DSF组血清NO及缺血区心肌组织NO含量均有明显升高(P<0.05或P<0.01),DSF组血清及缺血区心肌组织NO,cNOS含量有明显升高,iNOS含量没有明显差异但其与NOS之比明显降低,说明其相对含量比模型对照组有所下降,并且缺血区心肌组织cNOS mRNA表达对与模型对照组比较也有显著增高(P<0.05)。结论:DSF能明显提高NO水平,升高cNOS含量,降低iNOS/NOS比例,其抗心肌缺血作用机制可能是通过提高机体NO含量及NOS活性,提高cNOS mRNA的表达来实现的。同时DSF也可能通过其降低iNOS作用对心肌起保护作用。

氯化锂-匹罗卡品致大鼠急性癫痫模型

目的 建立氯化锂 匹罗卡品化学诱导的大鼠急性癫痫模型。方法 雄性Wistar大鼠 55只 ,随机分为生理盐水对照组、地西泮组和致痫组。氯化锂腹腔注射后 10～ 10h后给予匹罗卡品。结果 生理盐水对照组大鼠均为 0级发作 ,地西泮组中 8只大鼠为 0级发作 ,2只出现Ⅰ级发作 ;致痫组均达到Ⅲ级以上的痫性发作 ,其中Ⅲ级 2只 (2 / 3 5) ,Ⅳ级 3只 (3 / 3 5) ,Ⅴ级 3 0只 (3 0 / 3 5)。致痫组大鼠在匹罗卡品腹注射后 10～ 90min内全部出现急性痫性发作。结论 氯化锂 匹罗卡品诱导的大鼠急性癫痫模型具有制作方便、致痫成功率高和动物死亡率低等特点 。