中药对急性热应激小白鼠肺、肾脏的热休克蛋白70及热休克因子1表达量的影响

文章旨在研究中药对急性热应激小白鼠肺、肾脏的热休克蛋白70及热休克因子1表达量的影响。试验选用体质健康,体重基本一致的6~7周龄健康SPF级昆明小白鼠90只,将其随机分为7组,分别为复方一组、复方二组和复方三组、紫锥菊组、王老吉组、阳性空白对照组、阴性空白对照组,每组10只。在试验第1、3小时每组取5只小白鼠,采用ELISA法测定小白鼠肺、肾脏组织热休克蛋白70(HSP70)和热休克因子1(HSF1)表达量。结果显示,中药复方组能有效提高热应激小白鼠肺脏和肾脏HSP70表达量,复方一,复方二和紫锥菊能提高热应激小鼠肺脏HSP70的含量,复方三和王老吉组能缓解其下降幅度。高热应激过程中小白鼠肺脏HSF1表达量呈上升趋势,复方二能显著提高肺脏HSF1的表达量;但肾脏HSF1的表达量却呈下降趋势,这与肾脏HSP70高表达有关。结果表明,在此试验中,通过HSP70的表达量变化阐明了中药对急性热应激的预防保护能力。

急性热应激对西伯利亚鲟HSP70 mRNA表达、血清皮质醇和非特异性免疫的影响

为研究西伯利亚鲟(Acipenser baerii)对急性热应激的抗逆机理,将体质量为(155.47±19.50)g的鱼从17.5℃迅速转至27.5℃水中,在1h和3h取样测定HSP70 mRNA表达变化、血清皮质醇和非特异性免疫指标。结果显示:急性热应激时鳃、脾和脑的HSP70 mRNA表达量升高,具有组织特异性,热应激1h时鳃的表达量升高最快(P<0.05),3h时保持1h时的表达水平;脾和脑热应激1h时表达量变化不显著,在1h至3h时升高较快,并且脑组织的表达量升高最快(P<0.05)。热应激1h时血清皮质醇(Cortisol)含量迅速升高(P<0.05),之后快速回落。脾脏巨噬细胞呼吸暴发在热应激1h时显著升高(P<0.05),3h时降低。血清补体C3在1h时略有升高,3h时显著性降低(P<0.05)。血清溶菌酶活性(LZM activity)先升高后降低差异不显著。血清超氧化物歧化酶(SOD)活力随热应激时间延长逐渐降低,3h时显著降低(P<0.05)。血清丙二醛(MDA)含量随热应激时间延长逐渐降低,差异不显著。以上结果表明:1h的短暂急性应激增强了西伯利亚鲟的非特异性免疫,3h的应激使免疫力和抗氧化能力显著下降;在热应激过程中,HSP70表达升高,其中鳃组织最快,起到应激保护作用,提高了机体热耐受力。

急性热应激对性成熟雄性小鼠睾丸、附睾、输精管中热休克蛋白70表达的影响

目的:探讨急性热应激对性成熟雄性小鼠睾丸、附睾、输精管中热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)表达的影响。方法:将32只8周龄雄性小白鼠随机均分为4组,饲养7d后,进行热应激处理,温度控制在(39±0.5)℃,时间分别为0.5、1和3h。应激后立即采血,分离血清测定谷草转氨酶(GOT)含量。一侧附睾制备精子悬液,用于计算精子密度和顶体畸形率;另一侧附睾、睾丸、输精管用于免疫组化研究。结果:应激后,小鼠体重、睾丸系数、顶体畸形率变化不显著(P>0.05),附睾系数和精子密度有不同程度的下降,GOT含量急剧升高(P<0.01)。随着应激时间的延长,小鼠精子密度呈递减趋势,顶体畸形率呈上升趋势。应激时间最短的0.5h组小鼠体重、睾丸系数、附睾系数的降幅反而最大。免疫组化法观察发现,HSP70在性成熟小鼠睾丸、附睾、输精管中均有表达。正常状态下,HSP70在睾丸组织间质细胞中少量表达,应激后分布于间质细胞核,此外在精母细胞核与精子细胞核中也有大量分布;附睾中HSP70主要分布于主细胞质,基细胞和亮细胞中没有表达,应激后附睾体的纤毛细胞中也发现大量棕色颗粒;输精管中HSP70主要定位在基细胞质,主细胞中不表达。随着应激时间的延长,HSP70在睾丸、附睾中的表达量明显升高,而在输精管中的增幅不明显。结论:急性热应激对性成熟雄性小鼠的生殖系统造成了损伤;HSP70在睾丸、附睾、输精管中的表达与定位具有区域特异性和细胞特异性,提示其可能参与精子的发生与成熟;HSP70在应激状态下表达量大幅上升的作用可能在于保护细胞免受高热损伤。

牛磺酸对急性热应激蛋鸡输卵管损伤的保护作用

为了探讨牛磺酸对急性热应激蛋鸡输卵管损伤的保护作用,将40羽60周龄绿壳蛋鸡随机分成对照组(C)和牛磺酸组(T)。对照组饲喂正常日粮,牛磺酸组在饲喂正常日粮的基础上,添加0.1%的牛磺酸。饲喂14d后再将对照组和牛磺酸组随机各分为两组,分别为正常对照组(NC,n=10)、急性热应激对照组(SC,n=10)和正常牛磺酸组(NT,n=10)、急性热应激牛磺酸组(ST,n=10)。SC组和ST组的蛋鸡进行急性热应激(37℃)处理12h。采集蛋鸡输卵管组织样品,进行病理组织学观察,并测定其丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)及检测其TNF-a和IL-1βmRNA表达变化。结果表明,正常对照组和正常牛磺酸组蛋鸡输卵管上皮单层柱状细胞排列规则,纤毛正常,黏膜层清晰可辨;急性热应激对照组蛋鸡输卵管上皮单层柱状细胞排列不规则,绒毛脱落明显,黏膜及黏膜下层出现大量弥散红细胞和淋巴细胞、中性粒细胞浸润(PMN);而急性热应激牛磺酸组输卵管黏膜及黏膜下层仅有少量红细胞弥散和中性粒细胞浸润。与正常对照组比较,正常牛磺酸组蛋鸡输卵管组织中SOD活性、T-AOC均显著提高(P<0.05),正常牛磺酸组蛋鸡输卵管组织中IL-1βmRNA表达水平显著低于正常对照组(P<0.05)。与急性热应激对照组相比,急性热应激牛磺酸组蛋鸡输卵管组织中SOD活性、T-AOC均显著升高(P<0.05),而MDA含量、TNF-α和IL-1βmRNA表达水平均显著下降(P<0.05)。表明牛磺酸能够减轻和保护急性热应激诱发的输卵管损伤,同时也能够提高机体的免疫抗氧化机能。

急性热应激对肉鸡血浆及尿中的矿物质浓度的影响

为研究急性热应激对肉仔鸡矿物质代谢的影响 ,本试验采用 2 0只 9周龄肉仔鸡 ,分成两组 ,一组施人工肛门术用于集尿 ,另一组施血管插管术用于连续采血 ,在程控人工气候舱内设置急性热暴露条件 ,即 1h内由 2 0℃升温至 33℃维持 3h后迅速降至常温。分别在热应激前、中、后连续采集尿和血样 ,并测定矿物质元素含量。结果表明 ,急性热应激显著影响血浆中Cu、Fe、Mn、Co、Ca、Na、Mg、K、Cr的浓度 (P <0 .0 5) ,而对P、Zn浓度无影响 (P >0 .0 5) ;血浆中各种矿物元素浓度对急性热应激的反映快慢程度不同 ,应激结束后恢复原状的时间也不同。急性短期热暴露使肉鸡尿Zn、Fe、Mn和Cr排出量发生显著变化 (P <0 0 5) ,其中尿Zn、Fe和Mn排出量比热暴露前明显升高 ,而尿Cr排出量下降。

急性热应激联合创伤对兔血浆一氧化氮及平均动脉压的影响

目的 探讨急性热应激复合创伤后血浆一氧化氮 (NO)早期变化及其对血压的可能影响。方法 建立兔急性热应激复合创伤模型 ,按不同时间取血测定NO含量 ,全程监测血压变化。结果 急性热应激创伤后 1h左右兔血浆NO浓度下降 ,尔后升高 ,在高温和创伤条件下平均动脉压 (MAP)亦于 1h左右降至最低点 ,继之有一个短暂的回升 ,尔后迅速下降。结论 急性热应激复合创伤兔早期血浆NO浓度是先降低后升高 ,且与MAP的变化有一定关系。

急性热应激对小鼠大脑皮质GABA受体的影响

用放射配体结合分析方法和小鼠经受急性热应激致肛温达４２℃时的热应激模型，研究了小鼠大脑皮层中两类ＧＡＢＡ受体亚型（ＧＡＢＡＡ受体和ＧＡＢＡＢ受体）结合能力变化，以及氯丙嗪对ＧＡＢＡ受体的影响．通过Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图分析表明：１）急性热应激组小鼠大脑皮层ＧＡＢＡＡ受体Ｂｍａｘ值明显上调，而ＧＡＢＡＢ受体Ｂｍａｘ值则明显下调；２）氯丙嗪组小鼠大脑皮层ＧＡＢＡＡ受体增多出现上调现象，而ＧＡＢＡＢ受体则为下调；３）氯丙嗪热应激组小鼠大脑皮层的两类受体增多出现上调现象，且肛温明显低于４２℃．这些结果揭示：ＧＡＢＡ受体可能参予了热应激的调节过程，且两类不同受体有不同的作用方式，氯丙嗪也可能通过ＧＡＢＡ受体的介导，在改善热应激损伤中起主要作用．

急性热应激对雁鹅肌肉品质的影响

将42只1日龄健康雁鹅随机分为7组,每组6只,饲养至8周龄时,A组置于(22±1)℃作为对照,B、C、D、E、F组分别实施2、4、6、8h和10h(40±1)℃的急性热应激,热应激后立即屠宰,G组热应激10h后恢复12h再进行屠宰,以测定急性热应激对雁鹅肉质的影响。结果表明:胸肌pHi和pHu分别从宰前热应激6h和8h开始显著降低(P<0.05),而腿肌pHi无显著变化,pHu也仅在热应激10h后才开始显著降低(P<0.05);宰前热应激2h后胸肌剪切力开始显著升高(P<0.05),4h后滴水损失和烹饪损失也显著高于对照组(P<0.05),但此后除了烹饪损失在热应激达10h时又表现出显著升高外,随着热应激时间的延长胸肌的剪切力、滴水损失和烹饪损失并无显著变化;10h热应激后恢复12h,pH、滴水损失、烹饪损失和剪切力等仍未能恢复正常。腿肌的滴水损失、烹饪损失和剪切力变化规律与胸肌基本相同,但烹饪损失和剪切力的变化均略滞后于胸肌;本试验条件下,宰前热应激对肉色无显著影响。

急性热应激对西伯利亚鲟肝功指标及肝脏热休克蛋白表达的影响

【目的】探究急性热应激对西伯利亚鲟(Acipenser baeri)肝脏功能的影响。【方法】将(34.905±3.761)g西伯利亚鲟从23℃水体迅速移至30℃水体中,在热应激3、6、12、24、48和96 h检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶活力(AST)和总蛋白含量(TP),并利用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测肝脏hsp70和hsp90βmRNA的相对表达量。【结果】西伯利亚鲟血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力均呈现先升高后降低的趋势,在高温胁迫48 h达到峰值。血清总蛋白和白蛋白含量整体维持恒定。肝脏hsp70和hsp90β的相对表达量均在热应激后迅速上升,在6 h达到峰值,96 h降至0时刻水平。【结论】急性热应激对西伯利亚鲟幼鱼的肝脏功能产生一定影响,但是在胁迫96 h后均恢复到正常水平;肝脏中热休克蛋白70和90均参与生理调节,以应对热应激对肝脏细胞的损伤。

急性热应激对飞行员淋巴细胞DNA损伤的研究

我们用单细胞凝胶电泳检测技术探索了急性热应激对飞行员淋巴细胞ＤＮＡ损伤的影响，结果发现，急性热应激使飞行员淋巴细胞ＤＮＡ损伤发生率增高，损伤程度加重。同时我们分析了现有疾患与淋巴细胞ＤＮＡ损伤之关系，发现其现患疾患的飞行员ＤＮＡ损伤发生率明显增高。本结果提示了淋巴细胞ＤＮＡ损伤可能作为评价飞行员停飞的辅助指标。

蛋氨酸羟基类似物及甜菜碱在急性热应激下对肉鸡血清酶指标的影响

试验选用AA肉仔鸡72只,采用3×2因素随机分组试验设计。在笼养条件下,对试鸡进行急性热应激试验,试验共进行1周,测定和评价甜菜碱、蛋氨酸和液态蛋氨酸羟基类似物及不同添加水平在急性热应激下对肉鸡血清酶指标的影响。结果表明:甜菜碱可有效改善细胞膜的通透性,有助于降低应激时肌酸激酶、谷草转氨酶的升高;添加甜菜碱和MHA组的乳酸脱氢酶下降减慢,对机体能量的利用效率优于蛋氨酸。在热应激下添加甜菜碱和MHA优于蛋氨酸。

急性热应激小鼠模型实验装置的改进

[目的]为研究急性热应激提供实用可靠的小鼠模型。[方法]采用恒温热水循环对自行设计的热应激舱进行加热，应用生物机能实验系统等数显工具对小鼠肛温、舱内温湿度进行测量，并对2种舱内温度对热应激的影响进行了对比研究。[结果]该改进模型可使小鼠在18～21min内肛温达到41℃并形成急性热应激，并且动物肛温与经受热应激的时间具有较好的线性关系（r=0．9896，r=0．9826）。当舱内温度为40℃，进行热应激时肛温升高时间延长，但与41℃舱内温度相比无差异显著性。[结论]该模型研究急性热应激科学、准确、可靠、易重复易操作，是开展急性热应激方面研究不可或缺的模型。

温病急性热瘀证与TNF-α、ET-1的相关性实验研究

目的 :观察温病病变过程中热毒和血瘀的相关性。方法 :将 2 0只新西兰白兔随机分为对照组和模型组各 10只 ,将大肠杆菌内毒素剂量由小及大 ,每间隔 5h从模型组家兔耳缘静脉注射 1次 (攻毒 ) ,剂量依次为 1μg kg、15 μg kg、30 μg kg、2 5 0 μg kg。对照组同时从耳静脉注射生理盐水。每次“攻毒”后 1 5h采血 ,检测血清肿瘤坏死因子 α(TNF α)、血浆内皮素 1(ET 1)水平。结果 :第一次“攻毒”后TNF α、ΕT 1的水平明显增高 (与对照组比较P <0 0 1)。其后上述指标随时间推移和“攻毒”剂量加大而递增。提示 :TNF α和ET 1与温病的病情轻重有密切的相关性 ,两项指标能客观地反映温病病变过程中热毒和血瘀轻重程度。

急性热应激对蛋鸭内脏组织HSP70表达的影响

选取20只处于产蛋高峰期的蛋鸭,急性热应激处理后,用RT-PCR和Western-blot研究蛋鸭各内脏器官内热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)的表达情况。结果显示:急性热应激后内脏组织肝脏、心脏和卵巢中的HSP70 mRNA和蛋白水平的表达量无明显变化,肾脏内mRNA水平的表达量显著下降,而脾脏内mRNA和蛋白水平的表达量呈短暂下降后又恢复到原来水平。结果表明当蛋鸭遭受急性热应激时内脏器官呈现特异性反应。

温病急性热瘀证与血小板GMP-140、D-二聚体的相关性实验研究

目的:观察湿病病变过程中血瘀的轻重程度。方法:本文将20只新西兰白兔随机分为对照组和模型组各10只,将大肠杆菌内毒素剂量由小及大,每间隔5小时从模型组家兔耳缘静脉注射一次(攻毒),剂量依次为1μg/kg、15μg/kg、30μg/kg、250μg/kg。对照组同时从耳缘静脉注射生理盐水。每次“攻毒”后1.5小时采血,检测血浆D-二聚体(D-D),血小板GMP-140。结果:第一次“攻毒”后血小板GMP-140分子数明显增高,(与对照组比P<0.01)。第二次“攻毒”后D-D浓度开始升高(与对照组比P<0.01),其后上述指标随时间推移和“攻毒”剂量加大而递增。提示:温病病变过程中GMP-140能反映温病早期的“血瘀”变化,而D-D在温病后期变化最明显。两项指标能客观的反映温病病变过程中“血瘀”轻重程度。

谷氨酰胺对急性热应激肉鸡肌肉品质的保护作用

研究谷氨酰胺（Gln）对急性热应激（AHS）肉鸡肌肉品质的保护作用。选择35日龄（d）AA肉鸡180只,随机分成6组（每组3重复,每重复10只）。Ⅰ组为适温对照组,其他为AHS组,分别在基础日粮中添加0%（Ⅱ组）、0.5%（Ⅲ组）、1.0%（Ⅳ组）、1.5%（Ⅴ组）、2.0%（Ⅵ组）Gln,饲养至42 d时进行24h AHS处理。结果表明：AHS增加（P〈0.01或0.05）了肌肉的亮度、滴水损失、硬度、粗蛋白含量和粗脂肪含量,降低了肌肉的红度、系水力、pH45min、弹性、复原性和水分;日粮添加0.5%~2.0%的Gln可不同程度缓解AHS对上述品质指标的影响,但对黄度、水浴损失、pH24h、粗灰分的影响不明显。AHS条件下肌肉的亮度、红度、系水力、滴水损失、硬度、弹性、复原性、水分、粗蛋白含量指标间存在较强的相关性。试验说明,日粮添加Gln对AHS肉鸡肌肉品质具有较好的保护作用。

急性热应激对飞行员免疫活性细胞的影响研究

为探讨飞行过程中多种职业因素对机体的影响，通过玫瑰花环实验检测了人工气候室内急性热应激对飞行员外周血免疫活性细胞ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、Ｔ细胞、Ｂ细胞的影响。结果发现，飞行员在２ｈ热应激后，ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比例均明显下降（Ｐ＜００５），ＣＤ８＋略为升高，但无显著性差异（Ｐ＞００５）。结果提示，在急性热应激条件下，飞行员急性热应激反应对抗体免疫功能具有抑制作用和这些免疫活性细胞和表型的检测指标也可作为热应激反应的生物标志物。

急性热应激条件下日粮不同脂肪类型对鸡肉品质及过氧化状态的影响

本试验研究急性热应激(38℃,6h)条件下日粮不同脂肪类型对鸡肉品质与机体过氧化状态的影响。选用480只1日龄Arbor Acres(AA)商品代肉公鸡,随机分为8个处理组,常温对照组(A)及高温对照组(B),饲喂基础日粮,6个高温处理组C、D、E、F、G、H分别添加5%牛油,5%玉米油,5%共轭亚油酸(CLA),5%牛油+400mg/kgVE,5%玉米油+400mg/kgVE,5%CLA+ 400mg/kgVE。42日龄时进行38℃,6h的热应激处理,随后屠宰鸡只测定肌肉品质和机体脂质过氧化指标。结果表明：与对照组相比,急性热应激降低肌肉pH值,增加滴水损失,其中尤以玉米油处理组为甚(P＜0．05),肌肉剪切力各处理间差异不显著(P＞0．05)。添加VE的处理组较未添加VE处理组情况有所改善。血清、肝脏及肌肉中总超氧化物歧化酶(TSOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性发生显著变化,以添加玉米油组活性最低,应激对照组、牛油组、CLA组依次居于其后,添加VE使TSOD及GSH-PX活性较未添加VE处理组显著升高,而过氧化氢酶(CAT)活性各组差异不显著。丙二醛(MDA)含量与TSOD及GSH-Px活性变化规律基本相反,以玉米油组含量最高,添加VE使MDA含量显著降低。结论：急性热应激导致机体发生脂质过氧化,鸡肉品质降低。该条件下,添加玉米油显著加重了应激所产生的负面效应。CLA组和牛油组可不同程度的缓解应激反应,减少肉质损失。日粮中添加VE可有效地改善热应激过程对机体造成的损伤,使肉质获得改善。热应激过程机体脂质过氧化是肉品品质降低的原因之一。