骨活素在急性环孢素中毒SD大鼠肾组织中的表达及其作用机制

目的:探讨骨活素(osteoactivin,OA)在急性环孢素(cyclosporine A,CsA)中毒SD大鼠肾组织中的表达及其作用机制。方法:在正常饮食1周后随机将SD大鼠分为3组:试验组(CsA+橄榄油灌胃)、载体对照组(橄榄油灌胃)和空白对照组(生理盐水灌胃)。各组分别于灌药后2 d、1周、2周分批处死,测定血肌酐(serum creatinine,SCr)及体质量变化;HE染色评判肾组织病理学改变;免疫组织化学检测肾组织OA的着染情况;Western印迹检测OA蛋白的表达;RT-PCR检测OA、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)、Ⅲ型胶原(collagen typeⅢ,ColⅢ)mRNA的表达。结果:试验组SD大鼠的体质量和SCr在灌胃2 d和1周末与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),2周时体质量较对照组显著减轻(P<0.001),SCr显著升高(P<0.001)。试验组SD大鼠病理组织学改变主要为炎性细胞浸润、肾小管上皮细胞、间质细胞空泡变性及肾小管上皮细胞坏死脱落等。免疫组织化学显示试验组SD大鼠肾组织内OA的表达随CsA灌胃时间的延长而增加,其表达部位主要位于肾小管上皮细胞及间质细胞,对照组基本不表达。RT-PCR显示试验组OA,MMP-13及ColⅢmRNA的相对表达量随着CsA灌胃时间的延长而增加。Western免疫印迹检测显示,OA蛋白在空白对照组及载体对照组基本不表达,随着试验组CsA灌胃时间的延长,OA蛋白的表达增强。结论:OA在SD大鼠急性CsA肾中毒模型早、中期有表达且较SCr敏感,表达部位主要位于肾小管上皮细胞及间质细胞;在肾小管上皮细胞内早期反应性表达上调的OA可能通过激活MMPs的表达和胶原蛋白的重构从而在诱发肾间质纤维化中发挥关键作用。